首页 > 文献资料
-
PTEN基因在腮腺多形性腺瘤中的表达及意义
目的：探究PTEN基因在腮腺多形性腺瘤的发生中基因水平上的作用。方法：将手术切除并经病理检查确诊的腮腺多形性腺瘤、腮腺多形性腺瘤瘤旁1cm腺体组织和舌下腺组织(舌下腺结石摘除的腺体)标本各30例，采用免疫组化法分析各组之间PTEN表达水平的差异性。结果：PTEN在腮腺多形性腺瘤中表达的阳性率低于腮腺多形性腺瘤瘤旁1 cm腺体组织，差异有统计学意义(P<0.05)；PTEN在腮腺多形性腺瘤中表达的阳性率低于舌下腺组织，差异有统计学意义(P<0.05)；腮腺多形性腺瘤瘤旁1 cm腺体组织与舌下腺组织两组比较，差异无统计学意义(P>0.05)。结论：PTEN基因的阳性表达对腮腺多形性腺瘤的发生有抑制作用。
-
脑胶质瘤中PTEN基因表达的实时定量PCR研究
目的:探讨PTEN基因在胶质瘤中的表达及意义,以及与预后的关系.方法:采用荧光实时定量PCR技术检测44例人脑胶质瘤组织及其19例邻近正常脑组织、7例良性脑肿瘤中的PTEN mRNA及内参GAPDH的表达水平.结果:高分化组(29例)PTEN基因的表达明显高于低分化组(15例)(P＜0.05)这两组分别与良性脑肿瘤组(7例)相比,均有显著差异(P＜0.05).19例胶质瘤与邻近正常脑组织有显著差异(P＜0.000).高分化组和底分化组之间在1年或3年存活率的比较中,存在明显差异(P＜0.05).结论:PTEN基因在胶质瘤的发生及发展中起重要作用,脑胶质瘤中PTEN基因的表达与胶质瘤的恶性程度及预后相关.
-
携带野生型PTEN基因的重组腺病毒治疗子宫内膜癌的体外研究
目的:观察携带野生型PTEN基因的重组腺病毒(Ad-PTEN)体外转染子宫内膜癌细胞后的表达,并探讨其对肿瘤细胞产生抑制增殖、诱导凋亡的作用及机制.方法:细菌内同源重组方法构建Ad-PTEN,体外转染PTEN基因突变的子宫内膜腺癌RL95-2细胞中,X-gal染色检测转染效率.应用RT-PCR、Western印迹、细胞免疫组化检测Ad-PTEN在RL95-2细胞中的转录及表达; 应用细胞计数、MTT实验, 观察Ad-PTEN对RL95-2细胞生长的影响;应用光镜、透射电镜观察外源性PTEN基因表达对RL95-2细胞形态学及超微结构的影响;应用流式细胞分析仪(FCM)检测Ad-PTEN对RL95-2细胞周期分布的影响、凋亡诱导作用及半胱氨酸天冬氨酸特异蛋白酶casapase-3的激活.结果:外源性野生型PTEN基因经腺病毒介导成功转入RL95-2细胞,3种方法均检测出有PTEN mRNA及PTEN蛋白的表达,当感染复数(MOI)为50时,体外转染效率达到100%.Ad-PTEN显著抑制RL95-2细胞生长并诱导其凋亡.此外, Ad-PTEN还能诱导RL95-2细胞周期G0/G1期阻滞以及caspase-3的激活.结论:重组腺病毒Ad-PTEN是高效的基因转移系统,能将PTEN目的基因转移到丧失该基因功能的子宫内膜癌RL95-2细胞中,对RL95-2细胞产生强有力的生长抑制及凋亡诱导作用,其机制可能包括细胞周期G0/G1阻滞及caspase-3 蛋白酶的激活.
-
PTEN基因转染的胶质瘤细胞对γ刀照射敏感性的变化
目的:观察转入正常PTEN基因的胶质瘤细胞经γ刀照射后生长能力及黏附力的改变,探索PTEN基因对胶质瘤细胞放射敏感性的影响.方法:以RT-PCR方法体外扩增PTEN全长基因,与质粒pcDNA3.1连接,构建重组真核载体pcD-NA3.1-PTEN,并用之转染PTEN失活的U251细胞(人胶质母细胞瘤细胞系),用48 h的半数致死剂量(中心剂量和周边剂量分别为9.00和4.50 Gy)进行γ刀等中心照射,并采用MTT法和纤维粘连蛋白黏附实验观察照射前后细胞的生长及黏附力改变.结果:空载体转染组与未转染组照射前后细胞存活率和黏附率均无显著性差异,而PTEN基因转染的细胞存活率及黏附率在照射前后均显著低于空载体转染组及未转染组(P＜0.01),且照射后下降程度更加明显.结论:PTEN基因转染的胶质瘤细胞对于γ刀照射的敏感性提高.
