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非对称性二甲基精氨酸对人脐静脉内皮细胞黏附分子-1表达的影响及L-精氨酸的拮抗作用
目的: 探讨非对称性二甲基精氨酸(ADMA)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)表达可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)的影响,并观察不同浓度L-精氨酸(L-arg)对ADMA效应的拮抗作用.方法: 以不同浓度的ADMA与HUVECs共育或固定浓度的ADMA加不同浓度的L-arg与HUVECs共育24 h,用ELISA法检测培养液中sICAM-1的浓度. 结果: ADMA呈剂量依赖性增加HUVECs表达sICAM-1(P<0.05),接近生理范围的ADMA对内皮功能没有明显的影响;外源性补充L-arg可逆转ADMA的效应,且呈剂量依赖性(P<0.05),但当外源性L-arg的剂量大到一定程度时,内皮功能并不能得到进一步改善.直线相关分析显示培养液中sICAM-1的浓度和ADMA的浓度明显正相关(r＝0.943,P<0.01 ).结论: ADMA可通过增加内皮细胞表达sICAM-1来导致内皮功能紊乱,且内皮功能紊乱的程度与ADMA的浓度有关;外源性补充L-arg可逆转ADMA的效应;药物调节ADMA的浓度可能是防治心血管疾病的一个新目标.
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复荣通脉胶囊对糖尿病大鼠血清ADMA水平及胸主动脉eNOS、NF-κB表达的影响
目的：观察复荣通脉胶囊对糖尿病（DM ）大鼠血清非对称性二甲基精氨酸（ADM A ）水平、内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、核转录因子‐κB（NF‐κB）表达水平的影响，进一步探讨其防治DM 大血管病变的作用机制。方法：60只Wistar大鼠先分为空白对照组（n＝10）和造模组（n＝50），后者复制DM模型后，再分为DM 组（n＝9）、复荣通脉低剂量组（n＝10）、复荣通脉中剂量组（n＝9）和复荣通脉高剂量组（n＝9），低、中、高剂量组分别给予0．7、1．4、2．8g／kg体重复荣通脉胶囊灌胃，其余两组给予等量纯净水灌胃。8周后，从胸主动脉采血检测ADM A水平；留取胸主动脉制备病理切片，SP法免疫组化染色观察胸主动脉eNOS和NF‐κB阳性染色面积及强度。结果：与空白对照组比较，DM组及复荣通脉低、中、高剂量组血清ADM A 水平及组织N F‐κB表达明显增加（ P＜0．01），组织eNOS表达明显降低（P＜0．01）；与DM组比较，复荣通脉低、中、高剂量组血清ADMA 水平及组织NF‐κB表达明显降低（P＜0．01），组织eNOS表达明显升高（P＜0．01）；中、高剂量组ADMA、NF‐κB的降低和eNOS的升高更明显（P＜0．05）。结论：复荣通脉胶囊通过降低DM大鼠血清ADMA水平，上调胸主动脉eNOS和下调NF‐κB的表达，对大血管病变发挥保护作用。
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叶酸和维生素B12对急性冠状动脉综合征患者非对称性二甲基精氨酸浓度的影响
目的:探讨非对称性二甲基精氨酸(asymmetry dimethylarginine,ADMA)与急性冠状动脉综合征(ACS)的关系,并在此基础治疗上给予叶酸和维生素B12干预治疗,分析其对ADMA的影响及对心血管的保护作用.方法:ACS血压正常患者、ACS伴发高血压患者各60例,每组又随机分为干预组30例和未干预组30例,健康对照组60例.干预组给予叶酸和维生素B12治疗6周,分别检测各组ADMA、一氧化氮(nitric oxide,NO)、一氧化氮合酶(nitrio oxide synthase,eNOS)水平.结果:ACS患者ADMA水平显著升高(P＜0.05),ADMA与eNOS、NO呈负相关.应用叶酸和维生素B12治疗6周ADMA水平较治疗前显著降低(P＜0.05),eNOS和NO水平升高(P＜0.05).结论:ADMA与血管内皮功能障碍密切相关,补充叶酸和维生素B12可以改善血管内皮功能.
