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低分子肝素对肝癌细胞株HepG2迁移率及黏附率的影响
目的 探讨低分子肝素(LMWH)对肝癌细胞株HepG2转移及黏附的影响.方法 不同浓度LMWH作用于HepG2细胞株,分别在作用24、48、72 h采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测其细胞生长抑制率,Transwell小室检测HepG2细胞迁移率的变化,纤维黏附蛋白黏附实验观察HepG2细胞株的黏附性变化.结果 0.0×106IU·L-1组24、48、72 h的细胞生长抑制率比较差异无统计学意义(P＞0.05);0.5×106、1.0×106、1.5×106、2.0×106、2.5×106 IU·L-1组24、48、72 h的细胞生长抑制率两两比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).同一时间段各浓度组与0.0×106 IU·L-1组比较细胞生长抑制率差异均有统计学意义(P＜0.05);2.0×106 IU·L-1和2.5 ×106 IU·L-1组与0.5×106 IU·L-1组比较细胞生长抑制率差异有统计学意义(P＜0.05),其余各浓度组两两比较差异均无统计学意义(P＞0.05).与空白对照组比较,0.5、5.0、10.0 g·L-1组细胞迁移率和黏附率下降,差异均有统计学意义(P＜0.05);0.5、5.0、10.0 g·L-1组之间细胞迁移率和黏附率两两比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 LMWH可抑制HepG2细胞生长并降低其迁移率和黏附率.
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RNAi cyclin E对肝癌细胞生长的影响
目的:探讨RNAi cyclin E对肝癌细胞生长的影响.方法:肝癌细胞系HepG2采用体外培养,选取siRNA合成双链发卡样DNA;将其重组入pGFP-V-RS得到重组子pGFP-V-RS-siCE951和pGFP-V-RS-siCE1122:两重组子分别进行DNA序列测定、同源性比较;将两重组子和pGFP-V-Con分别转入人肝癌HepG2细胞中,同时设空白对照组(不转染任何质粒,仅加转染试剂).检测4组HepG2细胞cyclin E mRNA表达情况及细胞的增殖情况.结果:经过同源性检索和优选确定cyclin E基因的siRNA载体pGFP-V-RS-siCE951和pGFP-V-RS-siCE1122;干扰1组(转染pGFP-V-RS-siCE951)和干扰2组(转染pGFP-V-RS-siCE1122)细胞cyclin E mRNA的相对表达量显著低于空白对照组和无关siRNA对照组(P＜0.05);干扰1组和干扰2组与空白对照组和无关siRNA对照组比较,在3、4、5d细胞孔内的吸光度值显著减少,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:siRNA载体pGFP-V-RS-siCE951和pGFP-V-RS-siCE1122转染人肝癌HepG2细胞能显著降低细胞cyclin E基因的表达,是理想的siRNA靶区段.抑制肝癌HepG2细胞cyclin E基因表达,可以降低肝癌HepG2细胞的生长速度.
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COX-2抑制剂NS-398对肝癌HepG2细胞凋亡蛋白Bcl-2和Caspase 3表达的影响
目的 探讨选择性环氧合酶2(COX-2) 抑制在肝癌HepG2细胞凋亡中的作用.方法 用选择性COX-2抑制剂NS-398处理HepG2细胞,流式细胞术测定细胞凋亡和半胱氨酸酶3 (Caspase3)活性变化;Western blotting 法检测不同浓度NS-398处理后凋亡相关蛋白Bcl-2、Caspase3表达变化.结果 流式细胞术显示NS-398 (0、100、200、300、400 μmol/L)作用HepG2细胞24h后,对照组未见凋亡峰,各试验组(100、200、300、400 μmol/L)出现明显的凋亡峰,其凋亡率分别为(10.51±1.04)%、(27.79±2.40)%、(45.72±3.32)%、(60.22±2.03)%,呈明显剂量依赖性( P ＜0.01),不同浓度NS-398处理后Bcl-2表达下降,Caspase3表达增加,随着NS-398处理浓度的增加,表达活性Caspase3 的细胞百分率分别为(2.67±0.22)%、(9.53±0.15)%、(21.28±0.43)%、(39.63±0.8)%、(63.40±0.69)%,呈明显剂量依赖性( P ＜0.01).结论 选择性COX-2 抑制剂NS-398可能通过下调Bcl-2蛋白表达活化Caspase3,从而诱导肝癌细胞HepG2凋亡,COX-2抑制也许可作为新的肝癌的治疗方法.
