调节性T淋巴细胞在移植免疫耐受领域的临床应用研究

CD4~+ CD25~+ Foxp3~+ 调节性T淋巴细胞(Treg)是一类具有免疫调节功能的T淋巴细胞亚群,其免疫抑制功能成为近年来免疫学领域研究的重要内容~([1]).Treg不仅在维持机体免疫自稳方面发挥关键的作用,而且在移植后诱导和维持免疫耐受方面的作用也越来越受到人们的重视~([2]).

膀胱癌CD4+ CD25high Foxp3+调节性T淋巴细胞数量和分布及Foxp3基因表达与肿瘤分期的相关性

我们用四色流式细胞术准确界定CD4+ CD25high Foxp3+ Treg,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测Treg的特异性功能基因Foxp3 mRNA的表达水平,分析不同分期膀胱癌患者的该群细胞数量、膀胱癌不同部位的分布及Foxp3的表达差异与膀胱癌临床TNM分期的关系,探讨Treg在膀胱癌患者中表达水平及临床意义.

清除Treg增敏胰腺癌疫苗治疗作用的研究进展

胰腺癌是一种常见的消化道恶性肿瘤,恶性程度高,预后极差.即使施行治愈性手术,多数患者术后仍较早地出现了复发和转移[1].为改变这种现状,近年来对胰腺癌疫苗的研究方兴未艾[2-9].但是,调节性T细胞(Treg)介导的免疫逃逸机制不仅在肿瘤的发生发展中发挥重要作用,也可从识别、激活分化到效应的整个阶段抑制疫苗的抗肿瘤免疫反应,从而限制了疫苗的治疗作用.清除Treg,增敏胰腺癌疫苗的疗效,已成为近年来研究的重要方向.

环磷酰胺联合卡介苗对Lewis肺癌小鼠CD4+CD25+Treg细胞及效应细胞功能的影响

目的 探讨环磷酰胺(CTX)联合卡介苗(BCG)治疗对Lewis肺癌小鼠CD4+CD25+Treg细胞和效应细胞功能的影响及CD4+CD25+Treg细胞与肿瘤的相关性.方法 将传代培养的Lewis肺癌细胞接种于C57BL/6小鼠右腋皮下,建立Lewis肺癌模型.采用CTX联合BCG治疗,观察各组动物的肿瘤体积、脾脏CD4+CD25+Treg细胞数量和Foxp3 mRNA表达水平、脾脏T淋巴细胞增殖和杀伤功能.结果 CTX联合BCG治疗组肿瘤生长较肿瘤组缓慢;联合治疗组小鼠脾脏CD4+CD25+Treg细胞数量明显低于肿瘤组(P＜0.05);联合治疗组小鼠脾脏Foxp3 mRNA表达水平明显低于肿瘤组(P＜0.05);联合治疗组小鼠脾脏T淋巴细胞增殖功能明显高于肿瘤组(P＜0.05);联合治疗组小鼠脾脏CTLs细胞的杀伤活性略高于肿瘤组(P 0.05).结论 CTX联合BCG治疗可明显降低CD4+CD25+Treg细胞数量和Foxp3 mRNA表达水平,并增强机体抗肿瘤免疫应答,使肿瘤生长延缓.

Treg通过TICAM-1通路对变应性鼻炎发病机制的影响

变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)是变应原暴露后鼻黏膜的慢性炎症性疾病,主要由IgE介导炎症介质的释放和多种免疫活性细胞、细胞因子参与的鼻粘膜慢性炎症性疾病.许多炎症细胞参与了这一过程,包括效应T细胞、自然杀伤T细胞、嗜酸粒细胞、嗜碱粒细胞、肥大细胞,静止的组织细胞和调节性T细胞(regulatory T cells,Treg细胞)等[1-2].临床表现鼻痒、阵发性喷嚏、流涕、鼻塞,可伴有眼痒等症状.既往认为变应性鼻炎主要是由Th1/Th2细胞调节失衡引起,而主要原因是Th2细胞增强[3].随着研究的深入,发现Th17和Treg细胞之间的调节失衡也参与AR的发病机制,现已由Th1/Th2的细胞模型扩到Th1/Th2/Th17/Treg细胞模式.目前对Treg免疫调节的信号通路未完全阐明,本文主要对Treg细胞通过TI-CAM-1通路发挥免疫调节作用对AR发病机制影响进行综述.