-
PTEN基因突变与遗传性癌症综合征及其相关疾病的研究进展
PTEN基因是具有双重特异性磷酸酶功能的抑癌基因,其脂质磷酸酶活性降调PKB/Akt信号转导,使细胞周期阻滞在G1期,诱导其凋亡.已证实在人类许多恶性肿瘤中存在体细胞PTEN基因突变,如神经胶质细胞瘤、子宫内膜癌、前列腺癌、肾癌、乳腺癌等.近年来的研究发现,PTEN基因种系突变与人类多种遗传性癌症综合征有关.本文概括介绍了PTEN基因种系突变与人类遗传性癌症综合征及其相关疾病的关系,重点介绍了考登综合征(Cowden syndrome, CS)、Bannayan-Riley-Ruvalcaba syndrome(BRRS)、Proteus syndrome (PS)、Proteus-like syndromes(PS-like)等疾病.随着对这些综合征认识的加深,应用基因突变分析作为分子诊断工具,将有可能对这些患者极其家庭成员进行疾病的早期诊断及必要的癌症监测.
-
PTEN基因对白血病细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响
目的 探讨肿瘤抑制基因PTEN对人原代白血病细胞及K562细胞系的增殖、凋亡及细胞周期的影响.方法 将携带有野生型PTEN、绿色荧光蛋白的腺病毒(Ad-PTEN-GFP)及空载体腺病毒(Ad-GFP)转染原代白血病细胞和K562细胞系.采用MTT法检测细胞生长曲线;流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期分布;光镜和电镜下观察细胞形态;TUNEL等方法检测细胞增殖及凋亡;培养细胞集落并比较不同组间集落形成的数量;实时荧光定量PCR(FQ-PER)检测PTEN mRNA水平变化,Westernblotting检测PTEN蛋白水平变化.结果 以感染复数为200转染后,与Ad-GFP相比,Ad-PTEN-GFP转染人白血病K562细胞系后,细胞增殖受抑,凋亡率增加,大生长抑制率为35.2%,大凋亡率为30.0%.细胞周期显示G1期阻滞,G0/G1期细胞比例增加[(54.9±2.51)% vs (78.5±4.13)%],G2/M期比例降低[(30.2±1.91)% vs (13.6±1.02)%](均P<0.05).结论 过表达PTEN可以抑制白血病细胞增殖,促进细胞凋亡,并导致细胞周期阻滞在G0/G1期.
-
mTOR及PTEN、PHLPP、VEGF、p53蛋白在结肠癌中的表达及意义
目的 检测结肠癌组织中mTOR、PTEN、PHLPP及VEGF和p53蛋白表达,探讨结肠癌发生、发展可能的分子机制及临床意义.方法 选择2011年3月至2012年10月65例结肠癌癌组织标本及25例腹部外伤者的正常结肠组织标本,分别采用免疫组化法及Western-blot方法检测mTOR及PTEN、PHLPP、VEGF、p53蛋白的阳性表达率及相对表达量,并对检测结果进行比较.结果 mTOR、PTEN、PHLPP、VEGF、p53蛋白在正常结肠组织中的阳性率分别为12.0％、96.0％、92.0％、12.0％、8.0％,在结肠癌组织中综合阳性率为78.5％、23.1％、20.0％、92.3％、67.7％.结肠癌组mTOR、VEGF、p53阳性表达率高于正常对照组,PTEN、PHLPP低于正常对照组(P均＜0.01).Western-blot检测结果显示,TNM分期越晚,mTOR蛋白及VEGF表达水平越高(P ＜0.05,P＜0.01),PTEN、PHLPP蛋白表达水平越低(P ＜0.05,P＜0.01),而p53蛋白表达水平在肿瘤TNM不同分期无明显变化.结论 mTOR通路蛋白及抑癌基因PTEN、PHLPP、p53可能参与结肠癌发生、浸润、转移的信号传导.提示mTOR通路蛋白抑制剂可用于结肠癌的治疗.
