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量子点复合微球的活体荧光和化学发光双模式成像
为了探索荧光/化学发光双模式成像方法 用于可降解生物材料研究的可行性,将载有量子点的可降解高分子微球(量子点复合微球)植入小鼠背部皮下,利用美国Caliper定量荧光和生物发光成像系统IVIS Lumina II观察不同时间点植入部位的荧光强度和L-012介导的化学发光强度的变化.结果 显示:30 mg量子点复合微球植入28 d时,仍能检测到荧光信号.L-012介导的化学发光强度随时间逐渐减弱,第28 d时,量子点复合微球处仍存在微弱的化学发光.
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活性氧与肿瘤研究进展
在人们的生活中,致癌因素多种多样,其对人体的机体造成影响,使得机体局部组织的细胞基因水平不再正常调控之下,造成局部组织克隆性异常增生而出现新生物,这种新生物被称之为肿瘤.在对肿瘤的研究中,发现活性氧参与肿瘤的形成和转移过程,与肿瘤的发生、发展和治疗具有一定的联系,过低浓度的活性氧会造成细胞凋亡,过高浓度的活性氧会造成细胞癌变,浓度适宜的活性氧有利于肿瘤的治疗.本文围绕活性氧与肿瘤之间的研究进展进行了研究综述.
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电离辐射对人造血干细胞CD34+的损伤作用
目的 研究不同剂量电离辐射对人造血干细胞CD34+的损害及其机制.方法 采集健康人脐带血,分离培养得到CD34+造血干细胞,分为对照组和辐射组.分别用1、2、5Gy的X线对辐射组细胞进行照射后继续培养24 h后进行对比,检测细胞增殖活性,测定各组内ROS水平并定量测定各组细胞内caspase-3和Nrf-2水平.结果 用1、2、5 Gy的电离辐射对CD34+造血干细胞进行照射后,细胞活性降低,ROS释放量增高,细胞内caspase-3、Nrf-2蛋白相对表达量升高,且这种作用与电离辐射剂量相关.结论 电离辐射可诱导CD34+造血干细胞损伤,损伤作用很可能与细胞凋亡和氧化应激作用相关.
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紫草素对人鼻咽癌CNE2和HNE2细胞坏死性凋亡的影响及机制
目的 研究紫草素对人鼻咽癌CNE2和HNE2细胞的抑制作用及可能机制.方法 采用不同浓度、不同处理时间的紫草素处理鼻咽癌CNE2、HNE2细胞及正常人胚鼻咽上皮HENE细胞,检测分析细胞活性、细胞坏死性凋亡、细胞形态、活性氧(ROS)产生及受体相互作用蛋白1(RIP1)和RIP3的表达.结果 紫草素对鼻咽癌CNE2和HNE2细胞的增殖有明显抑制作用,且表现出显著的剂量和时间依赖性.紫草素处理后CNE2和HNE2细胞的早期凋亡率没有明显变化,而坏死细胞比例明显增加(P<0.05).染色后,PI阳性细胞有明显的细胞凋亡特征.IC50浓度紫草素处理后,CNE2和HNE2细胞产生的ROS相对量显著高于0.0μM紫草素处理,RIP1和RIP3的蛋白相对表达量显著高于0.0μM紫草素处理(P<0.05).经NAC或Nec1预处理后,CNE2和HNE2细胞的坏死性凋亡率明显下降(P<0.05).结论 紫草素可明显抑制鼻咽癌CNE2和HNE2细胞的增殖,其作用机制与诱导鼻咽癌细胞产生大量的ROS、上调RIP1和RIP3蛋白的表达,进而激活坏死性凋亡进程有关.
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不育男性的精子DNA完整性与活性氧及尿酸的关系
目的:探讨男性不育患者的精子DNA完整性、精浆过氧化氢与尿酸(UA)含量之间的关系.方法:依据世界卫生组织诊断标准,选择不育者45例,生育者30例,进行常规精液分析;过氧化氢含量测定用比色法;尿酸含量测定采用尿酸酶一过氧化物酶偶联法;将精子标记相应的荧光染料,用流式细胞仪检测精子的染色质状态.结果:生育组精子活率、密度、UA浓度明显高于不育组(P<0.01).精子畸形率、过氧化氢浓度、DNA碎片率明显低于不育组(P<0.01).DNA碎片率与过氧化氢浓度(r=0.285,P<0.05)、精子畸形率(r=0.371,P<0.01)呈正相关,与精子活率呈负相关(r=-0.349,P<0.01);过氧化氢浓度与尿酸浓度呈负相关(r=-0.271,P<0.05).结论:过氧化物含量过高会破坏精子核内DNA的完整性,使精子畸形率升高、活率下降而导致男性不育.