Th17细胞在慢性鼻-鼻窦炎中的研究进展

子痫前期发生与免疫系统关系研究进展

子痫前期是妊娠特有和常见的并发症,占孕妇死亡率的15％,该病严重影响母婴健康,是孕产妇和围生儿患病率及死亡率升高的主要原因[1].子痫前期被认为是由于浅植入胎盘引起缺氧,导致了胎盘介导的以炎症介质分泌上调为特征的免疫反应,通常作用于血管内皮细胞.一般情况下,在妊娠期间胎儿的免疫保护是允许免疫系统的改变的,但免疫系统通过异常高表达促炎性细胞因子或低表达免疫抑制而导致过度反应,从而对怀孕产生危害.因此免疫系统中的各种细胞因子及其之间的平衡至关重要.

调节性T细胞与结直肠癌

CD4＋ CD25＋ Foxp3＋调节性 T 细胞（ Treg）是由Sakaguchi 等于1995年首次发现并报道的一类具有特殊抑制功能的 T 细胞亚群，目前已被广泛深入地研究，发现它与多种肿瘤的发生相关，本文针对其与结直肠癌（CRC）的相关性综述如下。

Th17/Treg失衡在肺炎支原体肺炎患儿中的作用及其机制

目的：探讨Th17/Treg失衡在肺炎支原体肺炎患儿中的作用及其机制。方法：纳入2013年6月至2015年1月我院收治的60例肺炎支原体肺炎急性期患儿和30例同期体检的健康儿童为研究对象。流式细胞术分析两组儿童外周血Th17和Treg的百分率，ELISA分析Th17和Treg特异性细胞因子IL-17和IL-10的分泌水平，定量PCR测定Th17和Treg特异性转录因子RORγt和Foxp3 mRNA的表达水平，以及Notch信号分子(Notch1，Hes1和Hey1)的表达水平。结果：与健康儿童相比，肺炎支原体肺炎急性期患儿外周血的Th17的百分率，IL-17分泌水平以及特异性转录因子RORγt的表达水平均明显增高，差异均具有统计学意义(P<0.05)，而急性期患儿外周血的Treg的百分率，IL-10分泌水平以及特异性转录因子Foxp3的表达水平均较健康儿童明显降低，差异均具有统计学意义(P<0.05)。进一步分析显示急性期患儿Notch1、Hes1和Hey1的表达水平均明显高于健康儿童，其差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论：Th17/Treg失衡参与儿童支原体肺炎的发生发展，Notch信号通路可能通过调节免疫细胞分化和细胞因子分泌参与Th17/Treg失衡。

尖锐湿疣患者外周血Treg/Th17细胞平衡及相关转录因子的表达

目的 探讨Treg/Th17细胞失衡在尖锐湿疣(CA)发病及复发机制中的作用及意义.方法 选取52例CA患者(初发27例,复发25例)作为研究组,30例健康者为正常对照组,采用流式细胞术(FCM)检测其外周血Treg、Th17细胞的比例,实时荧光定量PCR检测外周血单个核细胞中Foxp3 mRNA和RORγt mRNA的表达水平.结果 CA患者外周血Treg细胞比例、Foxp3 mRNA表达水平高于正常对照组,复发组高于初发组,差异均有统计学意义(均P＜0.05);Th17细胞比例、RORγt mRNA表达水平低于正常对照组,复发组Th17细胞比例低于初发组,差异有统计学意义(均P＜0.05);Treg/Th17比值高于正常对照组[4.60(3.20,8.68) vs 1.39(1.05,2.05)],复发组高于初发组[8.19(4.21,10.81) vs 3.52(2.47,4.85)],差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 CA患者存在Treg/Th17细胞失衡,复发患者Treg/Th17细胞失衡更显著,并可能在CA发病及复发机制中起重要作用.

