首页 > 文献资料
-
热应激对睾丸功能影响及"金冷法"的应用
人体生物学的一个很重要的概念就是男性性腺需要低温环境才能产生精子.所以人类和其他哺乳动物一样,都有一个体外的"袋"--阴囊,为睾丸提供一个较低的温度.睾丸位于体外究竟有什么优势呢?事实证明阴囊的低温环境确保了精子在附睾的储存,同时保证在短期内能够产生很多优质的精子.我们面对的是一个由温度来掌控的生态系统.温度对于男性不育和其他生殖功能起着至关重要的作用.因此,热应激对睾丸功能会产生非常重要的影响,笔者经过多年的研究并结合应用金冷法实例,发明了金冷内裤,简单易行实施金冷法用以消除热应激对睾丸高温影响,并取得了可喜的成效.
-
谈谈"金冷法"、"肾藏精"与"肾应冬"
朋友,东莞又传来喜讯了:该市计划生育服务中心主任告诉我,不育的患者a级精子活动力只有8～14%(不育的弱精、少精典型标志),使用金冷内裤(金冷法)两个月后复查,活动力达到21%了,已经属于高水平,相信不久他太太就会喜结珠胎了.金冷内裤(金冷法)原理其实很简单,就是利用低温和主入肾经药物皮透作用,消除危害睾丸生精和睾酮分泌功能的热应激,达到低温保养睾丸的目的.使用方法更简单:一天才使用两个30分钟,就达到此作用,这正是金冷法长盛不衰的妙处(孟永生和熊有正,2006.12."热应激对睾丸功能影响及金冷法的应用").
-
右美托咪啶通过HSP60-TLR4-NF-κB通路抑制热应激诱导的小胶质细胞活化
目的 热射病是一种死亡率极高的重症中暑,所导致的脑损伤是其防治的焦点.本研究拟探讨右美托咪啶(Dexmedetomidine,Dex)对热应激诱导小鼠小胶质细胞株BV2细胞活化的影响,以期为热射病脑损伤的防治研究提供实验依据.方法 采用体外培养BV2细胞,分为空白对照组、热应激组(43℃)、Dex处理组、热应激(43℃)联合药物处理组.采用MTT[3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide]法检测细胞活力的改变.ELISA(enzyme linked immunosorbent assay)方法检测热休克蛋白60(heat shock protein 60,HSP60)和相关炎性因子如肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)、白细胞介素-1β (interleukin-1 beta,IL-1β)、白细胞介素-6 (interleukin-6,IL-6)的释放.Western-blot检测Dex对热应激活化的BV2细胞信号通路的作用.结果本实验条件下,Dex以及热应激不会对细胞活力产生影响(P＞0.05).与空白对照组相比,热应激将导致HSP60及炎性因子(TNF-α、IL-1β、IL-6)的释放增加,而Dex的预处理能够减轻HSP60及炎性因子的释放,差异均具有统计学意义(P＜0.05).与空白对照组相比,热应激将导致Toll样受体-4(Toll-like receptor-4,TLR4)和核转录因子(nuclear factor kappa B,NF-κB)的表达上调,而Dex预处理能够减弱这样的表达上调,差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论 Dex可能通过抑制HSP60-TLR4-NF-κB信号通路阻止热应激导致的小胶质细胞活化.
-
热应激对大鼠睾丸iNOS表达的影响及其意义
目的 研究热应激对大鼠睾丸诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达的影响及其意义.方法 42d龄SD雄性健康大鼠12只建立单侧隐睾作为热应激处理的模型,术后第7d处死大鼠留取双侧睾丸,采用RT-PCR及免疫组化SABC法分别检测生精细胞iNOS mRNA和蛋白表达的变化,TUNEL法检测生精细胞凋亡.结果 热应激处理后生精上皮内可见iNOS强阳性表达,而对侧睾丸生精上皮内无iNOS表达;热应激处理后睾丸iNOS mRNA也较对侧睾丸增强,生精细胞凋亡指数明显高于对侧睾丸,差异均有显著性意义(P<0.05).结论 热应激导致生精上皮内iNOS表达增强,生精细胞凋亡增加,iNOS参与介导生精细胞凋亡.
