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淫羊藿总黄酮对丝裂霉素致小鼠骨髓细胞突变的保护作用
淫羊藿总黄酮(totall flavonoids of herba epimedii,TFE)是从小檗科淫羊藿(Epimedium brevicornum Maxim)茎叶中提取出来的主要有效成分,现代医学研究表明,TFE具有增加脑血流量和冠脉流量、抗心肌缺血、抗炎、抗肿瘤、抗衰老、调节骨代谢和增强机体免疫力等药理作用,目前已在冠心病、白血病和骨质疏松症等疾病的治疗中显示出良好的应用前景[1-5].
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正交设计法优选腰腿痛冲剂的提取工艺
目的：采用正交设计法优选腰腿痛冲剂的提取工艺。方法：本实验以淫羊藿总黄酮提取转移率为考察指标，采用正交试验L9(34)对腰腿痛冲剂的提取工艺进行优选。结果：提取佳工艺为处方药材加7倍量水，提取2次，2 h/次。结论：通过制备工艺的优选，保证了腰腿痛冲剂的制剂质量。
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淫羊藿总黄酮延缓衰老的研究
目的:淫羊藿总黄酮(EF)延缓人胚肺二倍体成纤维细胞衰老及神经内分泌、免疫衰老的机制.方法:采用含EF的血清对人二倍体成纤维细胞2BS细胞株进行处理,观察2BS细胞寿命;采用荧光实时定量PCR法检测p16基因mRNA的表达;ELISA法检测细胞总视网膜母细胞瘤蛋白(Rb)和磷酸化Rb蛋白的含量;TRAP-Hyb单管一步法检测细胞端粒酶活性;端粒限制性片段(TRF)Southern blot法检测2BS细胞端粒长度变化.采用基因芯片技术,检测下丘脑、垂体、肾上腺、脾脏淋巴细胞的基因表达谱.结果:EF能够延长2BS细胞的传代寿命;下调2BS细胞p16基因mRNA的表达;增加磷酸化Rb蛋白的含量;延缓衰老细胞端粒长度的缩短,并未激活细胞端粒酶活性;EF上调HPAT轴多种神经递质、激素、细胞因子或其受体表达.结论:淫羊藿总黄酮通过抑制p16基因表达,促进磷酸化Rb蛋白的产生,从而延缓衰老细胞端粒长度的缩短,发挥延缓细胞衰老的作用.EF能上调神经递质受体的表达并通过NEI网络的下行通路激活神经内分泌和免疫系统;通过下调促凋亡、抗增殖基因,上调抗凋亡、促增殖基因的表达,重塑淋巴细胞基因表达的平衡,延缓免疫衰老.
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淫羊藿总黄酮与己烯雌酚合用对去卵巢大鼠子宫和骨的影响
目的:观察淫羊藿总黄酮(epimedium pubescens flavonoids,EF)能否抑制己烯雌酚(diethylstibestrol,DES)刺激子宫不良反应,及对DES抗骨质疏松作用的影响.方法:50只4个月龄SD雌性大鼠随机分为5组:假手术组(Sham组);去卵巢组(OVX组);己烯雌酚组(DES组);淫羊藿总黄酮组(EF组);联合用药组(EF+DES组).实验12周,通过测量子宫内膜厚度及子宫湿重分析用药对子宫的刺激作用,测量骨小梁面积百分率(%Tb.Ar)、荧光周长百分数(%L.Pm)及破骨细胞数量(Oc.N)反映骨量、骨形成及骨吸收的变化.结果:DES组与OVX组比,子宫湿重及内膜厚度都显著增加,%Tb.Ar增加,%L.Pm、Oc.N减少;EF组与OVX组比,子宫湿重及内膜厚度、%Tb.Ar、Oc.N均无显著性差异;EF+DES与DES组比,内膜厚度显著降低,%Tb.Ar增加;与假手术组比各参数无显著性差异.结论:淫羊藿总黄酮可有效抑制己烯雌酚对子宫内膜刺激作用并增强其防治骨质疏松作用.