关键词： 急性冠状动脉综合征 非对称性二甲基精氨酸 叶酸 维生素B12 -
高血压患者非对称性二甲基精氨酸与胰岛素抵抗的变化及奥美沙坦的干预作用
目的:观察高血压患者非对称性二甲基精氨酸(ADMA)与胰岛素抵抗(IR)的变化,探讨奥美沙坦的干预作用.方法:选择原发性高血压患者85例,采用稳态模式评估法(HOMA)评价IR,将高血压患者分为伴IR组51例,和无IR组34例.另选择22例健康体检者作为对照组.所有受试者均检测血糖、胰岛素、ADMA水平,并评估IR.观察高血压患者经奥美沙坦治疗前后上述指标的变化.结果:①血清ADMA水平及IR指数在伴IR组中显著高于无IR组和对照组(均P＜0.01),无IR组血清ADMA水平显著高于对照组(P＜0.05);②Pearson相关分析显示,在高血压患者中:血清ADMA与IR指数显著相关(r=0.388,P＜0.01);③与治疗前相比,奥美沙坦能显著降低血清ADMA水平(P＜0.05).结论:①高血压合并IR患者ADMA水平显著升高,ADMA的异常增高可能与高血压发病有关;②ADMA升高与IR具有相关性;③奥美沙坦能降低血清ADMA水平,且可能与改善IR有关.
关键词： 高血压 非对称性二甲基精氨酸 胰岛素抵抗 奥美沙坦 -
非对称性二甲基精氨酸促进大鼠腹腔巨噬细胞诱导型一氧化氮合酶表达
目的:观察非对称性二甲基精氨酸(asymmetric dimethylarginine,ADMA)对培养的大鼠腹腔巨噬细胞诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响,探讨其在脂质沉积中的作用及机制.方法:分组:①正常对照组:以PBS缓冲液与巨噬细胞共孵育,②氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)组:在巨噬细胞培养液中加oxLDL(50 mg/L),③O+A组:在巨噬细胞培养液中加oxLDL(50 mg/L)和ADMA(20 μmol/L),④O+A+L组:在培养液中加oxLDL(50 mg/L)、ADMA(20 μmol/L)、L-Arg(1.2 mmol/L).以硝酸还原酶法和化学比色法分别测定培养液中一氧化氮(NO)含量与iNOS活力,以RT-PCR和Western Blotting分别检测iNOS mRNA和蛋白表达.结果:① OxLDL组与O+A组NO含量降低,iNOS活力升高,且以O+A组明显,与正常对照组比较差异均有统计学意义(均P＜0.05);NO与iNOS呈负相关(r=-0.697, P＜0.05).② O+A组iNOS mRNA和蛋白表达增强,与正常对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论:ADMA抑制大鼠腹腔巨噬细胞合成NO,增强iNOS基因与蛋白表达,可能是ADMA促使巨噬细胞转变为泡沫细胞、促进动脉粥样硬化发生发展的机制之一.
关键词： 动脉粥样硬化 非对称性二甲基精氨酸 巨噬细胞 诱导型一氧化氮合酶 -
非对称性二甲基精氨酸对高血压患者外周血单核细胞CXCR2表达的影响
目的:检测一氧化氮合酶(NOS)抑制剂非对称性二甲基精氨酸(ADMA)对原发性高血压(EH)患者外周血单核细胞趋化活性的影响.方法:收集42例EH患者(EH组)和40例门诊健康体检者(对照组).检测血浆中ADMA和NO水平、血管假性血友病因子(vWF)、白细胞介素8(IL-8)和肿瘤坏死因子(TNF)-α浓度,并观察ADMA对外周血单核细胞IL-8受体CXCR2 mRNA表达的影响.结果:与对照组比较,EH患者血浆中ADMA和vWF水平升高、NO生成减少(P＜0.05),同时血中IL-8和TNF-α水平显著升高(P＜0.05).EH患者分离的外周血单核细胞CXCR2 mRNA表达明显高于对照组,外源性的ADMA 30 μmol/L孵育4 h后可进一步上调CXCR2 mRNA的表达(P＜0.05).结论:EH患者血中升高的ADMA可能增加外周血单核细胞的趋化活性,促进动脉粥样硬化的发生.