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山绿茶中RA对HepG2肿瘤细胞抑制作用的实验研究
目的 探讨中药山绿茶中乌苏烷三萜类化合物3β,19α-二羟基乌苏-12-烯-23,28-二羧酸(Rotundioic acid,RA)对肝癌细胞株HepG2细胞周期、凋亡的影响及其作用机制.方法 人肝癌细胞株HepG2以RA( 15,30,60,90mg·ml-1)作用不同的时间后,分别使用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT),吖啶橙(AO)荧光染色法,免疫细胞化学SP法,流式细胞术等实验方法检测HepG2细胞的增殖抑制情况、细胞周期和凋亡的形态学变化,以及细胞内半胱天冬酶-3(Caspase-3)、半胱天冬酶-9(Caspase-9)两个重要的细胞凋亡相关蛋白表达的变化.结果 RA对HepG2细胞有增殖抑制作用,其作用随着药物浓度和作用时间的增加而增强.RA作用24h后HepG2细胞周期的主要特点是大量细胞累积于G1期,进入S期的细胞减少,RA能够诱导HepG2细胞凋亡,RA( 30,60,90 mg·ml-1)经过24 h作用后,细胞凋亡率为8.19％,8.67％,9.81％,细胞内Caspase-3蛋白的表达随着药物浓度增加逐渐增加；Caspase-9的表达随着药物浓度增加无明显变化.结论 RA能够抑制HepG2细胞的增殖,并使细胞大量累积于G1期,进入S期的细胞减少；Caspase-3蛋白的表达增加来诱导细胞凋亡.
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健脾消癥方对肝癌细胞HepG2的增殖和凋亡作用研究
目的 探讨健脾消癥方对人肝癌细胞增殖、凋亡的影响及可能的机制.方法 MTT法观察健脾消癥方对HepG2、SMMC-7721增殖的影响;Annexin V/PI双染色法观察健脾消癥方对HepG2凋亡的影响;实时荧光定量PCR法检测健脾消癥方对HepG2的凋亡相关基因Bax、Bcl-2、Bak的mRNA表达的影响;Western blot检测健脾消癥方对HepG2细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达的影响.结果 健脾消癥方对HepG2、SMMC-7721均有良好的增殖抑制作用,对HepG2的抑制作用尤为显著;Annexin V/PI双染显示,健脾消癜方作用HepG2 48h后出现明显的早期凋亡;实时荧光定量PCR证实健脾消癥方作用HepG2 48 h后,Bak、Bax基因mRNA表达上升,Bcl-2基因mRNA表达下降,Bcl-2/Bax比例下降;Western blot证实健脾消癥方作用HepG2 48 h后,Bax蛋白表达上升,Bcl-2蛋白表达下降.结论 健脾消癥方对HepG2有良好的抑制增殖、诱导凋亡的作用;其作用机制可能与健脾消癥方下调Bcl-2、上调Bak Bax基因mRNA表达,下调Bcl-2蛋白,上调Bax蛋白有关.
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补骨脂素对HepG2细胞BSEP、NTCP的影响
目的 观察补骨脂素对人肝癌细胞HepG2的体外细胞毒性,并研究其可能的机制.方法 采用MTT法观察补骨脂素对HepG2细胞增殖的影响,考察其体外毒性.运用Western印迹法、ELISA试剂盒检测补骨脂素作用HepG2细胞24h后胆盐输出泵(BSEP)、Na+胆盐共转运体(NTCP)蛋白的表达.结果 补骨脂素对HepG2细胞有体外细胞毒性.药物作用24h补骨脂素的IC50为176.5813 μmol/L,补骨脂素能够抑制BSEP蛋白的表达,促进NTCP蛋白的表达.结论 补骨脂素对HepG2有体外细胞毒性,且这种毒性可能与其影响了胆汁酸转运体有关.