-
重叠PCR法构建PTEM基因3位点的融合重组载体
目的 构建包含与子宫内膜癌相关的PTEN基因3位点的重组pMD19-exon 5-exon 8载体.方法 以健康人全基因组DNA为模板,设计2对有重叠区的特异性引物分别扩增PTEN基因的exon 5和exon 8片段,利用重叠PCR技术,将exon 5和exon 8片段进行连接,再将连接产物exon 5-exon 8片段插入pMD19-T质粒,构建成重组pMD19-exon 5-exon 8载体,转化入大肠埃希菌感受态细胞DH5α进行表达,利用菌液PCR和基因组测序进行鉴定.结果 exon 5-exon 8片段经凝胶电泳检测,可在1 253 bp处见一清晰的目的条带,PTEN基因融合重组质粒经菌液PCR及测序结果鉴定,均与预期结果一致.结论 应用重叠PCR法将exon 5和exon 8片段进行融合,并成功构建了PTEN基因融合重组表达载体.
-
腺病毒介导的PTEN基因对前列腺癌细胞株PC-3增殖及cyclin D1、p21表达的影响
目的:构建携带抑癌基因PTEN的腺病毒载体,探讨PTEN基因对前列腺癌细胞株PC-3增殖及cyc-lin D1、p21表达的影响. 方法:采用RT-PCR方法从大鼠海马神经元扩增目的基因PTEN,连接入pENTR2A载体,在293A细胞中进行重组腺病毒的包装及扩增.以携带PTEN基因的腺病毒载体感染体外培养的前列腺癌细胞株PC-3.采用间接免疫荧光法检测细胞中PTEN的过表达情况.Western印迹检测PTEN、cyclin D1和p21表达的变化,通过细胞生长实验、平板克隆实验检测PTEN对PC-3细胞增殖能力的影响. 结果:成功构建重组腺病毒载体Ad-PTEN; PC-3细胞经Ad-PTEN感染后PTEN蛋白表达水平明显增加.Western印迹实验所得条带进行灰度值分析后与β-actin求比值,PTEN蛋白在Ad-PTEN感染组细胞中表达(0.215 ±0.065)明显高于对照组[(0.052±0.009),t=4.30,P＜0.05]和Ad-LacZ组[(0.056 ±0.008),t=4.21,P＜0.05].cyclin D1蛋白在Ad-PTEN感染组细胞中表达(0.256 ±0.072)明显低于对照组[(0.502±0.087,t=3.77,P＜0.05)]和Ad-LacZ组[(0.498±0.081,t=3.87,P＜0.05)].p21蛋白在Ad-PTEN感染组细胞中表达(0.589 ±0.076)明显高于对照组[(0.146±0.026,t=9.55,P＜0.01)]和Ad-LacZ组[(0.163±0.024,t=9.26,P＜0.01)].MTT实验显示Ad-PTEN对PC-3细胞的抑制作用自48 h后(21.98％)有显著性(t=6.80,P＜0.01).平板克隆实验显示Ad-PTEN组克隆形成率[(37.4±4.18)％]明显低于对照组[(54.9±4.81)％,t=4.76,P＜0.01]及Ad-LacZ组[(56.5±5.42)％,t=4.83,P＜0.01]. 结论:通过腺病毒载体Ad-PTEN使PC-3细胞表达PTEN基因,可以明显抑制细胞的增殖,并可降低cyclin D1表达,同时增加p21的表达.
-
PTEN抑癌基因对黏液表皮样癌实验性裸鼠肺转移的抑制作用
目的探讨外源野生型PTEN抑癌基因对人高转移性黏液表皮样癌M3SP2细胞系实验性裸鼠肺转移能力的影响.方法用脂质体介导方法将PTEN抑癌基因导入M3SP2细胞系(M3SP2-PTEN细胞),转染空载体的细胞系作为对照M3SP2-pBp细胞),应用裸鼠肺转移实验测定癌细胞的体内转移能力,并进行组织学观察.结果对照组裸鼠肺转移结节数为(24.0±1.2)个,组织学观察瘤细胞转移灶体积大,细胞生长活跃,可见较多核分裂.实验组裸鼠肺转移结节数量减少为(8.5±3.4)个,转移抑制率为65.6%;组织学观察可见转移灶数量少、体积小,并有较多的坏死和凋亡细胞.结论转染野生型PTEN抑癌基因能降低人高转移性黏液表皮样癌细胞转移能力.
