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雷米普利酸对内外源性自由基所致离体血管内皮依赖性舒张功能影响
目的:探讨雷米普利酸(Ramiprilat)对内外源性自由基所致家兔离体胸主动脉内皮依赖性舒张功能损伤的保护作用及其作用机制.方法:采用DPPH(0.25 μmol/L)或通过次黄嘌呤(HX 0.06 μmol/L)和黄嘌呤氧化酶(XO 2U/L)孵育家兔离体血管环10 min,诱导血管内皮依赖性舒张功能损伤.结果:DPPH和HX+XO诱导产生氧自由基超氧阴离子(O2-·),能明显抑制胸主动脉环对乙酰胆碱(Ach)诱导的血管内皮依赖性舒张反应.用雷米普利酸(5 μmol/L)预孵育血管环20 min,可明显改善DPPH和HX+XO所致血管内皮依赖性舒张反应的抑制.而预先用选择性缓激肽B2受体阻断剂HOE140(10μmol/L)孵育血管10 min,可明显抑制雷米普利酸对DPPH和HX+XO所致血管内皮依赖性舒张反应的损伤保护作用.结论:雷米普利酸对DPPH和HX+XO所致血管内皮依赖性舒张反应的损伤具有保护作用,其机制至少部分是通过激活缓激肽B2受体所介导的.
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土鳖虫超微粉体中尿嘧啶、次黄嘌呤的含量测定
目的 建立HPLC同时测定土鳖虫超微粉体中核苷类成分尿嘧啶、次黄嘌呤含量的方法.方法 色谱柱为Hypersil C18 BDS柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相0.05 mol/L磷酸氢二铵水溶液,检测波长为254 nm,流速为0.4 mL/min,柱温为25℃.结果 尿嘧啶、次黄嘌呤分别在0.044～0.22μg、0.042～0.21μg范围内线性关系良好,平均回收率分别为95.93%、97.32%,RSD分别为2.9%、3.0%.结论建立的方法简单、重复性好、准确可靠,可用于土鳖虫中尿嘧啶、次黄嘌呤的含量测定.
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建立高尿酸血症动物模型实验研究
目的:探讨构建科学、合理、稳定的高尿酸血症动物模型,为治疗高尿酸血症药物药效及机制研究奠定基础.方法:采用次黄嘌呤、氧嗪酸钾和乙胺丁醇三者联合应用造模.模型Ⅰ组采用次黄嘌呤(25 g/kg)饲料喂养,乙胺丁醇(250 mg/kg)灌胃并同时皮下注射氧嗪酸钾(200 mg/kg);模型Ⅱ组灌胃给予腺嘌呤(100 mg/kg)和乙胺丁醇(250 mg/kg).连续检测大鼠血清中血尿酸水平,并进行肾脏组织病理学观察,综合评价其对肾脏的影响.结果:模型Ⅰ、Ⅱ组大鼠连续给药10天后,其血尿酸水平均明显升高,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).模型Ⅰ组在造模的第3、7天的给药后3h血清尿酸值已明显升高,12～ 24 h与空白对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).造模后模型Ⅰ、Ⅱ组的尿素氮与空白对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).2组模型动物血清肌酐和谷丙转氨酶与空白对照组比较无差异.模型Ⅰ组肾小管-间质病理损害程度积分均低于模型Ⅱ组(P＜0.05).结论:两种造模方法均能有效造模,模型Ⅰ组更适合于高尿酸血症治疗药物药效筛选及作用机制的研究.
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HPLC法测定商品蛤蚧中核苷类成分的含量
目的:建立HPLC法测定蛤蚧药材中尿嘧啶、黄嘌呤、次黄嘌呤的含量.方法:采用高效液相色谱法.色谱条件为Doamonsil C18柱(5 μm,200 mm×4.6 mm),以0.05 mol/L磷酸氢二铵水溶液(pH=8.4)为流动相;检测波长为254 nm;流速:1 ml/min.结果:尿嘧啶、黄嘌啶、次黄嘌呤分别在0.06～0.14 μg、0.17～0.50 μg、0.27～0.6 μg范围内具有良好线性关系(r分别为0.9996、0.9998、0.9996);平均加样回收率分别为102.3%、100.6%、100.7%;RSD分别为1.84%、1.72%、1.65%.结论:该法可用于测定蛤蚧药材中尿嘧啶、黄嘌呤、次黄嘌呤的含量,从而便于控制蛤蚧药材的质量.
