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紫草软膏处方筛选及其体外渗透性
目的:筛选紫草软膏处方.方法:建立体外经皮渗透试验方法,采用高效液相色谱法对紫草软膏样品的体外透皮速率进行考察,并以左旋紫草素累积透过量作体外透皮曲线,与Higuchi方程进行拟合.结果:透皮速率以O/W型软膏为高,平均J值达到14.797μg·(h·cm2)-1,Higuchi方程线性较好.结论:佳处方为O/W型软膏处方.
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紫朱软膏中紫草的质量控制
目的：建立紫朱软膏中紫草的质量控制方法。方法采用薄层色谱法对紫朱软膏中紫草进行定性鉴别。以左旋紫草素含量为评价指标,采用正交试验设计优选左旋紫草素的提取工艺,以紫外可见分光光度法对左旋紫草素进行含量测定。结果在薄层色谱中,主斑点清晰,阴性对照无干扰。左旋紫草素的佳提取工艺为：提取3次,每次30 min,NaOH体积分数为1%、用量为50 mL。左旋紫草素在0.0102～0.0357 mg(r2＝0.9997)范围内与吸收度呈良好的线性关系,平均加样回收率为103.27%,RSD＝4.17%。结论本方法简便可行,可用于紫朱软膏的质量控制和评价。
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复方紫草油喷雾剂中紫草油提取工艺研究
目的 优选复方紫草油喷雾剂中紫草油的佳提取工艺,为以后制备喷雾剂前的紫草素包合提供条件.方法:用紫外分光光度法测定紫草油中左旋紫草素含量作控制指标,利用spss11.5软件分析L9 (34)正交试验优选紫草油的佳提取方案.结果:佳工艺为将1cm紫草段加10倍量麻油浸泡24小时后,加热,油温控制在150℃以内,45分钟,待紫草炸制焦枯,手粘即碎,趁热微孔滤膜过滤,为下一步用环糊精包合提供条件.
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闪式提取法用于紫草的工艺条件研究
以左旋紫草素、羟基萘醌总色素的提取率为评价指标,对比闪式提取、回流提取、超声提取对紫草中有效成分的提取效果,采用正交设计综合评分法对闪式提取的工艺参数进行优化.结果表明,闪式提取法提取效率高,优选的闪式提取佳工艺为95％乙醇提取3次,每次90s.在此工艺条件下左旋紫草素、羟基萘醌总色素提取率分别为93.16％,93.89％,出膏率为5.16％.闪式提取法适于紫草有效成分的提取,通过正交试验设计优选的紫草闪式提取工艺稳定、切实可行.
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左旋紫草素诱导人前列腺癌PC3细胞凋亡
目的 探讨左旋紫草素诱导雄激素非依赖型前列腺癌PC3细胞凋亡的作用及其可能机制.方法 实验分为对照组(只加DMSO)、不同浓度的左旋紫草素组(2、4、8、16、32 μmol/L),作用PC3细胞24 h后收集细胞,应用MTT法检测各组细胞生长抑制率并计算左旋紫草素半数有效抑制浓度IC50.8μmol/L左旋紫草素作用PC3细胞0、6、12、24、48、72 h后收集细胞,用MTT法计算各时间点细胞生长抑制率.PC3细胞加入8μmol/L的左旋紫草素,分别培养0、12、24、48 h后收集细胞,流式细胞仪检测各时间点细胞凋亡率.8μmol/L浓度的左旋紫草素作用PC3细胞0、6、12、24、48、72 h后收集细胞,荧光分光光度计检测caspases3的活性.将PC3细胞分为对照组(DMSO)、z-DEVD-fmk(caspase3抑制剂,20 μmol/L)、z-IETD-fmk(caspase9抑制剂,20 μmol/L)和z-LEHD-fmk(caspase8抑制剂,20 μmol/L)组,各组加入抑制剂1h后加入左旋紫草素,24 h后收集细胞,MTT法计算各组细胞生长抑制率.结果 左旋紫草素能抑制PC3细胞的增殖,作用24 h后随浓度的升高,细胞生长抑制率逐渐增加,IC50为(7.91 ±0.73) μmol/L.8μmol/L左旋紫草素作用PC3细胞0、6、12、24、48、72 h后,随着时间的延长,细胞生长抑制率逐渐升高.左旋紫草素8μmol/L作用12、24、48 h后,PC3细胞的凋亡率分别为(5.73±0.82)％、(19.15±1.14)％、(32.68±1.03)％,与0h时(0.98±0.34)％相比明显升高(均P＜0.05).左旋紫草素8 μmol/L作用PC3细胞后,caspase3活性6h时开始升高,在24 h达高峰,其后开始下降.caspase3、caspase9、caspase8抑制剂均可明显逆转左旋紫草素对PC3细胞增殖的抑制作用,与DMSO对照组比较,细胞生长抑制率由(50.63±0.99)％分别降至(25.30±0.58)％、(30.81±0.35)％、(39.64±1.19)％(均P＜0.05).结论 左旋紫草素能有效抑制PC3细胞的增殖,并诱导其凋亡,该作用可能通过激活caspase9线粒体通路为主.
