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白桦脂醇通过ER/MAPK信号通路对A375细胞黑素合成及机制
目的:研究植物雌激素成分白桦脂醇及加入受体阻断剂(ICI182780)后对A375细胞的黑素合成及机制的影响.方法:将1 μmol· L-白桦脂醇作用于A375黑素细胞,实验分为空白组(DMEM完全培养液),雌二醇组(1×l0-3μmol· L-1),白桦脂醇组(1 μmol·L-1),白桦脂醇+ICI182780组(1μmol· L-1+1 μmol· L-1).用NaOH裂解法检测黑素含量、蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量PCR法(Real-time PCR)测定雌激素受体/丝裂原激活的蛋白激酶(ER/MAPK)通路中关键蛋白激酶p38 MAPK,ERβ,c-Jun氨基末端激酶(JNK),细胞外信号调节激酶2(ERK2)和小眼畸形相关转录因子(MITF),酪氨酸酶(TYR),酪氨酸酶相关蛋白-1(TRP-1),酪氨酸酶相关蛋白-2(TRP-2)的蛋白及其mRNA表达.结果:与空白组比较,白桦脂醇组和白桦脂醇+ ICI182780组对A375细胞黑素合成有显著抑制作用(P＜0.01);1μmol· L-1的白桦脂醇对A375细胞中上述蛋白表达有不同程度的抑制作用(P ＜0.05,P＜0.01),对ERK2,MITF,TRP-1 mRNA的表达也有不同程度的抑制作用(P＜0.05,P＜0.01).与白桦脂醇组比较,ICI182780可以逆转白桦脂醇对A375细胞黑素合成的抑制作用(P＜0.01);ICI182780可以逆转白桦脂醇对A375细胞中上述蛋白表达的抑制作用及对ERK2,MITF,TRP-1 mRNA的表达的抑制作用(P ＜0.05,P＜0.01).结论:白桦脂醇能够通过ER/MAPK信号通路下调MITF,TYR,TRP-1及TRP-2蛋白表达量,从而减少黑素合成.
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补骨脂素对A375细胞黑素合成及ER/MAPK信号通路调控机制探讨
目的:探讨补骨脂素对A375细胞黑素含量、酪氨酸酶活性的影响及作用机制.方法:以密度2×105个/孔的细胞数接种于6孔板中,将细胞分为空白组、雌二醇组、补骨脂素组、补骨脂素+雌激素受体(ER)阻断剂组(ICI182780)(浓度分别为1×10-3,1,1 μmol· L-1).采用NaOH裂解法、多巴醌氧化法检测黑素含量及酪氨酸酶活性;蛋白免疫印迹法(Westernblot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)法测定ER/丝裂原激活的蛋白激酶(ER/MAPK)通路中关键蛋白激酶p38,c-Jun氨基末端激酶(JNK),细胞外信号调节激酶2(ERK2)和小眼畸形相关转录因子(MITF),多巴氧化法检测酪氨酸酶(TYR),酪氨酸酶相关蛋白-1(TRP-1),酪氨酸酶相关蛋白-2(TRP-2)的蛋白含量及相应mRNA表达.结果:与空白组比较,补骨脂素组对A375细胞中的黑素合成及TYR活性具有显著抑制作用(P＜0.01),对A375细胞中雌激素受体β(ERβ)蛋白的表达具有明显的抑制作用(P＜0.05),对p38 MAPK,ERK2,JNK的蛋白表达极显著的抑制作用(P＜0.01),对MITF,TYR,TRP-1,TRP-2的蛋白表达极显著的抑制作用(P＜0.01),对ERK2,p38 MAPK,MITF,TRP-1 mRNA表达显著被抑制(P＜0.01);与补骨脂素组比较,ICI182780能够逆转ERβ,ERK,MITF,TYR,TRP-1的蛋白表达(P＜0.01)及p38MAPK,JNK,TRP-2的蛋白表达(P＜0.05),同时能显著阻断补骨脂素对ERK2,p38MAPK,MITF,TRP-1 mRNA表达作用(P＜0.01).结论:补骨脂素通过ER/MAPK信号通路下调MITF和TYR,TRP-1,TRP-2的表达量,从而减少黑素合成.
