首页 > 文献资料
-
CD2胞内区结合蛋白的分子克隆及其功能研究
CD2分子分布于胸腺细胞、所有的成熟T淋巴细胞和大部分天然杀伤细胞的表面,是T细胞粘附和信号分子,在细胞分化成熟、识别、粘附、激活和凋亡等方面具有重要作用.
-
Nature：细胞之间的竞争与癌症
5月14日《自然》（Nature）杂志上的一篇文章中，来自德国的研究人员Martins和同事们发现缺乏来自骨髓移居细胞的竞争会造成定位胸腺的祖细胞发生遗传转变导致肿瘤形成。有趣的是，定位胸腺的祖细胞转变生成的肿瘤类型在很多方面与人类T细胞急性淋巴细胞白血病相似，包括基因组改变、细胞基因转录图谱和存在Notch1基因激活突变。这些结果表明，细胞竞争是骨髓源性的祖细胞替代定位胸腺的祖细胞的必要条件，如果这一过程遭到破坏胸腺细胞会癌变。这一研究发现有可能会对癌症治疗造成深远的影响。 T细胞急性淋巴细胞白血病是一种侵袭性的癌症，相比于更为常见的B细胞白血病其更加抵抗化疗。靶向与细胞竞争相关的一些基因有可能为治疗和诊断T细胞白血病提供了一条新途径。
-
五味子多糖对环磷酰胺诱导的小鼠胸腺细胞凋亡的保护作用
目的 探讨五味子多糖对环磷酰胺(Cyclophosphamide,CY)诱导小鼠胸腺细胞凋亡的保护作用及相关机制.方法 小鼠腹腔注射CY,建立胸腺细胞凋亡模型,施以不同浓度五味子多糖灌胃,利用流式细胞仪、末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEI,染色)及Bcl-2,Bax免疫组化分别观察不同剂量的五味子多糖对CY 诱导的胸腺细胞凋亡的影响及机制.结果 流式细胞仪和TUNEL染色显示CY组与对照组相比的细胞凋亡率明显增高,五味子多糖治疗组与CY组比较凋亡率明显降低(P<0.01).CY组bcl-2基因表达明显下降,bax 基因表达明显增加,Bcl-2/Bax比值下降.五味子多糖组与之相反,二者比值升高(P<0.01).结论 五味子多糖能够抑制CY诱导的胸腺细胞凋亡,降低胸腺细胞的损伤,其抑制作用可能通过促进Bcl-2表达、抑制Bax 蛋白表达实现的.
-
Fas/Fas-L介导热应激诱导的胸腺细胞凋亡
目的探讨体外热应激诱导小鼠胸腺细胞凋亡与Fas、Fas-L表达的关系.方法用流式细胞术检测体外热应激后再培养的胸腺细胞不同时间的凋亡率及Fas、Fas-L表达阳性率.结果体外热应激诱导胸腺细胞的凋亡率和Fas及Fas-L表达阳性率均呈时间依赖性增高,体外热应激诱导胸腺细胞Fas/Fas-L的表达与凋亡明显相关.结论Fas与Fas-L是介导体外热应激损伤胸腺细胞凋亡的重要分子.
-
不同剂量地塞米松对小鼠胸腺细胞凋亡的影响
目的 探讨地塞米松诱导小鼠胸腺细胞凋亡的适宜剂量.方法 小鼠腹腔注射不同剂量(20、40、50mg/kg)地塞米松后12 h处死,提取胸腺细胞DNA,用琼脂糖凝胶电泳方法观察DNA梯形条带(DNA ladder),再用流式细胞术和电镜检测胸腺细胞凋亡情况.结果 40、50 mg/kg地塞米松组出现DNA ladder,流式细胞术发现凋亡峰,电镜观察显示凋亡小体.结论 40 mg/kg地塞米松可诱导小鼠胸腺细胞凋亡.
