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脱细胞异种(猪)真皮基质临床应用与研究进展
创面处理贯穿烧伤治疗的全过程,皮肤移植是覆盖烧伤创面的重要手段,但严重烧伤常致自体皮源不足.寻找永久的真皮替代品成为研究的热点.1995年Wainwright研制出无细胞真皮基质(ADM)充当永久性真皮替代物并成功应用临床[1].近年来脱细胞异种(猪)真皮在临床开始广泛应用并取得一定成效.本文将就脱细胞异种(猪)真皮基质的临床应用与研究进展作一综述.
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深度烧伤患者四肢关节功能部位的复合皮移植应用
目的 观察异体无细胞真皮基质(ADM)在深度烧伤的四肢关节部位的临床移植效果.方法 以11例四肢关节部位深Ⅱ和Ⅲ度烧伤的患者为对象,采用复合皮(CS)移植技术将20块网状ADM(每块150～400 cm2)与自体超薄断层皮片(UTSG,厚度0.05 cm)重叠,组成CS,一次性移植于患者14处四肢关节区域的切痂或削痂创面上,并在邻近的烧伤部位移植自体断层中厚皮片(STSG,厚度0.15～0.20 cm)作为对照.术后10～14 d首次换药,定期随访和行移植皮片组织学观察.结果 术后2周CS成活率93.7%,STSG成活率为97.2%,二者比较差异无统计学意义(P＞0.05).随访1～3年,CS组未见明显的瘢痕增生和挛缩,所有患者关节屈伸范围正常.组织学观察显示,CS真皮层无皮肤附件,胶原纤维排列有序,仅有少量淋巴细胞浸润.但在烧伤后期感染创面上的CS移植效果(外观质地和组织结构)不及烧伤早期的清洁创面.结论 深度烧伤患者关节部位尽早应用ADM能够产生满意的整形效果并满足关节功能需要.
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无细胞真皮基质的制备及应用(文献综述)
无细胞真皮基质是指异体或异种皮经一系列处理后,保留原有胶原纤维成分及基本组织结构的一种永久性真皮替代物.其制作方法有胰酶消化法,Dispase-Triton X-100法,高渗盐溶液-SDS法,平衡盐浸泡法等.与其他真皮基质相比,其具有来源广泛、低免疫原性、生物亲和性高、有利于黑色素细胞增生等特点.其既可用于创面修复,又可用作软组织的替代物.广泛应用于烧伤、整形、口腔、神经外科、眼科、耳鼻喉科等学科领域.
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器官特异性无细胞基质移植物的研究进展
同种器官供体十分有限和随机,且受到组织配型的限制.去除器官组织中的细胞成分,使宿主对移植物的抗原反应程度降到低,有望使随机的器官特异性无细胞异体或异种基质移植物成功.1964年Grillo等[1]先对皮肤组织进行脱细胞处理,1977年Oliver等[2]通过胰蛋白酶处理皮肤得到无细胞真皮胶原用作临床创面敷料,1989年Badylak SF用猪小肠制备成无细胞基质移植物(acellular matrix grafts,AMGs)成功地进行狗动脉血管搭桥,直至1995年Wainwright[3]研制出无细胞真皮基质(ADM,商品名"AlloDerm")充当复合皮永久性真皮替代物并成功地应用于临床.这些组织经脱细胞处理目的在于清除器官组织内全部细胞,同时保持该组织的细胞外基质(ECM)结构及其生物化学特性[4],以获得组织或器官重建的大效价.此后,多种来源的AMGs被用作器官缺损的生物假体,已经在动物实验和临床试用中获得部分功能重建,成为重建外科崭新的研究领域.
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脱细胞真皮基质在整形美容外科中的应用
目的为改善皮肤移植的形态和功能,提高大面积烧伤缺乏自体供皮来源患者的美容整形治疗效果.方法应用自制脱细胞真皮基质(ADM),植入松解或切除瘢痕后的创面,5～10 d后再行自体刃厚皮移植,术后观察ADM和创面愈合、瘢痕增生及功能恢复情况.3例再次手术患者留取复合移植组织进行组织学检测. 结果 15例23次复合皮移植:14例22次成活率为100 %,1例1次成活率为80 %,植皮区平整光滑,瘢痕增生不明显,组织学检测提示复合皮血管化明显,胶原排列整齐,表皮-真皮连接结构重建充分,未见排异反应. 结论 ADM与自体刃厚皮复合移植能改善创面愈合的质量,是较理想的整形美容修复材料.