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白桦脂醇对A375细胞黑素合成及相关细胞信号通路调控机制的研究
目的:探讨白桦脂醇治疗黄褐斑的内在作用机制.方法:选择对数生长期的A375细胞,培养24 h,弃掉液体,然后分组并加入不同浓度药液200 μL,组别设定为空白组、雌二醇组(1×10-3μmol·L-浓度的雌二醇)和白桦脂醇组(设定浓度的白桦脂醇),每组均设置6个复孔.用白桦脂醇干预A375细胞,噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性;NaOH裂解法检测黑素量;多巴氧化法检测酪氨酸酶(TYR)活性;逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测TYR,酪氨酸酶相关蛋白-1(TRP-1)和酪氨酸酶相关蛋白-2(TRP-2)的表达,及丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)信号通路中关键蛋白激酶ERK1,ERK2,JNK2的mRNA表达.结果:与空白组比较,白桦脂醇在1,1 ×10-1,1 ×10-2,1 ×10-3 μmol·L-1剂量下可明显抑制A375细胞黑素合成及TYR活性,1 μmol·L-白桦脂醇可明显下调A375细胞TYR,TRP-1,TRP-2 mRNA表达,以及ERK1,ERK2,JNK2 mRNA表达(P＜0.05,P＜0.01).结论:白桦脂醇可能是通过抑制TYR活性和/或下调TYR,TRP-1及TRP-2 mRNA表达,抑制了A375细胞中黑素的合成,并且这种作用与抑制ERK1,ERK2,JNK2的基因表达有关.
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miR-182靶向作用环磷酸腺苷反应元件结合蛋白1调控人黑素瘤A375细胞的增殖和侵袭
目的 探讨miR-182对人皮肤黑素瘤细胞系A375细胞的增殖与侵袭能力的影响,及miR-182影响黑色素细胞增殖的机制.方法 利用阳离子脂质体LipofectamineTM 2000将miR-182模拟物或抑制剂转染人黑素瘤A375细胞,以使miR-182过表达或低表达,采用MTT方法检测细胞活力变化,应用Transwell小室法检测A375细胞侵袭能力的变化,同时通过Real-time PCR检测核转录因子环磷酸腺苷反应元件结合蛋白1(CREB1) mRNA的表达情况,采用Western blotting检测CREB1蛋白的表达水平.结果 与对照组相比,miR-182沉默能够显著增强A375细胞增殖和侵袭能力,P＜0.01,显著降低CREB1蛋白与mRNA的表达水平,P＜0.01;miR-182过表达的作用与之相反.结论 miR-182沉默增强A375细胞增殖和侵袭能力可能与降低CREB1蛋白相关.
关键词： miR-182 增殖 侵袭 环磷酸腺苷反应元件结合蛋白1 转染 A375细胞 实时定量聚合酶链反应 人 -
G6PD缺陷诱发人黑色素瘤A375细胞凋亡机制研究
目的:探讨葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD)缺陷对A375细胞凋亡的影响及其可能的机制.方法:以A375-WT和A375-G6PD△细胞为模型,用Real-time PCR检测G6PD mRNA表达,蛋白质印迹法检测G6PD、Bcl-2、Bcl-xL、STAT5和P-STAT5蛋白的表达,紫外分光光度法测定G6PD酶活性,Heochst 33342/PI 双染流式细胞仪检测细胞凋亡,免疫组化观察STAT5蛋白核迁移.结果:A375-WT和A375-G6PD△细胞中G6PDmRNA分别为0.545±0.13和0.207±0.03,降低了62.02％,t=-5.854,P=0.028;G6PD蛋白分别为0.975±0.16和0.227±0.10,降低了76.72％,t=-21.593,P=0.002;G6PD酶的比活性分别为(0.088±0.023)和(0.024±0.008) U/mg;降低了72.23％,t=-7.390,P=0.018;A375-G6PD△细胞的凋亡率为(8.62±1.67)％,比A375-WT细胞的(2.37±0.78)％升高了3.64倍,t=-12.163,P=0.007; A375-G6PD△细胞抗凋亡蛋白Bcl-2的表达量为0.245±0.037,比A375-WT细胞的0.578±0.073降低了57.61％,t=-16.021,P=0.004;Bcl-xL的表达量为0.138±0.019,比A375-WT细胞的0.287±0.067降低了51.92％,t=-5.377,P=0.033;A375-G6PD△细胞的P-STAT5/STAT5比值为0.72±0.201,比A375-WT细胞的2.28±0.367降低了68.4％(P=0.004),细胞核内STAT5表达为0.051±0.012,比A375-WT细胞核的STAT5蛋白(0.093±0.018)降低了45％(P=0.007),STAT5核迁移减少.结论:转录因子STAT5磷酸化降低、活性下降是G6PD缺陷所诱发的人黑色素瘤A375细胞凋亡的重要因素之一,为黑色素瘤发生及治疗的研究提供了新的思路.