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龙血素B改善肝细胞胰岛素耐受的研究
目的 利用HepG2细胞为研究对象,探讨龙血素B对于脂毒性诱发的肝细胞胰岛素耐受(IR)的改善.方法 0.25mmol/L PA刺激HepG2细胞48 h,测定细胞内和细胞外培养基中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的含量以及细胞内甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)的含量.相同方法处理细胞后,给予不同浓度的龙血素B干预,运用Western Blot法检测胰岛素耐受相关蛋白的表达情况.同时,用M'TT法检测龙血素B的细胞毒性.结果 与正常对照组相比,模型组的TG和TC含量和细胞外AST、ALT含量均显著增加,而细胞内AST及ALT含量则呈相反趋势,说明肝细胞内发生脂质积累,损伤较严重;给予龙血素B刺激后,上述情况均有所改善.龙血素B可升高p-Akt的表达水平,改善肝细胞胰岛素耐受.并且,当龙血素B浓度达100 μg/ml时才呈现明显的细胞毒性.结论 安全浓度范围内,龙血素B能够较好地缓解肝脏脂质积累和肝细胞损伤变性,改善脂毒性诱发的肝细胞胰岛素耐受.
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九香虫粗提物对SGC-7901和HepG2细胞增殖及细胞周期的影响
目的 研究九香虫粗提物对人胃癌SGC-7901细胞和肝癌HepG2细胞体外增殖和细胞周期的影响.方法 以乙醇为溶剂采用冷浸法获得九香虫的粗提物；利用倒置显微镜观察给药后两种癌细胞的形态变化；MTF法分析粗提物对两种癌细胞体外增殖的抑制作用；流式细胞仪分析粗提物对两种癌细胞周期的影响.结果 九香虫粗提物对SGC-7901和HepG2细胞生长有抑制作用,并呈明显的剂量依赖性；九香虫粗提物作用24 h后,对SGC-7901和HepG2细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为1 281.62μg/ml和582 μg/ml；流式细胞仪分析结果显示,与对照组细胞相比,HepG2细胞在细胞周期的分布上呈现显著的变化,即S期和G2/M期细胞比例明显降低、G0/G1期细胞比例明显升高.结论 乙醇粗提物能抑制两种肿瘤细胞的体外增殖,对HepG2细胞抗肿瘤活性可能是由于通过其细胞周期的阻滞引起.
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淫羊藿苷抗肝癌细胞HepG2迁移机制的研究
目的 探讨淫羊藿苷抑制肝癌细胞系HepG2粘附和移动的作用及机制.方法 不同浓度淫羊藿苷作用HepG2细胞24 h后,粘附实验检测细胞粘附率,划痕损伤实验检测迁移速度.结果 2,4,8,12和16μg/ml淫羊藿苷处理24 h后,HepG2细胞粘附率分别为77.42%,45.68%,42.39%,40.46%和20.57%,总体呈下降趋势,4 μg/ml组与2μg/ml和16μg/ml组比较差异有显著性(P <0.01);与8 μLg/ml组和12 μg/ml组比较差异无显著性(P > 0.05).4μg/ml淫羊藿苷处理24 h后HepG2细胞迁移速度明显降低(P<0.01).结论 淫羊霍藿苷抑制HepG2细胞粘附和运动,发挥了抑制肿瘤转移作用.
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热疗结合健脾理气抑瘤方诱导人肝癌细胞HepG2凋亡及机制探讨
目的 研究热疗结合健脾理气抑瘤方体外诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的作用和机制.方法 以人肝癌细胞HepG2为研究对象,培养并收集对数生长期的HepG2细胞,分为热疗组、健脾理气抑瘤方组(JPLQYLF)、联合组、对照组.将各组细胞置37℃、5％C02条件下在培养箱中分别培养24,48,72 h后,通过MTT法检测对细胞增殖的影响;培养24h后,流式细胞仪(Annexin V-FITC/PI双染)检测细胞凋亡;蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达情况.结果 与对照组比较,JPLQYLF组、热疗组和联合组人肝癌细胞HepG2的增殖抑制率均明显升高(P＜0.05).JPLQYLF组呈剂量依赖性和时间依赖性抑制肝癌细胞的增殖,而热疗组呈时间依赖性抑制细胞的增殖.与热疗组和JPLQYLF组比较,联合组的细胞增殖抑制率升高明显(P＜0.05),热疗与JPLQYLF结合对细胞的增殖抑制更为显著.热疗与各浓度JPLQYLF联合时,各组的q值均大于0.85,具有协同效应.与作用48h、72h比较,作用24h后各组的q值明显升高,二者结合的协同效应更强(P＜0.05).与对照组比较,热疗组、JPLQYLF组及联合组细胞的凋亡率均明显升高(P＜0.05).JPLQYLF呈剂量依赖性诱导细胞凋亡;热疗组呈时间依赖性诱导细胞凋亡.与热疗组、JPLQYLF组比较,联合组的细胞凋亡率明显升高(P＜0.05),热疗与JPLQYLF结合能更显著诱导细胞的凋亡.与对照组比较,热疗组、JPLQYLF组和联合组Bax的表达均上升(P＜0.05),Bcl-2的表达均下降(P＜0.05).与热疗组、JPLQYLF组比较,联合组呈剂量和时间依赖性显著上调Bax的表达,同时显著下调Bcl-2的表达.结论 热疗结合JPLQYLF抑制肝癌细胞增殖和诱导细胞凋亡可能与上调促凋亡蛋白Bax的表达,同时下调抑凋亡蛋白Bcl-2的表达有关,二者联合应用时具有明显的协同效应.
