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山绿茶中Ilexgenin A对HepG2肿瘤细胞抑制作用的研究
目的:探讨3β,19α-二羟基乌苏-12-烯-24,28-二羧酸(IA)对肝癌细胞株HepG2细胞周期、凋亡的影响及其作用机制.方法:人肝癌细胞株HepG2以IA 20,40,60,80 g·L-1作用不同的时间后,分别使用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT),吖啶橙(AO)荧光染色法,免疫细胞化学SP法,流式细胞术检测HepG2细胞的增殖抑制情况,细胞周期和凋亡的形态学变化,以及细胞内凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax表达的变化.结果:IA对HepG2细胞增殖有抑制作用,其作用随着药物浓度和作用时间的增加而增强.IA作用24h后HepG2细胞周期的主要特点是大量细胞累积于G1期,进入S期的细胞减少,IA能够诱导HepG2细胞凋亡,IA(40,60,80 g·L-1)经过24 h作用后,细胞凋亡率分别为7.89％,8.37％,9.93％,AO染色观察到大量凋亡细胞,凋亡细胞染色减弱、荧光较暗、呈均匀一致的圆状或固缩状,细胞内Bcl-2的表达随着药物浓度增加逐渐减少；Bax蛋白的表达随着药物浓度增加逐渐增加.结论:IA能够抑制HepG2细胞的增殖,并使细胞大量累积于G1期,进入S期的细胞减少,通过影响凋亡蛋白表达诱导细胞凋亡.
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山绿茶茎和叶中挥发油成分GC-MS比较分析
目的:分析比较山绿茶茎和叶中挥发油成分.方法:采用水蒸气蒸馏法分别提取山绿茶茎和叶的挥发油,通过气相色谱-质谱联用法对这2个部位挥发油成分进行对比研究,并用面积归一化法获得各化合物的相对含量.结果:从山绿茶茎中鉴定出24个成分,占挥发油总量的94.97％；从叶中鉴定出33个成分,占挥发油总量的98.48％.茎与叶挥发油成分中均含有的化合物有:糠醛、2,4-已二烯、(Z)-2,6-二甲基-2,6-辛二烯、乙酸己酯、双戊烯、正辛醇、顺-α,α-5-三甲基-5-乙烯基四氢化呋喃-2-甲醇、萜品油烯、芳樟醇、α-松油醇、β-环柠檬醛、橙花醇、香叶醇、己酸环己酯、β-紫罗兰酮.结论:该方法结果准确,为山绿茶的质量标准制定及进一步开发利用该药材提供了科学依据.
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山绿茶药材质量标准的研究
目的:建立山绿茶药材的质量标准.方法:采用TLC法鉴别山绿茶药材中芦丁;采用HPLC法测定山绿茶药材中绿原酸与芦丁的含量.结果:TLC鉴别芦丁斑点清晰,绿原酸进样量在0.01082-0.8656μg之间与峰面积呈良好的线性关系,r=1.000,平均回收率为96.53%,RSD为1.41%.芦丁进样量在0.02028-1.6224μg之间与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9997,平均回收率为99.15%,RSD为2.00%.结论:所建立的质量控制方法灵敏,简便,重现性好,可用于山绿茶药材的质量控制.
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HPLC-ELSD测定壮药山绿茶中3对三萜同分异构体含量
建立山绿茶中海南冬青皂苷D、冬青皂苷A1、3β,19α-dihydroxyolean-12-ene-24,28-dioic acid (命名为ilexhainanin E) 、冬青素A、齐墩果酸、熊果酸等3对齐墩果烷型、乌苏烷型三萜同分异构体HPLC-ELSD含量测定方法,用于指导山绿茶药材的质量控制.以6种三萜成分为对照品,采用Waters XBridge C18色谱柱(4. 6 mm×250 mm,5 μm),甲醇(A)-0. 5％甲酸水溶液 (B) 为流动相,梯度洗脱(0 ～18 min,70％ ～85％ A;18 ～20 min,85％ ～95％ A;20 ～35 min,95％ A),流速1. 0 mL· min-1;柱温30℃;ELSD漂移管70℃,载气为N2,流速2. 8 L·min-1.进样量10 μL.6批山绿茶药材中海南冬青皂苷D、冬青皂苷A1、ilexhainanin E、冬青素A、齐墩果酸、熊果酸质量分数分别为3. 7 ～8. 5,10. 3 ～22. 1,2. 8 ～5. 9,7. 8 ～14. 1,2. 6 ～3. 8,8. 8～11. 9 mg·g-1.该研究可用于山绿茶药材中三萜成分的含量测定,为该药材质量标准的完善提供参考.