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HPLC测定不同产地广地龙中次黄嘌呤的含量
目的:测定不同产地广地龙中次黄嘌呤的含量.方法:采用反相高效液相色谱法,色谱柱:Inertsil ODSEP柱,流动相:水-甲醇-四氢呋喃(93:7:0.05),流速:1.0 ml/min,检测波长254 nm.结果:次黄嘌呤的平均回收率为98.6%,方法精密度(RSD)为0.50%(n=6).结论:该法可用于不同产地广地龙中次黄嘌呤的含量测定.
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HPLC-MS2鉴定大青叶水提液中的5种化学成分
目的:鉴定大青叶水提液中的化学成分.方法:大青叶的水提液经HPLC分离后,收集各色谱峰的馏分进行二级质谱分析,并和胞苷、尿苷、鸟苷、黄嘌呤和次黄嘌呤对照品的水溶液进行比较.结果:大青叶水提液HPLC中的5个色谱峰分别与胞苷、尿苷、鸟苷、黄嘌呤和次黄嘌呤对照品的tR和UV光谱一致,并具有相同的二级质谱碎片离子.结论:大青叶中含有胞苷、次黄嘌呤、尿苷、黄嘌呤和鸟苷等5种成分.
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不同产地鹿茸中次黄嘌呤的HPLC含量测定
应用反相高效液相色谱法测定鹿茸药材中活性成分次黄嘌呤的含量.色谱柱:Discovery C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:甲醇-磷酸盐缓冲液(1000 ml水+1.36 g磷酸二氢钾+0.092 ml磷酸)(8∶92);检测波长:249 nm.结果:次黄嘌呤在0.1～1.8 μg范围内线性关系良好(r＝0.9999),加样回收率为97.73%(RSD＝1.13%).本方法简便,准确,可靠,适用于次黄嘌呤的定量分析.
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HPLC法测定海马中次黄嘌呤、黄嘌呤的含量
目的:建立海马中次黄嘌呤、黄嘌呤含量测定的方法.方法:采用Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-水(2:98,V/V)为流动相,测定波长λ=254 nm.结果:次黄嘌呤在29.0～464.0ng范围内呈良好的线性关系(r=0.99996);黄嘌呤在24.5～392.0ng范围内呈良好的线性关系(r=0.9995).平均加样回收率:次黄嘌呤为100.37%,RSD为1.31%;黄嘌呤为100.54%,BSD为1.14%.结论:本法操作简便,结果可靠,为海马药材的质量控制提供了有效的方法.
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炮制对广地龙次黄嘌呤和肌苷含量的影响
目的:研究广地龙不同炮制方法对次黄嘌呤和肌苷含量变化的影响.方法:分别以黄酒、白酒、醋、蛤粉为辅料炮制广地龙,各条件下制得的样品采用HPLC法测定次黄嘌呤和肌苷的含量.色谱条件:DIKMA C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);甲醇-水(95:5)为流动相,流速1.0 mL/min,检测波长256 nm,柱温30℃.结果:广地龙不同炮制品中次黄嘌呤和肌苷含量与生品比较有较大差异,次黄嘌呤含量高低顺序为蛤粉制广地龙＞黄酒制广地龙＞白酒制广地龙＞醋制广地龙＞净制品,肌苷含量高低顺序为净制品＞醋制广地龙＞白酒制广地龙＞黄酒制广地龙＞蛤粉制广地龙.结论:不同炮制方法使广地龙炮制前后次黄嘌呤和肌苷的含量发生改变,为进一步研究广地龙提供了依据.
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HPLC法测定美洲大蠊药材中尿嘧啶、次黄嘌呤及肌苷的含量
目的:建立美洲大蠊药材中尿嘧啶、次黄嘌呤及肌苷的含量测定方法.方法:美洲大蠊药材经石油醚脱脂后,用85％乙醇超声提取制备供试品溶液;色谱条件为:Waters sunfireTM C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),3％甲醇溶液(含0.07％醋酸)-甲醇为流动相,梯度洗脱,检测波长254 nm,进样量10 μL.结果:尿嘧啶、次黄嘌呤、肌苷进样量分别在0.0203～0.2018 μg、0.0516 ～0.5156μg、0.1038～ 1.0376 μg范围内与峰面积线性关系良好,平均回收率分别为99.90％(RSD =2.61％)、98.96％(RSD=2.94％)、99.54％ (RSD =2.35％).HPLC法测定8批美洲大蠊样品中尿嘧啶、次黄嘌呤、肌苷平均含量分别为117.4、428.3、817.0 μg/g.结论:建立的美洲大蠊药材含量测定方法科学、简便、可靠,重复性及稳定性好,为完善美洲大蠊药材的质量控制提供了科学依据.
