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p63和CK5/6在肺癌组织中的表达及临床意义
目的：探讨p63蛋白和CK5/6在肺癌组织中的表达及其与临床病理的关系。方法应用免疫组化SP法分别检测106例肺癌组织中p63和CK5/6蛋白质的表达并对结果进行分析。结果 p63在肺癌中阳性表达率为54.72%（58/106），其中在肺鳞癌中的阳性表达率（84.09%）明显高于在腺癌中的（23.26%）（P＜0.05）；CK5/6在肺癌中阳性表达率为43.40%（46/106），其中CK5/6在肺鳞癌中的阳性表达率（77.27%）明显高于在腺癌中的（9.30%）（P＜0.05）。在不同年龄、不同分化程度、不同临床分期以及有无淋巴结转移的肺癌患者中，p63和CK5/6阳性表达率均无显著性差异（P＞0.05）。肺癌组织中p63表达与CK5/6表达呈正相关（rs＝0.628，P＝0.01）。结论 p63、CK5/6的表达与肺癌病理类型密切相关，二者在肺癌中的表达密切相关。
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血清CYFRA21-1和CEA对非小细胞肺癌预后评价价值的Meta分析
目的：研究血清细胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）和癌胚抗原（CEA）对非小细胞肺癌（NSCLC）患者的临床预后意义。方法通过检索PubMed、Springer Link、超星读秀中有关研究血清CYFRA21-1和CEA对NSCLC患者预后影响的文献，采用RevMan5.1软件进行荟萃分析（Meta分析），合并值为风险比（HR）。结果共入选8篇文献，累计NSCLC患者1569例。所有高水平血清CYFRA21-1的NSCLC患者的总生存估计合并HR＝1.63[95%可信区间（95%CI）：1.43～1.85， P＜0.05]，所有高水平血清CEA的NSCLC患者的总生存估计合并HR＝1.45（95%CI：1.26～1.66， P＜0.05），差异均有统计学意义。结论血清CYFRA21-1和CEA可作为NSCLC患者的预后评价指标，高血清CYFRA21-1较高血清CEA对评价NSCLC患者的预后不良更有价值，联合检测将更可靠。
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抗CCP抗体、抗角蛋白抗体及类风湿因子联合检测在类风湿关节炎诊断中的应用
目的 评价抗环瓜氨酸多肽抗体(anti-CCP)、类风湿因子(RF)、抗角蛋白抗体(AKA)的单一及联合检测在类风湿关节炎(RA)诊断中的应用价值.方法 前瞻性研究.随机表法选取2011年1月至2013年9月于北京大学第三医院就诊的门诊及住院的137例RA患者,265例非RA的自身免疫患者,111名健康人,检测血清中AKA、anti-CCP抗体及RF的水平.其中AKA测定采用间接免疫荧光法;RF测定采用速率散射比浊法;anti-CCP测定采用电化学发光法.检测方案分为单项目、双项目、三项目检测,一共18种方案.检测结果组间比较采用四格表卡方(x2)检验.结果 Anti-CCP检测的准确度(80.39％),YI(0.51),和κ值(0.55)在单项目检测方案中均高.方案antiCCP+ (AKA/RF),AKA/(anti-CCP+ RF),和(AKA+ RF)/(anti-CCP+ RF)/(AKA+ anti-CCP)的准确度(80.94,80.94,80.66),YI(0.51,0.51,0.50),和κ值(0.55,0.56,0.54)在联合检测方案中高.结论 Anti-CCP检测在辅助RA诊断中具有突出的价值.联合检测方案anti-CCP+(AKA/RF)、AKA/(anti-CCP+ RF)、与(AKA+ RF)/(anti-CCP+ RF)/(AKA+ anti-CCP)对于RA的诊断有价值.
