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南方汉族人群KIR2DL4基因的多态性及五个新等位基因的鉴定
目的 研究南方汉族人群KIR2DL4基因的遗传多态性.方法 采用自行设计的PCR引物对306名南方汉族无关个体KIR2DL4框架基因的8个外显子进行扩增,之后进行双向测序,用Assign 3.5软件分析各样本的等位基因型.对与国际IPD-KIR数据库不完全匹配的样本进行cDNA分子克隆和单倍型测序.结果 共检出11种KIR2DL4等位基因,其中KIR2DL4*00503、*00504、*032、*033、*034被WHO HLA因子命名委员会KIR分委会正式命名为新等位基因.检出的等位基因及其频率分别为KIR2DL4*00102(75.5％)、*00103 (8.2％)、*00501 (34.0％)、*00503 (0.7％)、*00504 (0.7％)、* 00602(14.4％)、*00801(11.4％)、*011(22.2％)、*032(0.3％)、*033(0.3％)和*034(0.3％).第7外显子CDS nt811位置正常的10A型等位基因(KIR2DL4*00102、*00103、*00501、*00503、*00504、* 00602、*032、*033、*034)和CDS nt811位置缺失腺嘌呤的9A型等位基因(KIR2DL4*00801、*011)的检出比例分别为97.0％及33.0％,约为2.9∶1.结论 获得了南方汉族人群KIR2DL4等位基因分子遗传多态性的基础数据,可为移植、生殖免疫、疾病关联研究及人类进化等提供参考.
关键词： KIR2DL4框架基因 测序分型 新等位基因 cDNA 分子克隆 -
新等位基因HLA-B*13:01:06的核苷酸序列分析
目的 对1例HLA新等位基因进行确认并分析其核苷酸序列.方法 采用Qiagen试剂盒提取样本DNA,PCR-测序分型技术获得HLA-A、HLA-B、HLA-C、HLA-DRB1的核苷酸序列及HLA高分辨率分型结果,并分析HLA-B位点与HLA-B* 13:01:01等位基因序列的异同.结果 HLA-B位点中发现1个与HLA-B* 13:01:01核苷酸序列高度相似的新等位基因,与HLA-B* 13:01:01相比,该等位基因第2外显子的219位碱基出现G→A点突变,49位密码子由GCG→GCA,两者编码的氨基酸相同.结论 该基因序列为新的HLA等位基因,并被世界卫生组织HLA因子命名委员会正式命名为HLA-B* 13:01:06.
关键词： 等位基因 HLA-B* 13:01:06 测序分型 -
HLA新等位基因HLA-DRB1*09:01:07的序列分析及确认
目的 研究并确认在中国汉族人群中发现的1个HLA新等位基因序列.方法 应用聚合酶链式反应-序列特异性寡核苷酸探针(polymerase chain reaction-sequence-specific oligonucleotide probes,PCR-SSOP)基因分型技术和基于测序的分型技术(sequencing-based typing,SBT)对1名中华骨髓库辽宁分库汉族捐献者的HLA-A、-B、-DRB1基因进行分型,通过软件分析该基因序列及与相近等位基因序列的差异.结果 PCR-SSOP分型时该个体HLA-DRB1基因型为DRB1*09:03,15GEP,但探针反应格局出现异常;测序结果为DRB1 *15:01:01和一个DRB1*09新等位基因,比较新等位基因与序列相近的等位基因DRB1 *09:01:02在nt306 C→T,导致相应的第73位密码子GCC→GCT,但其编码的氨基酸未改变,仍为丙氨酸.结论 发现一个HLA-DRB1新等位基因,被世界卫生组织HLA因子命名委员会正式命名为HLA-DRB1*09:01:07.