-
热应激后小鼠皮层NADPH-d阳性神经元计数的时程变化
目的:探讨急性热应激小鼠皮层NADPH-黄递酶(NADPH-d)阳性神经元计数的时程变化.方法:复制小鼠急性热应激模型,用穿梭实验法,观察小鼠热应激后6、12、24 h不同时间点学习记忆功能.采用NADPH-d组化染色法,观察小鼠热应激后6、12 h、24 h不同时间点皮层NADPH-d阳性神经元计数的时程变化.结果:(1)穿梭实验结果表明:与对照组相比,热应激组在6、12h时错误次数(M)明显增高,潜伏期(EL)明显缩短(P＜0.05).(2)NADPH-黄递酶组织化学染色结果显示:与对照组相比,热应激组在6h,NADPH-d阳性神经元的数目明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05).热应激组在12 h NADPH-d阳性神经元的数目明显减少.结论:急性热应激可以对小鼠的学习记忆造成明显的损伤,而这种损伤的机制可能与NADPH-d阳性神经元表达的增加有关.
-
急性热应激后小鼠脑体功能的时程变化
目的：：探讨急性热应激后小鼠脑体功能的时程性变化.方法：复制小鼠急性热应激模型，记录小鼠实验前后不同时间点的体重，用穿梭实验法，观察各组小鼠热应激后0、6、12、24、36 h 不同时间点学习记忆功能.采用斜板实验法监测小鼠在热应激预处理后各时间点的脑体功能.结果：与对照组相比，热应激组小鼠体重明显减轻，差异具有统计学意义(P ＜0．05)；穿梭实验结果表明：与对照组相比，热应激组在0、6、12 h 时错误次数(M)明显增高，潜伏期(EL)明显缩短，差异具有统计学意义(P ＜0．05)；热应激组相比于对照组在0、6、12 h 等三个时间点，斜板爬坡角度显著降低，差异具有统计学意义(P ＜0．05).结论：急性热应激对小鼠脑体功能有明显影响.
-
何首乌乙酸乙酯提取物对秀丽线虫的抗衰老作用研究
目的：研究何首乌乙酸乙酯提取物（EPM）对秀丽线虫（简称“线虫”）寿命的影响，考察EPM抗衰老作用。方法：设立EPM低、中、高浓度组（25、37.5、50 mg/L，以生药计）和空白组（0 mg/L），考察EPM对线虫寿命的影响；设立EPM组（37.5 mg/L）和空白组（0 mg/L），分别进行线虫的生殖实验、急性热应激实验和急性氧化应激实验，考察EPM对线虫生殖能力以及压力应激的影响。结果：在寿命实验中，EPM低、中、高浓度组线虫的平均寿命较空白组均显著延长（P＜0.05或P＜0.01），以中浓度EPM作用为明显；增殖实验中，EPM组线虫在第2、3天中的子代数量较空白组显著增加（P＜0.05）；在急性热应激实验和急性氧化应激实验中， EPM组线虫的平均生存时间较空白组明显延长（P＜0.05）。结论：37.5 mg/L的EPM能延缓线虫衰老且不损害其生殖能力。
-
热应激对培养血管内皮细胞增殖的影响
目的探讨热应激条件下血管内皮细胞增殖变化的特点及相关机制.方法以血管内皮细胞株ECV304受热43 ℃、2 h为热应激实验模型,观察血管内皮细胞的细胞间粘附分子(ICAM-1)、分化抑制因子1(Id1)、P16及P21的蛋白表达变化,3H标记胸腺嘧啶核苷酸(3H-TdR)掺入法测定细胞DNA的合成.结果热应激后血管内皮细胞ICAM-1表达增强,Id1表达受抑制, P16、P21蛋白的表达增强.3H-TdR掺入实验显示热应激可显著抑制血管内皮细胞的DNA合成.结论热应激可以活化血管内皮细胞,抑制细胞增殖,从而改变增殖与分化的协调关系,并可能进而影响创伤后组织细胞的修复.