护卵汤配合补佳乐及安宫黄体酮对卵巢早衰模型小鼠卵巢Th17和Treg的影响

目的 观察护卵汤配合补佳乐及安宫黄体酮对卵巢早衰(POF)模型小鼠卵巢Th17和Treg表达水平的影响.方法 采用透明带多肽(PZP3)及弗氏完全佐剂(CFA)和弗氏不完全佐剂(IFA)建立POF模型小鼠,随机分为空白组、模型组、护卵汤+补佳乐+安宫黄体酮组(护补安组)、补佳乐+安宫黄体酮组(补安组)、护卵汤组,护卵汤分别给药对POF模型小鼠进行干预后,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组小鼠的血清促卵泡生成素(FSH)、雌二醇(E2)含量;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测小鼠卵巢的Th17和Treg表达水平；光镜下观察各组卵巢组织形态学变化.结果 与模型组比较,护补安组、补安组、护卵汤组对致衰小鼠有治疗作用,差异具有统计学意义(P＜0.01)；护补安组、补安组在降低小鼠血清FSH含量方面优于护卵汤组(P＜0.05)；但护卵汤组在降低小鼠卵巢Th17水平上优于补安组,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 护卵汤配合补佳乐及安宫黄体酮可通过降低小鼠卵巢Th17而升高小鼠卵巢Treg水平治疗卵巢早衰模型小鼠,且在降低小鼠血FSH含量上优于单纯护卵汤组.

调节性T细胞/Th 17在支气管哮喘小鼠气道炎症过程中的变化

目的 通过观察支气管哮喘小鼠模型T淋巴细胞亚群调节性细胞(Treg)、Th17的变化,探讨淋巴细胞亚群Treg和Th17在哮喘发病中的作用.方法 采用卵清蛋白致敏方法 建立支气管哮喘小鼠模型,Balb/c小鼠16只随机分为正常对照组和哮喘组各8只.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)技术检测小鼠肺泡灌-洗液(BALF)、血清中白细胞介素-10(1L-10)、白细胞介素17(IL-17)水平;HE染色评价各组小鼠气道炎症程度;采用流式细胞仪检测各组Treg、Th17细胞占CD4+细胞百分率情况.结果 哮喘组淋巴细胞亚群CD_4+~CD_(25)+~Foxp_3~+细胞占CD_4~+细胞百分率显著低于正常对照组(P<0.01);CD_4+IL-17~+细胞占CD_4~+细胞百分率显著高于正常对照组(P<0.01).CD_4~+CD_(25)~+Foxp_3~+细胞/CD_4~+IL-17细胞比值与嗜酸粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞数呈负相关(r=-0.894,-0.957,-0.886;P均<0.01).结论 Treg/Th17在小鼠哮喘模型中存在失衡表达,提示Treg/Th17失衡参与了哮喘的发病过程,是对哮喘发病免疫机制的重要补充.

终末期肾脏病患者外周血Th17、Treg细胞表达及其平衡关系的研究

目的 探讨终末期肾脏病患者外周血CD4+T淋巴细胞、Th17细胞及CD4+CD5+CD127-调节T细胞(Treg)变化及意义.方法 采用流式细胞术检测21例尿毒症患者(尿毒症组)、21例肾移植受者(移植组)和21例健康志愿者(对照组)外周血中Th17细胞和Treg细胞占CD4+T细胞的比例.结果 尿毒症组和移植组的Th17/CD4+T细胞的比例明显低于对照组(P＜0.05,P＜0.01)；尿毒症组和移植组的Treg/CD4+T细胞的比例明显低于对照组(P ＜0.01,P＜0.01)；尿毒症组的Th17/Treg细胞的比值明显高于对照组(P＜0.05,P＜ 0.01).结论 尿毒症患者外周血中存在Th 17/Treg失衡,Th 17/Treg失衡可能参与了患者的免疫异常从而导致尿毒症的发生和发展.

