"神舟"4号空间飞行对搭载的转谷氨酰胺酶链霉菌选育的影响

目的利用"神舟"4号无人飞船搭载生产微生物转谷氨酰胺酶(MTG)的链霉菌株,进行工业实用性微生物菌种的空间诱变育种研究,定向选育高产酶突变菌株.方法将产酶菌株链霉菌WZFF. L-M168(2.60 u/ml)以孢子和培养基中添加或不添加诱变剂亚硝基胍(NTG)的斜面培养形式搭载飞船后,采用蛋白质交联絮凝-沉淀实验方法初筛出正突变菌株,再采用摇瓶发酵产酶分析实验进行复筛驯化实验.结果实验首先发现在各种宇宙空间环境因素的综合作用下,搭载菌株的菌落形态发生明显变化,特定形态与产酶能力有一定正相关性.根据菌落形态特征从各搭载试管组中分离的733搭载突变株经系列选育驯化后,得到一系列MTG生产能力显著提高的优良搭载突变菌株.其中,高产酶菌株在利用小型生化反应器进行发酵培养的产酶效果良好,酶活提高了40%以上,达到3.62 u/ml,超过现有国际高水平.结论将产MTG菌种搭载"神舟"4号飞船,并进行严格的菌种驯化选育,获得了具优异性能的高产酶搭载突变株,表明空间诱变育种效果显著.

组织型谷氨酰胺转氨酶在肿瘤生物学中的作用

组织型谷氨酰胺转氨酶是一种多功能酶,不仅可以催化多种蛋白质形成交联分子稳定细胞外基质,而且可以调节肿瘤生长、细胞分化、细胞凋亡和细胞黏附.本文就该酶的一般特性及在肿瘤生物学中的作用进行综述.

肾间质纤维化组织中组织型转谷氨酰胺酶和结缔组织生长因子共表达

目的:探讨组织型转谷氨酰胺酶(tTG)和结缔组织生长因子(CTGF)在肾间质纤维化组织中的表达及二者的关系.方法: 采用单侧输尿管结扎(UUO)致肾间质纤维化大鼠模型.将大鼠随机分为假手术组(5只)、模型组(6只)、依那普利治疗组(6只).术后9天处死各组大鼠,肾组织标本用过碘酸-席夫染色(PAS)确证肾间质纤维化病变.以免疫组织化学染色方法观察肾组织内tTG 和CTGF的表达部位,以及细胞外基质成份纤维连接蛋白(FN)的表达变化.用Western蛋白印迹方法分析肾组织内tTG 和CTGF蛋白表达水平.结果: 假手术组大鼠tTG,CTGF和FN分别在肾小管、肾间质区仅有微量表达,肾小球内无阳性表达;模型组大鼠tTG、CTGF和FN在肾小管、肾间质区的表达信号比假手术组强;依那普利治疗后三者表达减少.双重染色结果显示,在模型组肾间质tTG阳性表达部位同时表达CTGF,并且强度相似.Western blot结果显示,模型组tTG和CTGF蛋白水平明显高于假手术组;依那普利治疗组tTG和CTGF蛋白水平明显低于模型组.各组大鼠肾内tTG蛋白水平与CTGF蛋白水平之间(r=0.683,P<0.05)以及tTG蛋白水平与肾间质内FN半定量水平之间(r=0.737,P<0.05)均有显著相关关系.结论: tTG和CTGF可能共同参与肾间质纤维化,依那普利减轻肾间质纤维化的作用可能通过下调两者的表达而实现.

粘附肽对小鼠成骨细胞转谷氨酰胺酶活性的调节

目的 粘附肽(精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸)是细胞外基质高度保守的氨基酸序列,可与整合素家族受体特异识别并结合,诱导细胞附着.本研究应用人工合成的粘附肤片段,观察其对小鼠MC3T3-E1亚克隆14前成骨细胞的转谷氨酰胺酶表达的调节.方法 MC3T3-El亚克隆14前成骨细胞在常规培养和诱导分化条件下,分别加入粘附肽(GRGDS)和对照肽(GRADS),24h后用ELISA法测定细胞中转谷氨酰胺酶的活性.结果 在诱导分化条件下,粘附肽(GRGDS)可以使MC3T3-El亚克隆14前成骨细胞的转谷氨酰胺酶活性明显高于对照组和加入对照肽组(P<0.05).结论 粘附肽对小鼠成骨细胞分化早期细胞转谷氨酰胺酶的表达有促进作用.