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人类白细胞抗原HLA-Cω基因第2,3,4外显子测序分型方法的初步研究
目的 初步建立可靠的HLA-Cω基因第2、第3和第4外显子测序分型技术.方法 基于中国汉族人群HLA-Cω基因的全长序列,设计和合成1对PCR引物,采用Stratagene P fu Taq DNA聚合酶特异性扩增HLA-Cω基因5'-启动子区至第4内含子目的基因片段,涵盖完整的第1～4外显子.PCR产物经纯化,采用自行设计的6条测序引物和ABI PRISM BigDye 1.1 Terminator,以及优化的测序反应体系和PCR条件,对HLA-Cω,基因第2、第3和第4外显子进行双向测序.测序反应产物纯化后,采用ABI3730测序仪电泳和Assign 3.5 SBT软件分析结果.结果 PCR扩增获得了清晰的HLA-Cu,基因日的片段,所用的6条测序引物进行HLA-Cω基因第2、第3和第4外显子测序,序列中无背景信号和杂峰.156份汉族随机骨髓志愿捐献者样本用本文的方法检测.分型结果与Atria AlleleSEQR HLA-Cw Plus测序分型试剂盒的结果相一致.结论 初步建立了可靠的HLA-Cω基因测序分型方法,在HLA-Cω基因群体遗传学及组织配型等领域,具有广泛应用前景.
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南方汉族人群功能性KIR框架基因测序分型中模棱两可的结果及解决策略
目的：探讨南方汉族人群中功能性 K IR 框架基因全部编码区测序分型中模棱两可结果的种类及其解决方法。方法对306份南方汉族人群的14个功能性 K IR 框架基因的全部编码区进行测序分型,统计模棱两可结果的种类及比例,针对每种模棱两可结果中等位基因编码区序列碱基的差异,设计组特异性 PCR 及测序引物,进行组特异性 K IR 等位基因 PCR 扩增和再测序,以鉴定等位基因型别。结果发现KIR2DL5、3DL2和3DL3存在6种模棱两可的结果,种类及其比例依次为：3DL2?(002,007/010,015)占12.09%(37/306),(2DL5A?001,2DL5B?006/2DL5A?012、2DL5B?008)占5.88%(18/306),3DL3?(001,010/009,048)占3.59%(11/306),3DL2?(007,008/016,027)占2.29%(7/306),3DL3?(00801,048/01001,026)及3DL3?(00802,048/01002,026)均占1.31%(4/306)。除了(2DL5A?001,2DL5B?006/2DL5A?012,2DL5B?008)、3DL2?(007,008/016,027)两组模棱两可结果均分别只检出其中的一种基因型外,其余的4组模棱两可结果每组中均检出了不同的基因型。结论我们建立了有效的组特异性引物扩增和测序方法鉴定模棱两可的结果,在 KIR 测序分型中具有广泛的应用价值。
关键词： 杀伤细胞免疫球蛋白样受体 测序分型 模棱两可 组特异性引物 -
KIR的分子遗传多态性及测序分型技术的研究进展
杀伤细胞免疫球蛋白样受体(killer cell immunoglobulin-like receptor,KIR)为免疫球蛋白超家族成员,主要表达于自然杀伤细胞(natural killer,NK)和某些 T 细胞亚群。KIR 主要与人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)Ⅰ类分子配位,组成 KIR-HLA 受配体复合物,传导激活或抑制信号,调节 NK 细胞活性,在移植免疫、肿瘤免疫、抗感染免疫以及自身免疫性疾病等生理病理过程中起重要作用。本文阐述了 KIR 分子遗传多态性,总结了当前国际 KIR 测序分型方法的特点及急待解决的问题。
关键词： 自然杀伤细胞 杀伤细胞免疫球蛋白样受体 遗传多态性 测序分型 -
中国南方汉族人群HLA-DPA1和-DPB1基因多态性及其常见和确定的等位基因研究
目的 研究中国南方汉族人群人类白细胞抗原(HLA)基因HLA-DPA1和-DPB1的多态性及常见和确定的(CWD)等位基因.方法 计算机随机数表法选择2010年2月至2011年9月,于深圳市血液中心采集的1 730份汉族健康志愿献血者全血样品为研究对象.采用HLA-DPA1及-DPB1基因第2外显子同步测序分型方法对血液样品的HLA-DPA1和-DPB1基因进行测序分型,对模棱两可的分型结果采用组特异性引物测序法鉴定.测序反应产物经乙醇醋酸钠/乙二胺四乙酸方法纯化后,采用ABI 3730测序仪进行测序,测序结果导入Assign 3.5测序分型软件,判定HLA-DPA1和DPB1等位基因型.结果 本组1 730例中国南方汉族无关个体中,共检出7种HLA-DPA1等位基因,其中基因频率＞0.1％的5种常见型等位基因依次为DPA1* 02∶ 02(54.65％)、DPA1* 01∶ 03(31.24％)、DPA1* 02∶ 01(10.26％)、DPA1 *04∶ 01(3.64％)及DPA1* 01∶04(0.12％);另2种为罕见型的新等位基因,其检出次数均＜3次.共检出了33种HLA-DPB1等位基因,其中20种为常见型等位基因,其基因频率均＞0.1％;2种为确定型等位基因,其基因频率＜0.1％,但检出次数≥3次;其余11种为罕见型等位基因,其中含2个新等位基因.结论 本研究建立了HLA-DPA1和-DPB1基因第2外显子双向测序及组特异性引物鉴定模棱两可分型结果的分型技术,初步获得了中国南方汉族人群HLA-DPA1、-DPB1基因遗传多态性及CWD等位基因资料.
