首页 > 文献资料
-
人工虫草与冬虫夏草成分的比较研究
目的 比较人工北虫草、发酵虫草菌粉和冬虫夏草中,核苷及碱基类成分、甘露醇及麦角甾醇的含量,为开发利用虫草的药用价值提供理论依据.方法 采用RP-HPLC法测定虫草中核苷及碱基类成分,采用HPLC-ELSD法分析虫草中甘露醇的含量,采用RP-HPLC法分析虫草中麦角甾醇的含量.结果 11批冬虫夏草中核苷及碱基类成分(尿嘧啶、尿苷、肌苷、鸟苷、腺嘌呤、腺苷和虫草素)的平均含量分别为0.008 0、0.738 8、0.251 1、0.200 6、0.003 7、0.229 4、0.005 0 mg/g.10批人工北虫草中核苷及碱基类成分的平均含量分别为0.012 3、0.110 0、0.081 2、0.6480、0.001 6、0.071 5、0.699 9 mg/g,12批发酵虫草菌粉中核苷及碱基类成分的平均含量分别为0.017 0、1.057 1、0.127 9、0.9448、0.009 7、1.232 8、0.029 0 mg/g;冬虫夏草、人工北虫草、发酵虫草菌粉中甘露醇的平均含量分别为88.66、44.23、17.40 mg/g;冬虫夏草、人工北虫草、发酵虫草菌粉中麦角甾醇的平均含量分别为1.723 8、5.1233、5.321 9 mg/g.结论 人工北虫草、发酵虫草菌粉含有与冬虫夏草相似的主要活性成分,但人工虫草与冬虫夏草中各种活性成分的含量存在差异.
-
近5年发酵虫草菌粉的化学成分和临床应用研究进展
冬虫夏草是中国名贵的滋补名贵中药材。由于冬虫夏草分布地区狭窄、自然寄生率低、生存环境苛刻等因素，天然虫草资源并不丰富。近些年，随着生活水平的提高，人们的养生保健意识越来越强烈，对虫草的需求量越来越大。也正因如此，人们过度挖掘，使得天然资源日益匮乏。为了满足人们对虫草的需求，国内大力进行研究。自1987年来国内相继研发出多种人工虫草，即发酵虫草菌粉，通过后续的不断研究并投入了大量生产，产生了一定的经济效益和社会效益。目前，市场上人工虫草主要有百令、金水宝、心肝宝和宁心宝4大商业品牌。本文对5年来发酵虫草菌粉化学成分和临床应用的研究进行综述，以全面了解发酵虫草菌粉的价值，并为业内学者更深入的研究提供参考。
-
发酵虫草菌粉多糖免疫活性实验研究
目的:探究发酵虫草菌粉多糖的免疫活性.方法:发酵虫草菌粉通过水提醇沉、复溶、透析、浓缩、冷冻干燥得多糖,命名为CSMP-60,其提取条件:60℃水提、提取时间4 h、料液比1∶15、提取次数2次.以小鼠免疫细胞为材料,检测CSMP-60的免疫活性.结果:CSMP-60能促进脾细胞的增殖(P＜0.05),明显促进小鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF-α(P＜0.05),有促进脾淋巴细胞分泌IFN-γ的趋势.结论:CSMP-60可能是发酵虫草菌粉产生免疫活性的效应物质之一.
-
发酵虫草菌粉中微量元素含量的测定
目的:对发酵虫草菌粉中微量元素的含量进行分析评价,为制定发酵虫草菌粉中微量元素质量标准提供参考依据.方法:采用原子吸收火焰法对发酵虫草菌粉中锌、铁、锰、铜、铅微量元素的含量进行分析.结果:发酵虫草菌粉中微量元素的含量顺序依次为Fe＞ Mn ＞Zn＞ Cu ＞Pb.各元素方法线性关系良好,相关系数均＞0.999 4;重复性试验RSD为0.54％～0.86％;回收率为96.05％ ～ 101.71％,RSD为0.32％ ～1.91％.结论:该方法简单,精密度、灵敏度高,结果可靠.发酵虫草菌粉中微量元素含量均符合世界卫生组织对重金属限量的要求.
