首页 > 文献资料
-
中国汉族人Brugada综合征患者SON5A基因Ⅳ区一个新的突变
背景 Brugada综合征是一种易导致猝死的具有遗传倾向的疾病,与编码心肌钠通道的基因突变有关.目的 研究中国Brugada综合征患者SCN5A基因的碱基改变情况.方法 对15例先证者及家系进行直接SCN5A基因测序.DNA来源于患者外周血白细胞.全部28个外显子通过设计的40对引物进行PCR扩增,扩增后的产物直接测序.结果 在一个家系上发现了一个错义突变,即G5080A(R1628Q),该突变导致心肌细胞钠通道的α亚基第Ⅳ结构域的第4片段发生改变.在150个正常对照者未发现此碱基改变.结论 G5080A(R1628Q)可能是中国Brugada综合征患者SCN5A基因新的突变位点.
关键词： Brugada综合征 SCN5A基因 钠通道 猝死 -
短QT间期并Brugada样心电图患者SCN5A突变的分子遗传学及电生理机制
目的 发现1例短QT间期合并Brugada样心电图患者,具有猝死家族史,报道其分子遗传及电生理机制研究结果.方法 通过DNA直接测序法进行候选基因突变筛查.对表达突变基因序列的HEK293细胞进行膜片钳分析,研究其生物学特性.结果 基因筛查发现患者SCN5A基因第2066位核苷酸G＞A杂合子错义突变,从而导致第689位密码子由精氨酸变成组氨酸(R689H).细胞膜片钳分析发现R689H突变型钠通道不能产生任何电流,提示R689H突变功能丧失.结论 首次发现SCN5A基因R689H杂合子错义突变导致蛋白功能丧失,以及短QT间期合并Brugada样心电图的重叠表型.
-
Brugada综合征相关基因SCN5A新突变位点的检测
目的研究中国人Brugada综合征相关基因SCN5A突变情况.方法利用多聚酶链反应及DNA测序对1个Brugada综合征家系SCN5A基因的全部28个外显子进行基因检测.结果在国内外已知突变点均无突变,发现1个新的错义突变位点(A5471G),其相应的氨基酸改变为N1774S.结论在中国人Brugada综合征患者的SCN5A基因上发现1个新的突变位点.
关键词： Brugada综合征 SCN5A基因 钠离子通道 特发性心室颤动 猝死 -
SCN5A基因移码突变导致Brugada综合征
目的检测Brugada综合征的致病基因突变位点.方法对1个Brugada综合征家系11名成员和20名正常人的DNA样本应用双脱氧链终止基因测序法进行心脏钠离子通道α亚单位(voltage-gated sodium channel type V,SCN5A)基因测序.结果 SCN5A基因测序发现Brugada综合征家系第22个外显子存在1个杂合基因移码突变位点,经克隆传代后测序发现该突变为4087insC.该突变使通道蛋白1314-1317位氨基酸发生改变并在1318位终止,导致钠离子通道第3结构域S4结构变化,S5-6及第4结构域全部缺失.该突变在Brugada综合征家系中分布符合常染色体显性分布规律.对照组未发现相同突变.结论 SCN5A基因4087insC是国内首次发现的导致Brugada综合征的基因突变位点,也是国际上发现的第2个引起Brugada综合征的SCN5A基因移码突变.
关键词： Brugada综合征 SCN5A基因 移码突变 -
先天性长QT综合征和Brugada综合征基因突变
目的研究先天性长QT综合征(LQTS,包括JLNS和RWS)和Brugada综合征(BS)家系的基因突变情况.方法采用聚合酶链反应(PCR)和直接测序法,对4个LQTS家系进行KCNQ 1、KCNH2和KCNE1基因检测,对3个BS家系进行SCN5A基因检测.结果在1个LQTS家系中发现1个KCNQ1基因上错义突变940(G→A)(G314S),在Jervell-Longe-Nielsen综合征(JLNS)家系的先证者及其姐姐KCNQ1基因的第15外显子发现单核苷酸多态性(SNPs)G643S,还发现1个突变:KCNQ1基因外显子2a的第227位核苷酸C被T代替,其编码的苏氨酸被异亮氨酸所代替.在1个BS家系中发现1个SCN5A基因上的突变N1774S.其余的LQTS家系及BS家系在以上已知基因中均未发现突变.结论发现和JLNS有关的1个SNPs和1个新突变,并发现1个与欧美人群相同的Romano-Ward综合征相关突变,在BS家系中发现1个新的错义突变,丰富了LQTS及BS离子通道突变的基因库资料.
