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胞外囊泡与骨再生研究进展
胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)是一种由多种细胞分泌的,内含核酸、蛋白质等的脂质双分子层.其可作为细胞与细胞间通讯物质传输的载体.而骨再生的相关研究中,如何将再生信号传导于靶细胞从而达到预期的成骨目标,已经成为了至关重要、有待攻破的重要研究课题之一.因此,本文从骨免疫、成血管、成骨及矿化四个方面探讨间充质干细胞及成骨相关细胞来源的EVs在骨再生中的作用,为基础及临床研究提供新思路.
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环磷酸腺苷反应元件结合蛋白调控转化生长因子β1对人根尖牙乳头干细胞分化的作用
目的 观察过表达第二信使环磷腺苷反应元件结合蛋白(cAMP-responsive element-binding protein,CREB)调控转化生长因子 β1(transforming growth factor-beta,TGF-β1)对人根尖牙乳头干细胞(human stem cells from the apical papilla,hSCAPs)分化的作用.方法 通过采用酶消化法培养hSCAPs,实验分成4组:①Control组,即正常矿化诱导液(α-MEM、10%FBS、10 mmol/Lβ-甘油磷酸钠、50μg/ml维生素C、10 nmol/L地塞米松);②TGF-β1组,加入正常矿化诱导液后,加入5μg/mL TGF-β1;③TGF-β1+LV-empty组,除正常矿化诱导液外,加入转染空病毒载体和TGF-β1,TGF-β1浓度为5μg/mL;④TGF-β1+ov-CREB组,除正常矿化诱导液外,加入转染过表达CREB病毒载体和TGF-β1,TGF-β1浓度为5μg/mL.矿化培养2周后,通过茜素红染色观察各组矿化结节形成情况,实时荧光定量PCR法检测各组矿化相关基因,Runt相关基因2(runt-related tran-scription factor 2,RUNX2)、牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)和碱性磷酸酶(alkaline phospha-tase,ALP)mRNA的表达.结果 TGF-β1作用SCAPs后,与Control组(1.12±0.11)相比,抑制矿化结节的形成(0.67±0.12)(P<0.05);下调矿化基因RUNX2(0.60±0.03)、DSPP(0.43±0.12)、ALP(0.69±0.05)的mRNA表达(P<0.05).过表达CREB后逆转TGF-β1对SCAPs分化的抑制作用,与TGF-β1组相比,促进矿化结节的形成(1.27±0.10)(P<0.01)并上调RUNX2(1.33±0.07)、DSPP(1.32±0.11)和ALP(1.26±0.03)mRNA的表达(P<0.05).结论 过表达转录因子CREB能够逆转TGF-β1对hSCAPs分化的抑制作用,促进其分化.
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犬骨髓基质细胞矿化不同阶段对犬牙周膜干细胞增殖和分化的影响
目的 观察矿化不同阶段犬髂骨骨髓基质细胞(iliac bone marrow stromal cells,I-BMSCs)条件培养液对犬牙周膜干细胞(canine periodontal ligament stem cells,PDLSCs)增殖和分化的影响,为分析骨髓基质细胞调控牙周膜干细胞的生物学行为奠定基础.方法 体外培养犬骨髓基质细胞和流式细胞术分选纯化PDLSCs.