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绿茶鉴别
绿茶是用高温破坏鲜茶中的酶而制成的,属于不发酵茶,沏出的茶保持鲜茶叶原有的颜色.有名的绿茶品种如西湖龙井、黄山毛峄、太姥山莲峰翠芽等.福建绿茶产区多集中在闽东北一带,其中以宁德的“天山绿茶”负盛名.绿茶中含有茶氨酸、儿茶素,可改善血液循环.明亮、细嫩、厚软的茶品质好.高级珠眉的花色嫩绿起霜,眉茶条索匀整、重实有峰苗,珠茶颗粒紧结、滚圆如珠的为上品.
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山绿茶治疗老年单纯收缩期高血压80例分析
单纯收缩期高血压病在老年人中非常常见.流行资料显示,它是心血管病致死的重要危险因素[1].西药常用钙离子阻滞剂或利尿剂治疗.我院自1998年2月-2000年2月,应用桂林永福制药厂生产的山绿茶降压片对此类患者进行临床观察,亦取得了较满意的效果.
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山绿茶研究进展
山绿茶为冬青科植物海南冬青(Ilex hainanensis Merr.)的干燥叶精加工炮制而成,具有清热解毒、消肿止痛、活血通脉之功效,可用于降血压、降血脂、降血糖、抑制前列腺增生、保护脂肪肝等.该文对近些年来山绿茶的研究状况进行归纳,简要概述了其化学成分、药理作用、临床应用、质量标准的研究进展,并对其存在问题进行总结,为山绿茶的研究开发提供参考依据与新思路.
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广西山绿茶药材HPLC指纹图谱研究
目的:建立山绿茶药材HPLC指纹图谱分析方法.方法:采用反相高效液相色谱法,Cl8柱(5μm,4.6mm×150mm),乙腈-0.1%磷酸溶液梯度洗脱,流速1.0mL/min,检测波长340nm,柱温30℃,使用"计算机辅助相似度评价软件"进行数据处理.结果:建立了山绿茶药材的HPLC指纹图谱,以芦丁为参照峰,确立了山绿茶药材指纹图谱中的12个共有峰.结论:所建立的指纹图谱有较强的针对性,为山绿茶的研究开发以及制定山绿茶的质量标准提供了科学依据.
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山绿茶不同炮制品的质量研究
目的:建立山绿茶不同炮制品的质量研究方法.方法:采用TLC法鉴别山绿茶不同炮制品中芦丁和绿原酸,并采用高效液相色谱法测定山绿茶不同炮制品中芦丁的含量.结果:芦丁进样量在0.11～0.55μg之间与峰面积呈良好的线性关系,r=0.999 5.平均回收率为99.47%,RSD为0.41%.结论:本法灵敏,简便,重现性好,可用于山绿茶不同炮制品的质量控制.
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山绿茶中黄酮类成分提取纯化工艺研究
采用正交试验设计,以总黄酮、芦丁提取率和出膏率为指标,优选山绿茶中黄酮类成分的提取工艺;以总黄酮、芦丁的静态吸附与解吸试验优选大孔吸附树脂型号,动态吸附与解吸试验优选黄酮类成分的纯化工艺.确定佳提取工艺为15倍量50％乙醇回流提取2次,每次1h;佳纯化工艺为用D101树脂,药材树脂用量比1∶2(1 g药材∶2 mL湿树脂),以2 BV/h的体积流量上样,上样液pH 3,用7 BV 50％以2 BV/h乙醇洗脱,得到精制品中总黄酮含量50.22％,芦丁含量0.52％.该工艺准确客观,重复性好,可为工业生产提供参考.