-
发酵虫草菌粉类产品质量标准研究进展
随着冬虫夏草资源的日益稀缺,从中分离提取的药用菌株经人工液体深层发酵加工得到的菌粉,即发酵虫草菌粉,已逐渐成为其替代品.现代药理学证明,发酵虫草菌粉与冬虫夏草有效成分类似,具有相似的药理作用.目前,市场上发酵虫草菌粉类产品众多,主要有金水宝胶囊、百令胶囊、心肝宝胶囊、至灵胶囊、宁心宝胶囊五大品种.其中,仅金水宝胶囊和百令胶囊被收载入2015年版《中国药典》,质量标准相对较为全面,而其他产品的质量标准则较为粗放.对于发酵虫草菌粉类产品,目前尚无统一对其产品质量进行全面控制的方法.因此,完善并统一发酵虫草菌粉类产品的质量标准是提升其产品质量标准及保证其产品安全、优质、高效的关键.文章全面综述了发酵虫草菌粉类产品的化学成分及质量标准研究进展,分析了现有发酵虫草菌粉类产品质量标准的不足,提出了建立一个更为科学合理的质量标准新模式以综合评价其质量方法的建议,旨在为发酵虫草菌粉类产品的质量标准提升及规范化生产提供参考.
-
金水宝胶囊加黄芪治疗慢性肾功能不全23例
近几年来,笔者应用金水宝胶囊(发酵虫草菌粉)联合黄芪注射液治疗慢性肾功能不全23例,取得了较好的疗效,现报道如下.1一般资料本组23例,男8例,女15例;年龄37～62岁,平均47.3岁:病程7～21年.其中由慢性肾炎引起的氮质血症12例,肾病综合症引起的氮质血症4例,肾结核和慢性肾盂肾炎引起的尿毒症3例,肾动脉硬化引起的氮质血症4例.
-
人工虫草与冬虫夏草HPLC特征图谱研究
目的 以人工北虫草、发酵虫草菌粉和冬虫夏草为研究对象,建立高效液相色谱(HPLC)特征图谱.方法采用超声法提取虫草中的水溶性成分,HPLC建立虫草的特征图谱.采用Agilent ZORBAX SB-Aq色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.04 mol/L磷酸二氢钾溶液(B),梯度洗脱(0~16 min,0%A;16~38 min,0%→10%A;38~58 min,10%→15%A;58~65 min,15%→0%A),流速1.0 mL/min,柱温25 ℃,检测波长260 nm,进样体积20μL.运用国家药典委员会《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004 A)》,建立人工虫草与天然虫草HPLC特征图谱,同时指认了7个核苷类成分,并进行比较研究.结果 本方法精密度、重复性、稳定性良好.以腺苷为参照峰,对11批冬虫夏草、10批人工北虫草和12批发酵虫草菌粉进行指纹图谱分析结果显示,其指纹图谱相似度分别为0.889~0.982、0.781~0.980、0.502~0.970.结论 天然虫草的指纹图谱相似度较高,人工北虫草和发酵虫草菌粉指纹图谱的相似度较低.本方法可作为评价人工虫草和天然虫草质量的参考依据.
-
RP-HPLC测定人工虫草和天然虫草中麦角甾醇含量
目的：建立反相高效液相色谱法测定人工虫草和天然虫草中麦角甾醇的含量。方法采用Diamonsil C18(2)色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(98∶2),检测波长280 nm,柱温25℃,流速1.0 mL/min。结果麦角甾醇进样量在0.1977～3.9549μg 范围内与峰面积呈良好线性关系(r＝1.000),平均加样回收率为99.51%,RSD＝0.56%(n＝9)。结论本方法操作简便、灵敏、准确,具有良好的重复性和稳定性,适用于人工虫草和天然虫草中麦角甾醇的含量测定。
-
发酵虫草菌粉对细胞色素P450酶的影响研究
目的:研究发酵虫草菌粉对大鼠细胞色素P450酶CYP1A2,CYP3A4,CYP2E1的影响.方法:用Cocktail探针药物法,将Wistar大鼠按体重随机分2组,灌胃给予33 g·L~(-1)的虫草菌粉生理盐水混悬液给药组,生理盐水对照组,灌胃体积为8.5 mL·kg~(-1)诱导10 d后静脉注射给予3种探针药物咖啡因、氨苯砜、氯唑沙宗,股动脉插管取血浆,通过HPLC检测各探针药物的代谢以评价各组CYP1A2,CYP3A4,CYP2E1业邱酶的活性;药动学计算采用DAs 2.0软件完成.结果:给予发酵虫草菌粉组的大鼠,咖啡因、氨苯砜代谢均加快,t_(1/2)分别为(2.90±0.47)h,(4.83±0.60)h;氯唑沙宗t_(1/2)与对照组无显著差异.结论:发酵虫草菌粉对大鼠CYP1A2,CYP3A4有诱导作用,对CYP2E1的作用不明显.