-
我国扩心病基因研究取得新突破
上海复旦大学附属中山医院葛均波教授率领的学术科研团队在扩张型心肌病(扩心病,DCM)基因研究的新成果发表在由美国心脏学会创办发行、全球权威心血管杂志
上,该刊以editor's picks接受,并以编者按的形式予以高度评价,并且论文和编者按评论同时被纳入editor's picks作为网页导读文章.成为我国相关领域研究的一个新的里程碑. -
中国新疆地区汉族、维族健康儿童SCN5A基因单核苷酸多态性及其与先天性心脏病的关系
目的 主要对钠离子通道基因(SCN5A基因)A29A和D1819D多态性与中国新疆地区汉族、哈萨克族、维吾尔族先天性心脏病(简称先心病)发病的相关性进行分析.方法 健康儿童(健康组)350例(维吾尔族145例,汉族110例,哈萨克族95例),先心病儿童(先心病组)350例(维吾尔族145例,汉族110例,哈萨克族95例),进行聚合酶链反应扩增SCN5A基因所有外显子序列,对其产物进行核酸序列检测,对检测到的位点进行统计学分析.结果 新疆地区儿童中发现9个单核苷酸多态位点(SNPs),通过对多态位点A29A和D1819D进行统计分析,汉族、哈萨克族、维吾尔族健康儿童中A29A和D1819D的基因型频率和等位基因频率差异有统计学意义(P＜0.05),汉族、哈萨克族基因型频率和等位基因频率差异无统计学意义(P＞0.05).A29A和D1819D的等位基因频率和基因型频率在汉族、维吾尔族先心病组和健康组中分布均有统计学意义(P＜0.05),A29A等位基因频率和基因型频率在哈萨克族先心病组和健康组中分布均无统计学意义(P＞0.05),D1819D基因型频率也无统计学意义(P＞0.05),但等位基因频率有统计学意义(P＜0.05).结论 SCN5A基因A29A、D1819D位点在新疆汉、维吾尔族先心病人群中存在多态性,D1819D可能在哈萨克族先心病人群中存在多态性,SCN5A基因可能是新疆地区先心病发病的易感基因.
-
新疆维吾尔族人群SCN5A基因在单纯性先天性心脏病中的相关性分析
背景：SCN5A是目前报道多的编码心肌钠离子通道的基因，SCN5A基因编码人心脏电压门控钠通道的α亚基，在人心肌细胞中高度表达，其主要负责动作电位的产生和兴奋细胞的扩展，对控制心肌细胞的兴奋传导起着关健作用。
目的：研究SCN5A基因H588R，C5457T，R1193Q位点多态性与新疆地区维吾尔族单纯性先天性心脏病的相关性。
方法：选取150例新疆维吾尔族单纯性先天性心脏病患者作为病例组，150例新疆维吾尔族健康人群作为对照组。采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性分析技术和直接测序法对SCN5A基因H588R，C5457T， R1193Q位点进行多态性检测，分析不同基因型频率和等位基因频率在病例组和对照组中的分布。
结果与结论：两组比较多态位点 C5457T，R1193Q 的基因型频率和等位基因频率差异均有显著性意义(P <0.05)；多态位点H588R的基因型频率差异有显著性意义(P<0.05)，而等位基因频率差异无显著性意义(P﹥0.05)。与对照组比较，C5457T 位点在房间隔缺损和动脉导管未闭患者中等位基因频率分布差异有显著性意义(P <0.05)，等位基因T分布增加房间隔缺损、动脉导管未闭的发病风险，OR值分别为3.636和3.467。R1193Q 位点在房间隔缺损、法洛氏四联症和卵圆孔未闭患者中等位基因频率分布差异有显著性意义(P <0.05)，等位基因A分布增加房间隔缺损、法洛氏四联症和卵圆孔未闭的发病风险，OR值分别为3.413，3.839和4.059。结果证实，SCN5A基因多态位点C5457T，R1193Q可能是新疆维吾尔族单纯性先天性心脏病的易感因子；未发现多态位点H558R与新疆维吾尔族单纯性先天性心脏病直接相关。 -
