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警惕药源性不孕不育
据统计,约有4％ ～6％的不孕是由药物引起的.据临床观察发现,可导致不孕不育的药物主要有以下几种:抗生素类药物抗生素类药物中多含有激素成分,可导致内分泌失调,尤其是对于男性来说,可导致睾丸细胞代谢下降及供养不足,使生精细胞中的精子浓度下降,引起精子减少,导致不育.大环内酯药物,如红霉素、螺旋霉素、麦迪霉素等,会造成精子发育停顿和有丝分裂减少,使精子被杀伤或被杀死,存活的精子活动力也明显下降.氨基甙类药能阻断初期精母细胞的减数分裂,故对精子发生有负面影响.
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纺锤体检测点与胚胎非整倍体的关系
纺锤体检测点对有丝分裂和减数分裂中期与后期转换过程中纺锤体的形成起着非常重要的作用,其组成成分初是在发芽的酵母中通过基因检测证实,此后发展到人,大量细胞中均发现某些检测蛋白.研究表明,纺锤体检测系统参与雌性哺乳动物减数分裂的调控,防止胚胎非整倍体的发生.本文阐述在有丝分裂和减数分裂中关于纺锤体检测点的研究进展,了解检测信号传导通路及其在减数分裂中防止染色体异常的作用,进一步探讨胚胎非整倍体发生的原因.
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精子发生减数分裂过程中相关基因的研究进展
精子发生是一个复杂的细胞分化过程,其中减数分裂又是为特殊和关键的一步.在这一过程中一些基因的存在与否、表达水平以及与其他因子间的相互作用,对形成具有生育能力的成熟精子有着至关重要的作用.本文依据减数分裂过程中减数分裂启动、同源染色体联会、基因重组、同源染色体解联、染色体分离的顺序,对Stra8、Sycp3、Dmcl、Hspalb、Rec8等相关基因的研究进展进行综述.
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顺式高尔基体蛋白GM130影响小鼠卵母细胞纺锤体组装
目的 确定顺式高尔基体蛋白GM130对小鼠卵母细胞纺锤体组装的影响. 方法 免疫荧光法检测GM130在小鼠卵母细胞发育不同时期的亚细胞定位,并用免疫印迹法半定量检测其表达水乎;接着用微管解聚药物诺考达唑处理小鼠MⅠ卵母细胞,明确GM130与微管动力的关系.免疫印迹检测注射GM130特定的寡聚核苷酸(morpholino,MO)后卵母细胞中GM130的表达水平,免疫荧光法检测纺锤体的形态变化及中心体相关蛋白γ-tubulin和Plk1的定位. 结果 M130在卵母细胞减数分裂成熟的不同阶段有不同的特异性定位,主要集中分布在生发泡周围、纺锤体的两极和中体及分散于胞浆.GM130在MⅠ和MⅡ期与中心体相关蛋白p-MEK1/2共定位并与纺锤体的组装密切相关.免疫印迹试验表明GM130在卵母细胞发育的各个时期均有表达.降调GM130的表达后,纺锤体组装异常比例升高,且大多数为拉长的纺锤体;第一极体排出率下降,在排出的极体中,大极体的比率升高,并影响γ-tubulin和Plk1的正确定位. 结论 GM130可能作为一种微管组织中心相关蛋白调节纺锤体的组装.
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Syntaxin4参与小鼠卵母细胞皮质颗粒的转运机制的研究
目的 探讨Syntaxin4参与小鼠卵母细胞皮质反应及对皮质反应的影响.方法 RT-PCR和Western blot检测Syntaxin4在小鼠卵母细胞表达;免疫荧光验证Syntaxin4与皮质颗粒在卵母细胞中的定位,分析Syntaxin4对小鼠卵细胞皮质反应的影响;活细胞实时拍摄系统观察降低Syntaxin4表达后皮质反应的动态变化.结果 (1)Syntaxin4在小鼠卵母细胞中表达,且在GV期和MII期无明显变化;(2)Syntaxin4与小鼠卵细胞皮质颗粒共定位;(3)活细胞实时拍摄证实降低Syntaxin4的表达后阻碍了皮质反应的进行.结论 Syntaxin4参与小鼠卵细胞皮质反应.
