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应用酵母双杂交系统筛选hTNFα特异性结合肽
肿瘤坏死因子(TNFα)是一种多功能细胞因子,目前已知许多病理性反应与之有关,如类风湿性关节炎、脓毒性休克、慢性心衰等[1].TNF的生物学功能是通过结合到细胞表面相应的受体(TNFR)来实现的,因此在炎症区引入可溶性TNF受体或TNF抗体,与膜上受体竞争性结合TNF,可以抑制TNF介导的生物学活性[2].在临床上,Enbrel、Infliximab和efalizumab等TNF拮抗剂,对类风湿性关节炎、节段性肠炎具有良好的治疗效果[3-5].
关键词： 肿瘤坏死因子(TNF) 酵母双杂交系统 结合肽 -
肿瘤坏死因子调节的肥大细胞蛋白酶激活受体表达分析
目的 检测肿瘤坏死因子(TNF)引起的肥大细胞蛋白酶激活受体(PAR)-1，2，3，4表达。方法 肥大细胞P815培养后以不同浓度的TNF激发肥大细胞，在不同时间点收集细胞，给予聚乙二醇辛基苯基醚( Triton X-100)非Triton X-100处理后用流式细胞术和激光共聚焦方法检测肥大细胞蛋白酶激活受体的表达。结果 TNF激发肥大细胞2h、6h和16 h后，Triton X-100与非Triton X-100处理后，肥大细胞PAR-1，3表达均无明显变化；但TNF以浓度依赖方式上调P515肥大细胞PAR-2，4表达(P＜0.05)；上述各时间点检测PAR-1，2，3表达情况，Triton X-100处理组与非Triton X-100处理组检测结果无明显差异，但PAR-4表达结果显示Triton X-100处理组表达强于非Triton X-100处理组。结论 TNF可以上调P815肥大细胞PAR-2，4表达，但对PAR-1，3表达的调节作用不明显，Triton X-100处理和非Triton X-100处理不影响TNF调节的肥大细胞PARs表达的检测结果。
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促红细胞生成素与炎性细胞因子在脑瘫发病中的作用
目的 探讨脑保护因子促红细胞生成素(EPO)与免疫炎性细胞因子在脑瘫发病中的作用.方法 检测31例脑瘫患儿(脑瘫组)和20名健康儿童(脑瘫对照组)及37例脑瘫高危因素新生儿(新生儿病例组)和20名正常新生儿(新生儿对照组)的血清EPO、肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-6水平.结果 新生儿病例组血清EPO水平明显高于新生儿对照组和脑瘫组(P<0.01),脑瘫组血清EPO水平与脑瘫对照组比较无显著性差异(P>0.05);新生儿病例组血清TNF-α和IL-6水平明显高于新生儿对照组(P<0.01);脑瘫组血清TNF-α和IL-6水平明显高于脑瘫对照组(P<0.01),脑瘫组血清TNF-α水平高于新生儿病例组(P<0.05),但两者间IL-6 水平无显著性差异(P>0.05).结论 炎性细胞因子介导的脑破坏作用在与EPO的神经保护作用的抗衡中占据优势,促进或导致脑瘫的发生.
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2型糖尿病肾病患者血清TNF、Hcy测定的临床意义
目的:探讨2型糖尿病肾病患者(DN)血清肿瘤坏死因子、同型半胱氨酸水平变化在肾病发生、发展过程中的作用.方法:分别应用放射免疫、荧光法测定70例糖尿病肾病患者和60例正常人进行了血清TNF、Hcy的含量.结果:糖尿病肾病患者血清中TNF和Hcy水平非常显著地高于正常人组(P＜0.01).结论:TNF、Hcy 均通过一系列复杂的机制参与了DN的发生和发展,它们对DN的预防和治疗将有重要的临床意义.
