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碱性成纤维细胞生长因子缓释支架联合骨髓间质干细胞治疗猪心肌梗死的心肌SPECT显像
目的 评价心肌SPECT显像对碱性成纤维细胞生长因子(b-FGF)缓释支架联合骨髓间质干细胞(BM-MSCs)移植治疗中国实验用小型猪急性心肌梗死的价值.方法 中国实验用小型猪18头,按完全随机法分为3组:机械打孔+空白支架(对照组)、机械打孔+b-FGF支架(单纯治疗组)、机械打孔+b-FGF支架+BM-MSCs(联合治疗组).所有猪左前降支均被结扎制作心肌梗死模型.3组均在梗死区及周边区机械打孔并分别埋入空白支架、b-FGF支架、b-FGF支架+BM-MSCs;术后行心肌SPECT显像检测心肌血流的改变,同时还进行超声心动图、免疫组化检查.结果 术后6周,治疗组梗死心肌质量差值、短轴缩短率、新生血管密度均高于对照组(P<0.05),且联合治疗组高于单纯治疗组(P<0.05).结论 b-FGF缓释支架联合BM-MSCs能够改善心肌梗死区域血流、促进血管生长、提高心功能;心肌SPECT显像是评估碱性成纤维细胞生长因子缓释支架联合骨髓间质干细胞治疗急性心肌梗死效果有价值的方法.
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骨髓间质干细胞移植对心衰大鼠心肌组织中MMP-2、MMP-9和TIMP-1的影响
目的：探讨骨髓间质干细胞（BMSCs）移植对心衰大鼠心肌组织中基质金属蛋白酶-2（ MMP-2）、基质金属蛋白酶-9( MMP-9)和基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）的影响及机制。
方法：采用异丙肾上腺素(ISO)皮下注射的方法建立大鼠的心力衰竭模型，随机分成3组，每组8只，心肌内分别注射BMSCs（简称BMSCs组）、BMSCs条件培养液（简称BMSCs-CM组）及生理盐水（Saline）（简称NS组）。RT-PCR检测3组心肌组织MMP-2、MMP-9和TIMP-1mRNA的表达，Western-bloting检测心肌组织MMP-2、MMP-9和TIMP-1蛋白的表达及胞浆内及胞核内p65和p50以及总蛋白中IкB、p-IκB蛋白表达水平。 -
骨髓间质干细胞移植后肝星状细胞凋亡情况及其治疗肝纤维化的机制探讨
目的 探讨骨髓间质干细胞移植后肝星状细胞凋亡情况及其治疗肝纤维化的机制.方法 购买中山大学动物实验中心提供的30只清洁级SD大鼠,实验研究选取20只,将提取骨髓间质干细胞的10只作为实验组,建立肝纤维化大鼠模型,骨髓干细胞动员干预大鼠肝纤维化及肝星状细胞凋亡,检测肝纤维化及星状细胞凋亡指标;将未提取骨髓间质干细胞的10只作为对照组,不对其进行干预.然后对骨髓间质干细胞的纯度鉴定结果进行分析,并对两组大鼠的肝脏羟脯氨酸含量、肝星状细胞激活及凋亡情况进行统计分析.结果 CD34、CD44、CD45、CD95阴性细胞分别为99.75％、99.51％、99.80％、95.72％.实验组大鼠CCl4皮下注射诱导8周后的肝脏羟脯氨酸含量显著高于骨髓间质干细胞移植前(P＜0.05);实验组大鼠骨髓间质干细胞移植1周后的肝脏羟脯氨酸含量显著低于骨髓间质干细胞移植3d后(P＜0.05),对照组大鼠骨髓间质干细胞移植1周后的肝脏羟脯氨酸含量显著高于骨髓间质干细胞移植3d后(P＜0.05);实验组大鼠骨髓间质干细胞移植1周后的肝脏羟脯氨酸含量显著低于对照组(P＜0.05).实验组大鼠骨髓间质干细胞移植1周后的肝星状阳性细胞数显著少于骨髓间质干细胞移植3d后(P＜0.05);实验组大鼠骨髓间质干细胞移植1周后的肝星状阳性细胞数显著少于对照组(P＜0.05).实验组大鼠骨髓间质干细胞移植3d后的肝星状凋亡细胞数显著多于骨髓间质干细胞移植前及对照组(P＜0.05).结论 骨髓间质干细胞移植后诱导肝星状细胞凋亡可能是其治疗肝纤维化的一个主要机制.