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Synaptotagmin1影响小鼠卵母细胞减数分裂和皮质反应的研究
目的 探讨Synaptotagmin1 (Syt1)对小鼠卵母细胞减数分裂过程和皮质反应的影响. 方法 免疫印迹检测Syt1在小鼠卵母细胞的表达;免疫荧光分析Syt1在卵母细胞中定位以及对减数分裂过程的影响;活细胞实时拍摄系统观察皮质反应以及纺锤体、染色体在降调Syt1表达的动态变化. 结果 (1)Syt1和小鼠卵母细胞皮质颗粒完全共定位;(2)降调Syt1表达,小鼠卵母细胞减数分裂进程受到阻碍;(3)活细胞实时拍摄系统证实了降调Syt1会影响中后期转换、第一极体释放以及进一步的皮质反应. 结论 Syt1参与调控卵母细胞的减数分裂的成熟过程和皮质反应的发生.
关键词： Synaptotagmin1 减数分裂 皮质反应 卵母细胞 -
人类精子染色体非整倍体研究进展
人类常见的染色体异常是非整倍体.由于在胚胎发育的早期阶段多数的非整倍体胚胎会停止发育,因此对胚胎的非整倍体率的精确评估多通过对配子的直接研究来进行.大多数非整倍体胚胎的产生,是由于父源或母源性减数分裂中偶然的染色体不分离所导致.本文综述了正常人群的精子非整倍体发生率以及不同种类患者的精子非整倍体率,包括不育患者、体细胞核型异常患者,以及暴露于某些有害的环境或生活方式中的个体;并对精子非整倍体率升高的临床影响进行讨论.
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某种卫生球对小鼠精母细胞染色体畸变的影响
某种无毒卫生球的主要成分是以石油副产品为原料的无毒升华剂,可用于驱避蚊虫、蟑螂,与其他驱虫剂复配可替代樟脑丸防治棉毛织物蛀虫.受研制单位委托,笔者对其进行生殖细胞染色体畸变检测.
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1-18 苯、CS2诱导小鼠卵母细胞染色体非整倍体率增高
目的研究苯,CS2对卵母细胞染色体非整倍体率的影响.方法成年雌性NIH小鼠,1次灌胃,苯(942、1 881、3 762 mg/kg),CS2(372、744、1 488 mg/kg)和多次吸入染毒,苯(706、1 922、4 864 mg/m3);CS2(199、651、1 209 mg/m3),染毒后收集MII卵母细胞,作细胞遗传学分析,测定染色体非整倍体率.结果在灌胃组,苯仅见高剂量组MII卵母细胞非整倍体率(5.64%)高于对照组;CS2 3个剂量组MII卵母细胞染色体非整倍体率分别为4.88%、6.82%、6.82%,与对照组(0.78%)比较,差异均有显著性(P＜0.05).小鼠吸入染毒,苯、CS2各3个剂量组MII卵母细胞染色体非整倍体率分别为7.06%、7.50%、9.76%和6.60%、12.00%、10.00%.与对照组(1.30%)比较,差异均有显著性(P＜0.05).同时也观察到苯、CS2染毒后,第1次减数分裂(MI)卵母细胞停滞,MI卵母细胞率高于对照组(P＜0.05).结果提示苯、CS2有致非整倍体作用.结论高剂量苯、CS2可诱导小鼠MII卵母细胞非整倍体率增高.
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染色体结构异常携带者精子非平衡染色体分析
随着生殖医学和荧光原位杂交技术的发展,染色体异常越来越受到重视.染色体异常导致少弱精或者无精,以及遗传物质异常的精子数量增多,从而降低男性携带者的生育力,影响辅助生育治疗的结局.不同类型的染色体异常生殖细胞进行减数分裂时,形成正常配子的比例不同.本文应用荧光原位杂交( FISH)技术对1例臂间倒位携带者和2例罗氏易位携带者的精子非平衡染色体进行检测,了解其发生情况.