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淫羊藿总黄酮对去势大鼠骨折原始骨痂发生的影响及其机制
目的:探讨淫羊藿总黄酮对去势大鼠骨质疏松性骨折愈合中骨痂形成的影响.方法:选取40只6~8周龄,体重209~246 g的雌性SD大鼠,采用钢锯截断加克氏针髓内固定法,建立去势大鼠股骨中段骨质疏松性骨折模型.按随机数字表法随机分为淫羊藿总黄酮组和对照组,每组20只.淫羊藿总黄酮组给予淫羊藿总黄酮150 mg·kg-1·d-1,对照组给予等量生理盐水口服.在干预6周后,使用双能X线骨密度仪检测股骨BMD,使用Micro CT系统测量骨痂的骨体积、骨体积分数、骨小梁厚度、骨小梁数量及骨小梁分离度等参数.采用HE染色技术观察两组骨痂愈合进程中的骨痂组织形态学差异,采用免疫组织化学染色技术检测骨痂处酪蛋白激酶2相互作用蛋白1(casein kinase 2 in-teracting protein 1,CKIP 1)的表达量.采用RT PCR技术检测两组骨痂样本中骨特异性转录因子2(runt related tran-scription factor 2,Runx2)表达量,采用3点弯曲力学方法测量骨痂处大载荷值.结果:干预6周后,淫羊藿总黄酮组骨密度为(129.4±3.1)mg/cm2,与对照组的(117.3±3.3)mg/cm2比较差异有统计学意义(t=-4.6288,P<0.001);Micro CT扫描结果显示,淫羊藿总黄酮组和对照组在骨痂骨小梁数量、骨痂体积、骨痂体积/总体积、骨小梁分离度和骨小梁厚度方面比较差异有统计学意义(P<0.05).200倍和400倍光镜下骨痂HE染色切片,见骨小梁微结构参数与骨痂Micro CT扫描结果趋势一致,同时发现淫羊藿总黄酮组软骨细胞骨化水平明显高于对照组.骨痂中Runx2因子RT PCR检测结果显示,两组的Runx2 mRNA相对表达量差异有统计学意义(P<0.001).400倍镜下观察骨痂中CKIP 1蛋白免疫组化检测结果显示,淫羊藿总黄酮组和对照组CKIP-1蛋白阳性表达数分别为9.30±1.16,40.50±1.08,差异有统计学意义(t=-62.26,P<0.001).骨痂生物力学结果显示,淫羊藿总黄酮组和对照组大载荷分别为(98.37±9.64)、(68.45±6.07)N,差异有统计学意义(t=6.4334,P<0.001).结论:淫羊藿总黄酮可以促进去势大鼠骨质疏松性骨折愈合过程中成骨细胞骨形成能力和软骨骨化能力,促进原始骨痂的形成,增强骨折愈合强度,而其促进骨愈合和增强骨折愈合强度可能是通过调节CKIP-1蛋白来实现的.
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淫羊藿总黄酮的长期毒性研究
目的:考察淫羊藿总黄酮的长期毒性.方法:Wistar大鼠灌胃(ig)淫羊藿总黄酮1.0,2.0和4.0 g.kg-1,1次.d-1,连续12周,逐日观察动物行为、外观及大小便,每2周测食物消耗量1次,每周及停药后2周称体重1次,给药12周后和停药2周后各查每组10只大鼠血液学指标、血生化指标,并测脏器系数,同时对主要脏器进行病理学检查.结果:所查各项指标与对照组比较均无明显异常.结论:淫羊藿总黄酮无明显的长期毒性.