关键词： 高血压 非对称性二甲基精氨酸 单核细胞 白细胞介素-8 -
H型高血压合并冠心病患者血浆非对称性二甲基精氨酸与同型半胱氨酸的相关性
目的:探讨H型高血压合并冠心病患者血浆非对称性二甲基精氨酸(ADMA)水平与血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平的相关性.方法:选择2016-01-2016-11于我院住院的原发性高血压病患者222例(其中单纯高血压病组66例,高血压合并冠心病组156例),采用酶联免疫吸附法检测血浆ADMA、Hcy水平.根据血浆Hcy水平,将单纯高血压组分为H型高血压亚组46例和非H型高血压亚组20例;将高血压合并冠心病组进一步分为H型高血压合并冠心病亚组104例、非H型高血压合并冠心病亚组52例.比较各组血浆ADMA水平,分析血浆ADMA与Hcy的相关性.结果:高血压合并冠心病组血浆ADMA、Hcy水平均高于单纯高血压组.H型高血压亚组血浆ADMA、Hcy水平高于非H型高血压亚组,H型高血压合并冠心病亚组血浆ADMA、Hcy水平高于非H型高血压合并冠心病亚组,差异有统计学意义(P＜0.05);线性相关分析显示,高血压合并冠心病患者血浆ADMA与Hcy水平有相关性(r=0.76,P＜0.01);进一步多元逐步回归分析显示,血浆Hcy是ADMA的影响因素.结论:H型高血压患者及H型高血压合并冠心病患者血浆Hcy、ADMA水平均高于非H型高血压患者及非H型高血压合并冠心病患者,高血压合并冠心病患者血浆ADMA水平与Hcy水平呈正相关.
关键词： 高血压 冠心病 同型半胱氨酸 非对称性二甲基精氨酸 -
冠状动脉支架置入术对急性冠状动脉综合征患者血浆非对称二甲基精氨酸水平的影响
目的:观察冠状动脉支架置入术(CSI)对急性冠状动脉综合征(ACS)患者血浆非对称性二甲基精氨酸(ADMA)水平的影响.方法:入选ACS患者(ACS组)81例(包括急性心肌梗死30例,不稳定型心绞痛51例),其中仅行药物治疗30例(非CSI亚组);行急诊CSI治疗51例(CSI亚组);另选取经冠状动脉造影排除ACS的人群54例作为对照组.采用高效液相色谱法测定冠状动脉治疗(造影)前,后1 h、1周、1个月时血浆ADMA水平,比较各组患者不同时期血浆ADMA水平的变化.结果:①ACS组血浆ADMA水平显著高于对照组(P<0.05);②CSI亚组患者血浆ADMA水平迅速且持续的降低(F=11.8,P<0.0001);非CSI亚组血浆ADMA水平缓慢下降(F=16.3,P=0.000);③对照组在冠状动脉造影后血浆ADMA水平升高,但总体水平低于ACS患者(F=7.4,P=0.000).结论:CSI不仅不会使血浆ADMA水平增加,还能进一步降低其水平,其影响血浆ADMA水平的机制与单纯冠状动脉造影对血浆ADMA水平的影响机制可能不同.