关键词： 糖尿病 肿瘤坏死因子(TNF) 同型半胱氨酸(Hcy) -
创伤性休克早期患者血浆TNF和IL-2含量测定及其机制分析
目的:探讨创伤性休克早期患者血浆中肿瘤坏死因子(TNF)和白细胞介素-2(IL-2)含量的意义.方法:采用放射免疫法对21例创伤并休克的患者分别于创伤后0.5、4、24 h 的血浆TNF和IL-2的含量进行测定,并与正常对照组(NC组)36例比较.结果:重度创伤并休克患者血浆TNF明显高于NC组(P＜0.05);IL-2活性明显低于NC组(P＜0.05).结论:创伤性休克患者早期血浆TNF升高,可能与创伤后早期的炎性反应有关,而IL-2活性降低,可能与创伤后巨噬细胞分泌大量的免疫抑制成分有关.
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慢性心衰气虚血瘀证与肿瘤坏死因子的相关性
慢性心衰(CHF)是一种临床常见病、多发病,近年来发病率呈上升趋势.目前研究认为,肿瘤坏死因子(TNF)是一种具有多种生物学效应的细胞因子,在心衰发生、发展过程中起着重要的作用.目前,国内许多研究从西医的神经内分泌指标和中医辨证论治的角度论证了TNF与中医气虚血瘀证的相关性,为进一步治疗慢性心衰提供客观依据.
关键词： 慢性心衰(CHF) 肿瘤坏死因子(TNF) 气虚血瘀证 -
系统性红斑狼疮患者肿瘤坏死因子与HLA-DR基因关联的研究
目的:探讨系统性红斑狼疮(SLE)的发病机理和遗传基础.方法:用聚合酶链反应结合顺序特异的寡核苷酸(PCR/SSO)探针杂交方法对71例汉族SLE患者和69例正常对照组HLA-DR亚区作DNA分型,同时用双抗体夹心ELISA法检测血清中TNFα水平.结果:发现汉族SLE患者中DR2频率显著高于正常对照组,而DR4频率则明显低于正常对照组,活动期SLE患者血清TNFα水平明显高于非活动期SLE患者和正常对照组,而非活动期SLE患者和正常对照组血清TNFα水平无明显差异.DR2阳性的SLE患者TNFα水平低,而DR4阳性的SLE患者TNFα水平则较高.结论:TNFα可能通过HLA-Ⅱ类基因或其单倍型在SLE的发病中起重要作用.
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14-3-3γ和ζ蛋白在小胶质细胞中表达变化的研究
目的 了解14-3-3γ和ζ蛋白在中枢神经系统小胶质细胞中的表达及脂多糖(LPS)刺激后其表达变化情况,探讨14-3-3蛋白与小胶质细胞释放炎症因子的关系.方法 应用小鼠小胶质细胞株BV-2作为体外小胶质细胞的模型,以LPS刺激其活化,应用免疫荧光、流式细胞术检测14-3-3γ和ζ蛋白在刺激前后的表达变化,ELISA检测TNF-α的表达.结果 小鼠小胶质细胞株BV-2在未刺激状态下表达14-3-3γ和ζ蛋白;LPS刺激细胞活化后释放TNF-α,同时14-3-3γ和ζ蛋白表达下降.结论 正常小鼠小胶质细胞高表达14-3-3γ和ζ蛋白,LPS刺激后表达下降,提示其参与了中枢神经系统免疫应答的调节.
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新生儿缺氧缺血性脑病NO、GSH-PX和TNF的含量测定及其临床意义
目的探讨新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)血浆和脑脊液(CSF)中的一氧化氮(NO)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和肿瘤坏死因子(TNF)含量变化及其与HIE不同时期和不同程度间的相关关系.方法对HIE患儿第3天的CSF和出生初入院(HIE 2 h内)、第1天、第2天、恢复期的血浆中NO、SOD进行检测,并与正常对照组比较;分析NO、GSH-PX、TNF的变化原因和意义.结果 HIE患儿血浆中第1天的NO含量高,而GSH-PX相反;初入院、第1天、第3天的血浆中NO、GSH-PX含量与正常对照组对比均有显著性差异(P＜0.01),而恢复期中NO、GSH-PX含量与正常对照组对比无显著性差异(P＞0.05),血浆和HIE第3天的CSF中NO和GSH-PX水平均呈负相关;病情越重NO浓度越高,GSH-PX越低.急性期血浆TNF显著高于对照组(P＜0.01),恢复期两组无显著性差异(P＞0.05).结论 NO、GSH-PX和TNF参与HIE的发病过程,在HIE的发病过程中起着重要作用;检测血浆和CSF中NO、GSH-PX、TNF含量有助于判断HIE患儿病变程度和病情进展.