关键词： 左旋紫草素 前列腺肿瘤 PC3细胞 细胞凋亡 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 -
HPLC法测定紫草中萘醌类成分
目的 建立紫草中3种萘醌类成分的HPLC测定方法.方法 采用流动相制备供试液;色谱柱为Kromasil100-5C18(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为乙腈-水-甲酸(700∶ 300∶0.5),流速为1.0 ml ·min-,检测波长为516 nm,柱温为室温.结果 左旋紫草素、乙酰紫草素、β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁分别在0.016～0.32、0.14～2.8、0.16 ～3.2 μg范围内具良好线性关系,平均回收率为分别为102.57％、100.16％、97.99％;6批商品紫草饮片中3种萘醌类成分的含量波动较大.结论 该方法简便易行,能同时测定紫草中3种萘醌类成分,可用于紫草的质量控制.
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左旋紫草素体外稳定性研究
目的 研究左旋紫草素在不同条件下的稳定性.方法 以左旋紫草素含量变化为指标,采用经典恒温法考察左旋紫草素在不同pH值磷酸缓冲溶液中的稳定性,并在此基础上考察光照、有机溶剂对其稳定性的影响.结果 左旋紫草素在不同pH值稳定性不同,以pH为偏酸性较为稳定,且适pH为3.0.结论 左旋紫草素在不同条件下稳定性不同,在实际应用中应加以考虑.
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紫草中有效成分提取方法的研究
目的 优选紫草中有效成分的提取方法.方法: 用乙醇60℃以下提取和CO2超临界萃取,用高效液相色谱法,以左旋紫草素含量为考察指标,进行不同提取方法的比较研究.结果: CO2超临界萃取法左旋紫草素含量是乙醇提取法的3倍.结论 紫草有效成分的提取以CO2超临界萃取法为优.萃取的条件是:萃取罐的温度为35℃,萃取压力为25Mpa,CO2流量为40L/h,萃取时间为3h.
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紫外-可见分光光度法测定紫草油中羟基萘醌总色素的含量
目的:建立紫外-可见分光光度法测定紫草油中羟基萘醌总色素含量的方法.方法:羟基萘醌总色素的含量以左旋紫草素计,溶剂为乙醇,检测波长为516 nm.结果:左旋紫草素质量浓度在8.08～40.40 μg/ml范围内与吸光度呈良好的线性关系(r=0.999 9,n=5),平均加样回收率为97.97％(RSD=1.70％,n=5).结论:该方法简便、准确,回收率与精密度高,重现性好,可用于紫草油中羟基萘醌总色素含量的测定.
关键词： 紫外-可见分光光度法 紫草油 左旋紫草素 羟基萘醌总色素 含量测定 -
正交试验设计优选紫草的醇提工艺
目的:优选紫草中左旋紫草素等萘醌类成分的佳提取工艺.方法:采用L3(34)正交试验法,以左旋紫草素量和干浸膏得率为评价指标.考察乙醇用量、提取温度和提取时间3个因素,每个因素选取3个水平进行试验.结果:提取温度对紫草有效成分的提取有显著影响,佳提取工艺为:加入12倍和10倍量95%乙醇,在65℃条件下温浸提取两次,每次1 h.结论:优选得到的工艺稳定、合理可行.