关键词： 冠状动脉支架置入术 急性冠状动脉综合征 非对称性二甲基精氨酸 -
高血压大鼠阴茎勃起功能与血浆非对称性二甲基精氨酸浓度的关系
目的 探讨自发性高血压大鼠(SHR)阴茎勃起功能与血浆非对称性二甲基精氨酸(ADMA)浓度的关系.方法 健康成年雄性SPF级SHR与对照组Wistar-Kyoto(WKY)大鼠各10只,14周龄,体质量250～ 300 g.麻醉后颈动脉和海绵体内插管连续监测平均动脉压(MAP)和海绵体内压(ICP),利用电刺激海绵体神经,记录ICP/MAP比值变化；用高效液相色谱法测定大鼠血浆ADMA浓度；免疫组织化学技术检测一氧化氮合酶(NOS)、一氧化氮(NO)在大鼠阴茎海绵体的表达.结果 3V和5V电刺激海绵体神经后SHR组ICP/MAP比值(0.22 ±0.03、0.23 ±0.03)较WKY组(0.44±0.03、0.75 ±0.04)均显著降低(P＜0.01),SHR组血浆ADMA浓度(3.86 ±0.15) μmol/L较WKY组(1.24±0.09) μmol/L显著升高,阴茎海绵体组织NOS、NO蛋白表达在SHR组(0.05±0.01、0.11 ±0.02)均较WKY组(0.11 ±0.02、0.16±0.02)显著降低(P＜0.01).结论 血浆ADMA异常升高可能是高血压性勃起功能障碍发生的机制之一.
关键词： 自发性高血压 非对称性二甲基精氨酸 一氧化氮合酶 勃起功能 -
丹参多酚对糖尿病大鼠血管内皮功能的保护作用
目的:探讨丹参多酚对血管内皮功能的保护作用.方法:SD大鼠30只,随机分为正常对照组10只及糖尿病模型组20只.正常对照组正常饮食,糖尿病模型组予高脂高糖饮食联合小剂量STZ注射造模,并予丹参多酚治疗,正常对照组给予生理盐水,观察治疗前及治疗14 d后的血管内皮功能.结果:糖尿病模型组的血清非对称性二甲基精氨酸(ADMA)、内设细胞钙粘蛋白(VE-Ca)高于正常对照组(P＜0.01).经丹参多酚治疗后,糖尿病模型组大鼠的血清ADMA、VE-Ca浓度下降(P＜0.01).结论:糖尿病大鼠有血管内皮功能损伤,丹参多酚对血管内皮功能有保护作用.
关键词： 糖尿病 血管内皮功能损伤 非对称性二甲基精氨酸 内皮细胞钙粘蛋白 丹参多酚 -
血清非对称性二甲基精氨酸水平与中青年脑卒中患者预后之间的相关性及潜在影响因素分析
目的 分析血清非对称性二甲基精氨酸水平与中青年脑卒中患者预后之间的相关性及潜在影响因素.方法 于2016年3月-2017年5月采用定群抽样的方法选取本院接诊并在该院接受后续治疗的患者作为本研究的受试对象,所有进入研究队列的受试者在征得其知情同意的基础上对其基本信息进行收集,同时采用ELISA法对其血清非对称性二甲基精氨酸水平进行定量分析,并进行随访调查.结果 本研究终获得的有效样本数为98例,98例有效观察对象的血清非对称性二甲基精氨酸水平(ELISA吸光度值)为3.19±0.82;血清非对称性二甲基精氨酸水平与中青年脑卒中患者从发病到痊愈时间长度的相关性分析显示,二者呈正相关(rp=0.726,P＜0.05);年龄、BMI、职业、脑卒中家族史、精神压力程度、吸烟年限、饮酒年限、合并高血压病、高脂血症、高血糖、高尿酸血症、肝肾功能异常是患者从发病到痊愈时间长度的影响因素(P均＜0.05);高水平的血清非对称性二甲基精氨酸的中青年脑卒中患者其发病至痊愈的时间均长于低水平的患者(x2=9.189,P＜0.05).结论 高水平血清非对称性二甲基精氨酸可能是中青年脑卒中患者预后不良的独立危险因素.此外,青中年脑卒中患者从发病到痊愈时间长度的影响因素还与许多的不良生活行为以及各种合并症有关.
