首页 > 文献资料
-
基于内皮祖细胞构建的组织工程静脉体内初步评价
目的 探讨基于犬骨髓源内皮祖细胞和猪脱细胞动脉基质构建的组织工程静脉植入体内的可行性.方法 实验犬(n=8)骨髓体外扩增获取内皮祖细胞,荧光标记后将其种植于猪脱细胞动脉基质,体外构建组织工程静脉.以未种植细胞的脱细胞基质为对照(n=4),将其置换自体犬下腔静脉,术后10 d、4周、12周造影后取材检测.结果 实验(对照)组在第10天、4周、12周的通畅率分别为7/7(2/4)、6/6(2/2)和4/4(1/2).相关检测提示实验组移植血管腔面覆盖汇合的内皮细胞,部分为种植的细胞,部分为新形成的内皮细胞,中层有成纤维细胞和α-actin阳性细胞出现.通畅的对照组腔面由假内膜覆盖.结论 基于自体内皮祖细胞和脱细胞动脉基质构建组织工程静脉是可行的,但需要进一步改进和观察.
-
脱细胞血管基质制备和异体移植的实验研究
目的研究建立无细胞血管基质制备的新方法,并探讨脱细胞血管异体移植的可行性.方法采用不同去垢剂[1%TritonX-100、1%十二烷基磺酸钠(SDS)]多步骤对血管进行脱细胞处理,并通过组织学和力学观测,建立兔动脉血管脱细胞的方法;并进行脱细胞血管的异体移植.结果经低渗溶液和去垢剂1%TritonX-100、1%SDS等多步骤处理,兔胸主动脉血管的细胞基本脱除,细胞外基质保持完好,血管的弹性、韧性和力学强度仅轻度降低;用该法制备的兔颈动脉(直径约2.0 mm)进行异体移植,经2个月观察,全部通畅.结论经去垢剂TritonX-100、SDS加低渗溶液和蛋白酶抑制剂处理的多步法, 可以脱除血管的细胞成分,细胞外基质和力学特性保持完好,是一种较好的方法;用该法制备的兔颈动脉(直径约2.0 mm)进行异体移植,初步取得成功.
-
肝素处理小口径脱细胞异种血管的移植研究
冠状动脉旁路移植术(CABG)中常因自体动静脉材料有限及曲张、炎症等原因,无法满足需求.我们研究探讨应用脱细胞联合肝素处理的方法在短时间内制备小口径异种移植血管的可行性.
-
脱细胞牛心包种植人血管混合细胞构建组织工程心脏瓣膜
目的 探讨在脱细胞牛心包上种植人血管混合细胞构建组织工程心脏瓣膜的方法与效果.方法 将体外培养的人血管混合细胞种植在脱细胞牛心包材料上,观察种子细胞形态学和免疫组织化学变化和牛心包超微结构变化,并测定内皮细胞分泌t-PA和PAI-1的活性.结果 种子细胞全层覆盖脱细胞牛心包表面,并浸润至组织内部生长;牛心包表面为扁平、片状、分层的细胞覆盖,细胞表面有少量绒毛和纤细的纤维结构.免疫组化显示内皮细胞Ⅷ因子、平滑肌细胞α-肌动蛋白、成纤细胞Fibronectin相关抗原呈阳性表达;种子细胞能分泌纤溶活性物质t-PA和PAI-1.结论 人血管混合细胞种植后附着满意,与脱细胞牛心包生物相容性好,生长状况好,并具有内皮功能.
-
牙周组织工程新技术的研究进展
由牙周炎等疾病导致的牙周支持组织丧失将引起牙齿逐渐松动脱落,进而影响发音和进食,甚至导致一系列生理和心理问题.组织工程作为可实现组织器官重塑及功能重建的技术,已在牙周组织再生中取得可喜成绩,但传统的构建方法在实现功能性牙周再生方面仍存在诸多不足.随着组织工程技术的进步,近年来涌现了一系列新技术、新方法,如细胞膜片技术、脱细胞技术、静电纺丝技术、三维打印技术等,为牙周组织再生带来新的希望.本文对近年来牙周组织工程领域取得的新进展及应用的新技术进行简要阐述,以期探讨未来牙周再生的发展方向.