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不同液体限制性复苏创伤性失血性休克兔的实验研究
目的 研究静脉输注高氧液和高渗盐水对创伤性失血性休克(traumatic hemorrhagic shock,THS)兔生存时间和24、48、72 h存活率的影响.方法 采用Lamson's法制作创伤性失血性休克兔模型.按照高氧液和高渗盐水两因素的有无,采用2×2析因设计,将40只日本长耳大白兔分为4组(n=10):生理盐水组(NS组)、生理盐水高氧液组(NSO组)、高渗盐水组(HS组)、高渗高氧液组(HSO组),在限制复苏期给予不同干预,止血复苏期予以相同干预.于休克前(T1)、休克末(T2)、限制复苏期末(T3)、止血复苏期末(T4)各时间点采取动脉血3 mL检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA),各组动物死亡后或存活满72 h后取左心、左肺、小肠组织观察病理变化,同时观察各组兔子存活时间和24、48、72 h存活率.结果 HSO组存活时间高于其他各组,差异有统计学意义(P<0.05),HSO组24、48、72 h存活率高于其他各组,差异有统计学意义(P<0.05).兔创伤性失血性休克后血浆TNF-α水平较基础值升高,差异有统计学意义(P<0.05),T3、T4时间点TNF-α水平下降,NSO、HS、HSO组TNF-α水平高于NS组,差异有统计学意义(P<0.05).T2时间点,血浆SOD活性较T1时间点下降,差异有统计学意义(P<0.05),T3、T4时间点,各组血浆SOD活性继续下降,但NSO组、HS组、HSO组SOD活性高于NS组,差异有统计学意义(P<0.05).各组兔血浆MDA浓度在T2时间点升高与T1时间点比较差异有统计学意义(P<0.05),T3、T4时间点MDA浓度继续升高,但NSO组、HS组、HSO组MDA浓度低于NS组,差异有统计学意义(P<0.05).NS组心、肾、小肠病理损伤高于NSO组、HS组和HSO组.结论 静脉输注高渗盐水高氧液能延长创伤性失血性休克兔的存活时间,提高24、48、72 h存活率.
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不同照射剂量对脐血贴壁层细胞功能的影响
目的了解不同剂量照射后,脐血贴壁层细胞的吞噬功能及肿瘤坏死因子(TNF)表达水平的变化.方法不同剂量60Co照射脐血贴壁层细胞,采用酶联法测定其吞噬功能及肿瘤坏死因子(TNF)表达.结果脐血贴壁层细胞在接受7.5 Gy 60Co照射后其吞噬功能强,而肿瘤坏死因子(TNF)表达水平则在接受2.5 Gy～5.0 Gy 60Co照射时达高峰.结论脐血贴壁层细胞对照射抵抗力较强,可促进放疗患者机能恢复.