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生物活性物质的抗氧化能力评价方法及其研究进展
准确评价生物活性物质的抗氧化能力已经成了氧化与抗氧化研究领域的热点问题,综述了国际上当前比较流行的几种体外抗氧化能力评价方法,如:2,2'-连氮-双-(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)-二铵盐法、1,1-二苯代苦基苯肼法、铁离子还原/抗氧化能力测定法、氧自由基吸收能力测定法、化学发光法,以及体内抗氧化能力评价方法的关键点.
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异甘草素对低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增生的抑制作用研究
目的 研究异甘草素对低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)增生的影响及作用机制.方法 2017年3—6月,通过 α-actin免疫组化染色对原代大鼠PASMCs进行鉴定,并取3～7代用于细胞实验;将细胞分成常氧组、低氧组、低氧+10μmol/L异甘草素组、低氧+25μmol/L异甘草素组、低氧+50μmol/L异甘草素组、低氧+100μmol/L异甘草素组,在常氧(21％O2)或低氧(3％O2)条件下培养24 h;CCK-8染色法检测异甘草素对低氧诱导的PASMCs增生的影响;DCFH-DA荧光探针检测异甘草素对低氧诱导的PASMCs活性氧(ROS)产生的影响;qRT-PCR检测异甘草素对低氧诱导的PASMCs NOX4 mRNA表达的影响.结果 低氧组PASMCs的吸光度(OD)值(0.86±0.05)显著高于常氧组(0.57±0.02),低氧+25μmol/L异甘草素组OD值(0.75±0.02)较低氧组显著降低,而且随着给予异甘草素浓度的增加OD值呈明显下降趋势;DCFH-DA结果显示,低氧组PASMCs ROS的产生(13.36±0.36)％显著高于常氧组(3.05±0.18)％,低氧+25μmol/L异甘草素组ROS的产生(9.79±0.26)％较低氧组显著降低,而且随着给予异甘草素浓度的增加ROS的产生呈明显下降趋势;qRT-PCR结果显示,低氧组PASMCs的NOX4 mRNA表达量是常氧组的2.15倍,低氧+25μmol/L异甘草素组NOX4 mRNA表达量较低氧组显著降低,而且随着给予异甘草素浓度的增加NOX4 mRNA表达量呈明显下降趋势.结论 异甘草素抑制低氧诱导的PASMCs增生,可能与抑制低氧诱导的PASMCs ROS的产生有关.
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氧化应激与动脉粥样硬化
活性氧家族(reactive oxygen species,ROS)不仅包含氧自由基如超氧自由基(O2-)、羟自由基(OH-),而且也包括一些含氧的非自由基衍生物,如单线态氧、氢过氧化物、过氧化物次氯酸以及内源性脂质和外源性的环氧化代谢产物.
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分子探针检测肾小球疾病患者活性氧水平及其临床意义
目的:探讨外周血细胞浆中活性氧水平的检测方法及其与肾小球疾病的关系.方法:分子探针技术检测26例肾小球疾病患者和27例健康人外周血中性粒细胞、淋巴细胞的活性氧浓度.结果:肾小球疾病组与健康对照组的外周血淋巴细胞活性氧阳性率分别为5.0±1.5、4.5±2.0,P＞0.05;平均荧光强度6.58±0.42、5.34±0.35,P＞0.05;肾小球疾病组与健康对照组的外周血中性粒细胞活性氧阳性率分别为99.8±0.6、99.3±2.3,P＞0.05;平均荧光强度69.0±10.2、27.1±8.1,P＜0.01.结论:分子探针技术检测外周血细胞中活性氧浓度是较为敏感特异的方法,并能直接明确不同的血细胞类型,肾小球疾病中性粒细胞活性氧水平明显升高,进一步支持氧自由基在肾小球疾病病理损伤中的重要作用.
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线粒体功能异常与卵巢衰老关系的研究进展
卵巢衰老是卵母细胞数量减少和质量下降共同决定的,而线粒体的功能直接影响了卵母细胞质量.本文就线粒体功能异常与卵巢衰老关系进行综述,并讨论如何通过改善线粒体功能而提高卵母细胞质量,延缓卵巢衰老.