取第三代PDLSCs,分别加入髂骨骨髓基质细胞矿化条件培养液(iliac bone marrow stromal cells conditioned medium,I-BMSCs-CM)行间接共培养PDLSCs.Control组:单纯的未诱导的PDLSCs,用含15％FBS的DMEM培养液常规培养;实验组为I-BMSCs-CM组、I-BMSCs-CM-10ds组、I-BMSCs-CM-15ds组.I-BMSCs-CM组:I-BMSCs诱导的PDLSCs;I-BMSCs-CM-10ds组:成骨诱导10 d的I-BMSCs诱导的PDLSCs;I-BMSCs-CM-15ds组:成骨诱导15d的I-BMSCs诱导的PDLSCs.MTT法绘制细胞增殖曲线;qRT-PCR检测PDLSCs成骨分化相关基因的表达:特异AT序列结合蛋白2(special AT-rich sequence binding protein 2,Satb2)、核心结合因子2(runt-related transcription factor 2,Runx2)、骨钙素(osteocalcin,OCN);Western blot检测Satb2、Runx2和OCN蛋白表达变化.结果 PDLSCs呈长梭形,表达波形丝蛋白,具备成骨及脂向分化能力.生长曲线显示I-BMSCs能促进PDLSCs的增殖,I-BMSCs-CM-15ds促进PDLSCs增殖为明显(F=342.8,P=0.017).qRT-PCR和Western blot均能检测到PDLSCs的Satb2、Runx2和OCN的表达,第7天时实验组的PDLSCs的Satb2、Runx2和OCN的表达均高于对照组.I-BMSCs-CM-15ds上调PDLSCs的Satb2、Runx2、OCN蛋白表达为显著,分别是Control组的3.04倍(Fsath2=24.48,P=0.014)、5.1倍(FRunx2=12.25,P＜0.001)和3.67倍(FOCN=18.35,P=0.022).结论 矿化程度较高的I-BMSCs更能促进PDLSCs增殖和向成骨样细胞分化,提示终末分化骨细胞可能诱发了PDLSCs的成骨分化.
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牙髓细胞条件培养液对大鼠牙髓干细胞矿化能力影响的研究
目的 观察牙髓细胞条件培养液对成年鼠及幼年鼠牙髓干细胞体内矿化能力的影响,以探求牙髓细胞条件培养液调节牙髓干细胞生物学特性的作用.方法 取2周龄和4月龄SD大鼠上下颌切牙牙髓组织,采用组织块酶消化法分离培养牙髓干细胞,有限稀释法纯化牙髓干细胞,流式细胞仪检测牙髓干细胞表面标记物基质细胞抗原-1(stromal cell antigen 1,Stro-1),CD90表达情况;用细胞条件培养液分别诱导两个时期的牙髓干细胞,以细胞团的形式移植到大鼠肾被膜下,观察形成矿化组织的能力.结果 细胞条件液可以改变两个时期大鼠牙髓干细胞的体内矿化特性,幼年鼠牙髓细胞条件培养液可以增强成年鼠牙髓干细胞形成矿化组织的能力,而成年鼠牙髓细胞条件培养液可减弱幼年鼠牙髓干细胞形成矿化组织的能力.结论 牙髓细胞条件培养液可以改变牙髓干细胞的体内矿化能力,为调节由年龄因素带来的细胞生物学特性的改变提供了实验依据.
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感觉、运动神经匀浆对兔成骨细胞增殖与成骨功能的影响
目的 研究兔周同感觉、运动神经匀浆对兔骨髓间充质干细胞来源的成骨细胞增殖与成骨能力的影响.探讨周围神经影响成骨的可能原因.方法 提取大隐神经、坐骨神经肌支分别作为感觉、运动神经组织,制备匀浆.体外培养兔骨髓间充质干细胞,常规成骨诱导后鉴定备用.以含感觉、运动神经匀浆的诱导培养基、成骨诱导培养基、无地米诱导培养基及对照培养基作用于干细胞来源的成骨细胞,观察其增殖、分化及矿化情况.结果 感觉神经组较其他各组显著促进成骨细胞增殖(P<0.01),成骨诱导组及对照组抑制细胞增殖(P≤0.001);感觉神经匀浆显著促进成骨细胞总蛋白及碱性磷酸酶(ALP)的合成(P<0.05),成骨诱导组及对照组ALP蛋白比活性显著高于运动神经组及无地米组(P<0.05);感觉神经组、成骨诱导组及对照组茜素红结合量显著高于无地米组及运动神经组(P<0.001),前三组之间无显著性差异.结论 感觉神经成分能显著促进成骨细胞的增殖、分化与矿化,运动神经成分未见促成骨作用.