反复自然流产患者IL-17、T-bet、GATA-3和FoxP3 mRNA表达水平的检测

目的 探讨反复自然流产患者辅助性T细胞17(Th17)免疫应答情况及其与Th1、Th2和Treg细胞相互之间的关系.方法 实时荧光定量PCR (Realtime PCR)检测反复自然流产患者30例(观察组)及健康早孕体检者38例(对照组)外周血中的IL-17、T-bet、GATA-3和FoxP3 mRNA表达水平.结果 观察组IL-17 mRNA、T-bet mRNA表达水平较对照组明显升高,差异有统计学意义(P＜0.0001).而GATA-3 mRNA、FoxP3 mRNA表达水平显著低于对照组(P＜0.0001)；观察组Th1/Th2和Th 17/Treg的比值均较对照组显著升高,差异有统计学意义(P＜0.0001).结论 Th17细胞参与了反复自然流产的免疫应答,Th1/Th2和Th 17/Treg细胞之间的平衡在妊娠的维持中发挥重要作用.

急性心肌梗死炎症发生机制与Th17/Treg细胞比例失衡的研究进展

急性心肌梗死是由于冠状动脉粥样硬化不稳定斑块破裂或糜烂导致冠脉内血栓形成、管腔堵塞的一组临床表现.其以发病急、病情危重、死亡率高,成为严重威胁人类健康的主要疾病之一.Th17/Treg细胞比例失衡参与的炎症机制已经成为急性心肌梗死炎症研究领域中的新热点.本文综述Th17/Treg细胞比例失衡与急性心肌梗死炎症发生机制的关系,为急性心肌梗死的早期诊断、预后及免疫治疗提供新的思路.

CD8+调节性T细胞与器官移植

调节性T细胞(regulatory T cells, Treg)在维持机体免疫平衡方面发挥关键作用,对于器官移植术后诱导治疗和维持免疫耐受具有重要意义.CD4+调节性T细胞(CD4+ Treg)曾被广为研究,但是由于钙调磷酸酶抑制剂(CNI)和抗体类药物对于CD4+ Treg具有明显的抑制作用,因此移植术后检测CD4+ Treg数量并不能真实反映器官移植术后的免疫调节状态.

肝癌组织中TGF-β1表达与Treg浸润的关系及其临床意义

背景与目的:调节性T细胞(Treg)在肿瘤组织局部浸润增多,而对其来源报道较少.体外研究表明转化生长因子(transforming growth factor-β1,TGF-β1)能诱导Treg的产生,而肝癌组织中TGF-β1表达与Treg浸润的关系尚未阐明.本研究旨在检测肝癌组织中TGF-β1表达,并分析其与Treg浸润的关系,探讨TGF-β1表达,Treg浸润的临床意义.方法:采用免疫组织化学染色的方法检测102例肝癌组织、癌旁肝组织中TGF-β1和Foxp3表达(Foxp3+).结果:肝癌组织中TGF-β1低表达组4l例,高表达组6l例,高表达阳性率为59.8%;癌旁组织中TGF-β1低表达组22例,高表达组80例,高表达阳性率为78.4%,癌组织和癌旁高表达率差异有统计学意义(P=0.001).肝癌组织中Foxp3+细胞平均密度为2.98个／HP,癌旁极少见或未见.肝癌组织中TGF-β1与Foxp3表达呈正相关(r=0.228,P=0.021).肝癌组织中TGF-β1表达在术前血浆AFP浓度高水平组高于低水平组(P=0.023),而与肿瘤直径、肿瘤包膜、肝硬化等临床病理资料无关;肝癌组织中Foxp3表达与肿瘤直径、肿瘤包膜、肝硬化等临床病理资料无关.肝癌组织中TGF-β1表达高低水平组患者5年生存率差异无统计学意义(P=0.790);肝癌组织中Treg高水平组患者的5年生存率低于低水平组(25%vs.44%,P<0.005).多因素cox回归模型分析显示Foxp3+细胞数量、肿瘤包膜是影响肝癌患者预后的独立危险因素(P值分别为0.021、0.001).结论:肝癌组织中Treg浸润可能与TGF-β1表达有关,两者的关系需进一步研究;肝癌组织中Treg数量可作为预测患者术后预后的免疫学指标.

