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多形性平滑肌肉瘤和去分化平滑肌肉瘤的临床病理学分析
目的 探讨多形性平滑肌肉瘤(PLMS)和去分化平滑肌肉瘤(DLMS)的临床病理学特征、鉴别诊断及生物学行为.方法 回顾性分析2007年11月至2016年12月复旦大学附属肿瘤医院手术(8例)及会诊病例(41例)共49例PLMS和DLMS患者的临床资料、组织学形态和免疫学表型,其中33例有存档切片可供分析免疫表型,38例有随访资料.结果 男性22例,女性27例;发病年龄24~83岁,平均52.5岁.肿瘤位于四肢15例,深部体腔14例,躯干11例,头颈部4例,膀胱2例,腹股沟、会阴部和股静脉各1例.肿瘤直径3~30 cm,平均9.1 cm.镜下观察:PLMS和DLMS具有大致相似的组织学形态,由经典平滑肌肉瘤(LMS)和多形性/未分化肉瘤成分组成,2种成分比例不等(至少局灶可见LMS成分),常相互混杂,亦可突然移行或逐渐过渡.其中,经典LMS成分呈典型平滑肌肿瘤特征,大多分化良好至中等,多形性/未分化肉瘤成分形态类似于未分化多形性肉瘤/恶性纤维组织细胞瘤.免疫组织化学表型方面,经典LMS成分至少表达1种肌源性标志物,多为强阳性,α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、结蛋白、H-caldesmon、肌特异性肌动蛋白(MSA)和calponin的阳性比例分别为97.0%(32/33)、72.7%(24/33)、90.9%(20/22)、14/16和15/15.在29例(87.9%, 29/33)中,多形性肉瘤成分至少表达1种肌源性标志物,多为局灶阳性或阳性强度较经典LMS成分弱:α-SMA、结蛋白、H-caldesmon、MSA和calponin的阳性比例分别为81.8%(27/33)、48.5%(16/33)、72.7%(16/22)、12/16和11/15.根据多形性肉瘤成分是否表达肌源性标志物,29例可归类为PLMS,4例为DLMS.Ki-67阳性指数为15%~70%,平均为40%.38例获得随访资料,11例(28.9%)死于该病,12例带瘤生存,14例无瘤生存,1例死于他因.中位无瘤生存和总生存时间分别为6个月和10个月.12例复发,11例转移,中位肿瘤进展时间为8个月.结论 PLMS和DLMS由经典LMS和多形性/未分化肉瘤成分组成,仔细寻找典型LMS成分是其诊断关键.两者较经典LMS具有更强的侵袭性,预后不佳.
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整合素与软骨细胞去分化
Objective In order to provide a better way to increase the quality of tissue-engineered cartilage, the effects of integrin on the dedifferentiation of chondrocyte were reviewed.Methods By searching PubMed and CBM, we reviewed published papers on integrin and chondrocyte dedifferentiation and analyzed the effects of integrin. Results ( 1 ) Integrin is a transmembrane glycoprotein on the surface of chondrocyte, belonging to the family of cell adhesion molecules. As the surface receptor of chondrocyte, it plays an important role in the interaction between the cell and extracellular matrix ( ECM ). ( 2 ) Integrin, which can be combined with a variety of signaling protein in the ECM, will transmit the stimulus signals to the cytoskeletal ( CSK ) and cytosolic proteins. Additionally, it can regulate the function of chondrocyte and affect the dedifferentiation through multiple pathways. ( 3 ) As a bridge between CSK and ECM, there are a number of critical junctions in the integrin which ensure normal operation of the signal of ECM-Integrin-CSK. ( 4 ) Because of the structural characteristics, a unified system of ECM and the intracellular protein are linked by integrin, which can be used to mediate the stimulation and regulate the function of chondrocyte.Conclusions Chondrocyte dedifferentition is closely related to integrin, which can affect cell viability, cell adhesion and cell phenotype. Due to the transmition of ECM, it can regulate the chondrocyte dedifferentiation process through specific singling pathway.
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肝干细胞与肝癌关系研究进展
目前,公认的肝癌发生机制有两种:其一,癌变由肝脏干细胞的异常分化引起;其二,癌变由成熟肝细胞去分化而致~([1]).
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软骨细胞培养中细胞去分化和再分化研究进展
软骨细胞是软骨组织工程种子细胞的一个重要来源,应用自体软骨细胞构建的组织工程软骨可以成功修复大型哺乳动物关节承重面的缺损[1].自体软骨细胞移植术作为一种有效和成熟的技术已开始应用于临床关节软骨缺损修复[2],但软骨组织中的软骨细胞数量较少,接种支架前需要进行足量的扩增才能满足修复缺损的要求.
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十年一剑:筑就"细胞去分化"学术丰碑——访解放军总医院生命科学院院长、中国工程院院士付小兵教授
风趣、帅气与严谨--付小兵院士给记者留下了如此深刻的印象.记者与付小兵院士是多年的老相识了.2000年记者还在医院工作时,因为科研的需要,得到过付小兵院士从国外带回的一些珍贵的科研资料,并由此建立了深厚的友谊.