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姜黄素联合热疗对人黑素瘤A375细胞毒性的实验研究
目的 从细胞水平探讨姜黄素联合热疗治疗人恶性黑素瘤的可行性.方法 采用噻唑蓝(MTT)比色法检测不同处理因素对人恶性黑素瘤A375细胞增殖活性的影响,流式细胞仪检测A375细胞的凋亡情况.结果 30 μmol/L姜黄素联合热疗的细胞抑制率高于单纯姜黄素组和热疗组,差异具有统计学意义(F=5.47,P＜0.01);A375细胞增殖抑制率与姜黄素浓度呈正相关(rs=0.95);30 μmol/L姜黄素联合热疗组细胞早期凋亡率高于单纯姜黄素组和热疗组,差异具有统计学意义(H=15.37,P＜0.01).结论 姜黄素联合热疗对人恶性黑素瘤A375细胞的毒性起协同相加作用,细胞毒性与姜黄素的剂量成明显剂量-效应关系.
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干细胞因子及受体c-kit对A375细胞增殖和凋亡影响的体外研究
目的 利用基因工程方法建立稳定表达干细胞因子受体(SCF/c-kit)的恶性黑素瘤A375细胞株,再给予外源性SCF/c-kit,观察其对A375细胞增殖、凋亡的影响.方法 通过脂质体转染技术构建稳定表达c-kit的黑素瘤细胞株(hc-kit/A375),给予A375细胞和hc-kit/A375细胞外源性SCF,将所有的细胞分为A375组、A375-SCF组、hc-kit/A375组和hc-kit/A375-SCF组.应用MTT法及流式细胞仪分析细胞的增殖和凋亡,并应用酶联免疫吸附法(ELISA)和免疫组化方法检测肿瘤细胞血管内皮生长因子(VEGF),基质金属蛋白酶(MMP)-9及肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达.结果 ①通过脂质体介导能将c-kit-pcDNA3.1neo重组质粒成功转染入黑素瘤细胞,建立稳定表达c-kit的黑素瘤细胞株hckit/A375,hc-kit/A375细胞中c-kit表达明显增加.②给予外源性SCF后,细胞的生长受到抑制,以培养后第5天尤为显著；细胞的凋亡率明显增加,S期比例降低,且hc-kit/A375-SCF组尤明显.③转染后细胞及加入SCF干预组VEGF、MMP-9分泌减少,而TNF-α的分泌增加.结论 通过脂质体转染和G418筛选成功构建稳定表达c-kit的A375细胞株；通过增加A375细胞中SCF/c-kit的表达能改变肿瘤细胞对VEGF、MMP-9、TNF-α的分泌,抑制肿瘤细胞的增殖,促进其凋亡.
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PI3K抑制剂ZSTK474对人黑素瘤A375细胞增殖和细胞周期的影响
目的 探讨PI3K抑制剂ZSTK474对黑素瘤A375细胞的抗肿瘤作用及其分子机制.方法 MTT法检测ZSTK474对A375细胞的增殖抑制活性;流式细胞术结合Western印迹法分析ZSTK474对A375细胞周期分布及相关蛋白cy?clinB1和cdc2表达水平的影响;Chou-Talalay法评价ZSTK474与CDK4/6抑制剂PD0332991的联合效应.结果 MTT结果表明,ZSTK474能以剂量依赖性方式抑制细胞增殖,IC50值为1.535 μmol/L;流式细胞术结果显示,ZSTK474在1和5 μmol/L浓度下诱导A375细胞G2/M期阻滞;Western印迹法结果表明,ZSTK474在这两个浓度下显著下调细胞周期相关蛋白cyclinB1、cdc2蛋白表达水平,且呈剂量依赖性.联合用药结果显示,当ZSTK474与PD0332991采用8×IC50 ZSTK474:1×IC50 PD0332991药物浓度比例联合应用时,ED50、ED75以及ED90的联用系数(CI)值分别为0.463±0.113,0.658±0.009和0.941±0.034,说明具有较好的协同作用.结论 ZSTK474抑制A375细胞增殖,将细胞周期阻滞在G2/M期.ZSTK474与PD0332991联用具有协同作用.提示ZSTK474单用或与PD0332991联用可用于黑素瘤的治疗.