组织型转谷氨酰胺酶与肾间质纤维化的研究现状

业已证实,肾间质纤维化(RIF)是各种慢性肾脏疾病进展至终末期肾衰竭的共同病变过程,且其对肾功能的影响较肾小球病变更为重要.对于细胞外基质(ECM)合成和降解失衡导致RIF这一共识问题,既往大量工作着重于降解ECM成分的主要蛋白酶-基质金属蛋白酶的调控研究,近年来,ECM蛋白翻译后被绞联修饰,从而抵抗蛋白酶降解,造成ECM过度沉积这一现象已引起重视[1].

大麻素WIN55 212-2对牛眼小梁细胞内钙离子及组织型转谷氨酰胺酶表达的影响

青光眼主要与病理性眼压升高有关.眼压升高的重要发病机制是小梁细胞形态和功能发生改变以及细胞外基质增多致房水流出阻力增加.研究表明小梁细胞有平滑肌样功能,而钙离子使小梁细胞收缩,增加房水流出阻力[1].组织型转谷氨酰胺酶(tTG)是一种钙依赖性转移酶,具有催化蛋白质交联和结合的功能,且阻碍蛋白酶水解,促进其在细胞外堆积,增加房水流出阻力[2].

大鼠肾组织中组织型转谷氨酰胺酶和结缔组织生长因子表达的研究

目的 观察依那普利对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织内组织型转谷氨酰胺酶(tTG)、结缔组织生长因子(CTGF)介导的肾间质纤维化的作用.方法 采用UUO致肾间质纤维化大鼠模型.将大鼠随机分为假手术组(8只)、模型组(8只)、依那普利治疗组(8只).术后第4周,处死各组大鼠,用苏木素-伊红(HE)、Masson染色评定肾小管间质纤维化程度;用免疫组织化学方法检测肾组织内tTG、CTGF和Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)的表达部位及蛋白表达水平.结果 与假手术组相比,模型组大鼠BUN水平显著增加(P＜0.01),肾间质纤维组织相对面积显著扩大(P＜0.01),肾组织内tTG、CTGF及ColⅠ蛋白质表达均显著上调(P＜0.01或P＜0.05).依那普利干预后,上述上调指标都被显著抑制(P＜0.01或P＜0.05).结论 依那普利具有抗肾纤维化的作用.其机制可能与下调肾组织tTG和CTGF表达有关.

大鼠肾组织中组织型转谷氨酰胺酶和结缔组织生长因子表达的研究

目的 观察依那普利对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织内组织型转谷氨酰胺酶(tTG)、结缔组织生长因子(CTGF)介导的肾间质纤维化的作用.方法 采用UUO致肾间质纤维化大鼠模型.将大鼠随机分为假手术组(8只)、模型组(8只)、依那普利治疗组(8只).术后第4周,处死各组大鼠,用苏木素-伊红(HE)、Masson染色评定肾小管间质纤维化程度;用免疫组织化学方法检测肾组织内tTG、CTGF和Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)的表达部位及蛋白表达水平.结果 与假手术组相比,模型组大鼠BUN水平显著增加(P＜0.01),肾间质纤维组织相对面积显著扩大(P＜0.01),肾组织内tTG、CTGF及ColⅠ蛋白质表达均显著上调(P＜0.01或P＜0.05).依那普利干预后,上述上调指标都被显著抑制(P＜0.01或P＜0.05).结论 依那普利具有抗肾纤维化的作用.其机制可能与下调肾组织tTG和CTGF表达有关.