-
以脱细胞犬动脉为基质的血管支架体外再细胞化
目的 对已成功制备的以脱细胞犬动脉为基质的血管支架进行体外再细胞化研究.方法 多聚环氧化合物家族的乙二醇缩水甘油醚(ethylene glycol diglycidyl ether,EX-810)、去离子水和超声共同作用于犬主动脉,制备血管支架,并在体外对其进行有效的再细胞化,包括人脐动脉平滑肌细胞(smooth muscle cell,SMC)的种植,人脐静脉内皮细胞(endothelial cell,EC)的种植,以及两种细胞的复合种植.结果 本文提出的制备血管支架适合SMC和EC的生长,以合适的接种密度进行再细胞化即可获得致密的细胞层;提高细胞的种植密度可以加速支架的再细胞化进程.SMC和EC复合种植模型中,高密度接种的EC能够在不同密度的SMC上生长,形成较为致密的EC单层;但共培养的EC的形态和覆盖率受SMC接种密度的影响.结论 在脱细胞犬动脉上成功实现EC和SMC的单独种植和联合种植.
-
脱细胞异种真皮支架与自体薄皮片治疗烧伤55例
1998～1999年,我院用江苏启东市医疗用品研究所研制的脱细胞异种真皮支架与自体薄皮片复合移植治疗深Ⅱ度、Ⅲ度烧伤切削痂创面及瘢痕切除创面55例,效果满意.
-
脱细胞异体真皮在增生性瘢痕治疗中的应用
目的解决皮源困难的烧伤病人供皮问题和避免或减轻对于瘢痕体质病人供皮区瘢痕的转移问题.方法切除肥厚性瘢痕,应用J-1(北京桀亚)脱细胞异体真皮加自体头皮移植创面,一旦愈合即进行抗瘢痕治疗.结果通过8例切瘢植皮,成活率达99%.结论脱细胞异体真皮加自体头皮移植用于增生性瘢痕尤其是具有瘢痕体质病人的治疗,其近期效果是肯定的,远期结果有待进一步观察研究.
-
京尼平交联对去污剂联合酶法脱细胞兔组织工程气管基质生物力学性能的影响
目的 探讨京尼平交联对去污剂联合酶法(detergent enzymatic method,DEM)脱细胞兔气管基质生物力学性能的影响.方法 健康成年新西兰兔30只,用随机数字表法分为3组(A、B、C),每组10只,A为DEM脱细胞组,B为京尼平交联脱细胞组,C为原生对照组.A、B组行DEM脱细胞处理,随后B组用1％京尼平交联,3组气管基质行力学测试评估脱细胞及京尼平交联对气管基质生物力学性能的影响.结果 拉伸强度A组(0.25±0.02) MPa,B组(0.42±0.09) MPa,C组(0.28±0.06) MPa;弹性模量A组(0.67±0.08) MPa,B组(1.18±0.31) MPa,C组(1.19±0.32) MPa.A组与C组弹性模量差异有统计学意义(P＜0.05),拉伸强度差异无统计学意义(P＞0.05);A组与B组弹性模量和拉伸强度差异均有统计学意义(P≤0.05);B组与C组弹性模量和拉伸强度差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 DEM脱细胞在一定程度上降低了气管基质生物力学性能,而京尼平交联可以显著提高脱细胞气管基质生物力学性能且获得的气管基质具有与原生气管相似的力学性能.
-
脱细胞同种异体神经移植的研究进展
目前周围神经缺损的病例越来越常见.周围神经损伤后佳治疗是自体神经移植,但其存在二次创伤、供区功能障碍、感觉缺失、瘢痕形成和神经瘤性疼痛等缺点.且供体有限,常无法满足较大神经缺损或较广泛神经损伤修复的需要.