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含锌、氟离子矿化液对牙釉质理化性能的影响
[目的]研究以钙磷为基础的含锌、氟离子矿化液对牙釉质理化性能的影响.[方法]将因治疗需要而拔除的成人第三磨牙牙冠制作成牙釉质切片.分别以含不同浓度氟离子和锌离子的钙磷饱和矿化液处理牙釉质切片,分为处理组:CaP-ZnF、CaP-F、CaP-Zn、CaP组和双蒸水DDW对照组.采用扫描电镜、X射线衍射仪和红外光谱仪,检测矿化液处理组和对照组牙釉质切片的表面特性.[结果]扫描电镜观察到经矿化液处理后的牙釉质切片表面有聚集的微晶沉积.X射线衍射仪分析牙釉质表层沉积的羟基磷灰石晶体显示,含氟离子组和同时含有锌、氟离子组矿化液与含锌离子组或对照组相比,晶粒增大、晶体完整性增高及沉积量增多.含氟离子组和同时含有锌、氟离子组矿化液处理的牙釉质表面红外光谱仪图谱分析,结果显示在1102、1065、1027 cm-1处呈现多个P-O(磷酸组)吸收峰.[结论]含有钙离子、磷酸根离子、锌离子和氟离子的矿化液可以在牙釉质表面形成具有保护功能的载锌氟磷灰石晶体层,从而具有防治早期牙釉质龋的作用.
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FTY720-P对成骨细胞分化成熟的作用
目的 以FTY720-P作用于成骨细胞后,分析相关蛋白和基因表达的变化,明确FTY720-P对成骨细胞的作用机制.方法 取Wistar大鼠乳鼠颅盖骨进行成骨细胞原代培养.将不同浓度的FTY720-P(0、200、300、400 ng/mL)作用于成骨细胞,MTT试验和流式细胞术进行生长速率和细胞周期的检测,碱性磷酸酶(ALP)染色和钙化结节染色对比FTY720-P用药前后对细胞形态学功能的影响,并分别采用ELISA、Western blot和Real Time RT-PCR检测相关蛋白和基因的表达.结果 MTT显示FTY720-P对细胞生长影响不大.流式细胞术结果提示,细胞阻滞在G2期,对周期影响不大.ALP染色显示对照组蓝紫色颗粒更加明显;茜素红染色可见数量较多和更加明显的钙化结节.PCR结果中ALP的表达是下调的,骨钙素(OCN)和胰岛素样生长因子(IGF)的表达是上调的;而在ELISA实验中,OCN和IGF的分泌是增加的,Western blot检测中,胞外胶原蛋白I型分泌也增加,而在ALP活性实验中,胞内ALP活性是降低的.结论 FTY720-P可以促进成骨细胞细胞外基质的成熟和矿化,但对细胞增殖和周期没影响.
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HtrA1、TGF-β1及Smad3在人牙髓细胞向成牙本质细胞分化过程中的动态表达研究
目的:探讨人牙髓细胞(hDPCs)经矿化诱导向成牙本质细胞分化过程中丝氨酸蛋白酶HtrA1、转化生长因子(TGF)-β1和Smad3的表达情况.方法:建立体外培养的hDPCs矿化诱导模型,根据矿化时间分为0d、7d、14 d、21d、28 d组,通过茜素红染色、碱性磷酸酶(ALP)活性测定、矿化相关因子ALP、Ⅰ型胶原(COL Ⅰ)及成牙本质细胞标志因子牙本质涎磷蛋白(DSPP) mRNA的表达证实hDPCs成牙本质细胞向分化并成功建立体外矿化模型,用实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测矿化诱导过程中细胞内HtrA1、TGF-β1和Smad3 mRNA的表达情况.结果:矿化诱导后,与对照组比较,矿化结节产生逐渐增多,hDPCs细胞内ALP活性增强(P＜0.05).qPCR结果显示,诱导后细胞的ALP、COL Ⅰ及DSPP mRNA表达水平增高(均P ＜0.05).各时间点HtrA1和TGF-β1 mRNA的表达均高于0d组(均P＜0.05),Smad3 mRNA的表达有下降趋势,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论:HtrA1、TGF-β1可能共同参与hDPCs向成牙本质细胞样细胞分化的过程,Smad3在这一过程中扮演的角色仍需要进一步的研究.