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蝮蛇质量标准的研究
目的:建立蝮蛇的质量标准.方法:采用生药学方法进行性状鉴别、显微鉴别,对蝮蛇肌肉中的次黄嘌呤进行含量测定.结果与结论:本法操作简便,结果可靠,为蝮蛇药材的质量控制提供了有效的方法.
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参环毛蚓体内核苷磷酸化酶的活性测定及动力学分析
目的：建立参环毛蚓体内嘌呤核苷磷酸化酶（PNP）的检测方法，以肌苷为底物，评价该酶的活性。方法采用 HPLC 法，色谱条件：Ecosil C18-AQ 柱（250 mm×4.6 mm，5μm），流动相为10 mmol·L-1磷酸二氢铵缓冲液（pH4.5）和甲醇，梯度洗脱，流速为0.8 mL·min-1，柱温为室温，检测波长254 nm，用底物肌苷与组织粗蛋白提取液在室温孵育30 min，沸水煮5 min 终止反应，12000 r·min-1离心10 min，取上清过滤后进行 HPLC 分析，以 OriginPro 8.5软件作图，计算酶动力学参数。结果酶反应中产物次黄嘌呤在0.5～40μmol·L-1范围内呈良好的线性关系（r=0.9996）；精密度小于3.5%，回收率大于80%。PNP 酶动力学参数：Vmax 为0.015nmol·min-1·mg-1， Km 为19.8μmol·L-1。结论成功构建了参环毛蚓体内次黄嘌呤代谢酶活性测定相关的实验体系，该法所得数据稳定可靠，可准确反映关键酶活性的动态变化。
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高尿酸血症动物模型初探
采用尿酸生成的前体物质次黄嘌呤(Hypoxanthine)为模型药物,制备一种高尿酸血症动物模型,并对造模的量效、时效关系,动物性别,黄嘌呤氧化酶抑制剂的影响等因素进行了考察.结果表明,以此方法可制备一种较为稳定的尿酸生成增多型小鼠高尿酸血症动物模型.
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甘草水制广地龙饮片质量标准研究
目的 建立甘草水制广地龙饮片的质量标准.方法 按2005年版<中国药典>附录ⅨH水分测定法中的第一法、附录ⅨK灰分测定法和附录ⅩA浸出物测定法测定;采用HPLC法测定饮片中的次黄嘌呤和肌苷的含量.结果 甘草水制广地龙饮片质量标准为:水分含量≤5.0%,总灰分含量≤10.0%,酸不溶性灰分含量≤5.0%,水溶性浸出物浓度≥20.0%,乙醇浸提物浓度≥8.0%;次黄嘌呤含量≥0 006%,肌苷含量≥0.40%.结论 建立了较完善的甘草水制广地龙饮片的质量标准,改变了过去仅依靠经验和感官判断的鉴定方法.
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HPLC法测定复方地龙胶囊中次黄嘌呤与阿魏酸的含量
目的:建立高效液相色谱法测定复方地龙胶囊中次黄嘌呤及阿魏酸的方法.方法:次黄嘌呤检测采用Thermo C18色谱柱(4.6 mm×250mm,5μm),流动相为水 甲醇—四氢呋喃(100∶0.5∶0.5),流速1.0 mL/min,检测波长为254 nm;阿魏酸检测采用Thermo C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为0.1％磷酸水 甲醇(65∶ 35),流速1.0 mL/min,检测波长为313 nm.结果:次黄嘌呤在0.096～0.48μg范围内呈良好的线性关系,r=0.999 9,平均回收率为98.74％,RSD为1.84％(n=6);阿魏酸在0.122 8～0.614 μg范围内呈良好的线性关系,r=0.999 9,平均回收率为99.03％,RSD为1.30％(n=6).结论:所建的高效液相色谱法方法简便,专属性强,方法可靠,可作为复方地龙胶囊的定量控制方法.