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血清CYFRA21-1检测在尿路上皮癌诊断中的应用价值
目的 探讨血清CYFRA21-1检测在尿路上皮癌(UC)患者诊断中的应用价值.方法 2011年1月至2012年3月对65例UC患者和61例非UC患者的血清CYFRA21-1进行检测,同时检测43例健康体检者作为对照,并将检测结果进行比较65例UC患者中肾盂UC 9例,输尿管UC 4例,膀胱UC 52例 61例非UC患者中肾癌21例,BPH 20例,前列腺癌10例,泌尿系结石10例.采用电化学发光法对3组研究对象的血清CYFRA21-1含量进行检测.结果 UC组血清CYFRA21-1含量(7.57± 12.76) μg/L,与对照组(2.58±0.97) μg/L和非UC组(2.75± 1.34) μg/L比较差异有统计学意义(P＜0.01).对照组和非UC组的血清CYFRA21-1含量差异无统计学意义(P＞0.05).按照试剂盒说明标准,将血清CYFRA21-1含量＞3.3 μg/L定为阳性值,对照组和非UC组假阳性率为10％～30％.UC组总阳性率为67.7％(44/65),其中低级别UC的阳性率50.0％ (10/20),中级别62.5％(5/8),高级别78.3％ (29/37),高级别组与中、低级别组间差异有统计学意义(x2=4.55,P＜0.05).非肌层浸润性UC(Ta～T1)阳性率40.9％(9/22),与对照组的阳性率23.2％(10/43)比较差异无统计学意义(x2 =2.19,P＞0.05).肌层浸润性UC(T2～T3)的阳性率78.6％ (22/28),与对照组比较差异有统计学意义(x2=20.96,P＜0.01),与局部晚期和转移组(＞T3)阳性率86.7％(13/15)比较差异无统计学意义(x2=1.97,P＞0.05).结论 67.7％的UC患者血清CYFRA21-1含量升高,其升高程度和阳性率随着UC的病理分级和临床分期的升高而升高.对血清CYFRA21-1升高的UC患者,动态监测其变化有助于判断疗效和预后.
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乳腺癌患者外周血CK19 mRNA表达浓度监测的意义
目的 探讨监测乳腺癌患者外周血中CK19 mRNA表达浓度的临床意义. 方法 用实时定量PCR法测定137例乳腺癌患者术前、术后第1天、术后第7天、术后1个月、术后3个月、术后6个月、术后12个月、术后18个月及术后24个月等各时间点的外周血中CK19 mRNA的表达,分析CK19浓度变化与乳腺癌复发转移之间的关系.结果 ①术前、术后第1天、术后第7天3个时间点乳腺癌患者外周血的CK19 mRNA的浓度无明显变化(P＞0.05)；术后1个月CK19 mRNA水平较术前、术后第1天及术后第7天相比均有明显下降(P＜0.05).未复发组的外周血中CK19 mRNA浓度持续维持在低水平,而复发转移组的CK19 mRNA表达浓度在下降后再次升高(P＜0.01).②CK19 mRNA的表达与月经状态、雌激素受体、孕激素受体、HER2和Ki67表达无明确相关(P＞0.05)；与肿瘤大小、肿瘤组织学分级、病理类型及淋巴结转移等指标均有明显相关性(P＜0.01).结论 乳腺癌患者外周血CK19 mRNA的表达与临床病理高危因素指标相关,复发转移时其浓度升高,可能成为乳腺癌患者复发转移的指标.
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CK5/6和 Ki67表达与乳腺癌分子病理特征关系的临床分析
