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五味子总木脂素对阿尔茨海默病模型大鼠记忆障碍的影响
目的 观察五味子总木脂素分离纯化方法及其对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)模型大鼠记忆障碍的影响,探讨其作用机制.方法 采用随机数字表法将大鼠分为空白对照组、假手术组、模型组、五味子低剂量组、五味子高剂量组,每组15只.模型组、五味子低剂量组、五味子高剂量组采用腹腔注射D-半乳糖50mg/kg复合Aβ海马定位注射制作AD大鼠模型.造模后3d开始给药.五味子低、高剂量组分别灌胃五味子总木脂素50、100mg/kg,空白对照组、假手术组和模型组灌胃等体积生理盐水.1次/d,连续给药2周后进行水迷宫实验.行为学测试结束后,采用RT-PCR法测定各组大鼠海马组织中caspase-3、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、Bcl-2 mRNA表达.结果 与模型组比较,五味子低、高剂量组逃避潜伏期缩短(P<0.05),穿越平台次数[(3.82±1.23)次、(5.82±1.18)次比(2.13±1.48)次]、游泳时间百分比[(39.43±7.12)%、(48.63±7.15)%比(59.98±6.13)%]增加(P<0.05);五味子低、高剂量组caspase-3[(6.11±1.25)、(4.42±1.13)比(7.88±1.28)]、Bax mRNA[(5.84±1.62)、(4.63±1.51)比(7.54±2.14)]表达降低,Bcl-2mRNA[(1.73±0.82)、(3.04±1.29)比(0.93±0.62)]表达升高(P<0.05).结论 硅藻土-索式提取法适用于五味子总木脂素的分离纯化,五味子总木脂素可上调Bcl-2表达,降低caspase-3和Bax表达,抑制Aβ所致的神经元细胞凋亡,改善AD动物模型记忆障碍,且干预效果呈剂量依赖性.
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北五味子总木脂素的GC-MS分析及其生物活性
目的:分析北五味子总木脂素中的挥发性成分,并对其抗烟草花叶病毒(TMV)活性和抗肿瘤活性进行研究.方法:运用GC-MS技术分析北五味子总木脂素中挥发性化学成分;采用活体半叶枯斑法和MTT法分别研究了其抗TMV活性和抗肿瘤活性.结果:从北五味子总木脂素中检测出58个化合物,鉴定出其中43个,含量较多的有五味子素(13.974％),香芹蒎酮(8.064％),去氢香树烯(6.063％),缬草萜烯醇(5.416％),戈米辛A(4.732％)等,其中非木脂素成分含量为67.06％.抗TMV活性和抗肿瘤活性数据显示北五味子总木脂素对A549细胞增殖有一定的抑制作用,对TMV有较好的抑制作用.结论:运用GC-MS方法对北五味子总木脂素中的低极性成分进行分析检测,该分析方法简便、快捷、准确、可靠,这为分析中药五味子总木脂素中非木脂素成分提供了一种更加高效的检测方法,同时为五味子中总木脂素品质的化学和生物功能研究提供了科学依据.
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肉豆蔻、麸煨肉豆蔻中总木脂素的含量测定
目的:建立肉豆蔻、麸煨肉豆蔻中总木脂素的含量方法.方法:采用紫外分光光度法,以去氢二异丁香酚为对照品,测定波长275 nm.结果:去氢二异丁香酚质量浓度在1.5～9.0 mg·L-1与吸光度呈良好线性关系,r=0.999 8,平均回收率97.6％(n=6),RSD 1.2％.结论:建立的方法简便、快速、重复性好.
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大孔树脂与氧化铝联用纯化南五味子总木脂素的工艺优选
目的:优选大孔树脂与氧化铝联用对南五味子总木脂素提取液的纯化工艺.方法:以除杂率和五味子酯甲转移率的综合评分为指标,采用正交试验考察树脂用量、乙醇体积分数和乙醇用量对南五味子总木脂素大孔树脂纯化工艺的影响；通过单因素试验考察南五味子总木脂素的氧化铝吸附除杂工艺.采用紫外分光光度法测定总木脂素含量,HPLC测定五味子酯甲、五味子甲素的含量.结果:佳纯化工艺为取2/3～ 4/3倍量LSA-7型大孔树脂,加85％乙醇6 BV洗脱,洗脱液过1倍药材量氧化铝柱吸附除杂.结论:该优选工艺合理、稳定可行,适用于工业生产.