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全反式维甲酸对恶性黑素瘤A375细胞VEGF表达的影响
目的 研究全反式维甲酸(ATRA)对体外培养恶性黑素瘤A375细胞VEGF表达影响.方法 应用Real-time PCR检测A375细胞VEGF-B在基因水平的表达.应用ELISA法检测A375细胞上清中VEGF蛋白水平的表达.结果 ATRA可降低A375细胞培养上清的VEGF的mRNA表达和血清浓度,与对照组相比有统计学意义(P<0.05).结论 ATRA可在mRNA和蛋白水平下调A375细胞VEGF的表达,且这种抑制作用呈时间剂量依赖关系.
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马钱苷抑制人恶性黑色素瘤细胞的作用及机制研究
目的 探索马钱苷抑制人恶性黑色素瘤细胞的作用和机制.方法 将实验分为空白对照组、不同干预浓度(10、20、40、60、80 ng/mL)的马钱苷组,分别作用24、48、72 h,采用MTT方法检测细胞活性;依据药物作用48 h时的IC50浓度[(74.96±7.92)ng/mL],选取马钱苷20、40、60 ng/mL分别干预48 h,并采用RT-PCR法检测细胞内Bcl-2、Bax和Caspase-3 mRNA表达水平的变化;用Western blot检测细胞内Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白水平的变化.结果 马钱苷具有抑制A375细胞增殖的作用,并呈时间和剂量依赖性.与空白对照组比较,马钱苷组细胞抑制凋亡因子Bcl-2的mRNA和蛋白质表达水平均明显下调(P＜0.05或P＜0.01),促凋亡因子Bax和Caspase-3的mRNA及蛋白质表达均明显上调(P＜ 0.05或P＜ 0.01).结论 马钱苷能抑制A375细胞增殖,其作用机制可能与下调细胞Bcl-2 mRNA与蛋白质的表达,上调Bax、Caspase-3 mRNA和蛋白质的表达,进而诱导细胞凋亡有关.
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阿魏酸对过氧化氢诱导A375细胞凋亡的保护作用研究
目的 观察阿魏酸对氧化应激诱导的黑素细胞凋亡的影响.方法 采用随机数字表法将A375细胞分为五组:空白对照组,模型组,阿魏酸高、中、低浓度组.空白对照组常规培养,模型组和阿魏酸各浓度组培养基中加入过氧化氢,使其终浓度为0.1 mmol/L,处理4h.采用荧光染料DAPI染色细胞,荧光显微镜观察各组细胞凋亡情况,Caspase活性试剂盒测定各组细胞Caspase活性.结果 与空白对照组相比,模型组Caspase-3、8、9活性水平显著升高,差异有统计学意义(P＜0.01).模型组细胞核、细胞质内可见致密浓染的颗粒,松散淡染的新月体或环状荧光,提示过氧化氢可诱导A375细胞凋亡.与模型组比较,阿魏酸高浓度组可显著下调Caspase-3和Caspase-8的表达,差异有统计学意义(P＜ 0.05或P＜0.01),但对Caspase-9作用不明显.阿魏酸高剂量组细胞核呈均匀亮蓝色,无致密凝集现象,阿魏酸低、中浓度组大多数细胞细胞核出现染色质凝集和边缘化.结论 阿魏酸通过下调过氧化氢诱导的Caspase活性而起到保护黑素细胞凋亡作用.
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大麻素Ⅱ型受体激动剂对A375细胞增殖的影响
目的 观察大麻素Ⅱ型受体激动剂JWH-133和WIN55,212-2对A375细胞增殖的抑制作用.方法 以人恶性黑素瘤A375细胞和人永生化角质形成细胞株HaCat为体外实验模型,RT-PCR检测CB-R2在A375细胞中mRNA水平的表达;不同剂量大麻素Ⅱ型受体激动剂JWH-133和WIN55,212-2处理组.MTT法测定大麻素Ⅱ型受体激动剂JWH-133和WIN55,212-2对A375细胞增殖的影响.结果 ①人恶性黑素瘤A375细胞和人永生化角质形成细胞株HaCat在mRNA水平均表达CB-R2;②不同浓度(0.01,0.1,1,10,100μmol/L)大麻素Ⅱ型受体激动剂JWH-133和WIN55,212-2抑制A375细胞增殖,抑制作用48h达高峰;③比较大麻素Ⅱ型受体激动剂JWH-133和WIN55,212-2两种药物对A375细胞增殖的抑制作用差异无统计学意义(P＞0.05).结论 ①A375细胞在mRNA水平表达CB-R2;②JWH-133和WIN55,212-2抑制A375细胞增殖.