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骨髓间充质干细胞移植后在胸腺内的定居
背景：骨髓间充质干细胞具有低免疫原性，并可诱导机体产生免疫耐受。目前对骨髓间充质干细胞发挥免疫调节作用的机制还不完全了解，对于骨髓间充质干细胞移植后能否迁移到免疫器官胸腺尚鲜有报道。
目的：观察骨髓间充质干细胞移植后在衰老模型大鼠免疫器官胸腺组织内的存活情况。
方法：以腺病毒介导绿色荧光蛋白基因体外转染骨髓间充质干细胞，通过大鼠尾静脉注射移植给衰老模型大鼠，于移植后第3，7，14，21天取材，荧光显微镜下观察骨髓间充质干细胞归巢到胸腺的存活情况。移植骨髓间充质干细胞第3天，取材胸腺组织，进行苏木精-伊红染色，观察移植细胞部位的组织病理变化。
结果与结论：①骨髓间充质干细胞移植后第3，7天：绿色荧光蛋白荧光表达较强，细胞轮廓清晰，两者平均吸光度值比较，差异均无显著性意义(P>0.05)。②移植后第14，21天：绿色荧光蛋荧光表达较弱，与第3天平均吸光度值相比，差异有显著性意义(P<0.05)。③细胞移植后第3天：胸腺组织切片光镜显示无急性排斥反应特征出现。④结果表明骨髓间充质干细胞可通过血液循环迁移至受损胸腺组织，且至少能够存活1周。 -
骨髓间质干细胞静脉注射移植对大鼠脊髓损伤后NGF及TNF-α表达的影响
目的 探讨大鼠骨髓间质干细胞(rMSCs)移植对脊髓损伤(SCI)后神经生长因子(NGF)、肿瘤坏死因子(TNF)-α表达的影响及rMSCs移植治疗SCI的作用机制.方法 选择清洁级健康雄性SD大鼠90只,采用改良Allen法制备SCI大鼠模型84只,随机分为对照组和rMSCs移植组各42只,另外准备6只大鼠进行假手术操作作为假手术组.对照组于损伤后经尾静脉注射PBS 1 ml,假手术组和rMSCs移植组于损伤后经尾静脉均注射rMSCs单细胞悬液1ml.损伤后1、6、12、24、72、168、336 h,应用RT-PCR方法检测各组处理前后NGF、TNF-α mRNA表达情况.结果 对照组和rMSCs移植组损伤脊髓后NGF、TNF-α mRNA表达较假手术组明显增加(P＜0.05);rMSCs移植组与对照组比较,NGF mRNA水平增加更明显,而TNF-α mRNA水平显著下降(P＜0.05).结论 大鼠发生SCI后损伤脊髓局部的NGF、TNF-α表达增加,而rMSCs移植能改变SCI区的微环境,使损伤脊髓局部的NGF更进一步的表达,而TNF-α表达降低,这可能是促进大鼠神经结构及功能恢复、减少脊髓继发性损伤进而促进损伤大鼠运动功能恢复的机制之一.
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自体骨髓干细胞移植治疗急性心肌梗死的实验及临床研究
目的:将大体动物自体骨髓间质干细胞移植至心肌梗死后的心肌瘢痕组织中,观察骨髓干细胞在梗死区的存活以及对心功能的改善情况,为临床应用自体骨髓干细胞移植治疗心肌梗死及各种原因导致的心力衰竭提供相关依据.方法:选择12只中国小型家猪,应用闭胸经股动脉介入的方法制作动物急性心肌梗死模型.同时抽取髂骨骨髓20ml进行骨髓干细胞的分离、纯化及细胞培养.AMI后2d所有动物经心脏彩超及ECT判定梗死心肌部位,并评价心功能.心肌梗死后10～14d在局麻下行冠脉造影,实验组(n=7只)在梗死区中心经微导管注入2ml骨髓干细胞悬液(1×108个细胞),对照组(n=5只)同法注入生理盐水.骨髓干细胞移植术后2、8周,行心脏彩超及ECT检查测定心功能、心肌收缩功能及梗死面积积分等指标,并据以上定位截取移植部位心肌标本进行光镜、电镜检查以观察大体形态及超微结构.结果:心脏彩超提示实验组左室收缩末期直径(LVSd)较对照组缩短0～5mm,左室收缩末期容积(SYS VOL)缩小40.1±11.2ml～36.2±10.6ml,左室射血分数(LVEF)增加43%±2.50%对照组为47%±2.36%,左室舒张末期直径(LVDd)及左室舒张末期容积(DIA VOL)无明显变化;99mTc-MIBI显示实验组梗死面积缩小34%±12%,对照组21%±10%;免疫组化染色实验组阳性,电镜结果显示心肌样细胞转化率较对照组增加,但双标法标记示部分移植细胞(Brdu标记)徘徊于心梗区,未转化为心肌细胞.结论:自体骨髓间质干细胞移植治疗急性心肌梗死取材方便,排异性小,术后无心律失常等不良反应.术后观察显示它可增强心肌收缩功能,缩小梗死面积,是治疗急性心肌梗死行之有效的新方法.其机理有待进一步探讨.