Lenegre病的临床诊治
Lenegre病是引起先天性传导阻滞常见的病因之一.它是一种SCN5A基因突变所致的常染色体显性遗传性疾病,男性多于女性,发病年龄较低(多数＜40岁),有明显的家族聚集性.该病的本质是传导系统发生组织纤维变性,病变广泛,常累及传导系统的多个部位,早、多累及右束支,其次是左前分支,严重时则会发生高度或完全性房室传导阻滞.在单束支和双束支阻滞时,患者常无症状,不需治疗.而一旦发展到高度或三度房室阻滞,患者即可能出现明显的心悸、黑朦、晕厥或阿-斯综合征,需积极给予起搏器治疗,当患者因心率缓慢继发严重的室性心律失常时,需置入植入式心律转复除颤器(ICD).
-
SCN5A基因单核苷酸多态性位点H558R 与慢型克山病合并高血压及其心电图特征的相关性研究
目的 研究克山病地区人群SCN5A基因单核苷酸多态性(SNP)位点H558R与慢型克山病合并高血压以及慢型克山病合并高血压患者心律失常发生之间的关系.方法 2006 - 2010年,在黑龙江省齐齐哈尔市富裕县,选取39例慢型克山病合并高血压患者作为病例组,63例高血压患者作为对照组,应用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)分析以及PCR直接测序技术,检测病例组与对照组人群SCN5A基因的Exon12 SNP位点H558R,并检查病例组与对照组的心电图特征,采用病例对照研究分析方法分析H558R与慢型克山病合并高血压以及慢型克山病合并高血压患者心电图特征之间的相关性.结果 H558RTC基因型可能会降低慢型克山病合并高血压的发病风险[比值比(OR)=0.288,95％可信区间(CI):0.104～0.794,P=0.016]以及降低慢型克山病合并高血压患者发生QRS间期延长的风险(OR=0.061,95％CI:0.006～0.612,P=0.017).结论 SCN5A基因SNP位点H558R可能是慢型克山病合并高血压以及慢型克山病合并高血压患者发生QRS间期延长的易感因子.
-
SCN5A基因启动区+495bp～+584bp片段的克隆与功能分析
目的 为了研究大鼠心肌SCN5A基因启动区+495bp～+584bp区域内的顺式作用元件对转录调控的影响.方法 应用聚合酶链反应扩增大鼠心肌SCN5A基因启动区+495bp～+584bp片段,与荧光素酶报告基因载体pGL3-promoter重组,以pGL3-promoter空载体为对照,瞬时转染人胚肾母细胞(HEK293)和小鼠胚胎心肌细胞(H9C2),检测荧光素酶活性.结果 成功构建的pGL3-P1重组载体的荧光素酶活性与pGL3-promoter对照载体相比,在HEK293细胞无明显差别(P＞0.05),在H9C2细胞荧光活性增高(22.5±5.4)倍(P＜0.01).结论 大鼠心肌SCN5A基因启动区+495bp～+584bp区域存在对基因的转录调控活性具有增强作用的组织特异性顺式作用元件.