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男性不育患者精子线粒体膜电位检测结果分析
目的：探讨男性不育患者精子线粒体膜电位（MMP）与精浆中活性氧（ROS）水平及精子活力之间的关系。方法按照研究条件，随机选取不育男性155例为不育组，正常男性54例为对照组。精液常规分析， ELISA 检测精浆中 ROS，流式细胞仪检测精子 MMP。结果不育组精子正常 MMP 率[（24.5±11.2）％]低于对照组[（34.3±15.9）％]，差异有统计学意义。不育组精浆中 ROS 水平[（654.0±277.7）U／L]高于对照组[（437.8±145.8）U ／L]，差异有统计学意义。精子正常 MMP 率与精子浓度呈正相关（r ＝0.19，P ＜0.01），与精子总数呈正相关（r ＝0.27，P ＜0.01），与精子活动率呈正相关（r ＝0.37，P ＜0.01），与精子前向运动率呈正相关（r ＝0.36，P ＜0.05）。精浆中 ROS 水平与精子正常 MMP 率呈负相关（r ＝－0.32，P ＜0.01）。结论不育患者精浆中 ROS 水平增加，导致精子 MMP 下降，精子活动力下降，可能是导致男性不育的重要原因之一，治疗时应考虑补充抗氧化药物。
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新型消毒剂过碳酰胺制备方法的研究
目的 研究过碳酰胺的制备工艺及其影响因素,得出佳生产条件.方法 通过重新设计反应物比例和改变反应条件,考察过碳酰胺产品收率及活性氧质量浓度.结果 试验结果得到的佳工艺条件是:过氧化氢与尿素摩尔比为1∶1.1,反应温度35℃,反应时间40 min.在此工艺条件下,得到过碳酰胺产品收率达到63.9%,其活性氧含量为16.5%.结论 本研究得出了过碳酰胺的佳制备方法,新生产工艺过碳酰胺收率高,过碳酰胺含活性氧量符合质量要求.
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一种新型过氧化物消毒剂理化性能的研究
目的 研究一种新型过氧化物消毒剂理化性状,为研究新的消毒制剂提供参考.方法 采用理化分析方法,对该新型过氧化物消毒剂的有效含量、酸碱度及损坏性等进行了实验室检测.结果 该新型过氧化物消毒剂主要为过氧化硼酸钾,为白色粉剂,活性氧化物含量为质量分数约24％.在温度为10℃～30℃条件下,其活性氧释放速度高峰值为6h～8h.过氧化硼酸钾水溶液的pH值随着活性氧含量的增加有所增高,溶液pH值为11.22条件下,活性氧含量为1 000 mg/L.将其固体粉剂密封储存于54℃条件下,其活性氧含量下降率为0.71％.结论 该新型过氧化物类消毒剂有效含量适中,性能稳定,溶液中活性物含量受反应温度和酸碱度的影响明显.
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高功率微波对大鼠免疫组织活性氧水平的影响
目的 观察高功率微波辐照对大鼠免疫组织细胞内活性氧水平的影响.方法 采用 DCFH-DA 分子探针结合流式细胞仪检测大鼠免疫组织细胞内经 0、10、30、50 mW/cm2 微波辐照后不同时间活性氧水平的变化.结果 ①骨髓、淋巴结在 0～30 mW/cm2 范围内活性氧水平出现规律性增高,在 50 mW/cm2 时有所降低;脾脏在 0～50 mW/cm2 范围内呈剂量依赖性增高;而胸腺组织虽有增高但未见明显的量效关系.②照后 1 d 活性氧水平升高为显著,3 d 出现明显降低,除骨髓高于对照组外,脾脏、淋巴结基本恢复正常.7 d 时全部恢复到对照水平.结论 微波辐照可诱导大鼠免疫组织细胞内活性氧水平升高,在一定剂量范围内呈较好的量效和时效关系.
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自由基医学理论用于"治未病"的探讨
近来,中医"治未病"理论受到广泛关注.本文从自由基生成与清除、氧化性损伤与修复、氧化-抗氧化平衡、及其与中医阴阳平衡的关系来探讨将自由基医学理论用于"治未病"的可能性.
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自由基,趋化因子与HIV-1/SIV感染及酒精肝疾病
自由基医学是近30年来迅速发展起来的一门新兴的边缘学科,它为许多疾病的发病原因、发病机制提供了新的理论、新的内涵.生物体内的自由基95%以上是氧自由基,一旦氧自由基产生过多或抗氧化体系出现障碍,体内氧自由基代谢就会出现失衡,产生大量的活性氧(reactive oxygen species,ROS),使机体处于氧化应激状态.氧化应激可导致细胞损伤,引起多种严重疾病.越来越多证据表明,HIV(human immun-odeficiency virus)感染者处于慢性氧化应激状态.笔者对自由基和趋化因子在HIV-1/SIV(Simian immmunodeficiency virus)和酒精肝中对细胞的损伤作用进行了综述.