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多指标综合评价南五味子木脂素提取工艺
目的:筛选出提取南五味子总木脂素的佳工艺.方法:采用紫外分光光度法和HPLC法相结合对南五味子总木脂素进行检测,以回流提取方法,采用正交试验设计,以提取时间、乙醇体积分数、溶媒用量、提取次数为因素,分别以总木脂素、五味子甲素、五味子酯甲为评价指标,确定佳提取条件;结果:用55%乙醇,溶媒用量为16倍,提取时间为60 min,提取次数为2次效果好.结论:采用多指标综合评价法能够更客观优化南五味子总木脂素工艺条件的提取工艺,为南五味子总木脂素分离纯化研究提供参考.
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南五味子总木脂素软胶囊制备工艺优选
目的:优选南五味子总木脂素软胶囊的制备工艺.方法:采用紫外分光光度法测定总木脂素含量.选择玉米油和聚乙二醇600(PEG600)为分散剂,氢化植物油和羧甲基纤维素钠(CMC-Na)为稳定剂,聚山梨酯80(Tween80)为助溶剂,筛选内容物佳处方.以胶囊收率和轧囊现象为综合评价指标,通过正交试验考察进料口温度、胶囊出口温度和转篮干燥时间对制备工艺的影响.结果:内容物佳处方为主药-玉米油-PEG600-1,2-丙二醇-CMC-Na-氢化植物油-Tween80-水(44∶10∶ 15∶ 1∶8∶9∶3∶ 10),佳制备工艺为进料口温度50℃,胶囊出口温度20℃,转篮干燥时间24 h.结论:优选的制备工艺稳定可行.
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肉豆蔻总木脂素纯化工艺及其抗炎活性研究
目的 优化肉豆蔻总木脂素的纯化工艺并对其抗炎活性进行研究.方法 采用大孔吸附树脂法富集纯化肉豆蔻总木脂素,以吸附率、解吸率及总木脂素含量为指标,考察树脂型号、洗脱剂浓度、上样量及洗脱剂用量等相关参数;采用二甲苯致小鼠耳肿胀模型,通过测定肿胀度、抑制率考察其抗炎活性.结果 总木脂素的纯化采用AB-8型树脂,取粗提物干膏1 g溶解后作为上样液,加入40 mL(含树脂16 g)预处理的树脂,静态吸附12 h,上柱,以2 BV/h流速,先用30%乙醇洗脱至无色,再用70%乙醇300 mL洗脱,收集70%乙醇洗脱液,纯度可达45.8%.肉豆蔻总木脂素高、中、低剂量组的肿胀度与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 总木脂素纯化工艺稳定、重复性好,肉豆蔻总木脂素具有明显的抗炎活性.
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正交试验设计优化杜仲总木脂素提取工艺
目的 筛选出提取杜仲总木脂素的佳工艺.方法 采用正交试验设计,超声提取,以提取时间、甲醇浓度、溶媒用量为因素,采用紫外分光光度法对杜仲木脂素含量进行检测,确定佳提取条件.结果 优选的佳工艺条件为 甲醇浓度75%,溶媒用量为8倍,提取时间40 min.结论 杜仲总木脂素提取工艺的优化为杜仲总木脂素进一步研究提供了参考.