目的：研究 CK 5/6和 Ki67在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法回顾性收集2011年2月至2014年7月在河南科技大学第一附属医院接受改良根治术的乳腺癌患者109例,用免疫组织化学法检测癌组织 CK5/6和 Ki67表达,分析其与乳腺癌分子病理特征的关系。计数资料采用χ2检验或 Fisher 确切概率法,相关性分析采用 Spearman 相关分析,并用 Logistic 回归分析 CK5/6表达的独立影响因素。结果109例乳腺癌组织中 CK5/6和 Ki67表达率分别为22．02%(24/109)、62．04%(67/108,1例表达未能判断)；三阴性乳腺癌(TNBC)中 CK5/6表达率为62．2%(23/37),显著高于非 TNBC的4．6%(3/66)(χ2=41．708,P<0．001)；Ki67表达在分子分型间差异无统计学意义(χ2=0．147,P<0．001)。 CK5/6表达与 ER、PR 及 E-钙黏蛋白表达负相关(r=-0．505、-0．417、-0．239,P 均<0．050),而ER 缺失是影响 CK5/6表达的独立因素(OR=0．099,95% CI=0．023~0．424)。基底样型乳腺癌(BLBC)(TNBC-CK5/6+)的 E-钙黏蛋白表达显著低于非 BLBC(χ2=6．669,P=0．010)。在 TNBC,仅 Ki67与组织学分级正相关外(r=0．354,P=0．043)。结论 CK5/6表达标记的 BLBC 易发生侵袭转移的特性可能与E-钙黏蛋白表达缺失有关,而 Ki67表达可能不是识别 BLBC 生物学特性的分子标记。
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黏蛋白-1和细胞角蛋白-20在食管癌中的表达及意义
目的 研究食管癌患者外周血黏蛋白-1(MUC1)和细胞角蛋白-20(CK20)表达情况及临床意义.方法 采用反转录聚合酶链反应(RT.PCR)方法检测53例食管癌患者外周血MUC1-mRNA和CK20-mRNA水平,以10例食管良性肿瘤患者及20名健康体检者为对照.结果 在良性肿瘤组及健康对照组中,MUC1-mRNA及CK20-mRNA均无表达,而在食管癌患者中的阳性率分别是35.85%(19/53)和49.06%(26/53),二者联合检测阳性率为62.26%(36/53),较单项阳性率高(x2=11.0228,P＜0.05).二者在食管癌患者中的表达与患者性别、年龄及肿瘤分化程度无明显相关性,而与肿瘤临床分期明显相关.结论 MUC1-mRNA和CK20-mRNA作为食管癌肿瘤标志物具有较高的敏感性及特异性;其表达与食管癌的临床分期密切相关;两种标志物联合检测有助于提高食管癌微转移的检出率.
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Ⅰ期非小细胞肺癌淋巴结微转移的研究
目的 检测Ⅰ期非小细胞肺癌(NSCLC)淋巴结微转移的情况,分析影响Ⅰ期NSCLC淋巴结微转移的主要因素,了解微转移的规律.方法 采用免疫组织化学SP法对91例Ⅰ期NSCLC清扫的肺门和隆突下淋巴结进行混合性细胞角蛋白(MCK)检测,检测其微转移的表达.另收集45例肺部良性病变手术切除的肺门淋巴结45枚和Ⅱ、Ⅲ期NSCLC常规病理检查阳性的肺门淋巴结45枚进行MCK(AE1/AE3)检测,分别作为阴性和阳性对照.结果 45例肺部良性病变的肺门淋巴结45枚MCK(AE1/AE3)表达均为阴性.Ⅱ、Ⅲ期NSCLC常规病理检查阳性的肺门淋巴结45枚MCK(AE1/AE3)表达均为阳性.91例Ⅰ期NSCLC取其肺门和隆突下淋巴结各91枚进行MCK(AE1/AE3)检测,45例阳性,总的微转移率为49%(45/91).其中,肺门淋巴结39枚阳性,隆突下淋巴结11枚阳性,二者均为阳性5例.Logistic单因素分析显示:肿瘤大小、分期和分化是影响淋巴结微转移的临床因素,其相对危险度OR值分别为8.444、6.946和14.566.多因素分析显示:肿瘤T分期和分化程度是影响淋巴结微转移的主要因素,其相对危险度OR值分别为14.509和7.028.结论 Ⅰ期NSCLC淋巴结中存在微转移;ⅠB期NSCLC微转移率明显高于ⅠA期;有必要对ⅠB期NSCLC进行术后化疗;肿瘤分期和分化程度是影响淋巴结微转移的主要因素;淋巴结微转移遵循肺门到纵隔的途径;腺癌存在跳跃式微转移现象.