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骨诱导形成蛋白-2诱导牙髓细胞矿化佳条件的探究
目的:探讨骨诱导形成蛋白-2(BMP-2)诱导人牙髓细胞(DPCs)矿化的佳条件.方法:将人DPCs进行体外培养稳定传代,用含不同浓度BMP-2(0 μg/L、50 μg/L、100 μg/L、150 μg/L)的诱导液培养14d,另用浓度为100 μg/L BMP-2诱导细胞,分别于7d、14d、21 d检测各组细胞增殖情况、矿化结节的形成情况以及诱导成牙本质过程中相关牙本质涎磷蛋白(DSPP)、牙本质基质蛋白-1(DMP-1)、碱性磷酸酶(ALP)基因的表达水平.结果:不同浓度BMP 2诱导细胞过程中,诱导液浓度的改变对细胞增殖无明显作用;一定范围内随着诱导剂剂量的增加,DPCs矿化结节形成量,DSPP、DMP-1、ALP基因表达量上调,各浓度与对照组(BMP-2为0 μg/L)比较,差异有统计学意义(P＜0.05),100 μg/L组和50 μg/L组之间的表达量比较,差异有统计学意义(P＜0.05),100 μg/L组和150 μg/L组比较差异无统计学意义(P＞0.05).在100 μg/L浓度BMP-2诱导下,0～14 d各表达明显增长,14d组与7d组各表达量差异有统计学意义(P＜0.05),而14 d组与21 d组各表达量差异无统计学意义(P＞0.05).结论:BMP-2对DPCs增殖无明显作用,但有明显诱导细胞矿化作用,佳浓度为100 μg/L,佳天数为14 d.
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富血小板纤维蛋白凝胶析出液对人牙髓细胞体外矿化的影响
目的：探索富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)凝胶析出液对人牙髓细胞(human dental pulp cells, hDPCs)体外矿化的影响。方法组织块法培养 hDPCs。采用 Choukroun 一步离心法制备 PRF 凝胶。将新鲜制备的PRF 凝胶浸泡于 DMEM 培养基中,于第7 d 取析出液。用 PRF 凝胶析出液孵育 hDPCs 3 d 后更换矿化诱导液。采用茜素红染色和 RT-PCR 检测人牙髓细胞矿化的潜能。结果矿化诱导21 d 后,茜素红染色观察到实验组有少量钙结节生成,而对照组无钙结节生成；RT-PCR 结果显示,实验组 hDPCs 碱性磷酸酶(ALP)的表达为对照组的1.5倍,差异具有统计学意义(P <0.05)。结论 PRF 凝胶析出液可促进人牙髓细胞矿化。
关键词： 富血小板纤维蛋白凝胶 析出液 人牙髓细胞 矿化 -
BMP-2及FGF-2对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响
目的:研究骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)和碱性成纤维细胞生长因子-2 (fibroblast growth factor-2,FGF-2)单独或联合应用对大鼠骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem ceils,BMSCs)增殖和成骨分化的诱导作用.方法:体外培养大鼠骨髓间充质干细胞,分别用不同浓度的BMP-2(10.0、100.0、200.0 ng/mL)和FGF-2(0.1、1.0、10.0 ng/mL)单独或联合诱导其增殖和成骨分化,于培养的第3、7天检测细胞增殖,第7天检测细胞周期分布,第7、14天检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)表达量,第14、21天采用茜素红染色检测钙结节的形成情况.结果:单独应用BMP-2能够明显促进BMSCs成骨分化,佳剂量为200.0 ng/mL.当BMP-2为200.0 ng/mL时,ALP mRNA表达量为2.29±0.14(P＜0.01),钙结节形成达2.68±0.45 (P＜0.01).单独应用FGF-2能够明显促进BMSCs增殖,佳剂量为1.0 ng/mL(P＜0.01).联合应用BMP-2和FGF-2时,较低浓度就能明显促进BMSCs的增殖和分化(BMP-2为10.0 ng/mL,FGF-2为0.1 ng/mL),ALP mRNA表达量为2.52±0.15(P＜0.01),钙结节形成达3.18±0.45(P＜0.01),具有显著的协同诱导效应.结论:BMP-2可促进BMSCs向成骨分化,FGF-2可促进BMSCs增殖,两者联合应用可协同诱导BMSCs增殖和成骨分化.
