首页 > 文献资料
-
耐多药结核病的研究进展
耐多药结核病(MDR-TB)是指患者有关标本(主要为痰标本)中结核分支杆菌至少对异烟肼(INH)和利福平(RFP)产生耐药者;或凡已耐除氨硫脲(TB)以外的5种基本抗结核药物中的2种或以上者.MDR-TB具有治疗费用高、治愈率低、病死率高的特点.WHO估计全球目前已有5000万以上受MDR-TB感染[1].MDR-TB在20世纪90年代前鲜有报道,但从1 990～1992年间美国纽约、迈阿密及新泽西洲等地发生多起伴HIV感染爆发流行以来已受到了世界范围广泛重视.MDR-TB的不断扩散,有可能使目前控制结核菌的化疗方法失去应有作用,对结核病的流行产生严重影响,因此对它的研究有很重要的意义.现就它的流行情况、发生机制及处理措施综述如下:
-
结核病复发有哪些原因
结核病是由结核分支杆菌引起的疾病,较一般感染性疾病的病程及治疗时间都要长,如为肺结核或气管内膜结核,即为呼吸道传染性疾病.
-
荧光定量PCR检测TB-DNA与荧光染色阳性率比较
目的:探讨荧光定量PCR检测TB-DNA在结核病中的应用价值方法:采集82例高度怀疑结核病患者的临床标本.应用FQ-PcR检测TB-DNA同时用直接涂片查找抗酸杆菌.比较两种检测方法在结核病患者标本在结核病患者标本中的阳性检出率.结果:TB-DNA阳性检出率为60.98%显著高于抗酸杆菌阳性检出率32.9 3%(P<0.05)且治疗后TB-DNA拷贝数和阳性检出率也显著下降(P<0.05)结论:TB-DNA定量能提高结核杆菌的检出率可作为药物选择和判断疗效的指标.
-
结核分支杆菌利福平耐药基因检测
利福平是结核病治疗的一线药物,但在临床上也常出现结核分支杆菌对利福平的耐药,目前检测耐药的方法较多的是采用改良的罗氏培养法加药敏试验,但由于培养基不同,检测方法不同,判定标准不一,国内目前尚缺乏有说服力的统一标准,由于药敏试验是建立在细菌培养基础上的,因此结核杆菌培养阴性的结核病患者无法做药敏试验,近年来,国内外学者不断报道较传统PCR更为灵敏、特异的套式聚合酶链反应(nested PCR,nPCR)技术诊断结核病,阳性检出率明显高于罗氏培养法和传统PCR,以结核分支杆菌rpoB基因为靶基因建立rpoB套式PCR技术,通过对产物直接测序,根据细菌基因型判别结核分支杆菌对利福平的敏感性,以探讨序列分析辅助诊断治疗的可能性.
-
含卷曲霉素方案治疗肺结核不良反应观察
卷曲霉素是一种对结核分支杆菌有效的抗生素,由于其对链霉素、卡那霉素耐药的肺结核患者仍有效[1],因而在抗结核治疗中具有重要价值,常作为二线抗结核药物[2].在抗结核治疗中药物的不良反应常常是导致患者停药、间断治疗的重要影响因素.积极观察含卷曲霉素方案在抗结核治疗中的不良反应,将有助于指导卷曲霉素在抗结核治疗中的安全应用,我们在这方面作了些初步工作,现报道如下.
-
耐多药肺结核的成因及治疗
耐多药肺结核是指患者排出的结核分支杆菌,至少已对异烟肼(INH)和利福平(RFP)产生耐药的结核病.随着发生率的不断增高和传播的日益扩大,特别是国外伴人类免疫缺陷病毒(HIV)感染的耐多药肺结核爆发流行以来,对全球结核病控制构成了严重威胁.
-
聚合酶链反应与抗结核抗体联合检测在结核性胸膜炎诊断上的意义
结核分支杆菌的细菌学检查是结核病病原学诊断的直接证据.但由于检出率低,远不能满足临床需要.而聚合酶链反应(Polymerase chain reacition,PCR)技术对诊断结核病具有敏感、特异和快速的优点,但也有一定的局限性.结核性胸膜炎是以痰菌阴性为主,依赖胸积液的生化及细胞学的诊断.为了进一步提高结核性胸膜炎的诊断率,探讨PCR与抗结核抗体(Against tuberculosis antigen,ATA)联合检测在结核性胸膜炎诊断上的意义,我们对61例结核性胸膜炎的胸水标本和34例非结核性胸膜炎的胸水标本采用PCR方法及ATA检测进行对比研究,现将结果报道如下.