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番茄红素对脑缺血再灌注大鼠活性氧及缺氧损伤的影响
目的 探讨番茄红素(lycopene,LP)对大鼠大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)所致氧化应激及缺氧损伤的作用及可能机制.方法 48只雄性SD大鼠按体重分层分为A组(20 mg/kg LP)、B组(5 mg/kg LP)、C组(色拉油)、D组(色拉油)及E组(正常饮食).灌胃15 d后,对A、B、C组大鼠制备MCAO模犁,D组行假手术对照.再灌注24 h后测定脑皮质活性氧(reactive oxygen species,ROS)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合成酶(NOS)、乳酸(LD)的含量及活性;并采用逆转录-PCR(RT-PCR)法检测大鼠大脑海马组织缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)mRNA、Bcl-2 mRNA的表达水平.结果 A、B、C、D、E各组大鼠脑ROS水平分别为(114.23±18.91)、(135.89±14.17)、(171.37±25.76)、(94.24±2.23)、(92.06±5.59)荧光强度值/g蛋白(F=9.038,P<0.01);NO水平分别为(6.60±0.77)、(7.13±0.47)、(8.38±0.80)、(5.52±0.16)、(5.23±0.51)μmol/g蛋白(F=10.197,P<0.01);NOS水平分别为(0.817±0.016)、(0.875±0.095)、(1.030±0.101)、(0.557±0.094)、(0.595±0.066)U/mg蛋白(F=14.555,P<0.01);LD水平分别为(0.381±0.069)、(0.446±0.012)、(0.576±0.059)、(0.359±0.021)、(0.310±0.036)mmol/g蛋白(F=10.043,P<0.01);各组HIF-1α mRNA表达水平分别为0.865±0.274、0.635±0.069、0.491±0.067、0.375±0.052、0.361±0.087(F=40.520,P<0.01);海马Bcl-2 mRNA表达水平分别为0.263±0.033、0.330±0.028、0.198±0.034、0.304±0.039、0.236±0.025(F=11.003,P<0.01).结论 LP对MCAO大鼠脑组织的保护作用可能与其减少缺血冉灌注后ROS和LD的蓄积、减轻炎症反应、上调HIF-1α mRNA、Bcl-2 mRNA的表达水平有关.
关键词： 番茄红素 活性氧 大鼠 Sprague-Dawley 大脑中动脉栓塞 -
细菌耐药机制:内源活性氧分子的角色
近年来,细菌耐药现象日渐严重,给抗感染治疗带来重大挑战.携带MCR-1/2或NDM-1等耐药基因的超级细菌的出现,使共性耐药机制的研究迫在眉睫.各类抗生素均诱导细菌代谢的变化,促进活性氧的产生,这些活性氧的水平及过氧化氢等分子的转化方向,决定了活性氧的作用是促进细菌损伤乃至死亡,亦或是诱导突变导致细菌耐药性的产生.本文讨论了抗生素诱导的活性氧的产生、转化及其对耐药发生发展的贡献,并阐述了抗生素诱导形成的间体膜囊通过携带大量过氧化氢外排,使细菌实现耐药的新途径.我们对活性氧参与细菌耐药机制的阐明,将提高抗生素处理的有效性,并为开发新的抗菌药物提供策略.
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线粒体与核基因交互作用的研究进展
线粒体是真核生物细胞中特别重要的细胞器,对其研究已有一个多世纪的研究历史[1],是机体通过氧化磷酸化生成高能磷酸化合物ATP的加工厂,也是细胞凋亡调控和活性氧产生的重要部位.线粒体DNA(mitochondrion DNA,mtDNA)由于自身比较独特的遗传特性(母系遗传、缺乏重组和进化速率高)而被广泛地应用于人类群体的研究.
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高效液相色谱-电化学检测法测定尿中8-羟基脱氧鸟苷含量
活性氧引起的DNA氧化损伤与衰老和一些疾病有关.DNA 中碱基鸟嘌呤C8位易受羟自由基攻击,形成碱基修饰产物8-羟基脱氧鸟嘌呤核苷(8-OHdG).8-OHdG是DNA氧化损伤的特异产物,是公认的内源性及外源性因素对DNA氧化损伤的生物标志物[1].当机体修复机制正常时,8-OHdG可在酶的作用下从DNA链上切除并重新掺入正常的鸟嘌呤碱基,而切下的8-OHdG则经尿液排出体外.8-OHdG在体内稳定存在,一旦形成不再被机体进一步代谢,尿中8-OHdG含量与细胞内DNA氧化损伤有关,且尿样标本易得,可实现无创伤检测,测定尿中8-OHdG含量可作为DNA氧化损伤的标志物[2,3] .