关键词： 骨形态发生蛋白-2 碱性成纤维细胞生长因子-2 增殖 碱性磷酸酶 矿化 -
人牙髓细胞的体外培养及生物学特性研究
目的:从年轻恒牙的牙髓组织中分离培养牙髓细胞,研究其表型及生物学特性.方法:选取因正畸或阻生拔除的年轻健康双尖牙或第三磨牙,取出牙髓,组织块酶消化法分离培养人牙髓细胞,免疫细胞化学检测第3代人牙髓细胞表面标志,并对体外培养的人牙髓细胞的矿化能力进行研究.结果:体外培养的人牙髓细胞表达Ⅰ型胶原及波形丝蛋白,少数细胞增殖可形成克隆并表达间充质干细胞的表面标志STRO-1.体外连续培养可形成钙化结节,加入矿化诱导液后钙化结节形成时间明显提前,牙髓细胞碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)活性增高.结论:人牙髓细胞中含有少量干细胞,体外培养的人牙髓细胞可向成牙本质细胞分化并形成钙化结节,体外矿化诱导可促进牙髓细胞向成牙本质细胞分化.
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p75NTR敲除对小鼠股骨矿化发育的抑制作用
目的 对比野生型和p75 neurotrophin receptor(p75 NTR)敲除小鼠股骨骨质的改变,探讨p75 NTR敲除对小鼠股骨矿化发育的影响.方法 取同窝p75 NTR+/+(野生型)和p75 NTR-/-(敲除型)雄性小鼠,出生后8周龄时行股骨Micro-CT扫描,检测股骨松质骨的骨量(BV)、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨表面积/骨量(BS/BV)、骨小梁分离度(Tb.Sp)和皮质骨的骨量(Ct.BV)、骨皮质厚度(Ct.TbTh)、骨皮质的骨表面积/骨量(Ct.BS/BV);出生后40 d分别取同窝两种基因型雄性小鼠行钙黄绿素荧光双标实验,以检测股骨的矿化沉积速率;提取4周龄大小鼠股骨总RNA及蛋白质,RT-PCR和Western blot检测ALP、Runx2的表达.结果 Micro-CT结果显示:p75 NTR--小鼠股骨的BV、BV/TV、Tb.N、Tb.Th、Ct.BV、Ct.TbTh明显低于同窝p75 NTR+/+小鼠(P＜0.05),同时,p75 NTR-/-小鼠的BS/BV、Tb.Sp、Ct.BS/BV明显高于p75 NTR+/+小鼠(P＜0.01);钙黄绿素荧光双标检测结果显示:p75 NTR-/-小鼠股骨的矿化速率明显低于同窝p75 NTR+/+小鼠(P＜0.01);RT-PCR及Western blot结果显示:p75 NTR--小鼠的ALP、Runx2表达均明显低于p75 NTR+/+小鼠(P＜0.01).结论 p75 NTR敲除对小鼠股骨的矿化发育有一定的抑制作用.