-
1例负压封闭引流技术联合植皮治疗开放性肺结核合并大面积压疮的护理
肺结核病是结核分支杆菌入侵机体后在一定条件下引起发病的肺部慢性传染性疾病,其中痰排菌阳性者为传染性肺结核病,其病程长,传染性大,易反复且病死率高.开放性肺结核合并大面积压疮经久不愈是临床治疗中的难题之一,给患者精神上、经济上带来难以承受的负担.我科对1例开放性肺结核骨转移合并大面积压疮实施真空负压封闭引流技术(vacuum sealing drainage,VSD)联合植皮治疗,疗效满意,现将观察与护理体会报道如下.
-
代谢组学在结核分枝杆菌研究中的应用
肺结核是由结核分枝杆菌引起的一种传染病,全球约有1/3的人群感染过结核分枝杆菌,据WHO估算2010年全球约有850万至920万的新增病例,约120万至150万人死于结核病,其在传染病死亡中居第2位,仅次于获得性免疫缺陷病毒(HIV).近年来,随着耐药菌的增多及HIV感染人数的增加,增加了结核疫情控制的挑战.基因组学、转录组学、蛋白质组学等研究获得了大量的结核分枝杆菌特性相关数据,而由于基因的复杂性、转录后修饰、酶活性调节等问题,基因组学及蛋白质组学并不能完全描述结核分枝杆菌的生物学特征,许多已知基因或蛋白的功能并未完全确定.代谢组学作为作为组学的一种新的研究方法,能够全面鉴别和量化生物体在特定的时间或环境改变、基因突变或病理生理刺激引起的代谢产物的变化,准确描述已发生的代谢改变.进行结核分枝杆菌的代谢组学研究,结合已有的基因组学、蛋白质组学等信息形成整体观,将对对结核分枝杆菌产生更深入认识,从而为发现更好的诊断标志物、药物靶点及疫苗研发提供更多有用信息.
-
LAM-IgG检测对结核性胸腹膜炎的诊断价值
脂阿拉伯甘露糖(Lipoarabinomannan,LAM)是一种80年代中期分离纯化的,与结核杆菌细胞壁有关的糖脂,能够大量分泌且具有较高的免疫性,当人体感染结核杆菌后,免疫系统便会对此抗原产生特异性抗体IgG,即抗脂阿拉伯甘露糖的抗体,简称LAMIgG.所以,临床上检测其含量,特别是联合检测结核分支杆菌DNA(TB-DNA)和LAM-IgG,对诊断结核性胸腹积液有较大的临床应用价值.
-
实时荧光定量PCR 法在检测血浆结核杆菌DNA 的应用
目的:探讨实时荧光定量PCR 法在检测血浆结核杆菌DNA 的应用及价值.方法:以我院确诊为结核病且未经治疗的患者392 例作为实验组,同时选取健康体检人群100 例作为对照组.分别对两组患者取静脉血,并对其血浆中结核分枝杆菌DNA 采用实时荧光定量PCR 法进行检测,同时对实验组患者进行痰涂片检查.结果:对照组患者实时荧光定量PCR 法检测全为阴性;实验组患者采用痰涂片检查,结果显示有80 例为阴性,其实时荧光定量PCR 法检测结果显示,痰涂片阳性的患者全为阳性,其阴性患者中有24 例为阳性,在对阳性患者抗痨治疗后有12 例患者转为阴性.实验组患者MTB DNA 为1.76×109 copies/mL.结论:本实验表明结核患者血浆中存在MTB DNA,采用实时荧光定量PCR 法可有效的对痰涂片阴性以及无痰患者进行诊断,有较好的利益价值.