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异基因骨髓间质干细胞移植治疗重症难治性红斑狼疮的护理
近年来,骨髓间质干细胞(MSCs)已用于临床治疗.南京大学医学院附属鼓楼医院近期率先采用异基因骨髓MSCs移植治疗2例重症难治性系统性红斑狼疮(SLE),获得成功,作者体会到,在移植过程中,有效的护理措施十分重要,有助于提高移植成功率.现将护理体会总结如下.
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骨髓间质干细胞移植在心血管病中的应用
近年来,骨髓间质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)移植成为心血管病治疗领域一个新的研究热点.它是人们利用MSCs具有多向分化潜能这一特点(1),将其移植到受损心肌并诱导分化为新生心肌细胞和血管内皮细胞,从而从根本上恢复心肌细胞数量,重建受损区血管(2～5).通过近年的不断研究探索,已实现了由动物实验到临床应用的突破,证实骨髓间质干细胞移植不仅是可能的,而且会日趋成熟和完善(6).而自体MSCs移植因其独特的优点无免疫排斥反应,容易从自身获取,无伦理学争议,有望成为细胞移植理想的供体.
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骨髓间质干细胞移植在神经科学领域的应用研究
骨髓中含有两种干细胞,一种是造血干细胞,另一种是非造血干细胞,非造血组织的前体被称为骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)或间质干细胞(mecenchymal stem cells,MSCs).MSCs是骨髓造血结构性和功能性支持细胞,具有多潜能特性和自我更新及多项分化的能力,参与组织细胞的替代及修复.
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髓芯减压植骨并自体骨髓间质干细胞移植治疗股骨头坏死手术配合
对5例股骨头缺血性坏死患者采用髓芯减压并自体骨髓问质干细胞移植治疗.结果 5例均于术后3周后下床活动.髋关节疼痛完全消失.3个月后复查示,50%股骨头死骨成活,HHS评分≥95分.提示自体骨髓问质干细胞移植治疗股骨头缺血性坏死创伤小、疗效好,早期股骨头坏死患者可恢复髋关节功能.手术室严格执行消毒隔离制度,巡回护士和器械护士熟悉手术配合步骤,充分准备物品,严格无菌操作,控制术中感染,才能确保手术顺利完成.
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通冠胶囊联合骨髓间质干细胞移植对心肌梗死后大鼠心功能的影响
目的:观察通冠胶囊联合骨髓间质干细胞移植对心肌梗死后大鼠心功能的影响.方法:通过手术结扎冠状动脉前降支的方法,建立急性心肌梗死大鼠模型,造模后相应组别经尾静脉移植骨髓间质干细胞和(或)灌喂通冠胶囊溶剂.于心肌梗死6周后,观察大鼠心脏重量指数、心脏彩超、血管内皮生长因子(VEGF)阳性表达评分等.结果:干细胞组、干细胞加中药组心脏重量及心脏重量指数与模型组比较,差异均有显著性意义(P＜0.05).干细胞组、中药组、干细胞加中药组VEGF阳性表达评分与模型组比较,差异均有显著性意义(P＜0.05).干细胞组VEGF阳性表达评分与干细胞加中药组比较,差异有显著性意义(P＜0.05).结论:经静脉内移植骨髓间质干细胞,联合口服中成药通冠胶囊可减轻心肌梗死后左心室重构,增加心肌血管数量,减少心肌细胞凋亡.