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头颈鳞状细胞癌患者血清Cyfra21-1检测的临床意义
目的 探讨血清Cyfra21-1在头颈鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)中的临床意义.方法 采用双抗体夹心ELISA法对随机选取的60例HNSCC患者,40例甲状腺良性肿瘤患者,20名健康对照组进行血清Cyfra2l-1检测.应用SPSS 11.5统计软件包进行统计分析.结果 HNSCC组术前、术后7d,甲状腺良性肿瘤组术前、术后7d和健康对照组血清Cyfra21-1浓度分别为(6.49 ±2.90)、(3.39±1.45)、(2.01±0.83)、(1.98±0.85)和(1.90±0.69) ng/ml.HNSCC组术前血清Cyfra21-1浓度明显高于甲状腺良性肿瘤组(t=4.69,P<0.01)和健康对照组(t=5.74,P<0.01),统计学均具有显著性差异.甲状腺良性肿瘤组与健康对照组之间血清Cyfra21-1浓度差异无统计学意义(t=1.21,P > 0.05).HNSCC组术后7d血清Cyfra21-1浓度比术前明显降低,统计学有显著性差异(t=3.57,P<0.01);而甲状腺良性肿瘤组术前和术后7d血清Cyfra2l-1浓度无显著性差异(t=1.92,P>0.05).HNSCC组术前血清Cyfra21-1浓度与肿瘤丁分级(t=2.35,P<0.05)和淋巴结有无转移(t=3.16,P<0.01)均有显著性统计学差异,而与性别(t=1.81,P > 0.05)和年龄(t=1.32,P>0.05)均无统计学差异.4例术后放疗后复发患者的血清Cyfra21-1浓度较术后7d明显升高.取甲状腺良性肿瘤组95%Cl上限值3.69 ng/ml为界,>3.69 ng/ml判定HNSCC的阳性诊断为标准,血清Cyfra2l-1诊断HNSCC患者敏感性为80.0%,特异度为91.7%.结论 血清Cyfra21-1对HNSCC的诊断、疗效评价、监测肿瘤复发和预后有一定的临床应用价值.
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淋巴结阴性乳腺癌患者细胞角蛋白19 mRNA与整合素α_vβ_3表达的相关性研究
应用逆转录PCR法检测62例乳腺癌患者骨髓中细胞角蛋白(CK)19 mRNA,免疫组织化学法检测乳腺癌组织中整合索α_vβ_3蛋白的表达.15例骨髓CK19阳性(24%),其癌组织中整合素仪α_vβ_3均为阳性,乳腺癌组织中整合素α_vβ_3表达阳性者36例(58%),两种标志表达结果有较好的一致性(kappa=0.6839,P＜0.05),二者的表达均与肿瘤的大小密切相关(P＜0.01).常规病理切片检查腋窝淋巴结阴性的乳腺癌患者,联合检测骨髓中的CK19和癌组织中的整合素仅α_vβ_3对判断预后和指导治疗具有参考价值.
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Fascin在非小细胞肺癌中的表达及诊断意义
目的 初步评价Fascin蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)患者中的诊断意义.方法 采用双抗体夹心ELISA法检测内蒙古医学院第一附属医院胸外科及北京胸科医院胸外科2009年10月至2011年5月NSCLC患者共110例和50例健康体检者血清中Fascin蛋白、癌胚抗原(CEA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、鳞状上皮细胞癌抗原(SCC)、细胞角蛋白21-1(CYFRA21-1)及胃泌素释放肽前体(pro-GRP)的含量.结果 NSCLC患者血清中Fascin阳性率(24.4％)明显高于健康对照组(4.0％)(P＜0.05)；在不同临床分期的非小细胞肺癌患者中,Fascin阳性率差异有统计学意义(P＜0.05)；CEA、CYFRA21-1、NSE、SCC、Pro-GRP在非小细胞肺癌的阳性率分别为25.64％、5.1％、5.1％、5.0％、1.7％.结论 Fascin可能作为一种新的肿瘤标志物,在肺癌临床筛查及预后具有一定的临床意义.
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前列腺术后犬前列腺部尿道再上皮化修复的实验观察
目的 观察前列腺术后犬前列腺部尿道再上皮化的修复过程,并探讨基底层细胞角蛋白(CK)34 (CK34βE12)细胞在再上皮化过程中的作用.方法 选择15只老年家犬行2-μm激光前列腺汽化切除术,分别于术后3、7、14 d序贯取材,采用免疫组织化学染色法检测前列腺部尿道上皮细胞CK34、前列腺特异抗原(PSA)表达水平.结果 术后3d手术创面未见CK34阳性表达细胞;术后7d可见连接成片的CK34阳性细胞覆盖手术创面,且这些细胞与残余前列腺组织连续；术后14d新生尿道上皮的基底细胞层阳性表达CK34.正常或增生的前列腺组织可见前列腺腺泡、腺管上皮胞质PSA阳性,前列腺部尿道上皮PSA表达阴性.术后14 d再生的前列腺部尿路上皮的PSA均为阴性表达.结论 前列腺组织是前列腺增生症术后前列腺尿道再上皮化的重要组织,而CK34阳性的基底细胞可能是这一修复过程的主要细胞.
