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FQ-PCR方法检测女性CA患者HPV6.11和HPV16.18结果分析
目的 探讨女性尖锐温疣(CA)患者感染人类乳头瘤病毒(HPV)的情况.方法 采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法检测316例CA患者疣体组织或分泌物中的HPV6.11和HPV16.18类型.结果:HPV6、11型阳性率为94.3％(298/316),HPV16、18型阳性率为13.6％(43/316),HPV6、11型和HPV16、18同时阳性为9.8％(31/316).定量检测病毒载量高为1.0×108copies/ml,低为2.2×104copies/ml.结论 本地区尖锐湿疣患者感染以HPV6、11低危型为主,少数为HPV16、18高危型；FQ-PCR技术具有灵敏、简捷、安全、特异性强的特点,避免了单纯PCR扩增产生的假阳性.女性尖锐湿疣患者应用此方法检测HPV阳性率高,可以快速区分高危型及低危型的HPV感染,有助于对尖锐湿疣的复发和癌变作出可能性预测.
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实时荧光定量聚合酶链反应检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的临床应用
目的:采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA),评价其快速检测MRSA的临床意义.方法:选取我院2014年1月至2014年12月采集的96份临床标本,其中血液36份,痰液42份,鼻咽拭子18份,开展FQ-PCR检测以及细菌鉴定.结果:血液标本中,两种检测方法的符合率为100％;痰液标本中,两种检测方法的符合率为95.2％;鼻咽拭子中,两种检测方法的符合率为100％.结论:FQ-PCR检测MRSA更加方便、快速,且对于血液等无菌体液的检测结果与细菌鉴定结果符合率较高.
关键词： 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 FQ-PCR mecA基因 -
孕妇乙型肝炎病毒感染与胎儿宫内感染的关系
婴幼儿是乙型肝炎病毒(HBV)的易感人群,而母婴传播是一条重要的感染途径[1].采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测孕妇血清HBV标志物,同时采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术对不同HBV感染状态的孕妇血清和脐血中的HBV-DNA进行检测,结合上述二者作相关性分析,以探讨孕妇HBV感染状态对HBV母婴传播的影响.
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祛腐生肌法治疗结核性溃疡临床观察
目的 探讨祛腐生肌法治疗结核性溃疡的疗效及作用机制.方法 将68例结核性溃疡患者随机分为2组,均口服异烟肼、利福平.观察组以依据祛腐生肌法研制的复方五凤草液外用(5 mL,隔日1次),对照组以异烟肼针剂外用(0.2g,隔日1次).实验时间设为21日,于治疗开始前及治疗第3、7、14、21日刮取2组患者疮疡内侧壁少许肉芽组织,行荧光FQ-PCR结核杆菌定量检测,应用ELISA法动态观察创面血管内皮细胞生长因子(VEGF)及碱性成纤维细胞生长因子(FGF-2)的变化.结果 治疗第7日,2组创面结核杆菌数量差异有统计学意义(P＜0.01);第14、21日,2组溃疡组织VEGF、FGF-2表达水平差异有统计学意义(P＜0.01,P＜0.05).结论 祛腐生肌法通过减少创面结核杆菌数量、刺激生长因子的表达促进溃疡愈合.
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人乳头瘤病毒基因检测方法的初步比较及基因亚型分析
宫颈癌的筛查方法从分子水平检测通常采用多重核酸扩增荧光检测技术(FQ-PCR)和第二代杂交捕获技术(HC-Ⅱ)以及PCR结合反向寡核苷酸探针点杂交技术(PCR/RDB).FQ-PCR实验方法简单,其优点是易于操作,且全部实验均在一个密闭反应体系中完成,能有效避免交叉污染造成的假阳性;而HC-Ⅱ实验方法相对繁琐,其缺点是开放式的操作过程容易交叉污染造成假阳性,且试剂成本较高.但HC-Ⅱ的实验方法比FQ-PCR要早若干年应用于临床,现今仍在广泛应用,并在指导临床宫颈痛早防早治领域有不俗的表现.而FQ-PCR是近一两年来才应用于临床的实验方法,其对人乳头瘤病毒(HPV)检测的灵敏度和特异性如何,目前尚未见报道.