-
神经和胶质双层细胞模型在研究载药纳米颗粒传送机制中应用的设想
在纳米材料的多年研究当中,人们取得了惊人的成就,特别是在诊断学和疾病的治疗方面,纳米材料用作药载方面的研究取得了重大的突破.纳米材料作为新型的药物载体其具有小的直径,容易穿过细胞膜,更容易逃脱细胞的吞噬效应等特性;同时也具有表面效应,更有利于吸收和携带其他组分的药物,如探针和蛋白纳米材料.
-
血管修复材料的一维拉伸实验研究
目的:从生物力学的角度筛选适合进行血管修复的生物材料.方法:选择兔的深筋膜、腹膜,和去抗原处理的脱细胞颈动脉、冷冻干燥颈动脉和经过戊二醛处理的犬股动脉、腹膜等进行一维力学拉伸实验,以兔正常的颈动脉、静脉作为对照.结果:所有组材料的力学强度都明显大于静脉对照组,深筋膜和腹膜组又显著大于其他组;伸长率、伸长比、Lagrange张应变检测值以静脉对照组和脱细胞组大,经过戊二醛处理组的小;经过戊二醛处理的组织材料,滞后环变化小且不明显,伸展性降低,脆性增加,但对破坏载荷和Lagrange张应力影响不大.结论:脱细胞、冻干颈动脉的力学性质和粘弹性接近于正常血管,正常深筋膜组次之,而经过戊二醛处理的组织材料,力学强度虽好,但粘弹性较差.
-
无细胞胶原基质的研究进展
天然胶原类组织,经过脱细胞处理后,降低免疫原性,可作为组织工程的支架材料,本文就脱细胞的方法以及无细胞胶原基质的研究进展作一综述.
-
组织及器官脱细胞方法的研究进展
来源于脱细胞组织和器官的生物支架材料已成功运用于组织工程和再生医学.不同组织因来源、密度、组成、几何特性、生物特性不同,脱细胞方法也不尽相同.佳的脱细胞方法应在充分去除细胞成分的基础上,保存细胞外基质(ECM)的完整性及生物活性.现主要介绍常用的组织及器官脱细胞方法,并对脱细胞后支架材料结构和组成影响进行综述.
-
软骨脱细胞细胞外基质多孔支架与山羊髓核细胞生物相容性研究
目的 制备软骨脱细胞细胞外基质多孔支架,并探讨其与山羊髓核细胞的生物相容性.方法 猪关节软骨经研磨、脱细胞、冷冻干燥技术等处理制成三维多孔支架；从山羊腰椎间盘中分离出髓核细胞,培养后获取P1代细胞；四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测支架浸提液毒性；将髓核细胞以5×106/ml的密度接种在支架上体外培养48 h,通过倒置显微镜、HE染色、死活细胞染色(LIVE/DEAD染色)、扫描电镜观察细胞在支架上的黏附及活性.结果 软骨脱细胞基质多孔支架在敷水状态下光滑透明,分离的髓核细胞呈典型的软骨细胞样形态；MTT检测各组间增殖,其差异不具有统计学意义(P＞0.05)；倒置显微镜、电镜观察髓核细胞呈球状或短梭形均匀地贴附在支架内部,HE染色观察可见髓核细胞均匀分布在支架内部,LIVE/DEAD染色显示全部为绿色荧光(活细胞),未见红色荧光(死细胞).结论 软骨脱细胞基质多孔支架在组成上与髓核组织相似,与山羊髓核细胞具有良好的生物相容性,可以作为髓核组织工程的支架材料.
-
经液氮保存具有活性的同种生物瓣脱细胞支架的制备
目的为体外构建组织工程瓣提供脱细胞的同种生物瓣支架材料,并建立相应的技术方法.方法选取经液氮保存、具有活性的同种生物带瓣管道作为实验材料,用含十二烷基硫酸钠(SDS)的Tris低渗缓冲液脱去同种带瓣管道存在的细胞;固定剂固定后,分别行HE染色、胶原纤维和弹力纤维染色的光镜和扫描电镜观察、摄片.结果用质量浓度为0.03%SDS的Tri8低渗缓冲液与同种瓣膜共同孵育48 h,完全脱去了表面的内皮细胞(ECs),又较完整地保留了胶原纤维和弹力纤维等细胞外基质主要成分,其形态学结构在脱细胞前后无明显改变;瓣叶中心部位有部分成纤维细胞存留.而对于脱主动脉壁细胞,质量浓度为0.1%SDS更合适.结论质量浓度为0.03%～0.1%SDS的低渗缓冲液对制备脱细胞的同种生物瓣支架效果较佳,有利于同种瓣再内皮化时种植细胞的粘附和扩增,可进一步应用于组织工程瓣体外构建的研究.