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无细胞真皮基质与自体皮片复合移植的临床应用
目的改善烧伤创面移植皮片愈合后皮肤的外形和功能,并减轻供皮区瘢痕增生.方法应用自制的无细胞真皮基质与自体刃厚皮片复合移植于4例切(或削)痂后的烧伤创面.结果未发现对复合移植皮片的排异反应.创面愈合后,大体观察发现移植自体网状皮片及自体小皮片的轮廓界面变得不明显或基本消失,自体大张皮片与真皮基质复合移植区出现较厚而特殊的脱屑,均反映了愈合过程的特殊性.光镜和电镜观察发现复合皮片移植区棘细胞间桥粒清晰,基底膜连续而完整等.与对照部位相比,复合皮片移植区瘢痕增生减轻,未见明显挛缩,皮肤弹性较好.结论在3～4个月的观察期内,自体刃厚皮片与无细胞真皮基质复合移植后,功能和形态等同或优于单纯自体刃厚皮片移植.
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真皮替代物的研究现状与展望
烧伤创面是引发机体病理生理变化的基础.目前已公认烧伤早期切削痂、及时封闭创面是提高大面积深度烧伤伤员成活率关键、有效的措施之一.然而在创面覆盖物的研究中仍然存在两大挑战,第一是如何充分、有效利用大面积深度烧伤伤员残留的极少的自体皮源,第二是如何改善伤员后期的功能.单纯的表皮替代物由于缺乏真皮基质成分对成纤维细胞的抑制作用及其引导性组织再生作用,导致成纤维细胞过度增生,大量胶原沉积,后期瘢痕挛缩严重,功能较差.因此,真皮替代物在创面愈合过程中的作用愈来愈受到重视,它不仅涉及到烧伤整形专业,而且与美容医学也有着极大的关系.本文对真皮替代物的研究现状与应用予以综述.
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关键词：
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无细胞异体真皮基质在关节功能部位整复中的应用
目的观察无细胞异体真皮基质(ADM)在功能部位的移植效果.方法选择11例大面积烧伤后产生增生性瘢痕伴有关节功能障碍的患者,将13块经胰蛋白酶等处理制成的网状ADM与超薄断层自体皮片(USSG)重叠,一次性移植于9例患者四肢关节部位的切瘢创面上,并以邻近的断层中厚自体皮片(TSSG)移植物为对照组,2W后首次换药,定期作CS随访和组织活检观察.结果与对照组一样,CS移植物全部成活,随访1～5年未见排异反应和瘢痕增生,外观质地和功能接近正常皮肤,真皮层无皮肤附件,胶原排列有序,仅有少量淋巴细胞散在浸润.结论充当真皮替代物的ADM可以用于功能部位瘢痕挛缩的整复治疗.
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无细胞真皮基质在特重烧伤晚期整形中的应用
目的提高大面积特重烧伤后期缺乏自体供皮来源整形患者的治疗效果,改善移植皮肤的形态和功能.方法应用自制无细胞真皮基质与自体刃厚皮片复合移植,修复烧伤瘢痕松解整形的创面以改善功能形态.结果12例患者应用本方法治疗,1例因感染致部分植皮坏死,其余均完全成活,未见排异反应,与单纯自体薄皮片移植对比观察,愈后表皮平坦光滑,质地柔软,皮肤可捏起,色泽较正常皮肤略深,较刃厚皮移植满意,功能良好,与全厚或中厚皮片移植相似,优于薄的断层皮片或刃厚皮片.结论无细胞真皮基质与自体薄皮片复合是比较理想的修复材料.
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无细胞真皮基质的研制
目的 研制人同种脱细胞真皮基质,用于大面积深度烧伤后真皮成分的替代、美容医学中的填充及皮肤组织工程中的支架材料. 方法 获得的正常人新鲜尸体皮肤,用高渗盐溶液去除表皮,十二烷基硫酸钠、胰蛋白酶等处理以去除真皮中的细胞成分,得到人同种脱细胞真皮基质,经光镜、电镜和免疫组织化学分析. 结果 经处理后得到的人无细胞真皮基质,完全去除了表皮和真皮中的细胞成分,保留了完整的基底膜复合物,胶原束结构和排列正常,弹力纤维结构正常. 结论 用此方法制备无细胞真皮基质,能完全去除表皮和真皮中的细胞成分,不改变真皮中胶原纤维和弹力纤维结构,其制备工艺操作性强,是一种简单有效的制备方法.
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混合型皮肤替代物的构建及移植试验
目的构建含自体表皮细胞和异种表皮细胞的混合型皮肤替代物,并用于移植封闭全层皮肤缺损创面.方法以无细胞真皮基质为载体,将Balb/c小鼠的表皮细胞(自体表皮细胞)和人表皮细胞(异种表皮细胞)按1:1比例混合后种植于无细胞真皮基质表面,经体外培养后形成含表皮细胞层的皮肤替代物,然后移植于Balb/c小鼠全层皮肤缺损创面,观察移植效果.结果皮肤替代物移植于小鼠全层皮肤缺损创面后,可封闭创面,新生皮肤基底膜结构较完整,抗层粘连蛋白、Ⅳ型胶原染色阳性.移植后人表皮细胞随时间延长,数量逐渐减少并终被小鼠自体表皮细胞替代.结论含自体表皮细胞和异种表皮细胞的混合型皮肤替代物可封闭全层皮肤缺损创面,可望节省自体皮源,缩短体外培养时间.