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藏药波棱瓜子总木脂素对四氯化碳致大鼠肝纤维化的保护作用及机制探讨
该实验探讨藏药波棱瓜子总木脂素对四氯化碳(CCl4)致大鼠肝纤维化的保护作用及其作用机制.将SD大鼠48只随机分为空白对照组、模型组、总木脂素低、中、高剂量(100,200,400 mg·kg-1)组、阳性药甘利欣(25 mg·kg-1)组,每组8只.空白组正常饲养,模型组、总木脂素低、中、高剂量组以及甘利欣组大鼠均隔2~3 d皮下注射3 mL·kg-1含40%CCl4的橄榄油溶液连续造模8周.期间空白组、模型组灌胃等量生理盐水2 mL,总木脂素低、中、高剂量组、甘利欣组灌胃给药相应剂量.8周后后一次造模6 d后处死大鼠.生化分析法测定各组大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)含量.ELISA法检测血清肝纤维化指标转化生长因子-β1(TGF-β1)、透明质酸(HA)、羟脯氨酸(HYP)、超氧化物歧化酶(SOD)的水平,肝组织进行HE和Masson胶原染色,进行病理分析并评分.结果显示与模型组大鼠比较,总木脂素组大鼠血清中ALT,AST,ALP,TGF-β1,HA和HYP水平显著降低(P<0.05,P<0.01),肝脏组织匀浆液中SOD浓度水平明显升高(P<0.05,P<0.01),肝脏病理损伤明显减轻(P<0.05,P<0.01),肝纤维化评分明显降低(P<0.05,P<0.01).通过以上实验说明波棱瓜子总木脂素能有效减轻CCl4致大鼠肝纤维化的肝脏损伤,降低肝纤维化程度,其机制可能与其保肝降酶抑制TGF-β1表达有关.
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药用植物爵床中总木脂素的含量测定
药用植物爵床为爵床科植物爵床Justicia proc- umbens L.的干燥全草[1],具有清热解毒、利尿消肿的功效,用于治疗感冒发热、咳嗽、喉痛、疟疾、肾盂肾炎、乳糜尿、肝硬化腹水、疳积等症,分布于我国西南部和南部各省及台湾等地,资源十分丰富[2].爵床的化学成分主要为木脂素及其苷类.
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降糖益肾胶囊的溶出度研究
降糖益肾胶囊及降糖益肾片均是采用牛蒡子中提取、精制的有效部位总木脂素加工制成的中药新制剂,主要用于降血糖及防治糖尿病肾病,适用于糖尿病引起的高血糖及糖尿病肾病早期症见肾小球滤过率增高至肾功能代偿者[1,2].但牛蒡子总木脂素为难溶性药物,其在体内的有效溶出是保证制剂生物利用度的关键之一.为此,本实验对其溶出度测定方法进行了研究.
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砂炒对波棱瓜子有效成分、致腹泻以及保肝作用的影响
为了研究砂炒对波棱瓜子有效成分、致腹泻以及保肝作用的影响,该实验采用HPLC分析波棱瓜子砂炒前后有效成分波棱甲素与波棱素的含量差异;以稀便率和腹泻指数评价砂炒对波棱瓜子总木脂素(total lignans,TL)致泻情况的影响;以CCl4急性肝损伤模型评价砂炒对波棱瓜子TL保肝作用的影响.HPLC分析结果显示,波棱瓜子砂炒后波棱甲素含量降低40.9％(P＜0.01),波棱素含量无显著性变化.药效学结果显示,砂炒波棱瓜子TL高、中剂量组稀便率与腹泻指数显著低于同剂量生品波棱瓜子TL组(P＜0.01或P＜0.05);砂炒及生品波棱瓜子TL高、中剂量组均能显著抑制CCl4致肝损伤小鼠血清中ALT,AST水平的升高(P＜0.01或P＜0.05),但砂炒波棱瓜子TL高、中剂量组小鼠ALT,AST水平高于同剂量的生品波棱瓜子TL组(P＜0.05).结果表明,砂炒可有效缓解波棱瓜子TL致泻作用,但是同时也降低了波棱瓜子TL的保肝作用.
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桃儿七中鬼臼毒素、总木脂素的含量与生态因子的相关性研究
为了探讨生态因子与桃儿七根及根茎中鬼臼毒素及总木脂素含量的相关性,采用HPLC测定5个省区87份桃儿七样品的鬼臼毒素含量,采用UV测定总木脂素含量;结合生态因子(地形、土壤、气候)采用SPSS软件对其进行相关与回归分析.含量测定结果表明产地桃儿七中鬼臼毒素与总木脂素的含量差异较大,分别达到1.001％～6.230％,5.350％～ 16.34％.SPSS相关与回归分析发现鬼臼毒素含量与总木脂素含量呈线性正相关;采样区域内,桃儿七中鬼臼毒素、总木脂素含量与纬度、年均降雨量呈强正相关关系,与土壤pH、土壤中有机质含量呈强负相关关系,与速效钾分别呈较弱、强正相关关系,与坡度、年均气温均呈较弱负相关,且鬼臼毒素含量与速效磷呈较弱正相关关系.