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细胞角蛋白与P16INK4a在宫颈癌前病变及宫颈癌中的研究进展
宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤之一,且近年来年轻患者有明显上升的趋势.子宫颈上皮内瘤变(CIN)是与子宫颈浸润癌密切相关的一组癌前病变,也是宫颈癌防治的重要阶段.从宫颈癌前病变发展成宫颈癌是一个较长时间的过程,有效的诊断和治疗CIN是预防宫颈癌的佳途径.有研究认为,细胞角蛋白17(CK17)是宫颈干细胞的标记物,反映了一种细胞化生由不成熟向成熟转化的现象.CK8、CK17表达水平与宫颈上皮内瘤样病变程度及宫颈癌有关,分析CK8、CK17表达水平可作为预测宫颈癌高危患者的指标.P16INK4a异常甲基化与宫颈癌的临床分期及病理分级有关,在晚期及恶性程度较高的组织中,其活性明显增强.综述细胞角蛋白与P16INK4a在宫颈癌前病变及宫颈癌发生及发展中的研究进展.
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角蛋白表达阳性的马尾节细胞性副神经节瘤伴脊柱裂:病例报告并文献复习
目的 探讨马尾副神经节瘤的临床表现及病理学特征.方法 报告1例临床罕见伴节细胞神经瘤分化的马尾副神经节瘤病例,分析其临床表现、组织病理学特点,并复习相关文献.结果 患者男性,47岁,临床表现为右足底麻木并渐进性双下肢麻木.MRI检查显示L4～S1椎管内占位性病变.术中可见S1节段硬脊膜部分缺损未闭合,硬脊膜受压,肿瘤约5 cm×3 cm×3cm大小,位于神经根,形状不规则,血运丰富,压迫马尾囊及神经根.组织形态学观察肿瘤由副神经节瘤和节细胞神经瘤组成,副神经节瘤为实性细胞巢结构,细胞呈器官样排列,部分为实性片状、癌巢样或条索样、假“菊形”团样、血管外皮瘤样及乳头状排列；节细胞神经瘤可见典型节细胞,背景为神经纤维、许旺细胞等,形成节细胞神经瘤图像,两种成分单独或混杂存在.免疫组织化学染色巢状成分的肿瘤细胞胞质表达广谱细胞角蛋白,以及α-突触核蛋白和嗜铬素A,肿瘤细胞巢周围胞质可见表达S-100蛋白的支持细胞,Ki-67抗原标记指数＜5％；节细胞成分表达α-突触核蛋白、神经元特异性烯醇化酶,并不同程度表达细胞角蛋白,但不表达神经元核抗原.结论 该例患者肿瘤组织中伴有节细胞神经瘤成分,含有多种组织学和细胞学形态,伴骶椎隐裂,临床罕见.细胞角蛋白表达阳性可能是马尾副神经节瘤不同于其他部位副神经节瘤的重要病理学特点之一.
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负载抗原DC与CIK共培养对富集培养乳腺癌CTCs杀伤作用研究
目的：观察负载抗原的树突状细胞（DC）与细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）对富集培养乳腺癌循环肿瘤细胞（CTCs）的细胞毒作用。方法将有CTCs的乳腺癌患者外周血单个核细胞，磁珠分选富集表皮细胞黏附分子（EpCAM）+乳腺癌CTCs体外培养，并用巢式PCR、细胞免疫荧光成像（CK8/18）、细胞免疫组化（CK8/18、CK19）方法进行鉴定，分选后EpCAM-细胞常规诱导DC及CIK；制备乳腺癌CTCs全冻融抗原（Ag）冲击DC，分Ag-DC-CIK组、DC-CIK组、DC组、CIK组。台盼蓝拒染法动态监测CIK细胞增殖情况，流式细胞术分析细胞免疫表型，MTT法检测对乳腺癌CTCs的杀伤活性，流式细胞术检测诱导乳腺癌CTCs的早期凋亡率，光镜及透射电镜观察细胞形态及超微结构。结果磁珠分选富集后EpCAM+细胞巢式PCR可见CK19 mRNA条带表达，经体外培养后胞浆染色CK8/18+、CK19+，CK-FITC/DAPI免疫荧光染色见胞浆蓝荧光/核绿荧光的CK8/18阳性细胞。DC与CIK共培养细胞增殖活性明显大于单独培养的CIK（P＜0.001），DC免疫表型CD1α、CD83+CD86+、CD83+CD11C+、CD86+CD11C+及CIK免疫表型CD3+CD8+、CD3+CD56+的表达率Ag-DC-CIK组高于DC-CIK组、DC组及CIK组（P＜0.05）。Ag-DC-CIK、DC-CIK、CIK3组均可诱导乳腺癌CTCs凋亡，凋亡率为（56.83±3.07）％、（31.43±1.77）％、（24.70±1.51）％，两两比较差异有统计学意义，透射电镜可见诱导凋亡乳腺癌CTCs的典型微结构。结论磁珠分选联合细胞免疫学方法可以提高乳腺癌CTCs的检测灵敏度；经抗原冲击DC明显增加CIK细胞的增殖能力和细胞毒活性,有可能作为一种临床有效的抗乳腺癌复发与转移的免疫治疗手段。