-
发酵虫草菌粉和泼尼松对急性马兜铃酸肾病大鼠肾小管Notch2/hes-1信号通路活化的影响
目的 探讨发酵虫草菌粉及泼尼松对急性马兜铃酸肾病(acute aristolochic acid nephropathy,AAAN)大鼠肾小管上皮细胞Notch2/hes-1信号通路的影响.方法 将50只SD大鼠随机分为正常组、模型组、发酵虫草菌粉组(CS组)、泼尼松组及CS加泼尼松组,每组10只.以马兜铃酸A纯品100 mg/(kg·d)连续灌胃3天建立AAAN模型.CS组予发酵虫草菌粉5.0 g/(kg·d)灌胃,泼尼松组予泼尼松0.5 mg/(kg·d)灌胃,CS加泼尼松组予两药联合灌胃,连续3周.检测各组大鼠肾功能[尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)],HE染色观察肾脏病理改变,TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡,免疫组织化学法及Western blot法检测大鼠肾组织Notch2、Hes-1蛋白表达.结果 HE染色结果显示,正常组大鼠肾组织结构正常;模型组大鼠出现肾小管坏死改变;泼尼松组、CS组及CS加泼尼松组肾小管病理明显改善.与正常组比较,模型组大鼠BUN和SCr水平、肾小管间质半定量评分、凋亡细胞比例以及Notch2、Hes-1蛋白表达均显著升高(P <0.01).与模型组比较,CS组、泼尼松组及CS加泼尼松组上述指标均显著降低(P <0.01).以CS加泼尼松组降低更明显(P <0.05,P <0.01).结论 Notch2/hes-1信号通路活化可能参与AAAN肾小管上皮细胞凋亡的发生.CS及泼尼松对AAAN有肾保护作用,但联合干预疗效更佳,其机制可能与抑制肾组织Notch2/hes-1信号通路活化有关.
-
金水宝的临床应用
金水宝为发酵虫草菌粉经加工制成的片剂,临床上具有秘精益气、补肾保肺之功效.按照其成分来看,金水宝实为冬虫夏草的一种.冬虫夏草为子囊菌门麦角菌科虫草属药用真菌,生产于西藏、青海、四川等地.近年来,冬虫夏草由于自然条件的影响,产量已经大幅度下降,无法满足当今医药市场的需要,所以,国内十分重视该药的开发.江西济民堂医药有限公司生产的金水宝胶囊就是其中的一种,其化学成分和临床作用均与冬虫夏草相似,而且氨基酸、腺苷、尿嘧啶核苷等含量的成分均高于冬虫夏草[1].
-
金水宝胶囊中发酵虫草菌粉多糖的指纹图谱研究
目的 建立金水宝胶囊发酵虫草菌粉多糖的指纹图谱.方法 沸水回流提取金水宝胶囊中的发酵虫草菌粉多糖,经酸水解和1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化后采用HPLC法分析,色谱条件为Phenomenex OOG-4252-EO C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈-0.05 mol/L磷酸盐缓冲液梯度洗脱,体积流量1 mL/min,进样量20μL,检测波长250 nm,柱温30℃.结果 对组成发酵虫草菌粉多糖的11种单糖成分进行鉴别,并建立了发酵虫草菌粉多糖指纹图谱.通过指纹图谱分析10批金水宝胶囊中各单糖成分,相似度均大于0.999,无显著性差异.结论 建立的发酵虫草菌粉多糖指纹图谱操作简单,专属性强,重复性好,能够客观评价金水宝胶囊的质量.