秦息痛片联合甲氨蝶呤对类风湿性关节炎患者外周血Th17/Treg细胞及IL-37表达的影响

目的 探讨甲氨蝶呤联合秦息痛片(青风藤水提物片)对类风湿性关节炎(RA)患者外周血辅助性T细胞(Th)17/调节性T细胞(Treg)及白细胞介素-37(IL-37)表达的影响.方法 选择2015年1月～2017年2月某院收治的RA患者45例,研究组23例甲氨蝶呤联合秦息痛片治疗,对照组22例患者仅应用甲氨蝶呤片治疗,比较两组临床疗效、CRP、ESR、IL-37和Th(CD4+IL-17A+)、Treg(CD4+CD25+FoxP3+)、Th17/Treg水平.结果 研究组治疗总有效率为93.02％,高于对照组的76.19％(P<0.05);治疗后研究组CRP、ESR水平低于对照组(P<0.05);研究组Th17、Th17/Treg水平与对照组相比较低,IL-37、Treg水平较高(P<0.05).结论 RA采用秦息痛片联合甲氨蝶呤治疗效果显著,能降低IL-17、Th17/Treg含量,并提高临床疗效.

类风湿关节炎患者Treg细胞变化及与病情活动度的关系

目的 探讨Treg细胞在类风湿关节炎(RA)患者外周血中的变化及与病情活动度、RA相关抗体的关系.方法 流式细胞仪技术检测40例RA患者和40例健康对照者外周血Treg占CD4+T细胞的百分率,酶联免疫吸附试验检测血清IL-10及TGF-β1,实时荧光定量PCR法检测Foxp3mRNA,分析Treg细胞百分率与病情活动度及RA相关抗体的相关性.结果 RA患者外周血中Treg细胞(CD4+CD25+FOXP3+T细胞)的百分率显著低于健康对照组[(5.36±1.55)％vs(7.49±1.46)％,P＜0.01],Foxp3mRNA表达也较对照组显著减少(P＜0.01);RA组IL-10水平低于健康对照组(P=0.000),而TGF-β1则显著高于健康对照组(P=0.000)；相关性分析显示IL-10水平与Treg细胞百分率及Foxp3 mRNA相对表达量正相关；RA患者外周血中Treg细胞百分率与关节压痛数、关节肿胀数、患者疼痛模拟视觉评分、健康评估问卷、DAS28评分、红细胞沉降率、C反应蛋白等临床和实验室病情活动指标无明显相关性(P＞0.05),与RF、抗CCP抗体滴度也无相关性(P＞0.05).结论 RA患者中Treg细胞数量减少并存在功能异常,疾病活动度越高的患者可能Treg细胞数量减少越明显.

非小细胞肺癌肿瘤间质T淋巴细胞亚群活性及临床意义

目的 检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者肿瘤间质T淋巴细胞亚群分布.探讨NSCLC临床分期与淋巴细胞各亚群比例及免疫功能的关系.方法 收集60例NSCLC患者新鲜肿瘤标本,运用免疫组化染色方法检测T淋巴细胞哑群CD4~+、CD8~+和CD4~+ CD25~+ Foxp3~+ (Treg)的分布.结果 与Ⅰ/Ⅱ期患者比较,Ⅲ/Ⅳ期患者肿瘤组织中CD4~+和CD4~+/CD8~+比值下降(P<0.05),CD8~+和CD4~+ CD25~+ Foxp3~+比值升高(P<0.05).较之癌旁组织,Treg细胞在肿瘤组织中明显富集.结论 NSCLC患者T淋巴细胞免疫功能受抑制.作为主要免疫抑制细胞的Treg细胞比例与肿瘤分期呈正相关.