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复方紫草油的制备工艺与质量标准研究
目的:验证复方紫草油的制备工艺,提高质量标准控制水平.方法:以左旋紫草素的含量为指标,考察制备工艺的合理性.采用薄层色谱法对白芷、忍冬藤、冰片进行鉴别,用高效液相色谱法测定左旋紫草素的含量.结果:制备工艺过程中左旋紫草素稳定,原制备工艺合理;白芷、忍冬藤、冰片的鉴别斑点清晰,阴性无干扰;左旋紫草素测定方法经方法学验证,结果可行.结论:结果表明,制备工艺合理,新建立的质量标准可行.
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复方四季青软膏的制备及质量控制
目的：鉴别复方四季青软膏中各主药的真伪；研究复方四季青软膏的制备方法；建立复方四季青软膏含量的控制方法。方法以薄层色谱法鉴别四季青叶、大黄、紫草；以紫外分光光度法测定紫草中左旋紫草素的含量。结果左旋紫草素的乙醇溶液在5.64～33.87μg/mL范围内，A与C呈良好线性关系， r=0.9999（n=6），平均回收率为98.80％，RSD（％）=0.88（n=6）。结论该方法准确、简便，重现线好，可用于复方四季青软膏中紫草含量的控制。
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三种不同中药单体对HaCaT细胞过度增殖模型的影响
目的 探讨地黄、紫草、丹皮3种不同中草药所含药效成分对HaCaT细胞增殖的影响.方法 采用10 μg/L角质形成细胞生长因子诱导HaCaT细胞过度增殖模型.运用CCK-8法及流式细胞仪分别检测梓醇、左旋紫草素、丹皮酚对模型细胞的增殖和细胞周期的变化.结果 左旋紫草素(≥10-6moL/L)和丹皮酚(≥1.88×10-4mol/L)均可抑制细胞模型的增殖,梓醇(≥10-6moL/L)可促进细胞模型的增殖.与HaCaT细胞生长因子模型组比较,左旋紫草素(≥10-6mol/L)和丹皮酚(≥1.88×10-4moL/L)可抑制HaCaT细胞进入S期及G2M期,梓醇(≥10-6mol/L)可促使HaCaT细胞进入S期,但G2M期差异无统计学意义.结论 左旋紫草素、丹皮酚能够抑制HaCaT细胞的增殖,梓醇可促进HaCaT细胞的增殖.
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正交试验优化复方紫草油的提取工艺
目的 优选复方紫草油的佳提取工艺.方法 采用L9(34)正交试验法优化提取条件,以左旋紫草素的含量为工艺考察指标.结果 佳提取工艺为A1B2C2D2,即选用新疆软紫草,加5倍芝麻油,温度为120 ℃,加热1 h.结论 用高效液相色谱法测定左旋紫草素的含量准确可靠,采用优选的提取工艺能有效提高复方紫草油中左旋紫草素的含量,提高制剂的质量.
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紫外可见分光光度法测定呼和-嘎日迪-13散中紫草的含量
目的:紫外可见分光光度法测定呼和-嘎日迪-13散中紫草的含量.方法:采用紫外可见分光光度法,样品以石油醚(60～90℃)超声振荡提取.结果:左旋紫草素在8.264～ 28.924μg/mL范围内呈良好的线性关系,r=0.99982,平均回收率96.2％,RSD为0.43％,结论:本法灵敏、准确,操作简单,重复性好.