关键词： 60Co照射 脐血贴壁层细胞 肿瘤坏死因子(TNF) -
白介素-6及肿瘤坏死因子在特发性血小板减少性紫癜患者血清中水平变化及临床意义
目的 探讨血清中白介素-6及肿瘤坏死因子(TNF)在特发性血小板减少性紫癜患者血清中数值变化及意义.方法 采用双抗体夹心酶联免疫(ELISA)定量测定方法检测37例ITP患儿和20例正常健康儿童血清IL-6、TNF-的水平,同时对其中25例ITP患儿进行血小板相关抗体 PAIb(IgG、IgA、IgM)的定性测定研究及临床意义.并对 ITP 患儿外周血中血小板,血小板抗体,血清 IL-6,TNF 水平进行相关分析.结果 ITP患儿血清IL-6、TNF水平均高于正常对照组(P<0.1),ITP惠儿治疗前血清IL-6、TNF水平均显著高于治疗后(P<0.01); ITP患儿重度出血组血清IL-6、TNF水平均明显高于轻度出血组(P<0.05);25例ITP患儿血小板相关抗体全阳性9例,阳性率36%(9/25),ITP惠儿血小板相关抗体全阳性组血清 IL-6、TNF 水平均明显高于非全阳性组(P<0.05);ITP患儿治疗前血清 IL-6、TNF 水平与血小板数均呈负相关(r=-0.802,P<0.01;r=-0.700,P<0.01),IL-6与 TNF 水平之间呈正相关(r=0.592,P<0.01).治疗后的IL-6、TNF 水平与正常无明显变化.结论 IL-6、TNF参与ITP的发病过程,其水平高低随病情轻重、病程而变化,说明除体液免疫以外,细胞免疫也参与了ITP的发病过程.
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中枢神经系统感染患儿脑脊液肿瘤坏死因子检测的临床意义
中枢神经系统感染一直是危害儿童健康的常见感染性疾病,其中化脓性脑膜炎(化脑)和病毒性脑炎(病脑)占绝大多数,具较高的病死率和致残率.为探讨肿瘤坏死因子(TNF)在中枢神经系统感染发病中的可能作用机制,我们观察了化脑和病脑患儿血清和脑脊液中TNF的水平变化,现将结果报道如下.
关键词： 中枢神经系统感染 脑脊液 肿瘤坏死因子(TNF) -
四逆汤对失血性家兔肿瘤坏死因子的影响
目的:探讨中药四逆汤对失血性休克家兔肿瘤坏死因子的影响.方法:采用动物分组对照实验,测量不同状态下动物血浆肿瘤坏死因子的变化.结果:与休克前比较,休克组的家兔血浆肿瘤坏死因子水平各时段均明显提高(P<0.01),而治疗组仅在治疗后30min家兔肿瘤坏死因子水平均明显提高(P<0.05),而其他时段与休克前比较未见显著差异(P>0.05)其他时段与休克前比较,虽有升高但无显著性差异(P>0.05),两组间各时段比较,未见显著性差异(P>0.05).
关键词： 四逆汤 失血性休克 肿瘤坏死因子(TNF) -
清热解毒法对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤保护作用的实验研究
为研究清热解毒法对局灶性脑缺血再灌注损伤的作用,35只 Wistar 大鼠均分为5组:脑宁康组(A)、阿斯匹林组(B)、模型组(C)、假手术组(D)和空白组(E),前两组分别以脑宁康(主药:野菊花、夏枯草、蚤休、半边莲、大黄、水蛭、陈皮、川芎)、阿司匹林灌胃,后三组以等量生理盐水灌胃.20d后,采用颈内动脉栓线法造成大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型.在此基础上比较各组大鼠血 TNF 含量,并观察脑组织形态变化.结果:C 组 TNF 较 D 组高;A、B 组 TNF 较 C 组低,且 A 组优于 B 组.光镜、电镜观察显示,D 组神经细胞形态正常,C 组神经细胞损伤显著,A、B 两组细胞的损伤较 C 组轻.提示清热解毒法对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能与降低血 TNF 含量有关.