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骨形态发生蛋白1A型受体介导的信号通路在成骨细胞终末分化中的调节作用
目的 观察骨形态发生蛋白1A型受体(bone morphogenetic protein receptor 1A,BMPR1 A)介导的信号通路在成骨细胞终末分化中的调节作用.方法 使用Lox P/Cre系统,以3.2 kb Ⅰ型胶原蛋白为启动子,在小鼠成骨细胞中特异性敲除BMPR1A(不含Cre的小鼠记为对照组),采用Von Kossa染色、细胞茜素红染色,扫描电镜观察成骨细胞矿化能力的改变;MASSON染色、天狼星红染色观察成骨细胞胶原合成能力的变化;免疫组化染色、细胞周期检测初步探讨其成骨细胞终末分化阻滞的可能机制.结果 BMPR1A敲除小鼠与对照组小鼠相比:①矿化能力明显下降,且细胞间连接减少,间隙变大;②胶原合成能力减弱,胶原排列不规则;③FGF23与OPN的表达升高,细胞周期的阻滞是成骨细胞终末分化障碍可能的原因.结论 BMPR1A在成骨细胞终末分化中起着至关重要的作用,敲除后可导致小鼠骨矿化减弱,胶原合成能力下降.
关键词： 骨形态发生蛋白1A型受体 成骨细胞 终末分化 矿化 -
甲状旁腺素相关肽蛋白核定位序列及C末端缺失对小鼠下颌磨牙发育的影响
目的 研究甲状旁腺素相关肽(PTHrP)核定位序列和C-末端在小鼠下颌磨牙中的作用.方法 选取野生型(WT)小鼠(WT组)和PTHrP Knock-in小鼠(PTHrP KI组)各10只,使用CT扫描三维重建、苏木精-伊红(HE)、免疫组织化学染色等方法分析PTHrP KI小鼠和WT小鼠的下颌第一磨牙的差异.结果 WT组小鼠的下颌第一磨牙明显长于PTHrP KI组小鼠,前期牙本质占总牙本质比例明显小于PTHrPKI组小鼠,差异均有统计学意义(P＜0.01);WT组小鼠Ⅰ型胶原(Collagen-Ⅰ)、牙本质涎蛋白(DSP)和Ki-67阳性比例明显高于PTHrP KI组小鼠,而p27阳性比例低于PTHrP KI组小鼠,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 PTHrP核定位序列和C-末端缺失导致小鼠磨牙牙本质细胞外基质分泌减少,矿化障碍.
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FGF-23（R176Q）过表达对成年小鼠下颌骨形成和矿化的影响
目的：研究 FGF-23（R176Q）过表达对成年小鼠下颌骨形成和矿化的影响。方法使用 CT 扫描、血清学检查、HE染色、免疫组织化学法染色和 RT-PCR 等方法分析 FGF-23（R176Q）转基因小鼠（TG 组）和野生型小鼠（WT 组）下颌骨，比较血清钙、磷浓度变化和下颌骨骨基质和矿化的差异。结果WT 组小鼠血清钙、磷和1，25（OH）2 D3浓度均明显高于 TG 组，差异有统计学意义（P ＜0．05）；TG 组的成骨细胞密度低于 WT 组，差异有统计学意义（P ＜0．05）；TG 组的二聚糖阳性百分比高于 WT 组，而 DSP 阳性百分比低于 WT 组，差异有统计学意义（P ＜0．05）；WT 组的 OCN 和Ⅰ型胶原 mRNA 表达水平均明显高于 TG 组，差异有统计学意义（P ＜0．05）。结论FGF-23（R176Q）过表达能够抑制下颌骨骨基质的形成，减少骨质的矿化，进而导致了下颌骨发育障碍。
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龙牡壮骨颗粒对小鼠成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化及矿化的影响
目的:研究龙牡壮骨颗粒对小鼠成骨细胞株MC3T3-E1增殖、分化和矿化的影响.方法:以小鼠成骨细胞株MC3T3-E1作为药物筛选的体外模型;采用终浓度分别为1,5,10,25,50 μg/ml的龙牡壮骨颗粒溶液干预,MTT法检测细胞增殖率;同时检测药物作用不同时间后的碱性磷酸酶(ALP)活性;茜素红染色和Von Kossa钙化染色检测不同浓度药物对细胞钙化的影响.结果:龙牡壮骨颗粒溶液在5～50 μg/ml范围内培养24和48 h可显著促进小鼠成骨细胞增殖;龙牡壮骨颗粒溶液在5～ 50μg/ml范围内培养48和72 h显著提高MC3T3-E1细胞ALP活性.龙牡壮骨颗粒浓度为10 μg/ml和50 μg/ml时,茜素红染色钙化结节显著增多,药物浓度在10～ 50 μg/ml范围内,Von Kossa染色钙化结节显著增多.结论:龙牡壮骨颗粒可提高MC3T3-E1增殖、分化及矿化的能力.