关键词： 呼和-嘎日迪-13散 紫外可见分光光度法 左旋紫草素 -
左旋紫草素联合顺铂对宫颈癌Hela细胞的抑制作用及其作用机制
目的 探讨左旋紫草素(shikonin,SHK)联合顺铂(cisplatin,CDDP)对宫颈癌Hela细胞的抑制作用及作用机制.方法 采用CCK-8法分别测定不同浓度的顺铂、紫草素和紫草素联合顺铂溶液对宫颈癌Hela细胞增殖的活性抑制作用;流式细胞仪测定紫草素联合顺铂后诱导宫颈癌Hela细胞凋亡的情况;Western blot检测Caspase-3蛋白表达情况.结果 左旋紫草素对宫颈癌Hela细胞有抑制作用,24 h与48 h的IC50分别为1.05和0.89 mg·L-1.紫草素联合顺铂作用于Hela细胞48 h后,细胞数量明显变少,胞体变圆,缩小,出现明显的细胞凋亡现象;不同浓度的紫草素联合顺铂作用于Hela细胞,24 h/48 h的IC50值(0.15 mg·L-1SHK +CDDP 2.82 mg·L-1/1.87 mg·L-1;0.3 mg·L-1SHK+ CDDP 2.43 mg·L-1/1.52 mg· L-1;0.6 mg· L-1 SHK+ CDDP 2.01 mg·L-1/1.23 mg·L-1)明显低于顺铂(CDDP 3.54 mg·L-1/2.78 mg·L-1)的IC50值,具有显著性差异(P＜0.05);用流式细胞仪检测细胞凋亡率显示,随着紫草素浓度的增大,紫草素联合顺铂(1.2 mg·L-1SHK+ CDDP总凋亡率15.6％)细胞凋亡比率增高,与对照组顺铂(CDDP总凋亡率3.7％)相比,具有显著性差异(P＜0.05).0.3、0.6、1.2 mg·L-1紫草素+顺铂分别作用Hela细胞48 h后,Western blot结果显示,Caspase-3随着紫草素浓度的增加,出现了明显的裂解活化,促进了凋亡.结论 紫草素联合顺铂对宫颈癌Hela细胞有明显的抑制作用,其抑制作用与促进Hela细胞凋亡有关.
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左旋紫草素抗炎作用的实验研究
目的:探讨左旋紫草素的抗炎药理作用.方法:采用二甲苯涂抹小鼠耳面,致使毛细血管渗出导致耳肿胀和醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高的炎症模型,观察左旋紫草素对急性炎症的对抗作用;采用大鼠腋窝皮下置无菌棉球的炎症模型,观察左旋紫草素对亚急性炎症的对抗作用.结果:与生理盐水组比较,左旋紫草素低、中、高三个剂量组和地塞米松组均能显著抑制二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀和醋酸所致的小鼠腹腔毛细血管通透性增高(P<0.05),对大鼠棉球肉芽肿组织增生的炎症模型也有明显的抑制作用(P<0.05),且左旋紫草素高剂量组作用接近地塞米松组.结论:左旋紫草素对急性和亚急性炎症动物模型均有明显的对抗作用,这一作用可能是其作为抗炎药物应用的药理学基础.
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龙葵银消片质量标准的研究
目的 建立龙葵银消片的质量控制标准.方法 采用薄层色谱法(TLC法)对龙葵银消片中的紫草、山药的主要有效成分进行定性鉴别,并应用高效液相色谱法(HPLC法)测定龙葵银消片中白芷的主要有效成分欧前胡素和异欧前胡素的含量.结果 紫草、山药薄层图谱斑点清晰,分离效果良好,专属性强,阴性对照无干扰.HPLC测得的欧前胡素与异欧前胡素分离度良好,阴性对照样品无干扰,欧前胡素在0.1125～1.8000μg范围内线性关系良好,r=0.999 9;异欧前胡素在0.09644～0.9644μg范围内呈现良好的线性关系,r=0.999 9;样品溶液在室温放置8h和4℃冷藏放置48h内比较稳定,平均加样回收率欧前胡素为97.20％(RSD=2.11％,n=6),异欧前胡素为98.06％(RSD =0.90％,n=6).结论 该方法简便、快速,回收率高、专属性好、测定结果准确可靠、重现性好,可用于龙葵银消片的质量标准控制.
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正交试验优选中华紫冰油提取工艺
中华紫冰油是湖南山秀医药化工厂研制的纯中药复方制剂,处方含紫草、冰片、当归等药味,以麻油为溶媒精制而成的外用油剂.具有清热止痛、解毒消肿、祛腐生肌的功效.＃主要用于Ⅰ度和浅Ⅱ度烧烫伤.采用L9(34)正交试验,以样品中紫草所含羟基萘醌总色素量为指标,考察了不同因素水平对提取效果的影响.
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微乳对左旋紫草素增溶作用的实验研究
目的:研究o/w型微乳对左旋紫草素的增溶作用.方法:以伪三角相图法制备了聚氧乙烯蓖麻油甘油醚(EL)-乙醇-肉豆蔻酸异丙酯(IPM)-水的微乳体系,用比色法测定了在微乳和水中左旋紫草素的溶解度.结果:左旋紫草素在微乳中的溶解度为水中的955倍.结论:微乳对左旋紫草素有明显的增溶作用,为紫草索相关制剂的研究提供了依据.