-
黄连素对脑缺血再灌注小鼠胸腺细胞的保护作用
目的:研究黄连素(Ber)对脑缺血再灌注(MCAO/R)小鼠胸腺细胞的保护作用.方法:用线栓法建立小鼠脑缺血再灌注(MCAO/R)模型,缺血1h,再灌注24h,实验动物共分为3组:正常组、手术组和给药组(腹腔注射黄连素质量分数为5 mg/kg),缺血0.5h和再灌注12 h各给药1次.24h后取小鼠胸腺计算其胸腺指数,并取胸腺细胞利用SYTOX Green染色法联合荧光酶标仪检测细胞活性；AFM检测细胞形貌的变化；流式细胞仪结合Calcein/CoCl2或JC-1染色检测早期细胞凋亡率.结果:MCAO/R可引起胸腺明显萎缩；SYTOX Green染色结果显示MCAO/R损伤引起细胞高死亡率(P ＜0.05)；AFM结果表明细胞表面形态发生显著变化(细胞高度差显著减小(P＜0.01)；粗糙度变大(P＜0.05)；Calcein/CoCl2和JC-1结果显示脑缺血再灌注后小鼠胸腺细胞的凋亡率显著增高(P＜0.01),而黄连素能显著改善胸腺的萎缩(P＜0.01),降低细胞的死亡率(P＜0.05),改善MCAO/R引起的细胞高度(P＜0.01)、粗糙度的变化(P＜0.05)和降低细胞的凋亡率(P＜0.05).结论:黄连素可能通过抑制胸腺细胞的凋亡而发挥对脑缺血再灌注的保护作用.
-
CD1d分子研究进展
传统观点认为, 肽类抗原是引起T淋巴细胞免疫反应的唯一物质.然而近年来研究发现,脂类、糖脂类抗原也可通过CD1d介导特异性激活自然杀伤T细胞(NKT细胞).CD1d是CD1家族中的一员,在胸腺细胞、B细胞亚群、表皮朗罕细胞、树突状细胞亚群、肠道上皮细胞中表达,是一类功能类似于MHCⅠ类分子又独立于MHCⅠ分子之外的具有抗原提呈作用的非多肽性跨膜糖蛋白分子.CD1d分子激活NKT细胞后具有抗肿瘤、抗病毒、抗病菌作用.因此,成为国内外学者研究热点.本文拟对CD1d分子的新研究进展作一综述.
-
胸腺基质细胞研究方法的进展
胸腺基质细胞(thymic stromal cell,TSC)是指胸腺内的非胸腺细胞,主要由上皮细胞(thymi epithelial cell,TEC)、成纤维细胞(thymic fibroblast cell,TFC)、巨噬细胞(thymic macrophage,TM )、树突状细胞(thymic deutrtic cell,TDC)组成[1,2].近来还发现有肥大细胞(mast cell)[3]和B细胞(thymic B cell,TBC)[4].
-
针刺足三里、关元穴对脓毒症大鼠胸腺细胞凋亡的影响
目的 观察电针足三里、关元穴对脓毒症大鼠胸腺细胞凋亡的影响.方法 将大鼠随机分成正常对照组、模型组、针刺组.采用盲肠结扎穿孔(CLP)致腹腔感染脓毒症模型,应用流式细胞仪以Annexin-PI双染色法及光镜、透射电镜观察CLP致腹腔感染后36h胸腺淋巴细胞的凋亡情况,应用放射免疫法测定脑垂体和外周血血管活性肠肽(VIP)含量的变化.结果 CLP致腹腔感染可导致胸腺细胞凋亡增多,电镜和光镜显示其典型的形态学特征,模型组、针刺组的胸腺细胞凋亡率高于正常对照组;而针刺组的胸腺细胞凋亡率低于模型组.CLP致腹腔感染后脑垂体和外周血中VIP含量下降,模型组、针刺组脑垂体VIP含量低于正常对照组;而针刺组脑垂体VIF-含量高于模型组.模型组、针刺组外周血中VIP含量低于正常对照组;而针刺组外周血中VIP含量高于模型组.结论 电针足三里、关元穴可以减轻CLP致腹腔感染脓毒症大鼠胸腺细胞凋亡,其机理可能与VIP的合成和释放增多有关,并通过这些免疫递质对神经-内分泌-免疫调节网络发挥作用.