关键词： 人类白细胞抗原 测序分型 组特异性引物 常见和确定的等位基因 -
南方汉族人群HLA-DPA1和-DPB1基因多态性与鼻咽癌的关联研究
目的 探讨人类白细胞抗原(HLA)-DPA1和-DPB1基因多态性与中国南方汉族人群鼻咽癌的相关性.方法 选择2012年2月至7月于广西梧州市红十字会医院及深圳市武警医院经病理学检查确诊为鼻咽癌(NPC)病变的南方汉族患者74例为研究对象,纳入研究组；计算机随机选择同期于本中心献血的南方汉族健康志愿捐者160例,纳入对照组(本研究遵循的程序符合本院人体试验委员会所制定的伦理学标准,得到该伦理会批准,分组征得受试对象本人的知情同意,并与之签订临床研究知情同意书).采用测序分型方法对研究组和对照组的血液样本进行HLA-DPA1和-DPB1基因第2外显子双向测序,用Assign 3.5 SBT分析软件判定等位基因型.采用Wolf法进行x2检验并计算P值和相对危险度(RR),比较研究组和对照组HLA-DPA1和-DPB1等位基因频率的差异.结果 研究组和对照组中,均检出4个DPA1等位基因,即DPAl* 01:03,02:01,02:02和04:01.作为多态性丰富的HLA-DPB1位点,研究组中共检出14个等位基因,对照组中共检出18个等位基因.研究组与对照组的HLA-DPA1和-DPB1等位基因的基因检出率比较,差异均无统计学意义(x2＜3.84,P＞0.05).结论 本文的结果初步显示中国南方汉族人群中HLA-DPA1和-DPB1基因多态性与NPC无相关性.
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一例供者携带的C* 03:100等位基因的测序分析
目的 检测与分析1例骨髓志愿捐献者携带的等位基因C* 03:100.方法 采用快速DNA提取试剂盒从全血样本中提取基因组DNA,经HLA-C基因商品化测序分型试剂盒扩增,纯化后的扩增产物作为模板由试剂盒配套的第2,3和4外显子正反向测序引物及自行研制的第5外显子正反向、第6外显子正向和第7外显子反向测序,经乙醇/醋酸钠/EDTA纯化的测序反应产物于ABI PrismTM 3730测序仪电泳检测.结果 将电泳后的数据导入Assign-SBT 3.5.1.45分析软件分析,分型结果为C*03:02:02,03:100.结论 临床移植配型HLA-C基因分型增加第5,6和7外显子区域的多态性检测可提高分型结果的准确性,对临床组织配型工作具有重要意义.
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PCR扩增产物磁珠纯化法应用于HLA测序分型的研究
目的 探讨PCR扩增产物磁珠纯化法应用于HLA测序分型的可能性.方法 采用本实验室建立的HLA-C基因测序分型方法 中的PCR扩增、测序反应和测序纯化等步骤,对96份标本特异性扩增HLA-C基因外显子1～4目的 序列片段约为2 000 bp,扩增产物分别采用OMEGA公司(瑞士)磁珠纯化法及USB公司(美国)的外切酶I和虾碱性磷酸酶的混合物和Atria HLA-C SBT plus试剂盒配套使用的外切酶I和虾碱性磷酸酶的混合物进行纯化和平行对照,经HLA-C基因第2、3和4外显子双向测序反应,纯化后的测序反应产物采用ABI 3730测序仪电泳检测,Assign 3.5.1.45分析软件判定结果,统计可判定受检者HLA基因型的样本的总数,并计算BCS(base calling score)平均值.结果 经磁珠纯化法纯化PCR扩增产物测序反应后得到的序列质量BCS平均值为81.191±3.539;Atria ExoSAP-IT纯化后测序反应所获得序列BCS平均值为79.946±3.778,USB外切酶I和虾碱性磷酸酶的混合物测序反应所获得序列BCS平均值为70.384±5.778.上述纯化方法 的碱基A,G,C和T的峰高均在1 000以上;平均每人份10μL扩增产物的纯化成本,磁珠法明显比外切酶I和虾碱性磷酸酶的混合物法便宜很多.结论 磁珠纯化试剂成本低、无需冷冻保存,HLA测序分型中序列质量效果较好,具有良好的实用价值.