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高血压患者非对称性二甲基精氨酸与动脉粥样硬化相关性分析
目的 探讨原发性高血压患者血清非对称性二甲基精氨酸(ADMA)的改变与动脉粥样硬化的相关性,为早期诊断治疗高血压提供理论依据.方法 原发性高血压住院患者98例,根据血压水平参照《中国高血压防治指南2010年》将其分为高血压前期组36例,高血压1级组32例,高血压2级组30例,另选取同期行健康体检者30例作为正常对照组,比较几组患者血压水平、ADMA,高频超声测定总动脉内中膜厚度(CCA-IMT)、颈总动脉内径(CCAD),并分析其相关性.结果 与正常组比较,高血压各组收缩压(SBP)、舒张压(DBP)以及PP均明显升高(P＜0.05,P＜0.01),随着高血压分级的严重度,SBP、DBP以及PP呈进行性升高(P＜0.05),ADMA值和颈动脉超声检测CCA-IMT和CCAD值也呈进行性增加(P＜0.05).多因素相关性分析显示,影响ADMA的主要因素为SBP,影响CCA-IMT的主要因素为SBP和ADMA.结论 血清ADMA水平与血压升高及动脉粥样硬化的形成有关,可能是高血压和动脉粥样硬化的主要危险因素.
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护心康片对动脉粥样硬化兔血脂及血浆ADMA的影响
目的:研究护心康对动脉粥样硬化兔血脂及血浆非对称性二甲基精氨酸(ADMA)的影响.方法:将家兔随机分为正常对照组、模型组、护心康组及辛伐他汀组,建立动脉粥样硬化兔模型后进行药物治疗,治疗结束后检测各组家兔血脂水平及血浆ADMA.结果:护心康组能降低动脉粥样硬化兔血清TC和LDL-C(P＜0.05),护心康组ADMA浓度较模型组明显降低(P＜0.05).结论:护心康能降低动脉粥样硬化兔血脂及血浆中ADMA含量,能有效防治动脉粥样硬化.
关键词： 护心康 动脉粥样硬化 兔 血脂 非对称性二甲基精氨酸 -
蛋白质精氨酸甲基转移酶与相关疾病
蛋白质精氨酸甲基转移酶家族(protein arginine methyltransferase,PRMTs)催化精氨酸残基甲基化,参与许多重要的细胞过程,包括DNA修复、RNA加工、转录调控和信号转导.此外,PRMTs还是内源性一氧化氮合酶抑制物非对称性二甲基精氨酸(asymmetric dimethylarginine,ADMA)的重要来源.大量研究证实,PRMTs与心血管疾病、呼吸系统疾病、肿瘤、病毒感染、自身免疫性疾病密切相关.
关键词： 蛋白质精氨酸甲基转移酶 精氨酸甲基化 非对称性二甲基精氨酸 一氧化氮 -
p38MAPK在非对称性二甲基精氨酸所致内皮细胞骨架改变过程中的作用
目的:探讨非对称性二甲基精氨酸(asymmetric dimethylargine,ADMA)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)的细胞骨架改变的影响及p38丝裂原激活蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38MAPK)在该过程中的作用.方法:体外进行HUVEC培养,实验分为正常对照组、SB203580组、ADMA组(量效关系组、时效关系组)及SB203580+ADMA组(SB203580+ADMA量效关系组及SB203580+ADMA时效关系组).对各组细胞进行免疫荧光染色,利用激光扫描共聚焦显微镜观察肌动蛋白(F-actin)形态变化,图像分析软件行F-actin荧光灰度值分析,流式细胞仪行F-actin荧光定量分析.结果:ADMA可诱导HUVECs应力纤维形成,导致F-actin荧光灰度值、荧光定量增加;而SB203580可抑制ADMA的作用.结论:ADMA可呈时间及浓度依赖性地导致细胞骨架改变.p38MAPK特异性抑制剂SB203580可抑制ADMA对内皮细胞骨架的改变,提示p38MAPK参与了ADMA所导致的HUVECs内皮细胞的骨架改变.