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消瘤汤含药血清对人肝癌细胞HepG2凋亡相关因子表达的影响
[目的]观察消瘤汤含药血清对人肝癌细胞HepG2凋亡相关因子表达的影响,进一步证实该方对肿瘤细胞的抑制作用,并初步探讨其诱导肝癌细胞凋亡的作用机制.[方法]给予昆明种小鼠中药煎剂灌胃3 d后,制备消瘤汤鼠含药血清,将其作用于HepG2细胞,用四氮唑盐法(MTT法)检测含药血清对HepG2细胞增殖的抑制作用,通过流式细胞技术测定肿瘤细胞的凋亡情况,应用免疫组化法检测半胱氨酸蛋白酸3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)蛋白表达水平.[结果]消瘤汤鼠含药血清作用于HepG2细胞72 h后,对肿瘤细胞生长有明显抑制作用.流式细胞仪检测可见含药血清组在细胞G1/G0期前出现明显的凋亡峰,即"亚二倍体峰".凋亡率为22.3%,明显高于对照组的1.05%(P<0.05).免疫组化结果表明Caspase-3在含药血清干预后,表达明显增加,而Bcl-2在含药血清干预后,表达明显降低.[结论]消瘤汤可能通过激活Caspase-3及抑制Bcl-2的活性,从而诱导肝癌细胞凋亡,有效地抑制肝癌细胞生长,达到抗肿瘤的作用.
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不同治疗法则的抗癌方诱导HepG2DNA裂解的观察
目的:观察不同治疗法则抗癌方对人肝癌细胞株HepG2 DNA裂解的影响,探讨其抗癌作用机制.方法:采用分子生物学方法观察益气活血的复方抗纤灵(Ⅱ)、行气化瘀的复方(Ⅲ)、清热解毒的药物(Ⅰ)对人肝癌细胞株HepG2 DNA片断、DNA裂解的影响.结果:HepG2经中药Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ处理48 h后,电泳分离后,低、高剂量Ⅱ、Ⅲ方和低剂量的Ⅰ方均出现明显的DNA梯状带,而Ⅰ方高剂量和氟脲嘧啶(5-Fu)低、高剂量均未见DNA梯状带;HepG2经中药Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ处理24 h后均可诱导DNA裂解,无明显的时间反应,而对Ⅱ、Ⅲ方有明显的浓度反应.结论:不同治疗法则的抗癌方诱导人肝癌细胞株HepG2 DNA裂解,可能为其抗肿瘤的机制之一.
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灵猫方通过增强天然免疫功能抑制乙型肝炎病毒复制的研究
目的:研究灵猫方对pHBV1.3转染HepG2细胞的天然免疫功能的影响,探讨灵猫方抗乙肝病毒(HBV)的作用机制.方法:制备0.25mg/ml和0.5mg/ml灵猫方水提物干预HBV质粒转染HepG2细胞,以0.9％ NaC1溶液作为空白对照组,72h后收集培养上清液,ELISA法检测HBsAg和HBeAg水平;收集细胞提取总RNA,RT-PCR法检测细胞内IFN-α、IFN-β、IFN-λ1及干扰素效应蛋白OAS1、MxA、PRKmRNA表达水平,RIG-Ⅰ mRNA表达水平.结果:与空白对照组比较,0.5mg/ml灵猫方干预pHBV1.3转染HepG2细胞分泌的HBsAg和HBeAg水平明显降低,细胞内IFN-α、IFN-β、IFN-λ1 mRNA及OAS1、MxA、PRKmRNA表达水平表明显升高(P＜0.01),RIG-Ⅰ mRNA表达水平明显升高(P＜0.01).结论:灵猫方通过促进pHBV1.3质粒转染HepG2细胞的Ⅰ、Ⅲ型干扰素产生,增强天然免疫功能,从而抑制HBV复制,可能是通过RIG-Ⅰ通路诱导干扰素产生,增加干扰素的形成.