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凋亡对女性生殖细胞的调节作用
卵泡被一层颗粒细胞包绕阻滞于减数分裂Ⅰ期,这种生殖细胞体细胞单位叫做卵泡,以后经过一系列成熟过程,包括卵母细胞生长、颗粒细胞增生以及卵母细胞的后成熟阶段,完全成熟的卵泡释放出卵母细胞,进入生殖管道受精、形成胚胎并进一步发育成胎儿.成年女性在生殖年龄持续存在这个过程,直到卵泡耗竭终止,这时卵巢发生衰老,在人类形成绝经[1].在女性一生中仅有很少的一部分卵母细胞生长、排卵、受精,大部分卵母细胞走向闭锁退化,如在中孕期女性胎儿大约有7×106的生殖细胞,但在出生时或出生后不久卵巢内生殖细胞仅保留大约1×106,在青春期及成年阶段卵母细胞数目持续减少,到绝经过渡期卵巢内仅发现大约几百个退化的卵母细胞.妇女在她的成年期大约可以排400个卵母细胞,显然99.9%的卵母细胞发生了退化[2,3].
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小RNA在精子发生中的研究进展
近20年来人们在动物、植物及病毒等生物中发现了一系列小分子非编码RNA,包括miRNA[1]、piRNA[2]和siRNA[3].与其相关的Argonaut家族蛋白分为2个亚家族:Ago亚家族和Piwi亚家族.精子发生是指由精原细胞经初级精母细胞、次级精母细胞、精细胞至成熟精子形成的过程.整个过程分为3个阶段:精原细胞的增殖、精母细胞的减数分裂和精子细胞的变态过程,这一复杂的过程受多种因素的调控.近年来,小RNA在精子发生中的作用越来越受到人们的重视,现将三种小分子非编码RNA在精子发生中调控作用的研究现状概述如下.
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精子染色体检测的研究进展
男性不育症病因包括少精子症、弱精子症、畸形精子症、无精子症及抗精子抗体所致的免疫性不育等,其中少、弱、畸形精子症患者较为多见,其染色体异常是引起不育、流产、死胎、先天缺陷、脑发育迟缓的一个重要原因[1].因为绝大多数染色体异常是在减数分裂过程中产生的,因此,直接对成熟的精子进行染色体分析,有助于发现染色体异常的机制和各种影响因素的作用,对制订相应的预防策略具有重要意义.本文对近年来精子染色体检测技术的研究概况综述如下.
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染料木黄酮对小鼠卵母细胞成熟的抑制作用
目的 探讨染料木黄酮(GEN)对小鼠卵母细胞成熟的影响.方法 以小鼠为实验动物,随机分为4组,分别给予不同剂量(0、0.5、5.0、50.0mg/kg BW)的GEN处理7d,观察GEN对小鼠促排卵和生殖激素水平[雌二醇(E2)、黄体生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH)]的影响;同时,进行体外培养试验,用不同浓度的GEN处理体外培养卵丘-卵母细胞复合物(COCs)和裸卵(DOs),观察GEN是否抑制卵母细胞的减数分裂成熟过程.结果 GEN处理可降低小鼠促排卵数,但对机体生殖激素(包括E2、FSH和LH)水平无影响;体外培养过程中,GEN可抑制COCs中卵细胞的减数分裂成熟过程,但对DOs的成熟过程无明显影响.结论 GEN可干扰小鼠卵母细胞的成熟过程,其作用机制可能是发生在卵巢中.
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21-三体综合征和阿尔兹海默病的相关性
21-三体综合征(21 trisomy syndrome,DS),又名先天愚型或Down综合征(简称DS),是一种生后显现的进展性认知功能障碍性疾病,主要由于减数分裂或有丝分裂时期额外复制了一个有功能的21号染色体所致.它是小儿先天性智力低下常见的病因之一.
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小鼠成熟卵子重构及胚胎发育
目的使用小鼠的卵丘细胞为供核,去核的成熟卵浆为受体进行卵子重构,观察受精、胚胎发育情况.方法昆明小鼠超排卵后获取生殖泡期卵子,进行体外成熟.成熟卵子去核后将卵丘细胞核与精子直接注入,观察其受精和胚胎发育情况.结果卵子去核存活率为69.2%(258/373),注核存活率为44.1%(112/254).20.9%(19/91)重构卵子排出1个极体并形成两原核,卵裂率为78.9%(15/19).15个重构卵子于D2分裂至2～3个细胞后阻滞,无囊胚形成.结论将小鼠的卵丘细胞核移植到成熟的去核卵浆中,同时注射精子进行激活,可以形成重构卵子并受精,但出现2细胞阻滞,发育潜能较差.