-
Cyclin D1在视黄酸诱导胸腺细胞分化中的作用研究
目的:探讨视黄醇类化合物促胸腺细胞分化的分子机制.方法:选择幼年小鼠胸腺细胞为研究对象,采用免疫组化染色、Western blot、流式细胞分析等实验方法,观察全反式视黄酸(ATRA)或视黄醇(Retinol)灌胃给药后对胸腺细胞分化成熟的影响,同时检测周期调控蛋白cyclinD1及相应基因表达变化情况.结果:ATRA和Retinol均可抑制胸腺细胞增殖活性,使胸腺组织中成熟功能T细胞比例增大;胸腺细胞cyclinD1、CDK4和RB基因表达呈时间剂量依赖性下调,而P16、P21蛋白表达上调,且ATRA作用优于Retinol.结论:RA可能经PRb、P16等多因素反馈调节cyclinD1和CDK4表达,抑或直接同其发生作用,进而影响胸腺细胞增殖分化的变化.
-
阻断p38途径对地塞米松诱导的胸腺细胞凋亡的影响
目的 研究阻断p38途径对地塞米松(dexamethasone, DEX)诱导的胸腺细胞凋亡的影响.方法 Western Blott检测DEX对p38途径的阻断作用.以SB203580(SB)阻断BALB/c小鼠胸腺细胞p38途径,在3、5和7 h,利用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;利用DiOC6(3)/PI双染流式细胞术检测线粒体膜电势(△ψm)和细胞膜完整性变化.结果 DEX显著减少了胸腺细胞p38蛋白含量;阻断p38后DEX诱导小鼠胸腺细胞晚期凋亡率显著增加(P＜0.01);DEX诱导了胸腺细胞△ψm降低,同时阻断p38途径后,DiOC6(3)阴性PI阳性细胞显著增多(P＜0.01).结论 阻断p38后加速了DEX介导的小鼠胸腺细胞凋亡中细胞膜完整性的破坏,该现象可能与线粒体功能有关.
-
拯阳汤的含药血清对阳虚小鼠免疫功能的影响
目的:采用血清药理学实验方法,观察拯阳汤的含药血清对阳虚小鼠免疫功能的影响.方法:采用氢化可的松(HC)阳虚小鼠模型,用MTT法检测腹腔巨噬细胞(pMф)的活化作用及其分泌IL-1的活性,脾脏T 淋巴细胞的增殖活性及其分泌的IL-2的活性,并用原位末端标记方法(TUNEL)检测胸腺细胞凋亡情况.结果:拯阳汤含药血清对阳虚小鼠腹腔巨噬细胞活化作用及其分泌的IL-1活性在一定剂量范围内均具有促进作用,但大剂量的促进作用有减弱趋势;对脾脏T 淋巴细胞增殖活性及其分泌IL-2活性在一定剂量范围内亦均具有促进作用,大剂量的促进作用亦有减弱趋势;对胸腺细胞凋亡的抑制作用在一定剂量范围内成正比,剂量越大,作用越强.结论: 拯阳汤含药血清对阳虚小鼠腹腔MΦ的活化及其分泌的IL-1活性、脾脏T淋巴细胞增殖及其分泌的IL-2在一定剂量范围内具有促进作用,对阳虚小鼠的胸腺细胞凋亡的抑制作用在一定剂量的范围内呈量-效关系.
-
胸腺基质细胞对热应激小鼠胸腺细胞亚群变化及HSP70表达的影响
目的 探讨胸腺基质细胞(TSC)对热应激小鼠胸腺细胞的调节作用.方法 应用光镜、电镜、流式细胞术等观察初代培养的TSC对热应激胸腺细胞发育的调节作用.结果 TSC可大量粘附和吞噬胸腺细胞,使热应激胸腺细胞数量明显减少,但尚存的胸腺细胞中活细胞比例却明显增加,凋亡率明显减少.TSC可促进热应激胸腺细胞HSP70表达增加,使热应激胸腺细胞的DP及SP细胞,尤其是DP细胞数量明显减少.结论 TSC可清除大量的热应激胸腺细胞,TSC促进热应激胸腺细胞HSP表达增高可能具有双重意义:既可保护胸腺细胞,又可促进TSC识别和吞噬已受损的或凋亡的胸腺细胞.