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山绿茶提取物对体外人血小板聚集的影响
山绿茶为广西少数民族民间中草药,具有活血通脉等治疗心血管疾病的功效.为观察山绿茶提取物对花生四烯酸钠盐(AA)、二磷酸腺苷(ADP)、盐酸肾上腺素(ADR)诱导的体外人血小板聚集的影响,通过阿司匹林为阳性药建立体外抗人血小板聚集模型,以健康人富血小板血浆为研究对象,分别以AA、ADP、ADR作为诱导剂,运用Born氏比浊法测定体外诱导的人血小板聚集率,探究不同山绿茶提取物对体外诱导的人抗血小板聚集的影响.实验结果表明:阳性药阿司匹林对诱导的体外人血小板聚集有明显抑制作用,而山绿茶各提取物对诱导的体外人血小板聚集无显著影响,虽然山绿茶提取物对体外人血小板聚集的抑制作用为阴性结果,但为地方中药材标准的完善提供了实验依据.
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广西大明山地区山绿茶种质资源及开发利用现状调查
目的 掌握广西大明山地区的山绿茶种质资源分布情况及开发利用状况.方法 采用实地踏查、标本采集、文献资料查阅与当地向导咨询相结合的方法对广西大明山地区山绿茶种质资源的地理分布及生境条件、生物学特性、群落特征及伴生植物、开发利用现状等进行调查研究.结果 山绿茶喜生长于海拔600～800m、坡度20°～40°、靠近水源、光照适中的黄壤林下或林缘.其基源植物海南冬青与同属几种植物类似,它们的形态特征主要区别在于幼枝的被毛情况和种子背部分核情况.由于生境破坏和不合理采收,大明山地区的山绿茶资源量正在逐年减少,资源短缺十分明显.结论 采取各种积极的办法保护山绿茶野生种质资源,以保证山绿茶资源的可持续利用已刻不容缓.
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山绿茶的化学成分与药理作用研究新进展
山绿茶富含三萜及其皂苷类、黄酮类、咖啡酰奎宁酸类、半萜苷(酯)类等化学成分,药理活性研究表明其对高血压、高血脂、高血糖及保护心脏、抗肿瘤、非酒精性肝炎具有一定的治疗作用.本文通过对山绿茶的化学成分、药理作用的研究进展进行综述,以期进一步开发利用山绿茶的药材资源,并深入探讨其发挥药理作用的物质基础.
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基于UPLC-Q-TOF-MS法对中药山绿茶化学成分分析
目的 建立测定山绿茶提取物化学成分的超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)分析方法.方法 采用Agilent poroshell SB-C18色谱柱(4.6 mm×50 mm,2.7 μm),以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,采用电喷雾(ESI)离子源,进行负离子扫描采集数据,通过Agilent Qualitative Analysis数据分析定性软件,进行色谱峰的提取和匹配.结果 通过质谱信息并结合对照品与相关文献、数据库分析检索,共鉴别出27个化合物.结论 该方法能够快速、灵敏、全面地分析山绿茶提取物的化学成分,为阐明山绿茶的药效物质基础提供有力的证据.
关键词： 山绿茶 超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱 化学成分 质谱特征 碎片离子 -
HPLC法测定山绿茶中芦丁的含量
目的:建立山绿茶中芦丁含量的测定方法.方法:采用ODS C18柱,5μm,4.6 mm×250 mm;以乙腈-体积分数2.5％的醋酸溶液(15∶85)为流动相；流速1.0 mL/min;柱温30℃；检测波长254 nm.结果:芦丁在0.01833～0.18330 g/L范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9998,n=5),平均回收率为97.5％( RSD=1.07％,n=6).结论:该方法简便、准确、重现性好,可用于山绿茶中芦丁含量的测定.