-
大鼠热应激对细胞免疫学的影响
目的 探讨热应激对大鼠脾脏细胞Toll样受体4(TLR4)及外周血T调节(Treg)细胞表达的影响.方法 将72只SD大鼠分为20℃常温组和37℃高温湿热组,每组分非刺激、细菌脂多糖(LPS)刺激、刀豆素-A(Con-A)刺激亚组,每个亚组设1、12、48、168 h观察点;流式细胞术测定TLR4+细胞及Treg细胞.结果 37℃高温湿热组脾脏TLR4+细胞比率在各亚组的1～168 h均低于20℃常温组(P＜0.05).37℃高温湿热组各亚组1～48 h的外周血CD4+ CD25+ Treg较20℃常温组显著下降(P＜0.05),只有LPS刺激的168 h稍有升高,37℃高温湿热组中非刺激及Con-A刺激亚组CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg在12h时间点较20℃常温组显著升高,而在168 h时间点各亚组显著降低(P＜0.05).37℃高温湿热组中各亚组1h和168 h的外周血CD8+ CD25+ Treg较20℃常温组显著升高;而CD8+ CD25+ Foxp3+ Treg各亚组在1h和48 h较20℃常温组显著降低,在非刺激和LPS刺激亚组的12 h和168 h较20℃常温组显著升高(P＜0.05).结论 高温湿热可破坏大鼠固有免疫并改变适应性免疫的功能状态.
-
老年人群耐受温度的初步探索
[目的]比较室外温度(Ta)与个体暴露温度(Tp)之间的关系,探索正常老年人群耐受温度的临界值(Tc).[方法]在南京玄武区和鼓楼区选择有责任心的40户老年家庭进行HOBO(自动便携式温度监测仪)跟踪监测.[结果]夏天Ta均高于室内温度(Tr)和Tp(P＜0.05),冬天Ta均低于Tr和Tp(P＜O.05),二维散点图阵显示夏、冬天的Ta、Tr和Tp3者间均有线性相关,老年人群夏天热耐受的温度为3l℃～32℃,冬天冷耐受的温度为3℃～4℃.[结论]Ta与Tp之间差异有统计学意义,当外界温度超过了老年人的耐受能力,人们开始采取相应的措施.
关键词： 室外温度(Ta) 个体暴露温度(Tp) 临界温度(Tc) 热应激 冷应激 -
三价铬对热应激大鼠免疫功能的影响
[目的]研究三氯化铬(CrCl3)和吡啶羧酸铬(CrPic)对热应激大鼠免疫功能的影响.[方法]分别以CrCl3和CrPic形式补充300 μg·kg-1铬饲喂SD大鼠6周后测定血清中免疫球蛋白、补体、溶菌酶、胰岛素、皮质醇水平以及外周血、脾脏淋巴细胞体外转化率.[结果]CrPic提高了大鼠血清中免疫球蛋白IgG、IgM和溶菌酶的水平,同时降低了血清中胰岛素和皮质醇水平(P＜0.05);添加CrCl3降低了SD大鼠血清中胰岛素和皮质醇水平(P＜0.05);CrPic能增强外周血和脾脏T/B淋巴细胞转化率(P＜0.05),而添加CrCl3并不能提高T/B淋巴细胞转化率.[结论]补充三价铬能增强热应激大鼠的免疫功能,CrPic增进免疫的能力要强于CrCl3.
-
胸腺基质细胞对热应激小鼠胸腺细胞亚群变化及HSP70表达的影响
目的 探讨胸腺基质细胞(TSC)对热应激小鼠胸腺细胞的调节作用.方法 应用光镜、电镜、流式细胞术等观察初代培养的TSC对热应激胸腺细胞发育的调节作用.结果 TSC可大量粘附和吞噬胸腺细胞,使热应激胸腺细胞数量明显减少,但尚存的胸腺细胞中活细胞比例却明显增加,凋亡率明显减少.TSC可促进热应激胸腺细胞HSP70表达增加,使热应激胸腺细胞的DP及SP细胞,尤其是DP细胞数量明显减少.结论 TSC可清除大量的热应激胸腺细胞,TSC促进热应激胸腺细胞HSP表达增高可能具有双重意义:既可保护胸腺细胞,又可促进TSC识别和吞噬已受损的或凋亡的胸腺细胞.