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卡波姆对淫羊藿总黄酮酶解效果的影响
目的:考察生物黏附剂卡波姆对淫羊藿总黄酮酶解效果的影响.方法:将淫羊藿总黄酮与卡波姆混合,加入蜗牛酶酶解,采用HPLC测定酶解液中朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C和淫羊藿苷等主要黄酮成分及箭藿苷A、箭藿苷B、鼠李糖基淫羊藿次苷Ⅱ、宝藿苷Ⅰ和淫羊藿苷元等主要酶解产物的含量变化,并与未加入卡波姆时淫羊藿总黄酮的酶解过程比较.结果:在37℃,含1％卡波姆的缓冲溶液中,淫羊藿总黄酮中朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C和淫羊藿苷的酶解速率变慢,约需4h才能完全酶解转化成次级苷,所需时间为无卡波姆时的2倍;酶解液中宝藿苷Ⅰ质量浓度始终高于未加卡波姆时的,高量48.43 mg·L-,6h时趋于稳定时12.99 mg·L-1,高量和稳定量分别为未加卡波姆酶解时的2.2,7.2倍;2～6 h内箭藿苷A和鼠李糖基淫羊藿次苷Ⅱ质量浓度都略高于未加卡波姆时的;之后次级苷被继续水解生成苷元,且苷元生成速率基本相同,约7.60mg·L-1·h-1.结论:卡波姆会减缓淫羊藿总黄酮的酶解速率,促进次级苷的生成,对苷元的生成基本无影响.
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淫羊藿总黄酮及淫羊藿苷的心血管保护作用及机制研究进展
淫羊藿总黄酮是淫羊藿主要活性成分,而淫羊藿苷是淫羊藿总黄酮中的重要活性物质之一,具有抗炎、抗肿瘤、抗骨质疏松、保护心脑血管等广泛的药理作用.本文通过系统查阅中国知网、PubMed、SpringerLink等国内外文献数据库,收集淫羊藿总黄酮及淫羊藿苷对心血管保护作用方面的文献,获取第一手资料,并对其进行分析和归纳整理.发现淫羊藿总黄酮及淫羊藿苷保护心血管作用涉及抗动脉粥样硬化、抗高血压、对血流动力学及血液流变学影响、抗心肌缺血、抗心力衰竭等方面的作用,在细胞因子、细胞内信号通路层面对其作用机制也进行了不同深度的研究.本文内容详实可靠,为以淫羊藿总黄酮及淫羊藿苷为主要药效成分的新药研究提供文献资料,具有重要的理论价值和现实意义.
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淫羊藿活性成分促进骨细胞增殖分化研究进展
近年来以股骨头坏死为代表的各类骨伤疾病发病率呈逐年上升趋势,淫羊藿作为常用的补肾强骨中药被广泛应用于中医骨科临床并对治疗各种骨伤疾病取得了显著疗效.但淫羊藿中何种成分行使功能,是临床用药及相关药品研发亟需解决的关键问题.近年来研究发现,淫羊藿中的淫羊藿苷、淫羊藿次苷、淫羊藿总黄酮、淫羊藿多糖以及一些微量元素均具有促进骨细胞增殖分化作用,其中淫羊藿苷、淫羊藿次苷、淫羊藿总黄酮在分子学领域的药理机制研究取得了巨大进展,大量实验研究表明,上述成分可以通过控制骨细胞相关基因的表达、调节信号通路促进骨形成蛋白2(BMP2)以及骨保护素(OPG)蛋白的合成,在细胞因子水平解释了淫羊藿促进骨细胞增殖分化的内在机制,对于淫羊藿中含有的淫羊藿多糖及微量元素促进骨细胞增殖分化作用,研究学者只进行了验证实验,其深层次的作用机制有待进一步探究.本文以淫羊藿中主要活性成分淫羊藿苷、淫羊藿次苷、淫羊藿总黄酮、淫羊藿多糖以及一些微量元素为依据,综述各成分促进骨细胞增殖及分化作用研究进展,以期为新药研发和提高临床疗效提供一定理论参考.
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淫羊藿总黄酮对去势大鼠骨密度的影响
目的:探讨淫羊藿总黄酮(TFE)对去势大鼠骨密度的影响及其机制.方法:采用卵巢切除的方法建立大鼠骨质疏松模型,将大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,TFE低、中、高剂量组,β-雌二醇组6组,每组10只,分别予相应药物灌胃90d.采用双能X线骨密度仪检测TFE对去势大鼠骨密度的影响、MTT法分析TFE含药血清对体外培养的成骨细胞(OB)增殖的影响.结果:与正常对照组相比,模型对照组各项骨密度均降低且有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01)；与模型对照组相比,各给药组骨密度均上升,除TFE低、中、高剂量组的全身骨密度,TFE低剂量组的腰椎、颅骨骨密度外,股骨、第2腰椎及第2腰椎椎体骨密度均具有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01)；2.5％和5％TFE含药血清可刺激OB增殖.结论:TFE可提高去势大鼠的骨密度,其机制可能是刺激OB的增殖.