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FQ-PCR法和染色涂片法检测脑脊液结核杆菌结果对比分析及意义
目的 通过荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)法和染色涂片法检测脑脊液(CSF)结核杆菌,结果与临床确诊结果进行对比分析,探寻提高抗酸杆菌(AFB)的检出率的检验方法.方法 近年来怀疑结核性脑膜炎患者62例,取脑脊液用两种方法检测结核杆菌.结果 FQ-PCR和染色涂片阳性率分别为14.52%和4.84%.结论 FQ-PCR技术是一种快速、敏感、特异性较强的结核分枝杆菌辅助诊断方法.在检测脑脊液结核杆菌有其应用价值和意义.
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涂片、培养和实时荧光定量PCR检测在妇科的临床应用
目的:比较涂片革兰染色、培养和实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测妇科性病淋球菌感染的临床应用价值,寻找一种快速而敏感的淋球菌检测方法.方法:同时用涂片革兰染色、培养和FQ-PCR检测临床疑诊淋病123例女性阴道标本中的淋球菌,以培养法为"金标准",将另外两种方法与之比较,分别计算其敏感性、特异性、阳性预期值和阴性预期值.结果:涂片检出率为76.4%、培养法检出率为66.7%、FQ-PCR检出率为69.9%;经配对计数资料χ2检验,FQ-PCR与培养法的检出率比较差异无显著性(P＞0.05).涂片法和FQ-PCR法的敏感性、特异性、阳性预期值和阴性预期值分别为94.2%、66.7%、87.2%、82.8%和97.6%、89.7%、95.3%、94.6%.结论:FQ-PCR检测淋球菌,可弥补涂片法较粗糙、培养法耗时长的缺点.FQ-PCR具有准确快速,敏感性和特异性较高的特点,是一种具有临床应用价值的淋球菌快速定量检测方法.
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比较TRF和FQ-PCR在乙型肝炎检测中的效果
目的:比较时间分辨荧光免疫分析法(TRF)和实时荧光定量聚合酶链式反应法(FQ-PCR)在乙型肝炎检测中的效果.方法:采用TRF和FQ-PCR分别对传染科收治的200例确诊的乙型肝炎患者血清标本进行检测.结果:采用TRF检测患者阳性例数为117例,准确度为58.5%;采用FQ-PCR检测,患者阳性例数177例,准确度为88.5%,FQ-PCR检测准确度显著高于TRF,差异具有统计学意义(P<0.05).结论:FQ-PCR在乙型肝炎检测的准确度优于TRF.
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淋病奈瑟球菌、沙眼衣原体和解脲脲支原体检测结果
淋病奈瑟球菌(NG)、沙眼衣原体(CT)和解脲脲支原体(UU)是临床常见的性传播的病原体.我们采用实时荧光聚合酶链反应(FQ-PCR)方法对来自性病门诊及妇科门诊的患者进行检测,现报告如下.
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FQ-PCR检测生殖器外尖锐湿疣患者HPV
我们采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术检测28例临床诊断为生殖器外尖锐湿疣(CA)患者感染人乳头状瘤病毒(HPV),结果报道如下.
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肺炎支原体载量指数在儿童肺炎支原体感染诊断中的应用
目的 探讨肺炎支原体载量指数(MPLI)在儿童肺炎支原体(MP)感染诊断中的应用价值.方法 2008年3-7月于医院儿科采集患儿咽拭子标本110份及其双份血清;分别用FQ-PCR法和MAG、MP-IgM法检测咽拭子和血清标本;以单次或双次MP-IgM型抗体阳性作为判定MP感染的标准,算出各种方法的灵敏度(SEN),特异性(SPE)、阳性预测值(+PV)、阴性预测值(-PV),制作MPLI的ROC曲线.结果 根据金标准一次MP-IgM法的SEN、SPE、+PV、-PV分别为73.1%～100.O%,一次微粒子凝集试验法(MAG)的依次为26.9%～94.O%;两次MAG法的依次为46.2%～94.O%,单一FQ-PCR法的依次为26.9%～95.2%;MPLI的依次为26.9%～8.8%.结论 MAG检测MP抗体的临床应用价值有限;MPLI能早于MP-IgM法诊断MP急性感染.