转谷氨酰胺酶优化后的老年豆奶粉对抗衰老作用的初探

目的：探索转谷氨酰胺酶优化后老年豆奶粉对老年大鼠的衰老的影响。方法转谷氨酰胺酶对老年豆奶粉进行优化处理，然后测定优化后豆奶粉的溶解性、乳化性及乳化稳定性；并对老年大鼠进行分组。对照组给予浓度为200、40、8 mg／ml的市售老年豆奶粉，处理组给予200、40、8 mg／ml的转谷氨酰胺酶优化后老年豆奶粉。30 d后测全血中谷胱甘肽过氧化物酶和脂质过氧化物含量及背部皮肤组织羟脯氨酸含量。结果改良后的老年豆奶粉在常规条件下溶解性增加，乳化性下降，乳化稳定性增加，改良后的老年豆奶粉可显著降低老年大鼠全血过氧化脂质含量，提高谷胱甘肽过氧化酶活性，并显著提高皮肤羟脯氨酸含量。结论转谷氨酰胺酶优化后的老年豆奶粉具有抗衰老作用。

TGase3研究现状及其与肿瘤的关系

TGase3即表皮型转谷氨酰胺酶(Epidermaltype transglutaminase),又称TGM3,是转谷氨酰胺酶家族的主要成员之一,是一种ca2+依赖性蛋白酶,主要功能是参与角质化细胞的终末分化过程,可通过催化赖氨酸残基e-NH2与谷氨酸残基γ-酰胺间异肽键的形成来进行蛋白质翻译后的修饰.

银屑病患者指甲和鳞屑的蛋白质SDS-电泳图谱和转谷氨酰胺酶活性探讨

目的:探讨银屑病患者指甲和鳞屑蛋白质十二烷基硫酸钠(SDS)-电泳图谱和转谷氨酰胺(transglutaminase 1,TGase1)酶的活性.方法:各取5例银屑病患者的指甲和鳞屑与5例健康人的指甲和鳞屑,分别提取蛋白质进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE).应用辣根过氧化物酶(HRP)-单丹酰尸胺结合物对鳞屑铺片标本检测TCase 1酶活性.结果:健康人指甲和鳞屑的SDS-PAGE图谱皆呈现4条主带:63 ku、54 ku、48 ku及38 ku,银屑病患者指甲及鳞屑的SDS-PAGE图谱也呈现此4条主带,但多数主带扫描数值的水平较高,P<0.01.健康人的鳞屑铺片标本TGase 1酶活性呈现为棕黄色细颗粒定位于角质深层角质形成细胞(KC)的周缘;相比之下银屑病患者的TGase 1酶活性缺乏.结论:指甲及鳞屑的SDS-PAGE主带相似,前者图谱更清晰可能与其蛋白较稳定有关.银屑病患者比健康人的SDS-PAGE图谱主带表达水平升高,提示其KC可能呈增生状态,表达产物较多;患者TGase 1酶活性的缺如提示其表皮屏障功能有缺陷,可能与其参与代偿性增生有关.

板层状鱼鳞病两家系TGM1基因的突变

目的:检测2个板层状鱼鳞病家系TGM1基因的突变情况.方法:采用PCR-DNA直接测序方法明确两个家系TGM1基因突变位点,并以免疫组化的方法检测其中一家系患者皮肤中转谷氨酰胺酶的活性.结果:在1个家系的患者中发现TGM1基因第13号外显子第2060位碱基发生G→A纯合突变,使密码子CGT→CAT,导致R687H突变:在另一个家系的患者中发现TGM1基因第4号内含子第一个核苷酸发生G→T及第5号外显子第760位碱基发生G→A杂合突变,分别导致IVS4+1G＞T及D254N的复合杂合突变,其父母均为相应突变的携带者.在50名无关正常人中未发现相同突变.R687H纯合突变患者皮肤转谷氨酰胺酶的活性降低.结论:R687H纯合突变及D254N和IVS4+1G＞T复合杂合突变为新发现的TGM1基因突变位点,可能是引起两家系板层状鱼鳞病患者的病因.

白色念珠菌菌丝壁蛋白1的研究进展

此文简述了条件致病菌白色念珠菌的菌丝壁蛋白1(Hwp1)的结构特征、表达部位、其作为哺乳动物转谷氨酰胺酶底物的特点、黏附的二阶段模型、在白色念珠菌病发病中的作用、形成生物被膜时所扮演的角色和对白色念珠菌病诊断及治疗的展望.