-
发热诱导的Brugada波与SCN5A基因变异的研究
目的:探讨1例发热诱导的心电图Brugada波患者的临床特征并分析其与热敏感相关的SCN5A基因位点的变异情况.方法:分析1例50岁汉族男性发热诱导的Brugada波患者的临床表现,并采用PCR.直接测序法对与热敏感相关的SCN5A基因位点进行变异检测.结果:心电图示Brugada波改变,其抬高的ST段随体温控制逐渐回复.在基因变异研究中,未发现该患者的SCN5A基因存在与发热诱导的Brugada综合征有关的L325R(T→974G)、R535X(C→1603T)、H681P(A→2042C)和F1344S(T→4031C)4个突变.结论:该患者Brugada波的热敏感现象并非由SCN5A基因的4个变异位点引起,发热与Brugada波的关系复杂,有待深入研究.
关键词： Brugada综合征 发热 SCN5A基因 -
心脏钠离子通道α亚单位基因单核苷酸多态性及其在汉族人群中的分布
实验旨在研究中国汉族人群心脏钠离子通道α亚单位(voltage-gated sodium channeltype V,SCN5A)基因的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)及其分布.应用荧光标记自动测序法测定120名非亲缘关系中国南方汉族人群的SCN5A基因序列,确定其单核苷酸多态位点及基因型.结果如下,在中国南方汉族人群中共检测到5个SNPs:3个位于编码区,另2个分别位于3'侧翼区和intron23邻接供体剪接位点的区域.各个SNP在基因中呈不均匀分布,其基因频率分别为G87A(A29A)275%,A1673G(H588R)10.4%,4245+82A＞G 32.8%,C5457T(D1819D)41.3%和G6174A44.9%.其中G87A(A29A),G6174A和4245+82A＞G为新发现的SNP.A1673G(H588R)的基因频率在中国南方汉族人群、日本人群和美国人群之间无显著差异(P＞0 05).C5457T(D1819D)在中国南方汉族人群和日本人群中的分布非常接近(P＞0.5),但都明显高于美国人群中的分布(均P＜0.005).各SNP在不同性别中的分布无显著差异(均P＞0.05).S1102Y及其余10个国外已经报道的多态位点在本研究中未检测到.各SNP等位基因频率在人群中的分布符合HardyWeinberg平衡.结果提示,SCN5A基因SNP具有较大的民族差异.
-
钠离子通道SCN5A基因突变与遗传性心脏病研究进展
大量研究表明,钠离子通道在维持心肌细胞的正常功能上发挥着重要的作用,心脏钠离子通道SCN5A基因突变可致多种心脏疾病,其中遗传性室性心律失常就是目前研究较多的一大类疾病,如长QT综合征(LQTS)、Brugada综合征、特发性心室颤动、婴儿猝死综合征等,本综述主要报道SCN5A基因与遗传性室性心律失常类疾病.
-
小G蛋白在心肌钠通道蛋白转运中的作用
目的 研究小G蛋白Sar1和Arf1对钠通道蛋白(Nav1.5)转运的调控作用.方法 以HEK293细胞作为宿主细胞,将人SCN5A基因转染到HEK293细胞中,通过G418筛选稳定表达SCN5A基因的细胞系;为了检测小G蛋白对Nav1.5的调节效应,野生型或突变型的小G蛋白Sar1和ARF1分别瞬转到HEK293-Nav1.5细胞.利用免疫印迹对目标蛋白进行定量,应用免疫荧光对细胞内的目标蛋白进行定位.结果 过表达突变的Sar1减少了细胞膜上Nav 1.5的表达和抑制了Nav 1.5转运到细胞膜上.另外,过表达ARF1对于Nav 1.5在细胞的表达及定位无明显影响.结论 小G蛋白Sar1可能参与调节Nav 1.5在细胞内的运输.