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尖锐湿疣临床治愈后原皮损区人乳头瘤病毒监测
目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)亚型、存在时间及其与尖锐湿疣(CA)复发的关系. 方法采用荧光定量PCR(FQ-PCR)技术,对临床治愈后的CA患者于3、6、9个月在原皮损区取活体组织行HPV亚型的测定. 结果 HPV6、11型63例, 3例临床及病例均支持CA的诊断,但FQ-PCR检查结果阴性;9个月时检出的10例阳性患者中HPV6、112例、HPV16、182例和HPV6、11/16、18混合型6例;而2例HPV6、11型阳性患者中有1例复发,2例HPV16、18 1例复发,6例HPV6、11/16、18 3例复发. 结论 HPV6、11型是常见的亚型,疣体去除后HPV6、11型和HPV16、18型、HPV6、11/16、18 3种类型在机体内存在的时间大多＞3个月;除疣治疗后6个月时HPV6、11在局部皮肤内大多被清除,这说明该型预后较好,复发率较低;HPV的阳性检出率与临床复发率之间呈密切相关性.
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解脲脲原体血清型1在兔生殖道中的致病性
解脲脲原体(ureaplasma urealyticum,Uu)是一类介于细菌和病毒之间的原核微生物,是在人工培养基上能繁殖的小的原核细胞型微生物,无细胞壁,能自我复制.uu是女性泌尿生殖道常见的一种支原体,其致病性可能与血清型及浓度有关.本研究通过建立Uu血清型1(Uu1)感染的兔模型,运用荧光定量PCR(FQ-PCR)技术分析不同浓度Uul在兔生殖道中的致病性,旨在探讨Uul感染与致病的关系.
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小脑变性相关蛋白2 mRNA在癫痫患者脑组织中的表达及其临床意义
目的 了解小脑变性相关蛋白2(CDR2)mRNA在癫痫(EP)患者脑组织中的表达及其临床意义.方法 将48例EP患者分成耐药(40例)和非耐药(8例)两组,用基因芯片扫描和FQ-PCR分别检测脑组织中CDR2基因表达,并与对照组比较.结果 基因芯片扫描提示CDR2 mRNA在EP患者与对照组中的表达差异有统计学意义(P＜0.05).FQ-PCR结果与基因芯片扫描一致.结论 EP患者脑组织中有CDR2 mRNA表达,由于其表达产物可通过血-脑脊液屏障进入脑脊液(CSF)和血液中,因而检测CDR2 mRNA在血或CSF中的表达产物有可能成为诊断EP的一个重要指标.
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PCR法检测结核菌在诊断肺结核中临床价值
目的 探讨PCR法检测结核菌在诊断肺结核中临床价值.方法 对102例因咳嗽、咳痰、胸痛、发热、胸片或CT异常住院接受检查的患者行痰液处理,并对处理后的痰液采用FQ-PCR技术进行结核分枝杆菌检测,并与处理后痰液的抗酸染色结果进行对比分析.结果 本研究结果表明FQ-PCR可以有效地检测出肺结核患者体内的结核分枝杆菌,且这种检测方法明显优于传统的抗酸染色法.结论 FQ-PCR方法检测肺结核患者体内的结核分枝杆茼具有快速、特异、敏感的特点,是一种值得临床推广的方法.