关键词： 实时荧光定量PCR法 结核分支杆菌 血浆 -
结核分支杆菌分泌蛋白Mtb81克隆、表达、纯化及血清学诊断价值的初步研究
目的 通过结核分支杆菌Mtb81基因在大肠杆菌中的表达, 获得大量纯化的重组Mtb81蛋白.通过Western -blot和ELISA方法评价Mtb81抗原,检测血清中抗结核抗体的灵敏度和特异性,为进行结核病血清学诊断打下基础.方法 应用PCR技术扩增结核分支杆菌H37Rv Mtb81DNA序列;构建pET24b-Mtb81重组质粒,然后转化入表达宿主大肠杆菌BL21(DE3);通过Western-blot鉴定重组Mtb81蛋白,采用Chelating Sepharose Fast Flow纯化重组 Mtb81蛋白;将纯化的重组Mtb81蛋白通过Western-blot、酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,检测结核病人及正常人血清中的抗体,应用Microsoft Excel软件统计分析实验数据.结果 pET24b-Mtb81在大肠杆菌BL21(DE3)细胞内以包涵体形式存在,表达量占菌体总蛋白的30%左右.纯化后的Mtb81样品经SDS-PAGE和光密度扫描分析表明其纯度为95%左右.纯化后的Mtb81蛋白通过Western-blot鉴定,结果显示:加入结核病人血清抗体于目的蛋白位置有一条显色带,而加入正常人血清组则无显色反应;酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,检测30例结核病人及正常人血清中的抗体,结果显示:rMtb81的特异性和灵敏度分别为96%、93%.结论 pET24b -Mtb81大肠杆菌工程菌株能高效表达Mtb81蛋白,Western-blot结果证明表达蛋白具有很好的免疫反应性和抗原特异性;ELISA结果证明重组Mtb81检测结核病人血清中的抗结核抗体,具有较高的灵敏度和特异性.
-
洋葱中黄酮类化合物对结核分支杆菌的抑菌作用研究
目的 探讨洋葱中黄酮类化合物对结核分支杆菌的抑菌作用.方法 选用56株结核分枝杆菌临床分离株作为研究对象,结核分枝杆菌标准菌株(H37RV)为对照用菌株,通过分格平板琼脂比例法抑菌试验,观察不同浓度洋葱中黄酮类化合物、黄酮与一线抗结核药物联合使用对结核分支杆菌的抑菌作用;小鼠腹腔巨噬细胞与结核分支杆菌共同孵育后,将细胞分为对照组、560μg/ml黄酮组、280μg/ml黄酮组、140μg/ml黄酮组、28μg/ml黄酮组、异烟肼(INH)组,给予相应药物干预,通过实时荧光定量PCR法检测巨噬细胞吞噬的结核分支杆菌DNA水平,通过ELISA法检测细胞培养液中细胞因子水平.结果 与2.0μg/ml INH、1.0μg/ml利福平(REP)、5.0μg/ml乙胺丁醇(EMB)、2.0μg/ml链霉素(SM)比较,28μg/ml黄酮敏感率较低,560μg/ml、280μg/ml黄酮敏感率较高,差异有统计学意义(P<0.05),560μg/ml黄酮及280μg/ml黄酮敏感率无明显差异(P>0.05).与2.0μg/ml INH、1.0μg/ml REP、5.0μg/ml EMB、2.0μg/ml SM比较,各药物联合使用280μg/ml黄酮后敏感率均较高,差异有统计学意义(P<0.05).与INH组比较,280μg/ml黄酮组、560μg/ml黄酮组巨噬细胞吞噬的结核分支杆菌DNA扩增Ct值及拷贝数较高,28μg/ml黄酮组巨噬细胞吞噬的结核分支杆菌DNA扩增Ct值及拷贝数较低,差异有统计学意义(P<0.05).与INH组比较,280μg/ml黄酮组、560μg/ml黄酮组细胞培养液中水平IFN-γ、IL-1β水平较高,28μg/ml黄酮组细胞培养液中水平IFN-γ、IL-1β、IL-6水平较低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 洋葱中黄酮类化合物对结核分支杆菌有明显的体外抑菌作用,能够协同INH、REP、EMB及SM抑菌,还能促进巨噬细胞释放IFN-γ、IL-1β等细胞因子,提高巨噬细胞吞噬结核分枝杆菌的能力,在≤280μg/ml范围内,黄酮类化合物浓度越高作用越强.