关键词： 非对称性二甲基精氨酸 肌动蛋白 p38丝裂原激活蛋白激酶 细胞骨架 -
Apelin-13对ADMA所致内皮细胞骨架损害的影响
目的:探讨Apelin-13对非对称性二甲基精氨酸(asymmetrical dimethyl arginine,ADMA)所致的人脐静脉内皮细胞(human umbilical endothelial cell,HUVEC)细胞骨架损害是否有保护作用及其可能的机制.方法:体外培养HUVEC,根据培养液中加入不同的药物分为正常对照组、ADMA 100 μmol/L组、Apelin-13 10-6 mol/L组、Apelin-13 10-7 mol/L组、Apelin-13 10-8 mol/L组、ADMA(100μmol/L)十Apelin-13( 10-6mol/L)组、ADMA( 100μmol/L)+ Apelin-13( 10-7 mol/L)组和ADMA( 100 μmol/L)+ Apelin-13( 10-8 mol/L)组,孵育24h后,测量细胞骨架成分肌动蛋白(F-actin)、黏着斑蛋白(vinculin)含量,并测定细胞上清液一氧化氮(nitric oxide,NO)的含量.结果:1)ADMA 100 μmol/L单独作用可诱导人脐静脉内皮细胞F-actin和vinculin形成,细胞上清液的NO含量显著减少(P＜0.01).2)联合给予Apelin-13可以减少ADMA诱导的F-actin和vinculin的增加,增加细胞上清液中的NO含量(P＜0.01).3)相关性分析显示上清液中的NO含量分别与F-actin和vinculin含量呈负相关(r=-0.809,p＜0.05；r=-0.781,P＜0.05).结论:Apelin-13能够减弱ADMA诱导的人脐静脉内皮细胞骨架损害,这一作用可能与NO生成增加有关.
关键词： Apelin-13 非对称性二甲基精氨酸 人脐静脉内皮细胞 细胞骨架 一氧化氮 -
一氧化氮合酶抑制物在胃黏膜损伤中的作用与机制
目的:研究一氧化氮合酶抑制物非对称性二甲基精氨酸(ADMA)在不同因素诱发的胃黏膜损伤中的作用,并初步探讨其机制.方法:用乙醇、吲哚美辛、应激诱发大鼠胃黏膜损伤模型,检测胃黏膜溃疡指数(UI),一氧化氮(NO)和ADMA水平,以及二甲基精氨酸-二甲胺水解酶(DDAH)的活性;检测幽门螺旋杆菌(Hp)处理胃黏膜上皮细胞(GES-1)细胞培养液中NO,ADMA和TNF-α水平,以及细胞中DDAH活性.结果:乙醇、吲哚美辛、应激诱发大鼠胃黏膜损伤的同时ADMA水平显著升高以及DDAH活性下降;Hp处理GES-1细胞24 h后,ADMA和TNF-α水平显著升高,DDAH活性下降;外源性ADMA也能显著升高GES-1细胞TNF-α水平.结论:ADMA是促进胃黏膜损伤的重要因子,除抑制NO生成外,还具有直接致炎作用.
关键词： 胃黏膜损伤 一氧化氮 非对称性二甲基精氨酸 -
围产期高盐饮食对雄性子代大鼠肠系膜动脉DDAH2/ADMA/eNOS/NO通路的影响
目的 探讨围产期高盐饮食对雄性子代大鼠肠系膜动脉二甲基精氨酸二甲胺水解酶2 (DDAH2)/非对称性二甲基精氨酸(ADMA)/内皮型一氧化氮合酶(eNOS)/一氧化氮(NO)通路的影响.方法 实验大鼠分为2组:正常饮食(NSD)组和高盐饮食(HSD)组,分别在围产期以普通饲料(含1％ NaC1)和高盐饲料(含8％NaCl)喂养,分娩后雄性子鼠继续相同饲料喂养至16周.测量子鼠血压,检测肠系膜动脉内皮依赖性舒张功能,检测血浆和肠系膜动脉NO含量、eNOS活性、ADMA含量,检测肠系膜动脉DDAH2活性及DDAH1和DDAH2蛋白质表达水平.结果 16周时,HSD组收缩压显著高于NSD组(P＜0.01).HSD组大鼠肠系膜血管张力低于NSD组(P＜0.01);用ADMA孵育血管环后,NSD组血管张力显著减弱,而HSD组未见显著性变化.与NSD组比较,HSD组血浆NO含量降低(P＜0.05),eNOS活性降低(P＜0.01),ADMA含量增加(P＜0.05);HSD组肠系膜动脉NO含量下降(P＜0.01),eNOS活性下降(P＜0.01),ADMA含量升高(P＜0.05).HSD组DDAH2活性降低(P＜0.01),DDAH2蛋白质表达显著降低(P＜0.01);DDAH1蛋白质表达未见显著改变.HSD组肠系膜动脉指标相关性分析:eNOS活性与NO含量呈正相关,ADMA含量与eNOS活性呈负相关,DDAH2活性、DDAH2蛋白质表达与ADMA含量呈负相关.结论 母体围产期高盐饮食导致其雄性子代收缩压增高,肠系膜动脉内皮依赖性舒张功能障碍,此与肠系膜动脉DDAH2表达下降、活性降低和DDAH2/ADMA/eNOS/NO通路障碍有关.