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染色体不平衡易位的产前诊断与遗传学研究
目的 分析染色体不平衡易位的病例,为总结遗传特点提供科学依据.方法 选取2015年8月至2017年6月,杭州市妇产科医院产前诊断中心确诊的染色体不平衡易位5例病例,对5个家系中胎儿抽取羊水行染色体核型及单核苷酸多态性微阵列(single nucleotide polymorphisms array,SNP array)检测,父母行染色体核型检测.结果 子代存在不平衡易位,染色体存在部分单体合并部分三体.平衡易位携带者的配子存在共同特征,均为减数分裂2∶2分离中的邻位-1分离所形成.由胎儿染色体核型及SNP array结果推测父母一方为平衡易位携带者.结论 染色体不平衡易位患者表型多样且轻重不一,产前诊断可明确胎儿异常病因.夫妻双方行染色体核型检测可确诊异常染色体的来源,指导生育.
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浅谈减数分裂的课堂教学
课堂是教学的中心环节,是老师传授知识,学生获得知识的主要场所,如何利用好课堂有限的几十分钟,充分发挥教师的主导作用,调动学生的主动性和积极性,想方设法激发学生根据授课内容积极思维,使学生对所学知识既感到新鲜又比较容易掌握,使老师讲的轻松,学生学得愉快,台上台下息息相通,教师与学生合拍,共同完成教学任务,是每个教师所期望的.
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药用植物湖北麦冬和山麦冬减数分裂及花粉发育的比较研究
目的:比较湖北麦冬和山麦冬减数分裂及花粉发育的差异,探讨湖北麦冬不育的细胞学实质.方法:采用常规压片法,观察湖北麦冬和山麦冬的减数分裂行为及花粉发育过程.结果:山麦冬花粉母细胞减数分裂过程基本正常,染色体能正常配对和分离.湖北麦冬花粉母细胞减数分裂过程中染色体行为异常,多表现为中期出现少数染色体及断片游离在纺锤体外面,在后期出现染色体桥、断片和落后染色体,在末期出现单个染色体游离在细胞核外形成微核的现象.湖北麦冬花粉发育异常,花粉畸形率为95.81%(2 066个).山麦冬花粉发育基本正常,花粉畸形率为3.44%(2 949个).结论:湖北麦冬减数分裂及花粉发育的异常是引起花粉败育的重要原因.
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左归丸、右归丸复方及相关成分对小鼠胚胎干细胞1B10向生殖细胞方向分化的影响
目的:探索左归丸、右归丸及其相关成分对干细胞向生殖细胞分化的影响.方法:制备左归丸、右归丸、左归丸和右归丸共有成分的大鼠含药血清,以此作为实验药物;以小鼠胚胎干细胞1B10(MESC-1B10)为干细胞代表;然后以上述大鼠含药血清干预MESC-1 B10,干预过程中进行显微照像追踪,干预72 h后,提取相关被干预细胞的RNA,立即合成cDNA,后利用实时荧光定量PCR(qPCR)检测各干预细胞的10种与生殖分化相关基因的表达模式.结果:左归丸大鼠含药血清(ZGW-RS)显著上调了Oct-4和SCP3,显著下调了GDF-9和Stra8;右归丸大鼠含药血清(YGW-RS)显著上调了Oct-4,GDF-9,Mvh和SCP3,显著下调了Stra8,Itga6和Itgb1;左归丸和右归丸共有成分的大鼠含药血清(ZGWYGW-RS)显著上调了Oct-4,SCP3和ZP3,显著下调了GDF-9,Stra8,Itga6和Itgb1.结论:ZGW-RS能启动MESC-1B10向减数分裂方向变化,但是尚不足以推动1B10向生殖细胞分化;YGW-RS能启动MESC-1B10向减数分裂方向变化,同时推动1B10向雌性生殖细胞分化;ZGWYGW-RS能启动MESC-1B10向减数分裂方向变化,同时能轻微推动MESC-1 B10向雌性生殖细胞分化,但是作用弱于YGW-RS.实验结果一方面增强了对左归丸和右归丸及其相关成分影响干细胞生殖分化的认识,另一方面有助于解释左归丸和右归丸治疗不孕不育症的机制.