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中波紫外线对角质形成细胞MMP-9及TIMP-1的影响
目的:研究中波紫外线(UVB)照射对HaCaT细胞中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)mRNA表达的影响.方法:培养HaCaT细胞,绘制细胞生长曲线,经不同剂量(0、30、60、90 mJ/cm2) UVB照射；用MTT方法测定UYB照射后细胞的增殖活性,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定UVB照射后HaCaT细胞中MMP-9 mRNA和TIMP-1 mRNA的表达.结果:随着照光剂量的增大,细胞的增殖活性逐渐降低,而细胞的增殖抑制率逐渐增加,不同照射剂量各组间光密度(OD)值差异有统计学意义(P＜0.05)；随着照光剂量的增大,MMP-9mRNA的表达逐渐增加,各组之间比较差异均有统计学意义(P＜0.05)；TIMP- 1mRNA的表达逐渐降低,与0mJ/cm2比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:UVB照射可诱导HaCaT细胞损伤和细胞凋亡,MMP-9和TIMP-1可能与光老化的发生有一定关系.
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单发胃息肉样病变内镜特点和病理特征
目的：观察单发胃息肉样病变的内镜和病理形态学特征，探讨不同类型胃息肉的增殖和分化特征。方法分析661例单发性胃息肉样病变临床病理特点，免疫组织化学 EliVisionTMplus 两步法检测63例各类型胃息肉增殖细胞核抗原（Ki67），细胞角蛋白7（CK7），细胞角蛋白20（CK20）的表达。结果内镜诊断661例单发胃息肉样病变多为炎症，只有34．9％（231／661）诊断为胃息肉；单发性胃息肉样病变主要发生于胃窦；其中增生性息肉157例，在息肉中所占比例高，多发生在胃窦部和贲门；胃腺瘤仅7例，主要发生于胃窦；除炎性纤维性息肉外，胃息肉的腺上皮均有不同程度 Ki-67表达，胃腺瘤的 Ki-67标记指数明显高于其他胃息肉（P ＜0．05）；胃息肉腺上皮免疫表型以CK7＋／CK20＋为主。结论胃息肉临床病理诊断符合率较低；不同类型胃息肉增殖指数不同，但免疫表型相似。
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小鼠肾脏缺血再灌注时肾组织角蛋白家族基因表达的变化
目的 探讨小鼠肾脏缺血再灌注时肾组织角蛋白家族基因表达的变化.方法 野生型雄性C57/B6小鼠6只,50日龄,体重20～30 g,采用随机数字表法分为2组(n=3):假手术组(Sham组)和缺血再灌注组(I/R组).采用夹闭右侧肾动脉与肾静脉1h后再恢复灌注,并切除左侧肾脏的方法建立小鼠肾脏缺血再灌注模型.再灌注24 h时经左心室采血,比色法检测血清肌酐及尿素氮浓度;取右侧肾组织,HE染色法观察病理学结果;采用qRT-PCR检测肾组织Kim-1、Ngal的mR-NA表达水平;采用基因表达谱芯片分析技术检测肾组织角蛋白家族基因的表达水平,筛选出的差异基因进一步通过qRT-PCR验证.结果 与Sham组相比,I/R组血清肌酐和尿素氮浓度明升高,肾组织Kim-1、Ngal的mRNA表达上调(P＜0.05),肾小管病理学损伤加重.基因表达谱芯片检测结果显示角蛋白家族基因中仅角蛋白20基因(表达上调)为差异表达基因(P＜0.05),qRT-PCR验证检测结果与基因表达谱芯片检测结果一致.结论 小鼠肾脏缺血再灌注损伤时肾组织角蛋白20基因表达上调,该变化可能参与了肾脏缺血再灌注损伤时的内源性保护机制.