转谷氨酰胺酶对混合肉糜蒸煮硬度影响的实验研究

目的 研究转谷氨酰胺酶对混合肉糜(鸡胸肉:猪肉=3∶1)蒸煮硬度的影响.方法 对比混合肉糜加入转谷氨酰胺酶与不加酶混合肉糜的性能.结果 主要影响性能的因素是保温时间,佳条件为保温时间1.5 h,加酶量0.35%,保温温度40℃.结论 添加转谷氨酰胺酶可改善混合肉糜的质构.

转谷氨酰胺酶对鸡肉猪肉混合肉糜的作用研究

目的 研究转谷氨酰胺酶对混合肉的作用.方法 混合肉加入该酶对比不加酶的肉糜的性能.结果 经过实验得出佳条件组合为保温时间1.5 h,加酶量0.35%,保温温度40℃.结论 转谷氨酰胺酶的添加可以改变肉的保水性.

丙酸氯倍他索和维甲酸联合应用对小鼠淋巴细胞、人角质形成细胞增殖及其Ⅰ型转谷氨酰胺酶mRNA表达的影响

目的:研究丙酸氯倍他索(CP)和全反式维甲酸(RA)联合应用(CP+RA)对小鼠淋巴细胞增殖及人角质形成细胞(KC)增殖和Ⅰ型转谷氨酰胺酶(TGase)mRNA表达的影响,以探讨两药合用对有关的抗银屑病药效有无相互影响.方法:体外培养条件下,3H-TdR掺入法和RT-PCR技术.结果与结论:CP+RA合用时RA不影响CP抑制小鼠淋巴细胞增殖的药效,CP也不影响RA下调人KC TGase I mRNA表达的作用,对人KC增殖抑制两药有协同作用.CP+RA合用在发挥各自不同药效的同时,可减少各自的剂量,进而能减少两药各自的副作用.

转谷氨酰胺酶交联胶原凝胶构建三维角膜基质

目的 检测转谷氨酰胺酶交联胶原凝胶对三维培养的角膜基质细胞的影响,探讨可提高机械性能的组织工程角膜基质层新途径.方法 胶原酶消化法获取原代兔角膜基质细胞,以加入转谷氨酰胺酶与胶原凝胶交联为实验组,不加酶交联为对照组.倒置显微镜下每日观察细胞生长情况、Alamar-Blue试剂检测细胞增生、免疫荧光法检测凝胶内细胞波形蛋白、检测透光度、酶消化法检测胶原凝胶抗消化能力.结果 实验组细胞胶原凝胶内附着和生长优于对照组,细胞在凝胶内呈树枝状生长.2组细胞均随培养时间延长明显增生(P=0.000).共焦显微镜下见2组细胞胞浆波形蛋白均阳性表达,实验组细胞伪足更丰富.实验组透光度稍差于对照组.实验组抵抗胶原酶消化的能力显著增强.结论 酶交联的胶原凝胶对角膜基质细胞无毒性作用,重构的基质层结构更加稳定,有利于组织工程角膜基质层的构建.

组织型转谷氨酰胺酶的研究进展

组织型转谷氨酰胺酶(tissue transglutaminase,tTG,TG Ⅰ)是转谷氨酰胺酶家族成员之一,作为一种多功能的蛋白质,具有催化蛋白质谷氨酰胺残基与赖氨酸残基交联的活性,还能结合和水解GTP,在胞内和胞外产生多种功能.初由于tTG在细胞凋亡中所起的重要作用而受到研究者的关注,近的研究更表明它在细胞分化、基质的稳定、伤口愈合、信号转导、动物发育等许多生理和病理过程中起着重要作用,因而受到越来越多的研究.

白细胞转谷氨酰胺酶2的表达限制动脉粥样硬化损伤程度

转化生长因子β1对人肾间质成纤维细胞组织型转谷氨酰胺酶表达的影响

近年来组织型转谷氨酰胺酶(tTG)在组织纤维化的发生和发展中的作用受到了关注.本实验通过观察TGF-β1对体外培养的人肾间质成纤维细胞tTG表达的影响,探讨TGF-β1与tTG的相互关系及其在肾间质纤维化中可能的作用.