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核糖核酸诱导肝癌细胞株HEPG2凋亡的实验研究
目的:研究核糖核酸对肝癌细胞株HEPG2凋亡的作用.方法:将肝癌细胞株HEPG2分为对照组、喜树碱(CPT)组和核糖核酸3组.核糖核酸组又分为剂量效应组和时间效应组.采用流式细胞仪对凋亡细胞进行定量检测.结果:随着培养时间延长,核糖核酸组HEPG2细胞凋亡逐渐增加,在诱导后20小时细胞凋亡率达到高,为38.6%,其浓度以20μl/ml为佳药物作用浓度.结论:核糖核酸对HEPG2细胞具有促凋亡作用,且具有剂量和时间依赖性.
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HBV X基因转染对HepG2肝癌细胞凋亡的影响及其机制
目的:研究HBV X基因转染对HepG2肝癌细胞凋亡及凋亡相关因子表达的影响.方法:用脂质体转染法将HBx真核表达载体pcDNA3/HBx瞬时转入HepG2细胞,以未转染的HepG2细胞及转染空载体pcDNA3的细胞为对照.RT-PCR法检测HBx基因的表达;MTT法检测各组细胞的增殖活性;TUNEL法检测各组的凋亡情况.β-actin为内参,半定量RT-PCR法检测凋亡相关基因Bax、Bcl-xL、c-myc的表达量变化.结果:pcDNA3-X转染HepG2细胞后,RT-PCR扩增出HBV X片段,空质粒组及正常对照组均未扩增出相应片段.HepG2细胞转染HBx基因后,相对于对照组细胞增殖能力明显下降,凋亡增多,差异有显著性意义(P＜0.01);转染HBx的细胞Bax、Bcl-xL、c-myc mRNA相对表达量较转染空质粒组和未转染质粒组明显增高,差异有显著性意义(P＜0.05).结论:成功将HBx基因转染入HepG2细胞,并在细胞中表达,转染HBx基因可同时上调Bax、Bcl-xL、c-myc mRNA表达,促进HepG2细胞凋亡,抑制增殖.
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RECK基因真核表达载体的构建及在HepG2细胞中的表达
目的构建RECK(reversion-inducing-cysteine-rich protein with Kazal motifs)基因的真核表达载体,通过脂质体介导法转染人肝癌细胞株HepG2并获得高表达RECK蛋白的细胞克隆.方法用RT-PCR方法扩增出人RECK基因,构建真核表达载体pcDNA3-RECK,采用脂质体介导法将重组质粒导入体外培养的HepG2细胞,RT-PCR和Western blot检测转染细胞和未转染细胞中RECK基因mRNA及蛋白质的表达.结果本实验成功构建了真核表达载体pcDNA3-RECK,并用脂质体介导的方法获得了高稳定表达RECK的细胞克隆;Western blot显示转染前的细胞未检测到RECK基因mRNA及蛋白质表达,但转染后表达量明显增高.结论重组质粒pcDNA3-RECK经转染能在HepG2细胞中高效表达,为进一步研究RECK对肝癌细胞的生物学影响奠定了基础.
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Bcl-2 家族蛋白在Ad.mda-7 介导HepG2细胞凋亡中的变化
目的 观察Bcl-2 家族蛋白在Ad.mda-7介导HepG2细胞凋亡中的变化,初步探讨Ad.mda-7 介导肝癌细胞的凋亡机制.方法 将携带人MDA-7/IL-24基因的腺病毒转染HepG2和L02,通过四甲基偶氮哩蓝染色法(MTT)及Hoechst染色观察MDA-7/IL-24对肝癌细胞HepG2和正常肝胚细胞L02的生长抑制和杀伤作用. Annexin V和PI 双染后流式细胞仪检测细胞的凋亡.蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Bcl-2家族蛋白的变化.结果 Ad.mda-7能明显抑制肝癌细胞HepG2的生长,但对正常肝胚细胞L02没有明显抑制增殖作用.Hoechst染色和流式细胞仪提示Ad.mda-7能明显诱导肝癌细胞HepG2细胞的凋亡,但对正常肝胚细胞L02没有明显毒副作用.Western blot说明抑制凋亡的蛋白Bcl-2和Bcl-xl的表达在HepG2明显下降,在L02中则没有变化; 而促凋亡蛋白Bax在HepG2和L02都升高.结论 Ad.mda-7转染HepG2后,促凋亡(Bax)与抑凋亡蛋白(Bcl-2和Bcl-xl)的比率发生改变,进而发生凋亡.