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白藜芦醇对人恶性黑色素瘤细胞A375增殖和凋亡的影响
目的 探讨白藜芦醇对人黑色素瘤细胞A375体外增殖和凋亡的影响及其作用机制.方法 用不同浓度的白藜芦醇作用于人黑色素瘤细胞A375,通过MTT法和HE染色法检测白藜芦醇对细胞增殖的影响;TUNEL末端标记法和Annexin V-FITC双标记流式法检测白藜芦醇对细胞凋亡的影响.结果 不同浓度白藜芦醇对人黑色素瘤A375细胞均有抑制增殖和促进凋亡的作用,并存在剂量和时间依赖性.结论 达到一定浓度的白藜芦醇对人黑色素瘤A375细胞有明显的抑制增殖作用,主要通过诱导A375细胞凋亡(主要是早期凋亡)抑制其增殖.
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miR-128对人黑素瘤细胞A375增殖和PTEN及p-Akt蛋白表达的影响
目的 研究miR-128对人皮肤黑素瘤细胞系A375的增殖能力和对PTEN及p-Akt蛋白表达的影响,探讨miR-128影响黑色素细胞增殖的机制.方法 将miR-128 mimics或inhibitor应用阳离子脂质体LipofectamineTM2000转染A375细胞,MTT检测转染后细胞增殖活力变化,Western blot方法检测PTEN及p-Akt蛋白表达.结果 转染miR-128 mimics后,A375细胞增殖活力明显增强,p-Akt蛋白表达明显上调,PTEN蛋白表达显著降低;转染miR-128 inhibitor后,A375细胞增殖活力明显降低,p-Akt蛋白表达明显下调,PTEN蛋白表达显著升高.结论 miR-128促进人黑素瘤细胞A375增殖可能与调控PTEN及p-Akt的表达相关.
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miR-181b通过靶定CREB1抑制人黑素瘤A375细胞的增殖和侵袭
目的 研究miR-181b对人黑素瘤细胞系A375的增殖与侵袭能力的影响.方法 利用阳离子脂质体LipofectammeTM2000将miR-181b mimic或inhibitor转染入黑素瘤A375细胞,以使miR-181b过表达或低表达,采用MTT方法检测细胞活力变化,应用Transwell小室法检测A375细胞侵袭能力的变化,同时通过qRT-PCR检测核转录因子cAMP反应元件结合蛋白1(CREB1) mRNA的表达情况,采用Western blot检测CREB1蛋白的表达水平.结果 与对照组相比,miR-181b沉默能够显著增强A375细胞增殖和侵袭能力,显著降低CREB1蛋白与mRNA的表达水平(P＜0.01);miR-181b过表达的作用与之相反.结论 miR-181b沉默增强A375细胞增殖和侵袭能力可能与降低CREB1蛋白相关.
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外源性CSMD1对黑色素瘤A375细胞活性的影响
目的 研究经pCDNA-3.0-CSMD1转染的A375细胞的活性,探讨外源性CSMD1的表达对黑色素瘤细胞活性的影响.方法 培养人黑色素瘤A375细胞株,利用前期实验获得的CSMD1基因,构建质粒、转染细胞.A375细胞分为:A组,未转染的A375细胞;B组,经pCDNA-3.0转染的A375细胞;C组,经pCDNA-3.0-CSMD1转染的A375细胞.应用MTT法、细胞周期分析法、细胞凋亡相关检测(DAPI染色、Annexin V-FITC/PI双染、Transwell细胞迁移实验)等方法,检测A375细胞的活性,并进行统计学分析.结果 C组细胞的增殖率明显低于其他两组细胞(P＜0.05);C组细胞G1期的比例高于其他两组细胞(P＜0.05);仅在C组细胞中发现凋亡细胞核固缩,并在48 h内出现核碎裂;C组细胞凋亡率为32.7％,明显高于A组(6.6％)和B组(8.4％)细胞(P＜0.05);与A组和B组细胞相比,C组细胞极少迁移至聚碳酸酯膜下层(P＜0.05).结论 外源性CSMD1可以抑制黑色素瘤A375细胞的活性,这有可能为黑色素瘤的治疗提供一种新的途径.