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活化的人淋巴细胞与不同猪真皮共同培养的免疫反应特征
目的探讨临床应用异种无细胞真皮基质(XenoADM)的免疫反应.方法用网状XenoADM与超薄自体皮片复合移植于3例大面积Ⅲ度烧伤患者,成活后4～8周分离外周血单个核细胞(PBMC),以同期单纯自体皮移植的大面积烧伤患者PBMC为对照,用新鲜小猪整张真皮片(wholexenodermis)、微粒真皮(mincedxenodermis)和MincedXenoADM作抗原刺激物,通过不同的猪真皮→人淋巴细胞共同培养(DLCC)、3HTdR掺入、免疫组织化学技术,检测反应细胞增殖水平和细胞类型.结果DLCC后,新鲜小猪微粒真皮组对活化和未被活化人淋巴细胞增殖刺激作用均明显强于猪整张真皮组和XenoADM组(P<0.05～0.01),增殖和浸润到真皮内的细胞以CD3+CD4+/CD45RO+T淋巴细胞为主、单核细胞和B细胞次之.结论以CD3+CD4+/CD45RO+为主的T淋巴细胞参与可能是异种真皮移植后的免疫反应特征;真皮微血管内皮细胞ICAM1的表达可能与诱导淋巴细胞浸润和增殖有关,与未活化的淋巴细胞相比,采用活化的淋巴细胞进行DLCC,可更真实地反映宿主对XenoADM的免疫反应状况.
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成人深度手烧伤258例治疗及功能康复
自1986年1月～2000年12月我科采用不同手术方法治疗258例413只深度手烧伤。现将治疗及功能康复情况报告如下。1 对象与方法本组258例413只手深度烧伤。其中男性215例341只手，女性43例72只手；年龄18～60岁，平均35岁。烧伤面积2％～98％，深Ⅱ度102例185只手，Ⅲ度156例228只手。方法：(1)入院后对上肢、腕关节、手背、指背区环形焦痂立即施行切开减张。于伤后2～7d行切削痂，大张自体薄中厚皮片或真皮下血管网皮瓣移植、异体无细胞真皮基质自体刃厚皮片复合移植。在指背切削痴时尽量保留深层软组织及伸指肌腱膜，使创基有良好的受皮条件。(2)手部创面一旦修复，即戴弹力手套，同时进行功能锻炼。首先从日常生活自理开始锻炼，配合水疗、理疗、器械辅助等达到有效的锻炼效果，是防止严重疤痕挛缩及功能障碍的有效措施。(3)本组除25例41只手感染后肉芽创面植皮外，233例372只手均在伤2～7d行手术植皮治疗。其中，98例184只手削痂大张薄中厚皮片修复；121例164只手切痂大张中厚皮片修复；5例7只手切痂真皮下血管网游离皮片移植；7例7只手切痂带蒂腹部真皮下血管网皮瓣修复；2例2只手切痂异体无细胞真皮基质自体刃厚皮片复合移植。
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无细胞真皮基质与自体皮复合移植愈合过程的观察
目的:为改善植皮区外观和功能,并同时减轻供皮区瘢痕增生.方法:应用自制的无细胞真皮基质与薄的刃厚自体皮复合移植应用于2例切削痂后的烧伤创面.结果:未发现对复合移植物的排异反应.创面愈合后,大体观察发现移植网状自体皮的网状形式已变得不明显,自体小皮片的轮廓基本消失,均反应了愈合过程的特殊性.光镜和电镜观察发现复合移植区基底膜清晰、连续且完整等.与对照部位相比,复合移植区瘢痕增生减轻,未见明显挛缩,皮肤弹性较好.结论:至少到目前为止的观察期(3～4个月)内,较薄的刃厚自体皮与无细胞真皮基质复合移植后外观和功能等同或优于单纯刃厚自体皮移植.
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无细胞真皮基质与软组织填充
在整形外科的临床手术中常需对体表某些部位软组织的先天发育不足和后天凹陷畸形进行填充修整,填充物的填充修复是治疗的必要手段,因此纵观软组织填充物在整形外科的发展过程就是一个不断寻找理想填充物的过程."理想"体现在以下几个方面:①首先是安全,即优异的组织相容性,不引起毒性反应、炎症反应、异物反应、变态反应、无抗原性、无致癌性;②有一定的强度;③物理、化学稳定性好,耐腐蚀,不产生有毒物质的溶出物;④吸收少;⑤不移位;⑥操作简单、易塑形;⑧非磁性、易消毒、易储藏;⑦价廉易得.