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濒危药用植物桃儿七中鬼臼毒素和总木脂素含量测定
目的:测定不同产地桃儿七中鬼臼毒素和总木脂素类成分含量,对其资源利用价值进行评价.方法:采用高效液相色谱法和紫外分光光度法分别测定不同产地共126个桃儿七样品中鬼臼毒素和总木脂素含量,采用参比波长法测定桃儿七中总木脂素类成分的含量.结果:桃儿七中鬼臼毒素和总木质素的含量均以产自甘肃省永登县自然保护区样地的样品含量高,产自西藏自治区江达同普乡样地的样品含量低,前者分别为7.40％,20.66％,后者分别为0.40％,5.46％,两者分别相差近19倍和4倍.桃儿七中鬼臼毒素与总木脂素的含量呈显著正相关,且两者的含量表现出海拔较低、纬度较高地区样地的含量较高的特点.结论:2种含量测定方法均简便、快速、准确、重复性好；以鬼臼毒素含量和总木脂素含量为指标评价桃儿七资源利用价值较为客观；本研究的结果,对于桃儿七野生资源采集和栽培生产基地建设的产地选择具有重要的指导意义.
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不同炮制工艺对波棱瓜子有效成分腹泻及保肝作用的影响
目的 比较砂炒和醋炙炮制工艺对波棱瓜子有效成分、腹泻及保肝作用的影响.方法 采用HPLC法分析波棱瓜子经砂炒(或)醋炙前后有效成分波棱甲素与波棱素的含量差异;以稀便率和腹泻指数评价砂炒和醋炙对波棱瓜子总木脂素致泻作用的影响;以CCl4急性肝损伤模型评价砂炒和醋炙对波棱瓜子总木脂素保肝作用的影响.结果 波棱瓜子经砂炒(或)醋炙后波棱甲素含量分别降低40.9％和12.0％(P＜0.01),波棱素含量无显著性变化(P＞0.05).在给药第4、6天,砂炒和醋炙波棱瓜子总木脂素高、中剂量组小鼠的稀便率和腹泻指数显著低于同剂量的生品组(P ＜0.01或P＜0.05);不同炮制品波棱瓜子总木脂素高、中剂量组均能显著抑制CCl4致肝损伤小鼠血清中ALT、AST水平的升高(P＜0.01或P＜0.05);与同剂量的生品波棱瓜子总木脂素组相比,醋炙波棱瓜子总木脂素各组小鼠AST、ALT水平无显著差异,而砂炒波棱瓜子总木脂素高、中剂量组小鼠ALT、AST水平显著升高(P＜0.05).结论 砂炒和醋炙均可有效缓解波棱瓜子总木脂素的腹泻作用,但砂炒后波棱瓜子总木脂素的保肝降酶作用下降,醋炙对波棱瓜子总木脂素的保肝降酶作用无显著影响.就缓解腹泻和保肝降酶作用而言,醋炙工艺优于砂炒工艺.
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牛蒡子不同炒制品中的成分与含量及其对动物的抗炎活性对比研究
目的 研究牛蒡子炒制的炮制机制.方法 用HPLC法检测牛蒡苷、牛蒡苷元含量;用UV法检测总木脂素含量;用醚浸出法检测油脂含量,对不同程度牛蒡子炒制品进行比较.以二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型,以角叉菜胶致大鼠足肿胀模型,检测肿胀度和肿胀抑制率,对不同程度牛蒡子炒制品的抗炎活性进行比较.结果 牛蒡子在炒制过程中主成分含量显著变化,随加热时间和温度的增加,牛蒡苷含量从6.03％降至1.07％,牛蒡苷元含量从0.32％增至2.61％,并在27 min产生一个含量逐渐增加的新吸收峰,但总木脂素含量变化不明显,醚浸出物量先升高后降低.牛蒡子生品及各炒制品均能不同程度抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀及角叉菜胶所致大鼠足肿胀,其中,200℃炒制6 min,耳廓肿胀抑制率36.0％,足肿胀抑制率16.9％.250℃炒制6 min,耳廓肿胀抑制率36.8％,足肿胀抑制度18.7％.炒制样品抗炎活性要强于生品的耳廓肿胀抑制率25.3％、足肿胀抑制率10.0％及100℃(低温炒制品)炒制6 min组的耳廓肿胀抑制率29.8％、足肿胀抑制率12.4％;150℃炒制6 min组的耳廓肿胀抑制率32.7％、足肿胀抑制率13.0％.结论 每200 g牛蒡子药材应在200 ～ 250℃炒制4 ～6 min为宜.牛蒡子炒制是为了使部分牛蒡苷分解成牛蒡苷元,并使外壳爆裂,油脂易被溶出.