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阿司匹林抗高糖诱导的内皮细胞衰老过程中对DDAH-ADMA系统及Caveolin-1蛋白的影响
目的 观察阿司匹对高糖诱导的内皮细胞衰老模型二甲基精氨酸二甲胺水解酶(DDAH)-非对称性二甲基精氨酸(ADMA)系统和Caveolin-1蛋白表达的影响,探讨阿司匹林抗高糖诱导内皮细胞衰老的机制.方法 人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分别培养于正常糖浓度培养液(5.5 mmol/L)、高糖培养液(33 mmol/L)、高糖+阿司匹林(0.01～1 mmol/L)培养液以及含L-NAME(300μmol/L)培养液,48 h后采用β-半乳糖苷酶(β-gal)染色鉴定衰老细胞,流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)水平,Western blot分析Caveolin-1蛋白表达,液质联用仪检测细胞上清液中ADMA的含量并计算DDAH的活性.结果 高糖作用内皮细胞48 h后,细胞β-gal染色阳性细胞数明显增多,ROS、ADMA水平以及Caveolin-1蛋白表达升高,DDAH活性降低.0.01～1 mmol/L阿司匹林剂量依赖性地降低β-gal染色阳性细胞数、ROS和ADMA水平以及Caveolin-1蛋白表达,同时升高细胞DDAH活性(P均＜0.05).L-NAME(NOS的抑制剂)能完全抑制阿司匹林的上述作用(P＜0.05).结论 高糖环境下阿司匹林(0.01～1mmol/L)能抑制Caveolin-1表达,改善DDAH-ADMA系统的活性而进一步发挥抗氧化损伤、抗细胞衰老的作用.
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肾素(前体)受体在高糖诱发的内皮细胞舒缩功能障碍中的作用及机制
目的 探讨高糖对内皮细胞舒缩功能障碍等损害过程中是否有肾素(前体)受体((P)RR)的过度激活,并探讨其机制.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞,分别以不同浓度的葡萄糖(15、30 mmol/L)干预细胞24h、48 h后收取细胞,用分子生物学方法测定(P) RR以及反映血管舒缩功能的生物标记物蛋白和mRNA的表达,以siRNA的方法抑制(P)RR的表达后,观察葡萄糖对内皮细胞上述作用的改变,进一步分析其机制.结果 高糖显著上调内皮细胞(P)RR的蛋白和mRNA表达;同时上调内皮素1(ET-1)的表达,抑制一氧化氮(NO)的合成.(P)RR-siRNA虽能抑制高糖引起的ET-1 mRNA表达增高,但不抑制其蛋白表达.(P) RR-siRNA显著抑制高糖引起的NO降低.高糖抑制内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的表达,增加非对称性二甲基精氨酸(ADMA)的合成,(P) RR-siRNA能显著抑制高糖对eNOS和ADMA的影响.结论 高糖能够激活内皮细胞(P)RR的表达;(P)RR可能通过ADMA/eNOS通路介导了高糖诱发的血管内皮舒缩功能障碍.
关键词： 肾素(前体)受体 高糖 内皮细胞 内皮型一氧化氮合酶 非对称性二甲基精氨酸