-
基于主成分分析和聚类分析的发酵虫草菌粉类产品氨基酸比较研究
目的 分析不同发酵虫草菌粉类产品氨基酸的含量差异,结合聚类分析和主成分分析法评价发酵虫草菌粉类产品的质量.方法 采用氨基酸自动分析仪测定氨基酸含量,色谱柱为LCA K06/Na离子柱,流动相为柠檬酸钠0.06 mol/L(pH 3.45) (A)-柠檬酸钠0.1 mol/L (pH 10.85) (B),梯度洗脱:0～3.5 min,100％ A;3.5～11.0 min,85％A;11.0～17.0 min,80％A;17.0～23.5 min,67％A;23.5～28.0 min,20％A;28.0～45.0 min,100％B,体积流量为0.45 mL/min洗脱泵+0.25 mL/min衍生泵;检测波长440 nm(脯氨酸)+570 nm(其余氨基酸);温度为58～74℃梯度控温,进样50 μL,外标法测定氨基酸含量.结果 分别对3种发酵虫草菌粉类产品A、B、C中氨基酸进行含量测定,产品A总氨基酸质量分数为251.82～265.93 mg/g,产品B总氨基酸质量分数为279.67～333.40 mg/g,产品C总氨基酸质量分数为321.37～370.86mg/g,样品各批次间一致性较好.产品A和产品B为同一原料药,氨基酸含量差异不明显,产品C中组氨酸和精氨酸含量与产品A和产品B存在较大差异.主成分分析筛选的前3个主成分的累积方差贡献率达到93.551％,包含了各样品中氨基酸含量的大部分信息.聚类分析将30批样品聚为2类,其中产品A和产品B聚为一类,产品C聚为一类,聚类分析结果与实际情况相符.变量聚类分析表明当氨基酸变量聚为5类时,随机选择其中的5个变量能够准确反映发酵虫草菌粉氨基酸的质量.结论 通过氨基酸含量差异研究,能够有效区别不同发酵虫草菌粉类产品,结合主成分分析和聚类分析能够客观评价发酵虫草菌粉类产品的质量.
-
发酵虫草菌粉对糖尿病大鼠心肌NLRP3表达的影响
目的 探讨发酵虫草菌粉对糖尿病心肌病的治疗作用及其对心肌核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)表达的影响.方法 雄性SD大鼠45只,随机分为正常对照组(CON组)、糖尿病组(DM组)和发酵虫草菌粉治疗组(CS组,1 g·kg-1·d-1),每组15只.DM组和CS组大鼠通过尾静脉注射链脲佐菌素(45 mg/kg)诱导糖尿病模型.CS组每日给予1次发酵虫草菌粉溶液灌胃,CON组和DM组给予相同体积生理盐水灌胃.灌胃18周后取材.HE染色观察心肌组织形态学改变;电镜观察心肌超微结构改变;Western blotting法检测心肌NLRP3的表达;免疫组化法检测各组大鼠心肌NLRP3、Caspase-1、IL-1β的表达水平.结果 (1)电镜下,DM组大鼠出现局部心肌纤维变性坏死、部分线粒体损伤;CS组大鼠心肌病变较DM组明显减轻.(2)Western blotting结果显示,DM组和CS组大鼠心肌NLRP3表达均较CON组显著上升,CS组大鼠心肌NLRP3表达较DM组降低.(3)免疫组化结果显示,DM组和CS组大鼠心肌NLRP3、Caspase-1、IL-1β表达均较CON组显著上升,CS组均较DM组降低.结论 发酵虫草菌粉能减轻糖尿病大鼠心肌病变,该作用可能与其抑制心肌NLRP3、Caspase-1、IL-1β的表达有关.
-
发酵虫草菌粉治疗糖尿病肾病的临床研究
目的:探讨发酵虫草菌粉对糖尿病肾病(DN)的治疗.方法:DN患者60例,肾功能正常者38例,肾功能衰竭者22例;60例患者被随机分为对照组及治疗组.除常规治疗外,治疗组患者加用发酵虫草菌粉治疗,对照组则加用缬沙坦治疗,共观察16周.治疗前后行尿白蛋白排泄率(UAER)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、24 h尿蛋白定量测定.结果:与对照组相比较,治疗组患者的尿白蛋白排泄率明显降低(P＜0.05).治疗组的血肌酐也显著下降(P＜0.05).结论:发酵虫草菌粉具有减少尿蛋白尿,改善肾功能的作用,对糖尿病肾病有较好的疗效.
-
星点设计-效应面法优化发酵虫草菌粉全粉末压片工艺
目的 研究发酵虫草菌粉全粉末直接压片的成型工艺,提升产品质量.方法 根据全粉末压片的要求,以微粉的流动性和可压性为评价指标对各类直压辅料进行筛选;运用星点设计-效应面法,以混合粉末的堆密度、崩解时间、硬度为考察指标优选佳处方.结果 优选的佳处方为微粉硅胶用量为10％,Flowlac 100∶AvicelPH102为3∶1,Plasdone(R)S-630的用量为3.03％,期望值达到95％以上.结论 该工艺处方合理,片剂成形性好,质量稳定,可有效解决发酵虫草菌粉直接压片成形性差的问题.