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表面矿化的载银纳米羟基磷灰石/聚酰胺66抗菌多孔支架研究
与植入骨修复替代材料相关的感染一直是临床亟待解决的问题.本文通过相分离法制备载银纳米羟基磷灰石/聚酰胺66(Ag-nHA/PA66)多孔抗菌组织工程支架,并通过在过饱和磷酸钙溶液中矿化以增强支架表面生物活性,对比研究了矿化前后支架的多孔结构、Ag+释放及抗菌性能.结果表明矿化后Ag-nHA/PA66多孔支架孔隙贯通性良好,大孔平均孔径为(626.61±141.94)μm,孔隙率为(76.89±8.21)％,压缩强度达到(2.94±1.12)MPa,矿化后多孔支架表面形成片状结构的磷灰石层.矿化前后Ag+释放速度变化不大,均表现为1d内较快,之后平稳缓慢释放.抗菌实验表明矿化后Ag-nHA/PA66多孔支架仍保持很强的抗菌能力.
关键词： 载银纳米羟基磷灰石/聚酰胺66多孔支架 矿化 银离子释放 抗菌性能 -
含Arg- Gly-Asp肽改性PLGA-[ASP-PEG]矿化的研究
将含Arg-Gly-Asp(RGD)肽对多孔的PLGA-[ASP-PEG]表面进行改性,然后置于仿体液中两周,探讨肽改性的PLGA-(PEG-ASP)在仿体液中的矿化情况.通过交联剂Sulfo-LC-SPDP把肽接枝到PLGA-[ASP-PEG],X射线光电子能谱仪(X-ray photoelectron spectroscopy, XPS)鉴定; 肽改性PLGA-[ASP-PEG]为实验组(Experiment group, EG),PLGA-[ASP-PEG]为对照组(Control group, CG),均置于仿体液中两周, 扫描电子显微镜(Scanning electron microscope, SEM )、X射线能谱仪(Energy dispersive analysis system of X-ray, EDS)及X射线衍射仪(X-ray diffractometry, XRD)对矿化情况进行分析.XPS检测肽改性PLGA-[ASP-PEG]表面硫元素结合能为164 eV,碳、硫元素的含量比值(C/S)为99.746∶0.1014;SEM示在EG表面及内部呈现连续的较为致密的矿化层, CG仅见分散稀疏的矿化层;EDS及XRD结果表明矿化物主要成分为羟基磷灰石,EG矿化物中钙/磷比值为1.60, CG矿化物中钙/磷比值为1.52.含RGD肽为矿化提供了丰富的功能基团,PLGA-(PEG-ASP)经肽修饰矿化后,获得了与天然骨基质相似的微观结构.
关键词： 矿化 PLGA-[ASP-PEG] 羟基磷灰石 -
婴幼儿佝偻病的诊治和预防
维生素D缺乏性佝偻病(rickets of vitamine D deficiency,简称佝偻病)为维生素D(VitD)缺乏引起体内钙磷代谢异常,导致生长期的骨组织矿化不全,产生以骨骼病变为特征的与生活方式密切相关的全身性慢性营养性疾病[1].