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非酒精性脂肪性肝炎患儿血清肿瘤坏死因子α与细胞角质蛋白18的表达及意义研究
目的：探讨非酒精性脂肪性肝炎（NASH）患儿血清肿瘤坏死因子α（TNF -α）与细胞角质蛋白18（CK -18）水平及其与组织学检查结果的相关性。方法选取2010年2月-2013年3月在郑州市儿童医院内科住院、肝组织活检证实为非酒精性脂肪肝病的患儿88例，根据 NASH 炎症评分将其分为 NASH 组64例和非 NASH 组24例。比较两组血清TNF -α、CK -18水平及不同病理特征 NASH 组患儿 TNF -α、CK -18水平。绘制受试者工作特征（ROC）曲线分析 TNF -α、CK -18诊断 NASH 的准确度。结果 NASH 组 TNF -α〔（171±24）μg/ L 与（127±19）μg/ L〕、CK -18〔（61±9）μg/ L 与（32±8）μg/ L〕水平均高于非 NASH 组（P <0.05）。NASH 组与非 NASH 组患儿不同程度脂肪变、小叶炎症、汇管区炎症、气球样变发生率比较，差异均有统计学意义（ P <0.05）。NASH 组 NASH炎症评分高于非 NASH 组〔（7.02±0.73）分与（2.91±0.80）分，P <0.05〕。Spearman 相关分析显示，血清TNF -α、CK -18水平与 NASH 炎症评分均呈正相关（rs =0.69，P <0.05；rs =0.73，P <0.05）。直线回归分析结果显示，NASH 炎症评分=0.05× TNF -α-2.08，NASH 炎症评分=0.1× CK -18＋0.58，差异均有统计学意义（ P =0.000）。不同程度脂肪变、小叶炎症、汇管区炎症、气球样变 NASH 组患儿 TNF -α、CK -18水平比较，差异均有统计学意义（P <0.05）；NASH 组患儿随着脂肪变、小叶炎症、汇管区炎症、气球样变程度的加重 TNF -α、CK -18水平逐渐升高，组间两两比较差异均有统计学意义（P <0.05）。Spearman 相关分析结果显示，NASH 组患儿脂肪变、小叶炎症、汇管区炎症、气球样变程度与 TNF -α、CK -18水平均呈正相关（P <0.05）。TNF -α诊断 NASH 的 ROC 曲线下面积为0.83，CK -18诊断 NASH 的 ROC 曲线下面积为0.92。取 TNF -α截点值为136μg/ L 时，可获得佳灵敏度0.79和特异度0.75。取CK -18截点值为42μg/ L，可获得佳灵敏度0.82和特异度0.85。结论 TNF -α和CK -18可以作为一种能较好地诊断儿童 NASH 的非侵入性生物标志物。
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自体皮肤成纤维细胞与毛发角蛋白复合填充材料在医学美容中的应用
目的 探讨自体皮肤成纤维细胞(Fibroblasts,Fbs)与毛发角蛋白(Hair keratin,HK)复合填充材料在面部除皱中的作用,为其在医学美容中的应用提供实验依据.方法 采用消化分离法对人Fbs进行原代培养,并按不同比例与HK颗粒进行复合培养,台盼蓝排斥法检测细胞的存活率,MTT法检测细胞的增殖活力,ELISA法检测培养液中Ⅰ型胶原蛋白(Collagen Ⅰ,Col Ⅰ)的含量.将志愿者耳后部Fbs与HK颗粒共培养后回注至面部皱纹真皮层内,观察除皱效果.结果 HK与Fbs的比例为1:2时,细胞的存活率、增殖活力及培养液中的Col Ⅰ含量均高；志愿者术后4周,注射部位手感柔软,顺应性良好,无僵硬、挛缩等情况出现,皱纹的填充效果良好,外形改善明显.结论 自体Fbs与HK复合填充材料能明显促进面部皱纹的修复,本研究为其临床应用提供了实验依据.