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山绿茶中Ilexgenin A诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡及其相关机制研究
目的 研究山绿茶中的鸟苏烷型三萜化合物Ilexgenin A对人宫颈癌HeLa细胞凋亡的诱导作用及其相关机制.方法 建立人宫颈癌HeLa细胞体外培养体系,采用CCK-8法检测细胞活力,MTT法测定LDH,免疫比色法检测细胞增殖情况,DAPI荧光染色观察细胞凋亡形态学变化,Western blot检测Caspase-3/7和NF-κB蛋白表达水平.结果 用IA处理过的HeLa细胞,LDH释放增加,呈剂量和时间依赖性.在CCK-8和BrdU测定过程中,IA比标准药物抗HeLa活性更强,随浓度和作用时间的增加,细胞的活性不断下降,对HeLa增殖的抑制作用明显.DAPI染色观察用IA处理过的HeLa细胞浓缩明显,细胞核分散,染色质凝聚.Western blot结果显示用IA处理过的HeLa细胞Caspase-3/7的活性显著增加,NF-κB蛋白表达水平下降.结论 Ilexgenin A具有诱导HeLa细胞凋亡的作用,其机制可能与激活Caspase-3/7和抑制NF-κB蛋白表达有关.
关键词： 山绿茶 ilexgenin A Hela细胞 凋亡 NF-κB -
不同炮制品山绿茶药材绿原酸和芦丁的含量比较
目的 探索不同炮制品山绿茶药材中绿原酸和芦丁的含量及其变化规律,为建立山绿茶佳炮制工艺提供依据.方法 采用反相高效液相色谱法测定不同炮制品山绿茶药材中绿原酸和芦丁的含量.结果 绿原酸峰面积在进样量为0.10～2.00μg之间呈良好的线性关系Y=4 021.7X+9.911 3,r=1.000 0,平均加样回收率为97.18％,RSD为1.27％,其中,传统炮制组合量高:芦丁峰面积在进样量为0.25 ～5.00μg之间呈良好的线性关系Y=1 258.8X-0.148 2,r=1.0000,平均加样回收率为99.36％,RSD为1.91％.结论 建立含量测定方法可用于山绿茶及其炮制品的质量控制,绿原酸与芦丁含量均以传统炮制组合量高.
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山绿茶不同炮制品中总黄酮的含量测定
目的 建立山绿茶不同炮制品的质量研究方法.方法 以芦丁为对照品,采用紫外分光光度法测定山绿茶不同炮制品中总黄酮的含量.结果 芦丁浓度在8.112～48.672(μg/ml)之间与吸光度值呈良好的线性关系,回归方程为C=85.224 5A+0.642 7,r=0.999 0.平均回收率为101.24%,RSD=2.73%.结论 该测定方法灵敏,简便,重现性好,可用于山绿茶不同炮制品的质量控制.
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HPLC法测定山绿茶中芦丁的含量
目的:建立山绿茶中的芦丁HPLC测定法.方法:使用water C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙晴-2.5%醋酸(14.2:85.8)为流动相,测定波长:254 nm,流速:1ml·min-1,柱温:40℃.结果:芦丁在0.38～3.82μg范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 8),平均回收率98.7%(RSD=2.0%,n=6).结论:本方法可用于山绿茶的质量控制,方法简便、准确、可靠.
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山绿茶不同炮制品醇提物对1型糖尿病小鼠的降糖作用初步研究
目的 研究山绿茶3种不同炮制品(传统品、清炒品、阴干品)醇提物对1型糖尿病小鼠模型的降血糖作用.方法 以小鼠尾部静脉注射四氧嘧啶(ALX)建立小鼠1型糖尿病模型,分组灌胃给予山绿茶3种炮制品高、中、低剂量及阳性对照药物,连续28 d,给药结束后取材并检测血糖及空腹血清胰岛素的含量.结果 山绿茶3种炮制品醇提物对ALX致1型糖尿病小鼠的血糖升高有一定的抑制作用,对其胰岛素的含量有增长作用.结论 山绿茶3种不同炮制品的醇提物均有降血糖、恢复胰岛素β细胞功能及促进胰岛素的释放等作用.