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淫羊藿总黄酮对去势大鼠骨组织BMP-2和OPG mRNA表达的影响
目的:研究淫羊藿总黄酮(TFE)对去势大鼠骨组织BMP-2和OPG mRNA表达的影响,进一步揭示淫羊藿“补肾壮阳,益精健骨”的作用机制.方法:采用卵巢切除的方法建立大鼠骨质疏松模型,将大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,TFE低、中、高剂量组,β-雌二醇组6组,每组10只,分别予相应药物灌胃90d,处死后取胫骨,用剪子剪下约1cm3,放入预冷的研钵中,加入液氮后将其研磨成粉末状提取总RNA,鉴定后采用琼脂糖凝胶电泳对扩增产物进行检测,研究它们对BMP-2和OPG mRNA表达的影响.结果:与模型对照组相比,TFE低、中、高剂量组BMP-2和OPG mRNA表达显著升高(P＜0.05,P＜0.01).结论:淫羊藿总黄酮通过灌胃后能上调去势大鼠BMP-2和OPG mRNA的表达,说明淫羊藿总黄酮代谢产物具有促进骨形成活性.
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淫羊藿黄酮类化合物对骨及软骨细胞作用研究进展
淫羊藿是一种补肾壮骨中药,广泛应用于骨科临床,其中主要有效成分为黄酮类化合物,包括淫羊藿总黄酮、淫羊藿苷和淫羊藿次苷等,具有促进成骨细胞分化、抑制破骨细胞分化与生成、促进软骨细胞生成等作用.故对近年来淫羊藿黄酮类化合物对骨及软骨细胞作用的实验研究作一综述,为其应用于临床提供理论依据.
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骨碎补、淫羊藿、菟丝子总黄酮对成骨细胞体外培养影响的比较研究
目的骨碎补总黄酮、淫羊藿总黄酮及菟丝子总黄酮对成骨细胞体外培养影响的比较研究.方法UMA-1 06-01成骨细胞株进行成骨细胞培养,观察ALP活性和3H-TdR掺入的情况.结果24 h培养液中骨碎补总黄酮ALP活性高于对照组,P＜0.05;细胞内骨碎补总黄酮、淫羊藿总黄酮ALP活性显著增加,与对照组比较,P＜0.05或P＜0.001.48 h培养液中骨碎补总黄酮、淫羊藿总黄酮、菟丝子总黄酮ALP活性高于对照组,P＜0.05或P＜0.001;细胞内骨碎补总黄酮、淫羊藿总黄酮、菟丝子总黄酮ALP活性显著增加,与对照组比较,P＜0.001.骨碎补总黄酮、淫羊藿总黄酮24 h3H计数显著高于对照组,P＜0.001.结论3种中药总黄酮对成骨细胞活性的促进作用,以骨碎补总黄酮为广泛,淫羊藿总黄酮次之,菟丝子总黄酮差.
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衰老大鼠淋巴细胞磷酸化p65,IκBα,IκBε表达特点及淫羊藿总黄酮的干预研究
目的:研究衰老状态下脾淋巴细胞磷酸化p65,IκBα,IκBε的表达特点,并探讨淫羊藿总黄酮(EF)的干预作用.方法:将SD大鼠随机分为4月龄(4 m)、27月龄(27 m)、27 m+EF组,其中检测IκBε,IκBα时,对27 m及27 m+EF组均用NF-κB信号通路抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC),进行NF-κB阻断(即27 m PDTC及27m PDTC+EF组).以SD大鼠脾脏分离的淋巴细胞为研究对象,采用Weatern-blot方法,分别比较检测各组淋巴细胞磷酸化p65,IκBε,IκBα的差异表达.结果:衰老状态下,RelA(p65)、磷酸化p65,IκBα,IκBε的表达与青年组对比,均明显降低,对27 m组进行PDTC阻断后则愈加明显.而加用EF干预后,老年各组的以上指标表达均可明显上调.结论:衰老大鼠淋巴细胞中p65,IκBα,IκBε磷酸化蛋白表达明显不足,EF能够显著上调衰老状态下以上蛋白的表达.