-
肺脱细胞支架制备方法及应用的研究进展
组织或器官脱细胞生物支架已成功应用于组织器官工程和再生医学,基于脱细胞器官支架构建的人工器官未来可能为器官功能衰竭终末期患者提供器官移植供体.理想的脱细胞方法应该在充分去除细胞成分基础上,保存器官细胞外基质支架的完整性及生物活性.肺脏具有结构疏松、拥有气道和血管两套管路系统等特点,采用何种脱细胞方法才能获得理想的效果,一直是肺脏器官工程的重要研究课题.文章阐述了肺脱细胞支架制备方法(物理方法、化学方法等),并且阐述了肺脱细胞后的无菌化处理及保存方法和评价方法;同时,介绍了肺脱细胞支架的应用及其发展前景,以期为相关领域的研究者提供参考.
-
脱细胞异体真皮和自体刃厚皮复合移植在功能部位深度烧伤早期治疗中的临床应用
目的：探讨脱细胞异体真皮和自体刃厚皮复合移植在人体重要功能部位深度烧伤创面早期治疗中的临床效果。方法2008年1月-2011年12月对37例53处关键功能部位深 II 度～III 度烧伤创面于24～120 h 内局部进行早期切削痂扩创后，用脱细胞异体真皮和自体刃厚皮行复合移植，观察复合植皮的成活率、关节功能恢复及后期瘢痕形成等情况。结果除2例3个部位复合皮片边缘有散在点状坏死延迟愈合外，其余35例手术均成功，50处关键功能部位复合皮片均成活愈合好。复合皮片光滑柔软，弹性好，关节功能恢复好；随访6～18（12．2±1．4）个月，供皮区无明显瘢痕，色泽接近正常皮肤，植皮区无明显增生挛缩的瘢痕，关节功能恢复接近正常水平。结论脱细胞异体真皮和自体刃厚皮应用于人体重要功能部位深度烧伤创面早期治疗是比较理想的方法，愈后植皮区关节功能恢复好，柔软度及弹性好，无明显增生及挛缩瘢痕。
-
脱细胞鸡肌腱的制备与体外生物力学测定的实验研究
目的 制备鸡的脱细胞屈趾肌腱,并对脱细胞肌睫进行生物学及生物力学测定,为其临床应用提供实验依据.方法 取3～4个月龄的来亨鸡18只,随机分为实验组(脱细胞肌腱组)和对照组(新鲜肌腱组).应用胰酶、Triton-X 100等试剂对来亨鸡的趾屈肌腱进行脱细胞处理,将制备的脱细胞肌腱进行大体、光镜及透射电镜观察,羟脯氨酸含量测定,体外生物力学测定,并与新鲜肌腱进行对比.结果 脱细胞肌腱大体观察无明显变化,光镜及透射电镜下观察肌腱经脱细胞处理后无细胞残留,肌腱细胞外结构保存良好,2组肌腱内的羟脯氨酸含量差异无统计学意义(P>0.05),脱细胞肌腱的破裂强度为160.23 MPa,应力应变曲线第二段的弹性模量1.47 GPa,与新鲜肌腱组差异无统计学意义(P>0.05).结论 肌腱经脱细胞后,其细胞外结构保存较完整,生物学及生物力学性能与新鲜肌腱无明显差异.
-
全球首个生物工程角膜上市
前不久。中国再生医学集团在“角膜盲防治创新论坛暨全球首个生物工程角膜启动仪式”上宣布，由中国科学家团队自主研发的生物工程角膜（脱细胞角膜基质，商品名为“艾欣瞳”）正式上市，这将改变传统的角膜移植手术中角膜供体来源奇缺的困境，为无数角膜盲患者带来光明。