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HPLC法同时测定赤子爱胜蚓药材中尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、尿苷、腺苷的含量
目的:建立同时测定赤子爱胜蚓药材中尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、尿苷、腺苷含量的方法.方法:采用高效液相色谱法.色谱柱为Venusil XBP C18,流动相为50%甲醇-0.01 mol/L磷酸二氢钾溶液(梯度洗脱),流速为1.0 ml/min,检测波长为254 nm,柱温为30℃,进样量为10μl.结果:尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、尿苷、腺苷检测进样量线性范围分别为0.05~1.60μg(r=0.9991)、0.05~1.60μg(r=0.9993)、0.002~0.010μg(r=0.9991)、0.0075~0.24μg(r=0.9999)、0.0250~0.80μg(r=0.9990);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<3%;加样回收率分别为98.30%~100.76%(RSD=0.8%,n=9)、98.68%~100.96%(RSD=0.8%,n=9)、95.16%~97.67%(RSD=0.9%,n=9)、96.15%~99.57%(RSD=1.5%,n=9)、96.39%~101.93%(RSD=1.8%,n=9).结论:该方法操作简便、稳定、重复性好,可用于赤子爱胜蚓药材中尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、尿苷、腺苷含量的同时测定.
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别嘌醇治疗痛风的不良反应分析
别嘌醇(Allopurinol)是天然次黄嘌呤的同分异构体,对黄嘌呤氧化酶有抑制作用,它可阻止黄嘌呤和次黄嘌呤氧化成尿酸,从而具有降低血尿酸及治疗痛风的作用.由于其作用不受肾功能影响,因此对痛风、尿酸性肾病及防止肾脏尿酸盐结石的形成具有较好疗效.但其在长期应用中,亦有不良反应发生,现分析如下.
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不同产地梅花鹿鹿茸药材中5种核苷类成分的含量测定及聚类分析
目的:建立同时测定梅花鹿鹿茸药材中尿嘧啶、次黄嘌呤、尿苷、肌苷、鸟苷5种核苷类成分含量的方法,并比较不同产地梅花鹿鹿茸药材中上述核苷类成分含量的差异.方法:采用高效液相色谱法.色谱柱为Agilent Eclipse Plus C18,流动相为甲醇-0.07％冰醋酸溶液(4:96,V/V),流速为1.0 mL/min,检测波长为254 nm,柱温为28℃,进样量为5μL.采用SPSS 19.0软件对30批不同产地梅花鹿鹿茸药材(S1～S30)进行聚类分析.结果:尿嘧啶、次黄嘌呤、尿苷、肌苷、鸟苷的检测质量浓度线性范围均为0.001～0.01 mg/mL(r均为0.9999);定量限分别为1.4891、1.9279、4.8809、7.8846、8.0921 ng,检测限分别为0.4467、0.5784、1.4643、2.3654、2.4277 ng;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于2％;加样回收率分别为99.69％～103.65％(RSD=1.40％,n=9)、97.77％～103.26％(RSD=1.67％,n=9)、97.82％～101.81％(RSD=1.12％,n=9)、99.30％～104.82％(RSD=1.72％,n=9)、98.13％～100.20％(RSD=0.64％,n=9).30批药材样品中尿嘧啶、次黄嘌呤、尿苷、肌苷、鸟苷的含量存在差异.上述药材样品可聚为3大类,即S16～S18、S22～S30聚为一类,S8～S15、S19～S21聚为一类,S1～S7聚为一类.结论:该方法精密度、稳定性、重复性均较好,可用于同时测定梅花鹿鹿茸药材中尿嘧啶、次黄嘌呤、尿苷、肌苷、鸟苷的含量;梅花鹿鹿茸药材的质量受生态环境、养殖技术等因素的影响,存在较大差异.
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肌氨肽苷注射液提取工艺研究
目的研究肌氨肽苷注射液提取工艺,以提高产品收率,确保产品质量稳定.方法采用正交设计试验,用福林酚法、高效液相色谱法检测提取物中多肽和次黄嘌呤含量,并对制剂产品质量进行考察.结果选用胃蛋白酶和木瓜蛋白酶进行水解,增加pH值3.0和10.5两步煮沸和低温沉淀,所得提取产物收率高、质量稳定.结论按照筛选出的生产工艺进行提取,可提高收率,产品质量稳定,工艺合理.
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别嘌醇致药物性皮疹及严重并发症1例
别嘌醇为抑制尿酸生成的主要药物,能有效抑制黄嘌呤氧化酶,阻止次黄嘌呤和黄嘌呤氧化生成尿酸,从而降低血中尿酸浓度,主要用于治疗慢性痛风及痛风性肾病,常见不良反应为皮疹(主要是斑丘疹).但由别嘌醇过敏引起的全身性严重并发症却少见,现将我院1例患者使用该药过程中出现的不良反应报道如下.