-
PTEN甲基化、p53异常表达与膀胱移行细胞癌发生的相关性
目的:探究PTEN甲基化、p53异常表达与膀胱移行细胞癌发生的相关性.方法:取71例膀胱移行细胞癌患者的膀胱组织作为观察组,另取71例良性前列腺增生患者的膀胱组织作为对照组.分别检查两组受试组织的PTEN基因启动子甲基化状态,应用免疫组化法检测p53蛋白的表达情况.结果:PTEN基因甲基化率观察组显著高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);组织学分级为Ⅱ～Ⅲ级和淋巴结转移阳性的患者其膀胱组织PTEN基因启动子甲基化率显著高于组织学分级为0～I级和淋巴结转移阴性的患者,差异均有统计学意义(P＜0.05);而年龄及肿瘤长径与PTEN基因启动子甲基化率无关(P＞0.05).p53蛋白的表达阳性率观察组显著高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);年龄、肿瘤长径、组织学分级及淋巴结转移情况均与p53蛋白表达有关(P＜0.05).结论:PTEN基因启动子甲基化水平较高及053蛋白的异常表达均与膀胱移行细胞癌的发生有较强的相关性.
-
PTEN、VEGF、FLT1基因在髓系白血病中的表达及其相关性研究
目的:探讨肿瘤抑制基因PTEN及血管内皮生长呙子(VEGF)及其受体FLT1(VEGFR1)在自血病中的表达及其相关性.方法:应用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测50例初治急性髓系白血病(AML),10例缓解期AML,10例慢性粒细胞白血病慢性期(CML-CP)、10例CML急变期(CML-BC)患者和10例正常人骨髓单个核细胞(MMNCs)中PTEN、VEGF、FLT1 mRNA的表达.结果:初治AML患者PTEN mRNA表达水平明显低于缓解组AML和正常对照组,CML-BC患者PTEN mRNA表达水平低于CML-CP患者,在AML初治白血病中PTEN mRNA与VEGF和FLT1 mRNA表达负相关,PTEN低表达、VEGF和FLT1高表达与AML缓解率及髓外浸润相关.结论:髓系白血病患者中低表达PTEN基因,高表达VEGF及FL1基因,并与白血病预后不良及髓外浸润密切相关,三者相互作用共同参与了白血病的发病.
-
非小细胞肺癌组织中PTEN基因与Ki67的表达及临床意义
目的:Ki67在非小细胞肺癌和正常肺组织中的表达及其与患者预后的相关性.方法:收集67例有完整临床病理资料和随访资料的非小细胞肺癌组织及41例癌旁肺组织标本作为对照,采用免疫组织化学方法检测PTEN基因、Ki67蛋白的表达,并分析其与各临床病理指标及预后之间的相关性.结果:PTEN基因在非小细胞肺癌中阳性表达率为32.84％(22/67),而在癌旁肺组织中阳性表达率为82.97％,显著高于非小细胞癌组织(P＜0.05).Ki67在非小细胞肺癌组织中表达为76.12％,则显著高于癌旁肺组织27.31％(P＜0.05).肺癌组织中PTEN基因、Ki67的表达均与肺癌的临床分期、淋巴结转移密切相关(分别P＜0.05),Kaplan-Meier生存曲线分析显示患者术后生存率PTEN阳性表达患者显著高于阴性患者(P＜0.05),而Ki67阳性表达患者显著低于阴性患者(P＜0.05).PTEN蛋白阳性表达与Ki67阳性表达呈负相关(r=-0.239,P＜0.05).结论:PTEN蛋白表达的缺失及Ki67高表达与非小细胞肺癌的恶性侵袭、淋巴结转移有关.联合检测PTEN与Ki67的表达有助于判断非小细胞肺癌的预后.
-
PTEN基因研究的临床意义
PTEN是迄今发现的第1个具有特异性磷酸酶活性的抑癌基因,该基因的突变失活与人类多种恶性肿瘤的发生发展密切相关,在细胞的生长发育、信号转导和细胞凋亡中起重要作用.本综述对PTEN基因的结构和生物学功能以及它们在各种肿瘤中的表达作了简要介绍,并对近来的发展提出展望.
-
喉鳞状细胞癌中PTEN基因mRNA的表达及其临床意义
目的 探讨PTEN基因在喉鳞状细胞癌中的表达及其临床意义.方法 应用RT-PCR方法 检测30例喉鳞癌组织及20例癌旁组织FFEN mRNA的表达.结果 (1)癌组织PTEN表达率明显低于癌旁组织,差异有统计学意义(P＜0.05);(2)TNM分期Ⅰ～Ⅱ期与Ⅲ～Ⅳ期相比较,FTEN表达差异有统计学意义(P＜0.05);(3)高中分化鳞癌与低分化鳞癌PTEN表达阳性率差异有统计学意义(P＜0.05);(4)有淋巴结转移组和无淋巴结转移组比较,PTEN检出阳性率差异有统计学意义(P＜0.05).结论 PTEN的表达与喉鳞癌的临床病理特征、生物学行为存在密切关系,PTEN基因可能在喉鳞癌的发生、发展中起重要作用,其表达可能成为喉鳞癌重要分子生物学指标.