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适量循环压应力影响细胞骨架促进关节软骨细胞的合成代谢
背景：不同的力学刺激可以对软骨细胞的代谢水平产生影响，但其作用方式不明。
目的：研究在压应力和拉应力作用条件下，参与软骨细胞分解与合成代谢基因表达水平的变化。
方法：提取2周龄SD大鼠的关节软骨细胞，对原代软骨细胞进行鉴定。第1代软骨细胞施加应变量为3%和7%的循环拉应力和循环压应力，测定关节软骨细胞相关基因的改变。
结果与结论：当3%的循环拉应力作用于软骨细胞时，其合成代谢基因Ⅰ、Ⅱ型胶原，蛋白多糖 mRNA表达水平均降低；在3%的循环压应力下，蛋白多糖mRNA表达水平升高，Ⅰ型胶原mRNA表达水平降低(P<0.001)，分解代谢基因基质金属蛋白酶13 mRNA表达水平下降(P<0.01)；而当应变量达到7%时，循环拉应力和压应力会导致合成代谢相关基因普遍下降，前者还会使分解代谢基因基质金属蛋白酶13 mRNA表达水平升高(P<0.05)。3%的循环压缩比3%的循环拉伸使细胞骨架更趋向卵圆形。提示在体外，适当的循环压应力有利于维持大鼠关节软骨细胞的生长特性，而小幅度的拉应力即可降低软骨细胞的合成能力，而应力的作用可能是通过改变细胞骨架引起的。 -
差速贴壁法原代培养椎间盘髓核细胞中的应用优势
背景：髓核细胞作为椎间盘的主要功能细胞是退变机制研究的重点对象，维持体外培养的髓核细胞的生理功能及细胞表型的稳定至关重要。
目的：通过对照研究差速贴壁法在大鼠椎间盘髓核细胞原代培养中的应用优势。
方法：取4周龄雄性Wistar大鼠20只，体外分离培养椎间盘髓核细胞，待原代细胞汇合近90%时进行分组传代，差速贴壁组在传代细胞贴壁30 min时，将未贴壁细胞吸出重新调整浓度后传至新的培养皿中，对照组不作处理。差速贴壁组第1、2代细胞均采用该法分离纯化。对两组第3代细胞进行细胞形态学比较及免疫组化鉴定纯度分析、CCK-8检测细胞功能活性并绘制细胞生长曲线。
结果与结论：①倒置显微镜观察及苏木精-伊红染色，差速贴壁组细胞均一性较对照组明显增高，对照组髓核细胞中混有较多的成纤维样细胞；②Ⅱ型胶原免疫组化鉴定及纯度分析，2组细胞胞浆均为被染成黄褐色，证实为髓核类软骨细胞；③纯度分析差速贴壁组阳性率显著高于对照组(P<0.05)；④CCK-8细胞生长曲线显示，2组细胞均经过2 d的生长潜伏期，3 d的指数生长期，进入生长停滞期，而对照组较差速贴壁组在潜伏期和指数增长期的早期生长更迅速。⑤结果说明，差速贴壁法是原代培养大鼠髓核细胞一种实用、有效的分离纯化方法；原代培养、经2次差速贴壁法分离纯化的第3代大鼠髓核细胞代谢旺盛、表型一致，细胞纯度更高，其对数增长期可以作为椎间盘细胞机制研究的佳时期。 -
碱性成纤维细胞生长因子对国产多孔钽-软骨细胞复合物软骨细胞表型维持及去分化的影响
目的 对比不同浓度碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)对国产多孔钽-软骨细胞复合物维持软骨细胞表型和去分化作用的影响.方法 分离培养3周龄新西兰幼兔膝关节软骨细胞,Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色、番红O (Safranin O)染色鉴定软骨细胞;取第3代软骨细胞分为5组:A组(1 ng/mL bFGF-多孔钽-软骨细胞),B组(10 ng/mL bFGF-多孔钽-软骨细胞),C组(50 ng/mL bFGF-多孔钽软骨细胞),D组(多孔钽-软骨细胞)及E组(软骨细胞);MTT法检测不同浓度bFGF对多孔钽-软骨细胞生长及增殖状态的影响;扫描电镜观察bFGF-多孔钽-软骨细胞复合物细胞形态及生长;Ⅰ、Ⅱ、Ⅸ、Ⅹ型胶原免疫细胞化学染色检测软骨细胞表型变化及去分化状态;real time-PCR检测软骨细胞Ⅱ、Ⅹ型胶原mRNA表达.结果 Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色及Safranin O染色均呈阳性反应,证实所分离培养的细胞为软骨细胞;1、10、50 ng/mL bFGF均可促进软骨细胞增殖,各实验组(A～D组)软骨细胞增殖与对照组(E组)相比,差异有统计学意义,其中10 ng/mL bFGF-多孔钽-软骨细胞增殖为明显(P＜0.05);组间比较差异有统计学意义(P＜0.05);扫描电镜观察:各组软骨细胞在多孔钽表面及孔隙内生长、黏附,早期呈不等的球形,24 h后胞质延展并向周围伸出多条突起,相互连接、延展向孔隙内部生长,细胞间相互融合并覆盖支架材料;Ⅰ、Ⅱ、Ⅸ和Ⅹ型胶原免疫细胞化学染色显示10 ng/mL bFGF-多孔钽-软骨细胞组(B组)Ⅱ和Ⅸ型胶原表达高于对照组(E组,P＜0.05),组间差异也有统计学意义(P＜0.05);而Ⅰ和Ⅹ型胶原表达则低于对照组(E组,P＜0.05);real time-PCR检测软骨细胞Ⅱ、Ⅹ型胶原mRNA表达显示:各实验组(A～D组)Ⅱ型胶原mRNA的表达高于对照组(E组,P＜0.05),而Ⅹ型胶原mRNA表达量则低于对照组(E组,P＜0.05).结论 bFGF能维持多孔钽-软骨细胞复合物软骨细胞表型,抑制去分化,加强软骨细胞分泌功能.