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DNA工作站在HLA测序分型中的应用
目的 建立从全血样本中高通量提取基因组DNA的方法,以应用于HLA常规测序分型.方法 采用DNA工作站及2 ml深孔板,从400份全血样本中提取基因组DNA.用紫外分光光度仪测定其浓度和A<,260>/A<,280>值,并采用琼脂糖电泳检测DNA的完整性.扩增产物经纯化后作为测序模板,产物经酒精/EDTA/NaOAc法纯化,用ABI Prism<'TM>3730测序仪电泳检测.相关的分析软件分析HLA基因型.结果 使用400μL全血中400份样本的DNA产量平均为(3.217±0.715)μg,A<,260>/A<,280>值平均为1.710±0.103;琼脂糖电泳表明DNA的分子量均大于15×10<'3>;HLA-A、HLA-B和HLA-DRB1座位序列碱基峰高均在2000以上,测序评分在75分以上.48份HLA-A、B和DRB1基因型已知的室内质控样本,经本文的方法提取DNA并进行HLA基因分型,经盲检质控检测,所得到的结果与已知的HLA基因型相一致.结论 采用本方法所提取的DNA能稳定、可靠地应用于骨髓捐献者样本的HLA-A、B和DRB1座位测序分型,具有快速、高通量化的特点和广泛的应用前景.
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南方汉族强直性脊柱炎患者及健康人群HLA-B27基因的分子多态性及分布
目的 研究南方汉族强直性脊柱炎(AS)患者及健康人群HLA-B27亚型等位基因的多态性和分布特点.方法 采用HLA测序分型方法,对收集到的46份B*27阳性的南方汉族AS患者血样以及随机选择的80份经rSSO HLA流式磁珠低分辨检测为B*27阳性的造血干细胞南方汉族捐献者血样,做HLA-B基因的第2-4外显子测序分型,测序反应产物用ABI PrismTM 3730测序仪检测,Assign3.5分析软件分析结果.对检出的模棱两可结果及"罕见型"等位基因,辅以PCR-SSP法HLA-B27高分辨基因分型.结果 46名南方汉族AS患者中,共检出4个HLA-B*27相关的等位基因:B*2704的检出比例高,为82.98%(39/47);其次是B*2705,为12.77%(6/47);B*2707和B*2724各为2.13%(1/47).80名南方汉族造血干细胞捐献者中,共检出7种B*27相关等位基因:以B*2704的检出比例高,为57.32%(47/82);其次为是B*2705,为26.83%(22/82);B*2706和B*2707各为6.10%(5/82);B*2703、B*2715和B*2724各为1.22%(1/82).结论 南方汉族AS患者HLA-B*27基因中以B*2704为常见,健康人群以B*2704和B*2705等位基因为主要亚型.
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对LABType(R) SSOP HD试剂的不确定HLA分型结果的分析
目的 总结使用LABType(R)流式磁珠反向杂交法(polymerase chain reaction-sequence specific oligonucleotide probes,PCR-SSOP)高分试剂(high definition,HD)对人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)分型的经验,对其不确定结果进行分析.方法 用测序分型(sequencing-based typing,SBT)的方法对SSOP HD试剂HLA分型得到的不确定结果进行验证分析,比较两者之间的差别.结果 2种分型方法在低分水平上是完全一致的,在高分水平上仅1例不符,吻合率为98％,这50份验证样本的SSOP不确定分型结果中,12份样本的SSOP检测结果出现明显的磁珠假性反应,2份为SSOP不能区分的基因型,36份为HLA罕见型.结论 用LABType(R) SSOP HD试剂进行HLA高分辨分型的结果可靠,对稀有型和调整探针后的结果应进行验证,保证HLA基因分型结果的准确.