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波棱瓜子总木脂素纳米混悬剂胶囊的保肝作用评价
目的 制备波棱瓜子总木脂素纳米混悬剂胶囊(NSC)及评价其保肝降酶的药效学性质,并与医院制剂肝能滴丸做比较.方法 采用高压均质法制备波棱瓜子总木脂素纳米混悬剂(HTL-NS),采用冻干工艺将其固化后装胶囊,并对波棱瓜子总木脂素纳米混悬剂、冻干粉和波棱瓜子总木脂素纳米混悬剂胶囊进行表征.采用腹腔注射30％ (v/v)四氯化碳制备大鼠急性肝损伤模型,依法测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平;同时测定肝匀浆组织中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的活性,并在光学显微镜下观察肝脏病理学变化.结果 波棱瓜子总木脂素纳米混悬剂胶囊复溶后粒径、多分散指数及Zeta电位分别为(332±15) nm、(0.263±0.010)及(-23.8±3.8)mV.在等剂量时波棱瓜子总木脂素纳米混悬剂胶囊降低丙氨酸氨基转移酶和天冬氨酸氨基转移酶的水平,提高超氧化物歧化酶活性,降低丙二醛含量和改变肝脏病理变化程度明显优于肝能滴丸.结论 波棱瓜子总木脂素纳米混悬剂胶囊保肝作用显著优于肝能滴丸,为波棱瓜子总木脂素剂型的进一步开发和临床运用提供了一定的参考价值.
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浓缩型和全粉型五味保肝丸总木脂素体外溶出速率对比研究
目的：评价五味保肝丸浓缩型和全粉型主要成分体外溶出速率。方法以五味子总木脂素溶出速率为指标，采用变色酸水法显色，在570nm波长处检测吸光度测定含量，对比研究浓缩丸和全粉丸体外溶出速率情况。结果浓缩丸40分钟内就可全部崩解溶散和100%成分溶出，而全粉丸接近60分钟才能全部崩解溶散且仅有53.62%的成分溶出。结论浓缩丸的生物利用率约是全粉丸的两倍，药效明显优于全粉丸。
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大孔树脂纯化五味子总木脂素、总三萜工艺研究
目的 考察大孔树脂纯化五味子总木脂素总三萜的佳工艺.方法 比较了5种不同类型大孔树脂对五味子总木脂素、总三萜、五味子醇甲的吸附解析性能,确定适宜的树脂类型和佳纯化工艺条件.结果 AB-8型树脂吸附解析效果好;佳工艺条件:上样液浓度1.5 mg/mL,大上样量7BV,蒸馏水洗脱体积9BV,洗脱溶剂为30%乙醇(9BV)+80%乙醇(10BV);纯化后终产品中总木脂素、总三萜、五味子醇甲的质量分数分别为39.55%、13.96%、8.95%.结论 本文所报道的梯度洗脱法可显著提高终产品中总木脂素、总三萜、五味子醇甲的质量分数,验证了其工业生产的可能.
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正交试验法优选五味子种子中木脂素类成分提取工艺
目的：优选五味子种子中木脂素类成分提取工艺。方法紫外分光光度法测定总木脂素含量，以五味子总木脂素提取量为指标，采用L9(34)正交试验考察回流次数(1、2、3次)、回流时间(30、45、60 min)、乙醇体积分数(75%、85%、95%)、乙醇用量(4、5、6倍量)对五味子总木脂素提取量的影响。结果浓度在0.438~8.760μg/mL范围内，五味子乙素的吸光度与浓度有良好的线性关系(r=0.9928)。优选的工艺为5倍量95%乙醇，回流提取3次，每次60 min。结论优选的提取工艺稳定可行，可用于为五味子种子中木脂素类成分的提取。