-
肝癌中PTEN基因及蛋白表达的意义
目的:研究肝癌中PTEN基因mRNA和蛋白的表达与肝癌病理之间的关系.方法:应用RT-PCR法检测28例肝癌组织和对应的癌旁组织中PTEN基因mRNA表达,并通过电泳凝胶图像系统分析其相对表达量.同时采用免疫组化方法检验51例肝癌石蜡切片中PTEN蛋白表达(其中包括与28例新鲜组织相对应的标本).结果:RT-pCR检测PTEN mRNA表达率肝癌中为35.71%,癌旁组织中为71.43%,PTEN基因在肝癌细胞中表达显著低于癌旁肝组织.免疫组化检测肝癌中PTEN蛋白的检出率为66.7%,PTEN蛋白表达与肝癌的病理分级和癌栓形成呈负相关.结论:PTEN基因缺失和肝癌的分化程度以及癌栓形成、转移密切相关.
-
肝细胞癌组织中PTEN蛋白表达的意义
目的:探讨肝癌组织中抑癌基因PTEN蛋白表达的意义.方法:应用免疫组织化学S-P法检测37例肝细胞癌及相应的癌旁组织与6例正常肝组织中PTEN蛋白的表达情况,分析HCC中PTEN蛋白表达与各临床病理特征关系.结果:PTEN蛋白在正常肝组织及HCC癌旁组织中表达高于癌组织,差异有显著性(P＜0.05),但正常肝组织与癌旁组织表达无显著性差异(P＞0.05).分化程度高的HCC中PTEN表达高于低分化者,Child A级高于B和C级,差异有显著性(P＜0.05);无静脉浸润者高于有静脉浸润者,差异有显著性(P＜0.05);PTEN蛋白表达在性别、年龄、有无包膜、大体类型及肿瘤大小间无明显差异(P＞0.05).结论:肝癌组织中PTEN蛋白阴性表达率较高,PTEN可作为检测肝癌生物学特征的一种分子标记.
-
PTEN基因在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义
目的:探讨PTEN基因在喉鳞癌LSCC中的表达及临床意义.方法:采用免疫组化S-P法检测10例正常喉组织,20例癌旁组织和60例喉鳞癌组织中PTEN基因的表达情况.结果:PTEN在LSCC、癌旁喉组织及正常组织中阳性表达率分别为70.0%、95.0%、100.0%,差异有统计学意义(P＜0.01).LSCC组织中PTEN蛋白表达在TNM分期Ⅰ-Ⅱ期、高中分化癌、无转移、生存率＞3年的患者中表达水平较Ⅲ-Ⅳ期、低分化和有转移、生存率＜3年的患者高,差异有统计学意义(P＜0.05).PTEN基因表达与年龄、性别、肿瘤部位无关(P＞0.05).结论:PTEN基因的异常表达可能与喉鳞癌的发生、发展和预后有关.
-
脑星形细胞瘤中PTEN和VEGF蛋白的表达及其相关性
目的 探讨PTEN基因及血管内皮生长因子(VEGF)在脑星形细胞瘤中表达及其相关性.方法 采用SP免疫组化法检测PTEN和VEGF在65例脑星形细胞瘤组织(A组)和10例正常脑组织(B组)中的表达.结果 A组PTEN表达阳性率为49.2％,明显低于B组的100％(P＜0.01)；A组VEGF表达阳性率为64.6％,B组无阳性表达.与低恶性度组比较,高恶性度组的PTEN低,而VEGF表达明显增高(P＜0.05).在脑星形细胞瘤组织中,PTEN与VEGF蛋白的表达呈负相关(r=-0.980,P＜0,05).结论 PTEN及VEGF均与脑星形细胞瘤发生及恶性程度密切相关；检测两者表达情况可为脑星形细胞瘤的临床诊治及预后判断提供依据.
-
宫颈癌转移与抑癌基因PTEN表达的关系
目的 探讨宫颈癌转移与PTEN基因表达的关系.方法 官颈癌手术切除标本72例(宫颈癌组),宫颈良性肿瘤手术标本46例(对照组),检测两组标本PTEN基因表达情况,分析宫颈癌转移与PTEN表达之间的关系.结果 宫颈癌组PTEN检出率明显低于对照组(27.8%vs.95.6%)(P<0.01),27例宫颈癌转移患者PTEN阳性率为25.9%,而45例非转移患者阳性率为62.2%(P<0.01).结论 宫颈癌转移与PTEN基因表达受抑有一定的关联性.