关键词： 胸腺基质细胞 胸腺细胞 热应激 CD4CD8细胞业群 热休克蛋白70 -
鲑鱼鱼白DNA对老龄小鼠胸腺细胞IL-7mRNA和CD127表达的影响
目的探讨外源性核酸对自然衰老小鼠胸腺细胞IL-7mRNA和CD127(IL-7受体)表达的影响.方法 10月龄雌性Balb/c小鼠按体质量随机分为高剂量组(每日灌胃333.33 mg·kg-1·d-1鲑鱼鱼白DNA)、低剂量组(每日灌胃166.67 mg·kg-1·d-1鲑鱼鱼白DNA)和对照组(0.1 mol/L的柠檬酸钠).5周后测定胸腺脏器指数;原位杂交法检测胸腺内IL-7mRNA的表达,并用Image-pro Plus专业图像分析系统(4.0版)对其表达面积百分比进行分析;间接免疫荧光流式细胞术检测老龄小鼠胸腺细胞CD127的表达.结果鲑鱼鱼白DNA提取物对小鼠的体质量、胸腺质量和胸腺指数均没有影响,但高剂量SMD补充组可显著增加胸腺细胞IL-7mRNA表达和CD127淋巴细胞的数量(分别P<0.05).结论补充鲑鱼鱼白DNA可能促进IL-7的产生及其受体的表达,从而延缓Balb/c小鼠胸腺的退化萎缩.
-
鲑鱼鱼白DNA对老龄小鼠胸腺淋巴细胞构成的影响
目的探讨外源性核酸对自然衰老小鼠CD3+、CD3+CD4+和CD3+ CD8+胸腺淋巴细胞构成的影响.方法 10月龄雌性Balb/c小鼠按体质量随机分为高剂量组、低剂量组和对照组.5周后,测定胸腺脏器指数;胸腺组织切片后以Ima ge-pro Plus专业图像分析系统(4.0版)计数胸腺细胞;采用直接免疫荧光流式细胞术检测老龄小鼠胸腺细胞CD3+、CD3+CD4+和CD3+CD8+的表达情况.结果鲑鱼鱼白DNA提取物对小鼠的体质量、胸腺质量和胸腺指数均没有影响,但可增加小鼠的胸腺皮质和髓质细胞数量,并提高CD3+、CD3+CD4+和CD3+CD8+淋巴细胞的比例, 而对CD3+CD4+和CD3+CD8+淋巴细胞的比值没有影响.结论补充鲑鱼鱼白DNA可能改变自然衰老Balb/c小鼠胸腺细胞的构成,使胸腺有效细胞数量增加,从而可能延缓胸腺的退化萎缩.
-
Fas/Fas-L与体外热应激胸腺细胞亚群变化及凋亡的关系
目的探讨体外热应激胸腺细胞的亚群变化及凋亡与胸腺细胞表达Fas、Fas-L的关系.方法用流式细胞术检测体外热应激后再培养的胸腺细胞不同时间的凋亡率、CD4CD8亚群及表达Fas、Fas-L的阳性率.结果体外热应激胸腺细胞的凋亡率和表达Fas及Fas-L的阳性率均呈时间依赖性增高,凋亡的胸腺细胞以CD4+CD8+双阳性胸腺细胞为主.结论热应激主要诱导CD4+CD8+胸腺细胞凋亡;Fas与Fas-L是介导热应激胸腺细胞凋亡的重要分子.