-
发酵虫草菌粉中甘露醇含量的比色法测定
目的 对比研究发酵虫草菌粉中甘露醇的提取和后处理方法,建立甘露醇含量的比色测定法.方法 采用超声提取、高速离心分离进行样品预处理,比色法测定发酵虫草菌粉中甘露醇的含量.结果 甘露醇的线性范围为20～90μg/mL,加样回收率为102.6%,RSD为1.34%,重复性实验的RSD为0.44%,供试品溶液在24 h内稳定.2001年生产的发酵虫草菌粉中甘露醇含量的平均值比前2年约高2%,含量变化范围比前两年稍小,3年内生产的各批次甘露醇含量波动均在10%左右,发酵虫草菌粉质量较为稳定.结论 用超声离心比色法测定甘露醇含量,简捷快速,重现性好,回收率高,可以用于发酵虫草菌粉的质量控制.
-
发酵虫草菌粉对DEN致大鼠肝损伤的保护作用及TGF-β1/Smads通路的影响
目的:探讨发酵虫草菌粉(fermented cordyceps sinensis powder,CS)对二乙基亚硝胺(DEN)诱导大鼠肝损伤的保护作用及对TGF-β1/Smads通路的影响.方法:无特定病原体(SPF级)健康雄性Sprague Dawley(SD)大鼠48只,体质量(180±20)g,随机分为4组:对照组、模型组、CS治疗组与CS溶媒组,每组12只.模型组:灌胃给予10 mg/kg DEN每周5次共8周,构建慢性肝损伤模型;对照组:灌胃给予与模型组相同体积的生理盐水;CS治疗组:在建模4周后灌胃给予80 mg/kg CS每周5次共8周;CS溶媒组:灌胃给予与CS组相同体积的5％甲基纤维素钠(CMC-Na)溶液.实验结束后,麻醉,脊椎脱臼法处死大鼠,收集血液,紫外分光光度法检测各组大鼠血清中AST、ALT以反映肝功能;H&E染色观察肝组织形态变化,Masson染色观察胶原沉积情况;改良Nycodenz法分离各组大鼠原代肝星状细胞(HSC),RT-qPCR检测肝组织与HSC中 α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子(TGF)-β1、Smad3、Smad7 mRNA的表达水平;Western blot检测肝组织Smad3与Smad7蛋白表达水平.结果:与对照组相比,模型组大鼠血清中AST、ALT含量显著升高,H&E染色结果显示肝脏组织形态显著改变,Masson染色结果显示胶原沉积增多;与模型组相比,CS治疗四周能显著降低肝损伤大鼠血清中升高的AST、ALT水平,改善其肝脏病理损伤程度,减少肝脏中胶原沉积.RT-qPCR结果显示,CS可减少肝损伤大鼠组织及HSC中α-SMA、TGF-β1 mRNA表达水平,增加Smad7 mRNA表达水平;CS溶媒组各项检测指标均与模型组无差异;此外,Western blot结果显示,CS可下调肝损伤大鼠肝组织Smad3蛋白的表达,上调Smad7.结论:CS可显著改善DEN诱导的大鼠肝损伤,该作用可能与CS上调Smad7,并抑制TGF-β1/Smads通路有关.
关键词： 发酵虫草菌粉 慢性肝损伤 TGF-β1/Smads通路 肝星状细胞 -
发酵虫草菌粉抗大鼠肝纤维化作用及机理研究
目的：探讨发酵虫草菌粉抗大鼠肝纤维化作用及作用机理。方法将30只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组和虫草组，采用40%四氯化碳(CCl4)每周2次皮下注射6周制作大鼠肝纤维化模型，经灌胃给药6周后，在麻醉状态下采血，检测大鼠血清肝功能和肝纤维化指标、基质金属蛋白酶-1（MMP-1）及金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）。结果与模型组比较，虫草组肝脏纤维化程度明显减轻，谷丙转氨酶（ALT）降低和白蛋白（ALB）升高作用明显(P<0.05)，同时非常显著改善肝纤维化指标、MMP-1及TIMP-1（P<0.01）。结论发酵虫草菌粉具有抗肝纤维化作用且与升高MMP-1及降低TIMP-1有关。
-
原子荧光光谱法同时测定发酵虫草菌粉中砷和汞
目的:建立采用原子荧光光谱法同时测定发酵虫草菌粉中砷和汞的方法.方法:标准及样品经消解,直接用AFS-9130型双道原子荧光仪分析,并对实验条件进行优化.结果:在选定的佳条件下,测得砷和汞的相对标准偏差分别为0.75和1.86.砷和汞的回收率分别为94.5%～104.0%和89.4%～107.8%.结论:该方法具有较高的灵敏度、准确度和精密度.