-
2005至2008年住院肺结核患者不同年龄组结核分支杆菌耐药结果分析
耐药结核病的增多与传播,是造成当今世界结核病发病率回升的重要原因之一.加强结核分枝杆菌的检测(监测)和药物敏感试验,分析耐药流行趋势是非常重要的.
-
泌尿系结核28例临床分析
目的：提高泌尿系结核的诊断水平。方法：回顾性分析28例泌尿系结核患者的临床资料，总结其诊断经验。结果：静脉肾盂造影检出率53.5％、C T平扫+增强检出率64.2％，膀胱镜膀胱粘膜活检检出率70％，在泌尿系结核感染病例中有较高的阳性率。尿沉渣找抗酸杆菌阳性率较低22.2％，血结核抗体，P P D试验及B超检查对泌尿系结核感染诊断的特异性较低。结论：泌尿系结核的临床诊断应综合分析临床表现、尿液和血液检查、影像学检查、病原学检查,诊断性抗结核治疗等多方面资料，才能更好的做出判断。
-
中药在耐多药结核分支杆菌感染中的应用前景
目的 耐多药结核分枝杆菌(MDR-TB)感染是造成结核病重新流行的重要原因之一.中药在难治性结核病的治疗中有独到的优势,从天然药物中选择和研究抗结核新药具有重要意义.本文对近年来关于中药单方和复方抗结核机制的研究做了简单回顾,并对其在MDR-TB感染中的应用前景进行了评估.
-
蛋白芯片法检测结核分支杆菌抗体及其临床应用
目的:通过对蛋白芯片法和常用结核分支杆菌抗体检测的方法比较,评价蛋白芯片法检测结核抗体的临床价值.方法:用蛋白芯片法和胶体金法检40例结核确诊患者、20例健康体检者和76例结核疑似病例,并进行相关统计学分析.结果:蛋白芯片法和胶体金法检出结核分支杆菌抗体的敏感度分别为92.5%、75%,特异性为95%、90%,阳性预测值分别为97.4%、93.7%,阴性预测值分别为86.4%、64.3%,P＞0.05,两者之间无显著性差异,但蛋白芯片法对临床标本检测阳性率明显高于胶体金法(P＜0.05).结论:蛋白芯片法检测结核分支杆菌抗体的特异性强,敏感度更高,是实验室诊断结核病重要、有效手段.
-
18例艾滋病合并结核病临床分析
艾滋病(AIDS)患者和人类免疫缺陷病毒,HIV,感染者逐年增多,艾滋病患者中有1/3同时感染了结核分支杆菌[1],且两病互相影响,互为因果[2].对2003年-2006年收治的18,例艾滋病合并结核病的患者进行分析讨论,报告如下:
-
结核病变组织中卡介苗多克隆抗体的表达及意义
结核分支杆菌(MTB)感染所引起的结核病是威胁人类健康的重要传染病之一.在日常病理工作中,有些结核性病变在病变早期由于病变时间长、继发感染等原因使结核性病变在形态学上未形成典型的结核病变,此时单靠苏木素-伊红(HE)染色难以作出准确的诊断.且有些非结核性肉芽肿病变也容易误诊为结核;用传统的细菌学抗酸染色对结核杆菌的检出率极低.为此本研究应用免疫组织化学染色技术探讨卡介苗(BCG)多克隆抗体在结核性病变组织中的表达及意义.
-
利用尿素酶试验测定结核分支杆菌耐药性的方法学研究
目的:利用尿素酶试验的方法对结核分枝杆菌的耐药性进行检测.方法:采用液体结核分枝杆菌的培养基加尿素和酚红指示剂,高压消毒灭菌,将分离纯培养的结核分枝杆菌接种其中, 再加入不同浓度的抗结核分枝杆菌的药物培养,分别设阳性和阴性对照.待阴、阳性对照结果完全清晰时,终止培养,观测结果.结果:结核分枝杆菌、在500 cfu/mL以上时,结果在3 d～7 d内显现;在500条以内时,其结果在培养7 d～10 d内显现;阳性菌株中,通过加温处死,其尿素酶试验均为阴性;与传统的绝对浓度法比较,差异无显著性(χ2=2.25,P＞0.10).结论:尿素酶试验方法快速、简便,将对结核分枝杆菌耐药性检测提供一种新方法.