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KIR3DL3等位基因多态性与南方汉族人群白血病的关联研究
目的 了解中国南方汉族人群KIR3DL3等位基因多态性与白血病的相关性.方法 收集急性髓系白血病患者(AML组,n=137)、急性淋巴细胞白血病患者(ALL组,n=141)以及健康无关志愿献血者(对照组,n=306)的血样(3组均为南方汉族),提取基因组DNA,应用本实验室设计的引物对KIR3DL3全部外显子进行测序分型,用As-sign 4.7.1软件判定基因型.使用SPSS 22.0统计软件对2个病例组与对照组中检出的每个KIR3DL3等位基因做差异性分析.结果 AML组、ALL组和对照组分别检出了12、14、16种等位基因.ALL病例组和对照组中KIR3DL3*004和*028等位基因的检出比例分别为12.77％(18/141)vs1.63％(5/306)与11.35％(16/141)vs 3.27％(10/306),(Pc＜0.05).AML病例组中检出的各等位基因的检出比例与对照组比较无明显差异(P＞0.05).结论 本组人群携带的KIR3DL3* 004、*028等位基因为中国南方汉族人群发生ALL的易感因子.
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南方汉族人群HLA-E基因测序分型及其分子遗传多态性研究
目的 研究南方汉族人群HLA-E基因的分子遗传多态性.方法 随机选择150人份南方汉族健康无关个体,采用1对PCR引物特异性扩增HLA-E基因第1-5外显子目的序列,纯化后的PCR扩增产物作为测序模板,对HLA-E基因的第2、3、4外显子进行双向测序,测序反应产物纯化后经ABI3730测序仪电泳,用Assign 3.5 SBT软件分析结果.结果 所检测的150例标本均扩增出清晰的目的条带,对HLA-E基因外显子2-4进行双向测序,所获得的序列无背景信号和杂峰.检出了2种HLA-E等位基因,其中HLA-E* 01∶01等位基因频率为0.42,HLA-E* 01∶03等位基因频率为0.58.3种HLA-E基因型频率的分布符合Hardy-weinberg平衡定律.结论 本文所获得了南方汉族人群HLA-E基因分子遗传多态性等基础数据,可为HLA-E的疾病关联研究、临床移植等提供重要参考.
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湖南地区汉族健康人群HLA-B*27基因多态性调查
目的 调查湖南地区汉族健康人群中HLA-B* 27基因多态性.方法 对3488名湖南汉族健康造血干细胞志愿捐献者进行HLA -B基因测序分型,对HLA-B* 27健康携带者亚型分布情况进行分析.结果 3488名湖南汉族志愿捐献者中,共检出HLA-B*27基因健康携带者99名,在人群中的分布比例为2.84％,男女比例无明显差异.99名健康携带者中,共检出HLA-B*27基因亚型6种,其中以HLA -B*27∶04为主(68/100),其次是HLA-B* 27∶05(18/100),HLA -B*27∶06(7/100),HLA-B* 27∶ 07(3/100),HLA-B* 27∶ 02 (2/100),HLA-B*27:24(2/100).结论 湖南地区汉族健康人群HLA-B* 27基因亚型以B*27∶04、B*27∶05为主.
关键词： HLA-B*27亚型 测序分型 -
KIR2DL4基因测序分型中杂合碱基位置峰高不平衡现象及其意义
目的 研究KIR 2DL4基因测序分型中序列及分型结果“异常”的原因.方法 2016年5月对KIR 2DL4基因测序分型时检出的2例杂合碱基位置峰高不平衡、判定为模棱两可结果或无完全匹配分型结果的标本,采集新鲜外周血样,提取mRNA,反转录成cDNA后,进行cDNA分子克隆和单体型测序;同时采用荧光定量法检测基因组DNA中2DL4基因的拷贝数.结果 分子克隆和单体型测序表明,1例标本携带正常的KIR 2DL4*00102,*00501及*011等位基因;另一标本中检出了KIR 2DL4* 00102,* 00501及*00602等位基因.2例标本中均检出了3种不同的KIR 2DL4等位基因,无新等位基因检出.荧光定量PCR实验证实这2例标本KIR 2DL4拷贝数均为3个.结论 人类KIR单体型上KIR 2DL4基因的拷贝数存在多样性,当出现杂合碱基位置峰高不平衡、无与之完全匹配分型结果,并非由新等位基因所致.