关键词： 胸腺基质细胞 胸腺细胞 热应激 CD4CD8细胞业群 热休克蛋白70 -
Fas/Fas-L与体外热应激胸腺细胞亚群变化及凋亡的关系
目的探讨体外热应激胸腺细胞的亚群变化及凋亡与胸腺细胞表达Fas、Fas-L的关系.方法用流式细胞术检测体外热应激后再培养的胸腺细胞不同时间的凋亡率、CD4CD8亚群及表达Fas、Fas-L的阳性率.结果体外热应激胸腺细胞的凋亡率和表达Fas及Fas-L的阳性率均呈时间依赖性增高,凋亡的胸腺细胞以CD4+CD8+双阳性胸腺细胞为主.结论热应激主要诱导CD4+CD8+胸腺细胞凋亡;Fas与Fas-L是介导热应激胸腺细胞凋亡的重要分子.
-
生化指标及小肠上皮细胞膜结构在热应激中的变化规律
目的研究TxB2、PGFIa、PRL、CORT、TSA等生化指标及小肠上皮细胞膜结构在热应激中变化的规律.方法应用生化、酶学、放免法检测相关的生化指标.采用冷冻蚀刻技术,定量分析大鼠小肠上皮细胞膜内微粒的数量及分布状况.结果热应激动物体温迅速上升;受检生化指标明显异常;小肠上皮细胞膜,核膜EF面及PF面的膜内微粒数量均有明显减少和异常分布,且累及范围较为广泛,负荷能加重其异常改变的程度;热暴露停止4-24h上述各项指标无明显恢复迹象.结论(1)热应激能迅速破坏小肠上皮细胞的膜性结构,其程度与受热时间长短,体温高低呈反比.(2)可导致对机体有害的TxB2大量释放,对机体有保护作用的PGFIa水平降低,以及与继发损伤有关的CORT持续上升和TSA的异常增高,终导致全身系统,多器官,多种细胞成分的广泛受损;(3)受热停止4～24h,上述各项指标均无明显恢复迹象,迟发性损伤明显.
-
耐热运动颗粒对热适应+应激大鼠的保护作用与热休克蛋白70表达的关系
目的通过耐热运动颗粒(主要成分为红参、黄芪、红景天等)对热适应+热应激机体的热休克蛋白70(HSP70)表达影响的研究,以探寻该药提高机体的耐热能力的机理.方法采用人工热气候室(34℃±1℃、RH60%),建立热适应和热应激动物模型.SD大鼠200只分为对照组、热适应组、颗粒热适应组、热适应+应激组,颗粒热适应+应激组,每组又分为热适应2 d、7 d、14 d、28 d四个时段.采用免疫组化SP法染色,应用图像分析系统分析肝、心肌组织HSP70含量的变化.结果①在热适应的四个阶段,肝与心肌细胞的HSP70表达强度变化呈现如下趋势:颗粒热适应组＞热适应组＞对照组(P＜0.01或0.05),热适应+应激组＞热适应组(P＜0.01或0.05),在2 d时颗粒热适应+应激组＜热适应+应激组(P＜0.01).②热适应2 d、7 d与28 d时血清中肝与心肌细胞内酶浓度明显增高,而颗粒热适应组血清酶浓度明显低于热适应组.结论耐热运动颗粒可增强热适应机体肝与心肌细胞HSP70的表达强度,减轻热适应+应激组机体的热损伤.耐热运动颗粒保护细胞的机理可能与增强HSP70的表达有关.