关键词： 碱性成纤维细胞生长因子 国产多孔钽 表型 细胞去分化 软骨细胞 -
2型糖尿病中β细胞去分化及其机制的研究进展
胰岛β细胞功能障碍是2型糖尿病(T2DM)发生的重要环节之一.新研究性显示持续的代谢应激下β细胞功能障碍主要原因是β细胞发生了去分化,且成为具有多项分化潜能的内分泌祖细胞样细胞.有研究发现胰岛β细胞去分化的过程是可逆的,此发现对阻止和逆转β细胞功能进行性下降、延缓T2DM的发生提供了可能性和新思路.
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成年心肌梗死小鼠心肌细胞去分化现象观察
目的 观察成年心肌梗死小鼠心肌细胞是否存在去分化现象.方法 20只成年小鼠随机分为观察组和对照组各10只,观察组制备心肌梗死模型,对照组仅行假手术处理.采用RT-PCR法检测两组心肌组织α-横纹肌肌动蛋白(α-SA)、横纹肌蛋白(α-actinin)、转录因子nkx2.5、肌细胞增强因子2(mef2)、细胞增殖核抗原(Ki67)、于细胞标记物血管内皮生长因子受体(flk-1) mRNA,采用免疫荧光染色法检测两组心肌组织磷酸化组蛋白(PH3)、连接蛋白43(cx43).结果 观察组心肌组织α-SA、α-actinin、nkx2.5、mef2 mRNA表达量均低于对照组,Ki67、flk-1、mRNA表达量及PH3、cx43均高于对照组,P均＜0.05,结论 成年心肌梗死小鼠心肌细胞存在去分化现象.
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缺氧诱导因子-1α对肿瘤侵袭转移的影响
肿瘤的形成和演变依赖于机体氧气和各种营养物质的供给，但肿瘤异常增殖和过度生长使瘤内出现严重缺氧，此时肿瘤细胞便通过调节自身代谢克服机体氧气和营养物质的不足，保证存活、快速生长和转移。缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α、HIF-1α)是近年来发现的广泛表达于人和哺乳动物细胞内的一种调控缺氧应答的转录因子，与肿瘤细胞去分化、增殖、凋亡、新生血管生成、侵袭和转移、放化疗耐受等密切相关 [1-3]。大量的研究显示其在良性肿瘤中表达较低，恶性肿瘤中表达升高，而转移性肿瘤中的表达则更高，提示HIF-1α在肿瘤侵袭与转移方面起着非常重要的作用，并且是导致不良预后的主要原因。目前，HIF-1α关于肿瘤侵袭和转移中的作用及机制成了研究的热点，而对其阻断的研究可能使诊治上取得突破。现对HIF-1α关于肿瘤侵袭和转移方面的研究进展作一综述。
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卵圆细胞与肝细胞癌关系的研究进展
原发性肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)是全球五大常见癌症之一,每年约有1百万患者发病[1].我国每年有11万患者死于肝癌,占全世界肝癌死亡人数45%,其病死率仅次于胃癌、食管癌而居第三位[2].HCC的发生是一个多因素、多阶段共同积累的过程,有研究认为HCC的细胞起源是由成熟肝细胞去分化而形成,另有学者推测可能是肝干细胞在分化过程中发生分化异常导致HCC的发生.
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Sox9 mRNA在软骨肉瘤去分化过程中的意义
目的：探讨Sox9 mRNA在软骨肉瘤去分化过程中所起的作用，并分析其与各临床病理参数的关系。方法利用免疫组织化学方法检测Sox9 mRNA在人普通软骨肉瘤与去分化软骨肉瘤间的差异表达及其与临床病理参数的关系。结果与正常软骨组织比较，Sox9 mRNA 在普通软骨肉瘤中表达上调，在去分化软骨肉瘤中表达下调；Sox9 mRNA在软骨肉瘤各分级之间表达水平比较，差异有统计学意义（P<0.05）；Sox9 mRNA的阳性表达差异与年龄、性别、部位无关（P>0.05），而与肺转移、有无复发有关，且肺转移及复发者阳性率明显高于无肺转移、无复发者，差异有统计学意义（P<0.01）。结论 Sox9 mRNA与软骨肉瘤的发生、发展、转移及预后有关。