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96序列相似的家庭成员B在凋亡素特异性诱导HepG2细胞凋亡中的作用
目的 探讨96序列相似的家庭成员B(FAM96B)在凋亡素(Apoptin)特异性诱导人肝癌细胞株HepG2细胞凋亡中的作用.方法 将含人FAM96B全长序列的pcDNA3.1-myc-FAM96B和含人Apoptin全长序列的pcDNA3-HA-Apoptin重组质粒共转染到人肝癌细胞株HepG2细胞中,采用激光共聚焦显微镜观察共转染FAM96B与Apoptin对细胞定位的影响,流式细胞仪检测共转染FAM96B与Apoptin对细胞凋亡的影响.结果 激光共聚焦显微镜观察结果显示,Apoptin定位于HepG2细胞核,FAM96B定位于细胞质.过表达FAM96B通过与Apoptin相互作用可致部分Apoptin定位于细胞质.流式细胞仪检测结果显示:共转染Apoptin和FAM96B的HepG2细胞凋亡率显著低于单独转染Apoptin组[(31.76±1.88)％ vs.(44.85±1.85)％,P＜0.05],表明过表达FAM96B通过与Apoptin相互作用降低Apoptin特异性诱导HepG2细胞的凋亡.结论 共转染FAM96B与Apoptin于HepG2细胞中,过表达FAM96B通过与Apoptin相互作用可致部分Apoptin定位于细胞质,从而抑制Apoptin特异性诱导HepG2细胞的凋亡效应.
关键词： 96序列相似的家庭成员B 凋亡素 HepG2 脱噬作用 -
酸性环境抑制CIK细胞对肝癌HepG2细胞的杀伤活性
目的 研究酸性环境对CIK(cytokine-induced killer,CIK)细胞杀伤肝癌HepG2细胞的影响.方法 利用IFN-γ、IL-2及CD3抗体诱导外周血单个核细胞获得CIK细胞.在pH6.5及pH7.4条件下将CIK细胞和荧光素酶标记的HepG2细胞(HepG2-1uc)按不同的效靶比混合培养,用小动物活体成像系统检测HepG2-1uc荧光强度并计算杀伤活性,用MTT法检测并计算杀伤活性.在pH6.5及pH7.4条件下,在含CIK条件培养液0、50％和100％的情况下培养HepG2细胞,流式细胞仪检测凋亡坏死的细胞比例.结果 pH7.4时CIK细胞对HepG2细胞的杀伤率明显高于pH6.5时.CIK条件培养液作用下,pH7.4时HepG2细胞的凋亡坏死比例明显高于pH6.5.结论 酸性环境明显抑制了CIK细胞对肝癌细胞HepG2的杀伤活性.
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甜菜红素恢复HeLa、HepG2和A549细胞线粒体形态完整和促进细胞核坏死的作用
目的 研究甜菜红素对人宫颈上皮癌HeLa细胞、人肝癌HepG2细胞和人肺腺癌A549细胞线粒体和细胞核等超微结构的影响.方法 分别将0、62.5和500 ppm甜菜红素加入HeLa、HepG2和A549细胞培养36h,在8 000～30 000倍透射电子显微镜下,观察细胞核、线粒体等细胞超微结构,并计算线粒体数量和截表面积.结果 HeLa、HepG2和A549肿瘤细胞核具备肿瘤细胞的特征,并且线粒体肿胀、脊膜结构消失.加入62.5 ppm甜菜红素时,HeLa、HepG2和A549细胞的线粒体计数分别增加10.9％、25.0％和12.6％,截表面积较0 ppm浓度组分别减小38.9％、70.1％和65.3％;加入500 ppm甜菜红素时,HeLa、HepG2和A549细胞的线粒体计数分别增加15.2％、79.7％和40.0％,截表面积较0 ppm浓度组分别减小67.8％、77.6％和81.9％;并且线粒体内膜结构趋于完整.加入500 ppm甜菜红素时,以上三种细胞均出现核分裂、固缩和溶解的坏死相.加入甜菜红素时, HeLa和A549细胞出现凋亡小体,HepG2和A549细胞出现自噬体.结论 甜菜红素可促进肿瘤细胞线粒体形态结构恢复,引起细胞核坏死和细胞死亡.