-
Brugada综合征一家系中2例患者的SCN5A基因突变及意义
目的 观察Brugada综合征一家系中2例患者的SCN5A基因突变情况,并探讨其意义.方法 选择Brugada综合征一家系2例患者,采用直接测序法对其SCN5A基因突变进行检测.结果 该家系中发现1个纯合变异,即SCN5A基因第28外显子上的同义变异(C5457T),其所编码的1819位天冬氨酸密码子没有发生改变.结论 该Brugada综合征家系2例患者的SCN5A基因上存在1个同义变异,但SCN5A基因不是患者的致病基因.
关键词： Brugada综合征 SCN5A基因 突变 -
中国散发Brugada综合征患者SCN5A基因突变位点的检测
目的 对5例中国散发Brugada综合征患者进行SCN5A基因突变位点检测.方法 采用直接测序法对5例散发Brugada综合征患者进行SCN5A基因碱基突变位点的检测,测序结果用Chromas软件进行BLAST分析,再将测序峰与网上检索结果重新比对.结果 1例Brugada患者发现了一个同义杂合变异,即SCN5A基因第20外显子上发现一个碱基变异(C3549T),其所编码的第1 183位苏氨酸没有发生改变(T1183T).结论 在中国散发Brugada综合征患者的SCN5A基因上发现了1个新的碱基杂合同义突变.
关键词： Brugada综合征 SCN5A基因 基因突变 -
钠通道重叠综合征相关基因SCN5A在H9C2细胞中的表达
目的 构建表型重叠家系相关基因SCN5A delQKP1507-1509突变型真核表达载体,研究其在H9C2细胞中的表达.方法 一步法定点诱变技术构建SCN5A基因delQKP1507-1509突变型真核表达载体,电穿孔方法将野生型和突变型质粒转染至H9C2细胞,应用实时荧光定量聚合酶链反应(RFQ-PCR)及Western blot技术检测其mRNA及蛋白表达情况.结果 琼脂糖凝胶电泳法及DNA直接测序法均表明定点突变成功,RFQ-PCR及Western blot结果显示,野生组、突变组和混合组SCN5A基因mRNA相对表达量分别为1.089±0.459、1.011±0.840和1.069±0.492,3组SCN5A基因mRNA相对表达量比较差异无统计学意义(P＞0.05).野生组、突变组和混合组SCN5A蛋白在H9C2细胞的相对表达量分别为3.781±0.221、3.466±0.176和3.714±0.198,3组SCN5A蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 成功构建钠通道基因delQKP1507-1509突变型真核表达载体并转染至H9C2细胞,该突变未引起钠通道在细胞膜的异常表达,为进一步功能研究提供了研究基础及方向.
-
大鼠SCN5A基因内含子1+204 bp～+757 bp转录调控功能分析
目的 克隆大鼠心肌SCN5A基因5'端调控区,检测目的片段在HEK293细胞中的转录活性.方法 扩增大鼠心肌SCN5A基因+204 bp～+757 bp、+204 bp～+385 bp和+204 bp～+329 bp片段,构建含目的片段的荧光素酶报告基因--pGL3-P0、pGL3-P1和pGL3-P2,比较HEK293细胞中荧光素酶活性,评价不同长度DNA片段的转录调控活性.结果 成功构建大鼠心肌SCN5A基因5'端3个片断的荧光素酶报告基因,HEK293细胞中pGL3-P1相对荧光素酶活性分别为pGL3-P0、pGL3-P2的4.3倍和2.8倍.结论 SCN5A基因内含子1目的片段在HEK293细胞中具有较强的转录调控活性;SCN5A基因+329 bp～+385 bp为正凋控区,软件分析MZF1、USF、C-ETs-1等因子能与这些正调控区域结合并可能参与SCN5A基因的表达调控.
-
钠离子通道病致心律失常的机制研究进展
离子通道是细胞膜上具有通过和运载特定离子能力的一类重要功能蛋白质,参与许多重要的生命活动.由离子通道结构、功能改变所致的疾病称为离子通道病.虽然离子通道病概念提出不到5年,愈来愈多的研究表明其与许多人类疾病相关,是人类疾病极其重要的一部分,已证实的先天性离子通道病达数10种[1,2].