关键词： KIR 2DL4基因 测序分型 基因拷贝 杂合碱基 峰高 -
KIR3DL3基因测序分型中模棱两可结果的鉴定方法
目的 探讨KIR3DL3基因测序分型中出现的模棱两可结果的鉴定方法.方法 对南方汉族614例白血病患者的KIR3DL3基因的全部编码区进行测序分型,统计KIR3DL3模棱两可等位基因结果的种类及比例,针对每种模棱两可结果中等位基因编码区序列碱基的差异,设计组特异性PCR引物,进行组特异性KIR3DL3基因PCR扩增和再测序,鉴定KIR3DL3的基因型.结果 共检出了7种新的KIR3DL3模棱两可的结果,其中3DL3*(00301,01002/00902,028)检出了7例,占1.14％(7/614);3DL3*(00102,01501/00601,00901/02102,023)、3DL3*(00402,01002/00802,028)、3DL3*(00402,01001/00801,028)分别检出了6例,均占0.98％ (6/614);3DL3*(00301,01001/00901,028)、3DL3*(00301,00801/00402,00901)、3DL3*(00301,00802/00402,00902)分别检出了3例,均占0.49％(3/614).这7种模棱两可组合分别采用组特异性PCR引物均能准确的鉴定出KIR3DL3基因型,其中3DL3*(00102,01501/00601,00901/02102,023)、3DL3*(00402,01001/00801,028)和3DL3*(00301,00802/00402,00902)的模棱两可组合样本均鉴定出1种基因型,其余的模棱两可组合均检出了2种不同的基因型.结论 本文为鉴定KIR3DL3模棱两可的结果建立了可靠的鉴定方法,具有良好的实用价值.
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维吾尔族人群HLA-Cw等位基因遗传多态性研究
目的 研究新疆维吾尔族人群HLA-Cw等位基因的遗传多态性.方法 采用自行建立的HLA-Cw基因测序分型方法 ,并辅以Ariza商品化测序试剂盒,对100份维吾尔族无关个体血样进行HLA-Cw基因的第2和第3外显子进行序列测定;用ABI PrismTM 3100检测测序反应产物,Assign3.5分析软件分析结果 .结果 (1)经Assign3.5软件分析,能直接分析出明确的HLA-Cw等位基因型的样本占30%;排除罕见等位基因后,可判定HLA-Cw等位基因型的样本占33%;其余的样本经PCR-SSP高分辨分型试剂盒检测后,可判定出等位基因型;(2)在70份模棱两可的结果 中,共有41种NMDP Allele Code,出现120次,其中频率在5%以上的有03BPSK等7种,其频率之和>50%(61/120);(3)检出了27种HLA-Cw等位基因,频率大于10%的2种常见等位基因为:Cw*0602>Cw*0102,介于5%-10%的依次为:Cw*0401>Cw*0303>Cw*0701>Cw*1502,维吾尔族中Cw*02, 04, 05, 06组与Cw*01, 03, 07, 08组的频率分别为0.295和0.485;(4)共检出62种HLA-Cw等位基因型,基因型频率的分布符合Hardy-Weinberg定律.结论 本文的结果 可为骨髓库和临床无关供/受者样本的HLA-Cw高分辨基因分型提供重要参考;所得到的HLA-Cw位点的等位基因频率可为人类学、遗传学等研究提供基础数据.
关键词： 人类白细胞抗原(HLA) 维吾尔族 HLA-Cw位点 测序分型 遗传多态性 -
PCR-ST Amp法应用于HLA-DRB1测序分型的研究
目的采用单管PCR扩增(ST Amp)方法建立高效的人类白细胞抗原-DRB1(HLA-DRB1)基因测序分型(SBT)技术并探讨其应用价值.方法合成7个5′端特异性扩增引物和1个3′端共用引物,将上述引物混合在一起组成单个PCR反应用于HLA-DRB1的DNA测序分型分析.结果所有样本都能成功分型,分型结果准确可靠,重复性好.结论 ST Amp法改进了测序分型技术,具有高分辨率、高特异性和高效率的特点,值得推广应用.
关键词： 人类白细胞抗原-DRB1 测序分型 单管扩增