-
T-ALL中两种新的TCRδ基因重排δRec151051-Jδ1和δRec151298-Jδ1
目的分析T细胞急性淋巴细胞白血病(T-ALL)细胞中TCRδ基因新的重排形式及其在正常人外周血和胸腺细胞中的分布情况.方法利用半巢式PCR扩增2例T-ALL、10例正常人外周血和7例正常人胸腺细胞DNA的TCRδ基因组片段,了解其重排情况,克隆性PCR产物进一步进行核苷酸序列分析确定重排位置,并进一步经RT-PCR检测其重排基因的表达情况.结果在2例T-ALL病人白血病细胞发现两种新的TCR δRec-Jδ1基因重排方式,称为δRec151051-Jδ1和δRec151298-Jδ1,该新的TCR δRec基因重排同时见于大多数正常人外周血和胸腺.RT-PCR显示该两种TCR δRec-Jδ1基因重排的产物可见于2例T-ALL中,而正常人为阴性. 结论本研究发现两种新的TCR δRec151051-Jδ1和δRec151298-Jδ1基因重排.该重排基因表达于T-ALL中,而正常人不表达该重排基因,提示该重排形式可能与T细胞白血病的形成有一定的关系.
-
正常人外周血和胸腺T细胞中TCR δRec151051-Jδ1和δ Rec151298-J δ 1基因重排的分布特点
目的分析正常人外周血和胸腺细胞中TCR δRec151051-Jδ1和δRec151298-Jδ1基因重排分布特点.方法利用半巢式和巢式PCR扩增10例正常人外周血单个核细胞(PBMCs)、4例分选的外周血CD3+T细胞和7例正常人胸腺细胞DNA的TCR δRec基因与J δ 1、Dδ3和ψJα重排的基因片段,从不同含量DNA的PCR分析,了解其重排分布频率.结果 TCR δRec151051分别与Jδ1、Dδ3和ψJα的重排和TCR δRec151298-Dδ3重排见于大多数外周血T细胞和胸腺细胞中,而TCR δRec151298与Jδ1和ψJα的重排则多见于胸腺细胞中.对不同含量的DNA的PCR分析显示δRec重排的分布频率在外周血和胸腺细胞有所不同.结论 TCR δRec151051、TCR δRec151298与Jδ1、Dδ3和ψJα的重排均存在于多数正常人T细胞中,TCR δRec151051-Dδ3常见于成熟和未成熟T细胞中,而TCR δRec151298-J δ 1和TCR δRec151298-ψJα则主要见于未成熟T细胞中.
-
重症肌无力患者胸腺细胞基因突变的初步探讨
目的探讨重症肌无力(MG)胸腺细胞异常增生的原因,揭示其发生机制.方法利用患者手术摘除的胸腺组织,分离胸腺细胞,进行体外培养并用植物血凝素(PHA)或地塞米松、雌激素诱导48 h,培养前后均从胸腺细胞提取RNA,反转录后,用三对引物分段扩增Fas cDNA,用银染法进行单链多态构象性分析(SSCP).结果正常人胸腺细胞诱导后均可见FasmRNA表达,大约有25%的MG患者胸腺细胞体外诱导未见Fas mRNA表达,部分Fas mRNA表达与未诱导时电泳条带存在差异.结论部分重症肌无力患者胸腺细胞Fas基因存在突变,这种突变可能是胸腺细胞异常增生的原因之一,与疾病的发生发展有关.
关键词： 重症肌无力 Fas基因 胸腺细胞 单链多态构象性分析鲻 -
TCR Dβ-Jβ sjTRECs检测方法的建立和应用
目的建立检测TCR Dβ-Jβ sjTRECs的方法,并了解不同T细胞受体Dβ-Jβ之间T细胞受体删除DNA环(sjTRECs)在胸腺细胞和外周血T细胞中的形成情况.方法利用巢式PCR分别扩增10例正常人外周血单个核细胞和3例正常胸腺细胞DNA中不同的Dβ片段和Jβ重排时形成的sjTRECs的情况,PCR产物进一步进行克隆和序列分析以确定结合区的位置.结果可检测到Dβ1与5个Jβ1基因片段、Dβ2与4个Jβ2基因片段分别形成的sjTRECs,其中以Dβ1-Jβ1S1、Dβl-Jβ1S2和IDβ2-Jβ2S2的sjTRECs常见,PCR产物经克隆和序列分析证实其形成Dβ-Jβ sjTRECs的情况.结论成功地建立了检测Dβ-Jβ-sjTRECs的方法,为分析各TCRβ亚家族的sjTRECs含量和确定TCRβnaive细胞提供了新方法.