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322例乙型肝炎患者实时荧光定量PCR检测与血清标志物的相关性分析
目的：探讨乙型肝炎病毒感染者血清HBVDNA定量与血清乙肝病毒标志物的关系。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测血清HBV-DNA含量，酶联免疫法检测血清乙肝病毒标志物。结果大三阳组HBV-DNA阳性率及含量显著高于其他组，差异有统计学意义(P＜0.05)；HBeAg阳性患者中，HBV-DNA阳性率为100%，与HBeAg阴性组比较，两者差异有统计学意义(P＜0.05)。结论要准确了解乙型肝炎患者体内的病毒复制情况，采用FQ-PCR和HBV血清学标志物检测相结合的方法，才能在乙型肝炎的诊断、病情判断、治疗方案的选择及预后方面提供可靠的依据。
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荧光定量检测HBV-DNA与ELISA检测乙肝标志物模式的比较分析
目的:探讨HBV-DNA复制水平与乙肝病毒标志物(HBV-M)模式的关系.方法:采用荧光定量探针PCR(FQ-PCR)法检测HBV-DNA,采用ELISA检测HBV-M.结果:1 100例血清标本中,HBsAg、HBeAg、HBcAb(+)组的HBV-DNA阳性符合率达97.13%;HBsAg、HBeAb、HBcAb(+)组的HBV-DNA阳性符合率为45.95%;HBsAg、HBcAb(+)组的HBV-DNA阳性符合率为54.17%,HBsAb(+)组的HBV-DNA阳性符合率为18.42%;阴性组的HBV-DNA阳性率为11.11%.结论:FQ-PCR法检测HBV-DNA是反映乙肝病毒复制的良好标志,可以更为清楚地反映病程变化,对临床诊断治疗及判断预后具有重要的指导意义.
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“FQ-PCR溶解曲线法”监测麻风患者TCR a链CDR3谱系漂移的研究
麻风病是由麻风杆菌引起的一种慢性接触性传染病。主要侵犯人体皮肤和神经，如果不治疗可引起皮肤、神经等永久性的损害。当下，我国对麻风病的治疗以预防为主，而对于那些已经患上麻风病的患者来说，治疗方法还值得更深层次的研究探索。本篇文章的研究方法是通过T细胞受体a链V区基因各家族CDR3免疫谱系分析技术来监测麻风患者TCR a链CDR3谱系的漂移情况，进而初步分析出TRAV家族的CDR3 PCR产物定量和克隆增生情况，以此为被麻风感染后的患者的T细胞免疫应答变化提供新的研究方向。
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6种常见的乙肝病毒感染模式与其DNA相关性分析
目的:探讨6种常见的乙肝病毒(HBV)感染模式与乙肝病毒DNA(HBV-DNA)病毒载量之间的关系.方法:运用酶联免疫吸附法(ELISA)、实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术对1022例乙肝患者进行血清标志物(两对半)及HBV-DNA含量检测.结果:血清学检测乙肝表面抗原(HBsAg)+乙肝病毒e抗原(HBeAg)+乙肝病毒核心抗体(HBcAb)阳性(大三阳)患者HBV-DNA阳性率为94.1%,明显高于其他模式,且其病毒载量显著高于其他组.HBsAg+乙肝病毒e抗体(HBeAb)+HBcAb(小三阳)阳性检出率也较高(阳性率54.3%).结论:HBeAg是反映HBV复制活跃的可靠指标,HBV-DNA与HBeAg的存在明显正相关;HBV-DNA病毒载量可真实反映HBV感染、复制及病程变化,对乙型肝炎临床诊断及治疗均有较大的指导意义.
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乙型肝炎病毒DNA定量分析的临床意义
目的:探讨乙型肝炎病毒HBV DNA含量与血清标记物的相关性及其对乙型肝炎诊断、预后的意义.方法:采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测1652例乙肝患者血清学标记物(HBV-M),其血清学模型包括以下9种组合;并选取160例HBV M全阴性正常人作为对照.实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测血清中HBV DNA含量.结果:1、2组HBV DNA阳性率为98.4%和96.67%,明显高于其它组.结论:HBV DNA含量与乙肝病毒e抗原具有显著相关性,HBV M和HBV DNA定量检测对于临床乙肝病毒感染、复制及临床治疗有重要意义.