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CSMD1在黑色素瘤A375细胞中的表达及意义
目的 研究CSMD1在黑色素瘤A375细胞中的表达情况,探讨CSMD1对A375黑色素瘤细胞的调控作用.方法 培养人黑色素瘤A375细胞株(实验组)和正常人皮肤TE353.Sk细胞株(对照组),应用RT-PCR及Western blot技术,检测CSMD1mRNA和蛋白在A375细胞和TE353.Sk细胞中的表达情况,并进行统计学分析.结果 与对照组正常人皮肤TE353.Sk细胞株相比,实验组人黑色素瘤A375细胞株中的CSMD1mRNA和蛋白的表达水平较低(P ＜0.05).结论 CSMD1可能是黑色素瘤细胞的抑制基因,可能为黑色素瘤的治疗提供一种新的研究方法.
关键词： CSMD1 黑色素瘤 A375细胞 TE353.Sk细胞 -
miR-489抑制黑色素瘤细胞的增殖
目的 检测miR-489对黑色素瘤细胞增殖的影响.方法 在黑色素瘤细胞A375中分别过表达或沉默miR-489后,通过MTT实验观察miR-489对细胞增殖的影响.进一步通过Western blotting和实时PCR检测miR-489对A375细胞中增殖相关蛋白CDK2和cyclin E的影响.结果 MTT检测发现,miR-489过表达后可以显著抑制A375细胞增殖,miR-489受到抑制后A375细胞的增殖受到促进.Western blotting和实时PCR检测发现,过表达miR-489可以抑制A375细胞中增殖相关蛋白CDK2和cyclin E蛋白的表达;miR-489受到抑制后蛋白表达增加.结论 miR-489对黑色素瘤细胞的增殖有一定的抑制作用,可能作为黑色素瘤诊疗的新靶点.
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补骨脂酚对人A375细胞黑素生成及MAPK信号通路干预作用研究
目的 探讨补骨脂酚抑制A375细胞的黑素合成效果及对丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路的干预作用.方法 体外培养A375细胞,经不同浓度的补骨脂酚(100 μmol/L、10 μmol/L、1μmol/L、10-1 μmol/L、10-2μmol/L、10-3μmol/L)干预后,采用MTr法和多巴氧化法检测细胞增殖率和酪氨酸酶(TYR)活性;氢氧化钠裂解法检测黑素含量的变化;RT-PCR法测定酪氨酸酶及相关蛋白(TRP-1、TRP-2)和MAPK通路相关蛋白激酶JNK2、ERK1、ERK2mRNA的表达量.结果 与空白组比较,补骨脂酚(10-1 μmol/L、10-2 μmol/L、10-3 μmol/L)对黑素合成率和TYR活性均明显降低(P＜0.05,P＜0.01),补骨脂酚(10-1μmol/L)对TYR、TRP-1、TRP-2、JNK2、ERK1、ERK2的mRNA基因表达量均显著抑制(P ＜0.05,P＜0.01).结论 补骨脂酚对A375细胞黑素合成及TYR活性有抑制作用,其变化可能是通过下调TYR、TRP-1、TRP-2、JNK2、ERK1、ERK2的mRNA基因表达量来实现的.
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三叶青水提物体内、体外抗肿瘤作用的研究
目的 考察三叶青水提物体内、体外抗肿瘤的作用.方法 应用中药血清药理学方法,制备三叶青水提物的含药血清.采用MTT法观察不同质量浓度三叶青水提物及其含药血清对人宫颈癌细胞Hela229和人恶性黑色素瘤细胞A375细胞的体外抑制作用；以小鼠S180肉瘤为模型,观察三叶青水提物在体内对肿瘤生长的抑制作用.结果 三叶青水提物对Hela229和A375细胞有增殖抑制作用,且呈现出剂量依赖性,IC50分别为45.60 g/L和38.35 g/L;三叶青水提物含药血清高、中、低(20,10,5g/kg)剂量组也可抑制Hela229和A375细胞的体外增殖,IC50分别为41.82 g/L和248.60g/L,呈现出剂量依赖性；三叶青水提物在体内对小鼠S180肉瘤的生长具有一定的抑制作用,高、中、低(24,12,6g/kg)剂量组的抑瘤率分别为28.24％、41.56％和6.00％.结论 三叶青水提物体内、体外均具有抗肿瘤作用.