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无细胞真皮基质在外科应用中的流行观点
无细胞真皮基质是一类"由去除了细胞的皮肤制成的,保留无菌支架结构或'网'状组织可使患者自身细胞长人并终取代"的生物支架材料[1].无细胞真皮基质在整形外科及整个医学领域引起了很大的关注,因为其可"帮助避免其他再造手术所存在的困难和限制"[1].有关无细胞真皮基质的基础研究和临床应用扩展迅速,并涉及多个领域.根据PubMed的检索结果来看,此方面研究是一类相对较新的进展,第1篇报道的文献为1979年2月[2].至今(2012年6月中旬),仅有相对较少的关于无细胞真皮基质的文献报道,在联合生物医学文献中大概有640篇(应用检索词"acellular dermal matrix").
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无细胞真皮基质在整形与再造外科中的应用
无细胞真皮基质(acellular dermal matrices,ADMs)是一类生物支架材料,其由去除了细胞的皮肤制成的,保留无菌支架组织结构.在这一支架上,患者的自身细胞可以长入,并终形成新的组织.有关ADMs的基础科学和临床应用在多个领域中迅速扩展,尚还有许多外科应用领域有待探索[1].整形与再造外科医师已在多个外科领域广泛应用ADMs,本期PRS专栏重点讨论了2012年11月PRS杂志发表的增刊<无细胞真皮基质在外科应用中的流行观点>中的文章.正如第1篇全文[1]所述,这份增刊承载了有关ADMs的科学、技术和应用的流行的信息,还包含一些在PRS杂志中不常看到的主题.本期PRS专栏所选的全文和摘要,,代表了一些在ADMs方面世界权威专家的观点.本期专栏覆盖范围广泛,包含ADMs的基础科学、头颈外科中的应用、乳房再造中的应用、躯干和胸外科中的应用、甚至美容外科和手外科中的应用.然而,我建议您阅读整本PRS增刊内容,而翻译的论文承载的重要技术您可在临床实践中应用.
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放射治疗对应用无细胞真皮基质的扩张/假体置入乳房再造术的影响:基于证据的回顾
背景与目的 无细胞真皮基质在乳房再造术中的益处已得到了很好地描述.然而,其在放射治疗的组织中,对于乳房再造术的临床影响尚未见很好的报道.方法 在MEDLINE和EMBASE数据库中检索2005年1月至2012年2月发表的在放射治疗组织中应用无细胞真皮基质行乳房再造术的相关文献.同时,对本机构2008年1月至2011年10月收治的符合要求的连续病例的治疗经验进行回顾.结果 挑选出13篇文献进行回顾分析:有关无细胞真皮基质的3篇动物实验研究和10篇证据水平Ⅲ级人体应用研究.10篇临床研究中包含246例经放射治疗的患者.回顾的M.D.Anderson癌症中心的276例放射治疗患者中,有30例为放射治疗组织中应用无细胞真皮基质者.在放射治疗的组织中,在假体置入乳房再造术中应用无细胞真皮基质不会增加感染和总体并发症的发生率,也不会妨碍生物假体网的融合.然而,网状材料融合的速率可能会被延缓.考虑到无细胞真皮基质的应用会增加术中生理盐水灌注的量,可改善美学效果,使患者术后即刻拥有成形的乳房.结论 假体置入乳房再造术中应用无细胞真皮基质不会增加或减少并发症发生率,但却可在心理方面和美学方面满足患者.需要多中心或单中心的随机、对照的高质量、证据水平Ⅰ级的研究来进一步证实.
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无细胞真皮基质的研制
目前治疗大面积深度烧伤的方法是刃厚自体皮移植,后者因缺乏足够的真皮成分,常常造成瘢痕和挛缩.因此,研制一种含有足够量真皮成分的永久性皮肤替代物将具有很大的临床意义.将异体(或异种)皮用高渗盐溶液处理以去除表皮,去污剂处理以去除真皮中细胞成分,得到一种无细胞真皮基质.经光镜和透射电镜观察证实,它去除了表皮全层和真皮中所有细胞成分,保留了完整的基底膜复合物,胶原束结构和排列保持正常,弹力纤维亦正常存在.与AlloDerm相比,无细胞真皮基质具有以下主要优点:①由于延长去污剂的作用时间,真皮中残留的细胞成分被完全清除,因此制得的真皮基质更为理想;②AlloDerm用同种异体皮制备,而无细胞真皮基质除用同种异体皮外,亦可用异种猪皮制备,因此来源广泛,价格低廉.