关键词： 脑缺血再灌注损伤 大鼠模型 肿瘤坏死因子(TNF) 神经病理 -
连续性静-静脉血液滤过治疗对外周血细胞因子的影响
目的研究连续性静-静脉血液滤过(CVVH)对外周血中肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-1β(IL-1β)、 白细胞介素-8(IL-8)和内皮衍生血管舒张因子(一氧化氮, NO)浓度的影响.方法 10例重症急性肾功能衰竭(AFR)患者在明确诊断后行CVVH, 每天持续10～12 h.采用中心静脉留置单针双腔导管建立血管通路, AK-10血泵建立体外循环,血滤器采用FH66D型(聚酰胺膜, 0.6 m 2).治疗前和治疗后1、 2、 3、 6、 9和12 h(或结束时)取血和超滤液检测TNF、 IL-1β、 IL-8和NO的浓度.结果 10例患者均存活且脱离血液滤过治疗.4种细胞因子在超滤中均未能检出.CVVH开始1 h后外周血中TNF浓度轻度升高,但在治疗过程中缓慢降低, 6 h时达到低水平,与治疗前和治疗1 h相比差异显著( P ＜0.05, P ＜0.01), 随后直到12 h时,其浓度基本稳定无显著变化; IL-1β水平在治疗后有下降趋势, 6 h降至低值,但与治疗前相比差异不显著, 6～12 h间有所回升, IL-8浓度也呈同样变化趋势.NO水平在CVVH开始后亦缓慢降低, 9 h时达到低值,但与治疗前相比差异不显著.结论使用FH66D型血滤器行CVVH对各种细胞因子的清除效能不同:治疗6 h时TNF水平显著降低, IL-1β, IL-8和NO水平在治疗过程中无显著变化;适时更换血滤器可能有助于这些介质的清除.
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膜分离工艺对清络通痹颗粒抑制佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞分泌TNF作用的影响
目的观察以膜分离工艺制备的清络通痹颗粒对佐剂性关节炎(AA)大鼠滑膜细胞分泌TNF的影响.方法将清络通痹颗粒治疗过的佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞进行体外培养,收集细胞上清,检测TNF的活性.结果治疗组滑膜细胞的TNF含量明显低于模型组,P<0.05.结论膜分离工艺制备的清络通痹颗粒能明显降低佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞分泌的TNF.
关键词： 膜分离工艺 清络通痹颗粒 滑膜细胞 肿瘤坏死因子(TNF) -
金属蛋白酶-9和肿瘤坏死因子在子宫内膜异位症的表达
具有生长功能的子宫内膜组织出现在子宫腔被覆黏膜以外的身体其他部位时称为子宫内膜异位症(endometriosis,EM).EM是一种具有恶性侵袭行为的良性妇科疾病,主要的临床表现为痛经、盆腔包块和不孕等,近年发病率不断上升,严重影响妇女的生殖健康及生活质量.其发生机制至今尚不清楚,故引起研究者的广泛关注,并成为当今一个研究热点.已有大量研究报道,免疫系统的变化,包括各种免疫球蛋白、细胞因子(CK)、整合素家族等均参与了EM的发病过程,并起着关键作用.
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绿脓杆菌MSHA菌苗对肝纤维化大鼠血清TNF的影响
目的探讨绿脓杆菌MSHA菌苗对肝纤维化大鼠血清肿瘤坏死因子(TNF)的影响.方法采用以人血白蛋白攻击方法制备肝纤维化动物模型,放免法测定血TNF,免疫组化法观察肝内层粘蛋白改变.结果菌苗保护组TNF水平较损伤组、正常对照组明显升高,并且保护组肝内层粘蛋白沉积明显减少.结论菌苗能明显提高肝纤维化大鼠血清TNF水平.
关键词： 肝纤维化 肿瘤坏死因子(TNF) 绿脓杆菌MSHA菌苗 -
加味承气汤对继发性腹膜炎大鼠血清ET及TNF影响的实验研究
目的:为降低继发性腹膜炎死亡率和并发症,筛选出更有效的治疗方法.方法:以大白鼠为实验对象,经盲肠结扎加穿孔术制成继发性腹膜炎模型,用加味承气汤、大承气汤、灭滴灵、生理盐水分别对四组大鼠分别进行治疗,并检测24小时、72小时、给药后六天血清中ET及TNF含量.结果:清下益活四法并用的加味承气汤组,能迅速有效地降低血清中ET及ENF的浓度,给药六天后内毒素减毒率达50%,与另三组比较,有显著性差异.并且大鼠组织、器官的病理损害较轻,提高了大鼠的生存率.结论:加味承气汤可有效防治内毒素血症和多器官功能损害的发生.
关键词： 继发性腹膜炎 内毒素(ET) 肿瘤坏死因子(TNF) 加味承气汤