-
热应激对血管内皮细胞DNA损伤效应的研究
目的:观察血管内皮细胞株ECV304在不同热应激条件下DNA受损情况.方法:实验采用单细胞凝胶电泳法(SCGE)检测在不同热应激条件(41℃2h、43℃2h、45℃2h)对ECV304细胞DNA的单链损伤情况.结果:在不同的热应激条件下,固定热应激时间,随着热应激温度的逐步增加,采用SCGE法所观察到的受损细胞数显著增多,P＜0.05,相应的慧尾长度显著增加,P＜0.05.结论:热应激对内皮细胞的DNA致伤肯定,可使ECV304细胞DNA发生不同程度的单链断裂.
-
药提取液预防环境热损伤的研究
目的:研究中药预防环境热损伤的作用.方法:检测热习服和热应激日本大耳白兔的体温、免疫功能、心肌酶谱、肝功能及血清离子等.结果:①与热应激组比较,热习服组动物心肌酶谱、肝功能、电解质紊乱更为明显,并有血糖降低;②与未服用中药的热习服组动物比较,服用中药的动物心肌酶谱、肝功能、肾功能、血清离子各项指标明显降低,接近对照组水平.血糖水平亦明显高于未服药组.结论:中药提取液具有良好预防热习服损伤的作用.
-
热应激对小鼠TLR-4表达的影响及相关研究
目的:探讨热应激对小鼠Toll样受体4(TLR-4)表达的影响及TLR-4表达与脾脏指数的关系.方法:采用ELISA法检测35℃、42℃热应激小白鼠血液TLR-4蛋白含量,并计算脾脏指数,HE染色、观察其组织病理学变化.结果:在35℃及42℃热应激组均有TLR-4的表达,35℃组2h达到高水平,与对照组相比差异显著(P＜0.05),然后随应激时间延长而降低,42℃5 h达到高水平,与对照组差异不显著(P＞0.05).35℃及42℃应激组脾脏指数均较正常组明显降低(P＜0.05),组织病理学观察白髓比例减小,脾小体有不同程度的缩小、分布及结构不规则.结论:轻度、短时热应激促进TLR-4的表达；免疫功能的降低与脾脏变化有一定关系.
-
血管紧张素转化酶抑制剂和抗氧化剂对湿热应激性大鼠心肌AngⅡ和p22phox表达的影响
目的:观察血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)卡托普利(Captopril,CTP)和抗氧化剂(维生素C,VitC)对湿热应激(HHS)大鼠心肌组织中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、活性氧簇(ROS)和p22phox表达的影响.方法:将32只成年雄性SD大鼠随机分为:对照组、HHS组、CTP组(HHS+CTP)及VitC组(HHS+VitC),每组8只.喂养4周后,颈动脉插管测定大鼠血压,计算大鼠左心室质量指数.用放射免疫法测定心肌组织中AngⅡ的浓度.用比色法测定心肌组织中ROS的水平.应用RT-PCR检测p22phox mRNA的表达.用免疫组化染色法检测大鼠心肌中p22phox的分布特征.结果:平均动脉压、AngⅡ和ROS和p22phox的水平,HHS组与对照组比较,VitC组和CTP组与HHS组比较,均有非常显著性差异(P＜0.01);两个药物组之间比较无统计学意义.结论:HHS可增加大鼠心肌组织中AngⅡ表达,同时上调p22phox mRNA和其蛋白的表达,介导心肌细胞内ROS生成增加.用抗氧化剂和ACEI阻滞后,AngⅡ表达减少,p22phox mRNA和其蛋白的表达降低,心肌细胞内ROS生成减少,其机制可能与HHS导致AngⅡ诱导ROS产生有关.以上提示,HHS可引起心脏损害,抗氧化剂和ACEI对HHS性心脏损害具有拮抗作用.
-
热应激对心肌缺血耐受性影响的机制
心肌缺血后常会引起一系列生化改变,这些改变将影响心肌细胞的生存,临床上采用一些方法恢复心肌供血,但这些措施未必能使心肌细胞功能恢复,原因是恢复供血引发再灌注损伤.热应激为一简单而行之有效的应激方法,给心肌短暂热应激能起到保护心肌作用.本文就热应激耐受机制作一概述.