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淫羊藿总黄酮对大鼠心肌急性缺血再灌注损伤氧化应激干预机制的研究
观察淫羊藿总黄酮(total flavones of Epimedium,TFE)对大鼠心肌急性缺血再灌注损伤氧化应激干预作用及其机制.40只雄性大鼠随机分为假手术组,模型组,地尔硫卓组(阳性对照药)以及淫羊藿总黄酮高、低剂量组,每组8只.淫羊藿总黄酮分别以200,100 mg·kg-1的剂量连续灌胃给药4d后,结扎冠状动脉前降支40 min再灌注4h建立大鼠急性心肌缺血再灌注损伤模型.采用N-BT染色法测定心肌梗死范围,比色法检测心肌组织中SOD和T-AOC活性及MDA含量,ELISA法测定血清TnI水平,同时光镜下观察心肌组织结构的变化,分别应用免疫组化和Western blot法观察心肌组织中SIRT1与Nrf2表达的变化.结果发现,与模型组比较,淫羊藿总黄酮高、低剂量组以及地尔硫卓组能明显减少心肌梗死范围,降低血清TnI水平,提高心肌组织中SOD和T-AOC活性并降低MDA含量(P＜0.05或P＜0.01),改善缺血再灌注损伤后心肌的组织结构,同时淫羊藿总黄酮高、低剂量组中心肌组织SIRT1和Nrf2表达明显增加(P＜0.05或P＜0.01).由此可见,淫羊藿总黄酮能够通过提高机体SIRT1与Nrf2内源性抗氧化信号传导通路,增加心肌组织的抗过氧化能力,从而抑制心肌急性缺血再灌注过程中氧化应激反应导致的心肌细胞不可逆性伤害,维护心肌组织的正常功能.
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2种黔产淫羊藿总黄酮对免疫功能影响的比较研究
目的:比较2种黔产淫羊藿总黄酮(TFE)对CTX小鼠免疫功能的影响.方法:采用CTX造免疫低下小鼠模型,同时给药10d,以体重、脾重、脾指数,血清溶血素浓度,血清TNF-α及IL-2含量为指标,观察2种TFE增强免疫作用,并比较其差异.结果:单次ip CTX 80m9·kg(-1),使正常小鼠的脾指数、血清溶血素水平、IL-2和TNF-α含量明显下降;ig 2种TFE1.3,0.65g·kg(-1)10d,可使体重、脾重、睥指数上升(P<0.01),下降的溶血素值回升(P<0.01),以及下降的IL-2和TNF-α含量显著升高(P<0.01).结论:2种黔产淫羊藿TFE对CTX小鼠的非特异免疫和特异免疫功能都具有明显增强作用;但2种黔产淫羊藿茎叶TFE增强免疫作用差异不明显.提示TFE中除了淫羊藿苷(ICA)外,尚有其他增强免疫的有效成分.
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淫羊藿总黄酮的生物转化过程分析
该文旨在研究淫羊藿总黄酮在体外水解酶作用下的生物转化过程.主要采用蜗牛酶水解淫羊藿总黄酮,用HPLC测定总黄酮中主要黄酮的转化.数据结果显示已知主要黄酮成分淫羊藿苷,朝藿定A,朝藿定B,朝藿定C都在1～2h内分别完全转化为宝藿苷Ⅰ,箭藿苷A,箭藿苷B和鼠李糖基淫羊藿次苷Ⅱ,随着水解时间的延长,各转化产物被继续水解.因此可得出结论,蜗牛酶在37℃,pH 6.0的Hank's平衡盐溶液中,2h内能将淫羊藿主要总黄酮转化为次级苷或苷元,且其酶解产物与肠道代谢产物相一致.
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多孔淀粉作为淫羊藿总黄酮固体分散体载体的研究
评价多孔淀粉作为淫羊藿总黄酮固体分散体载体的特性.以多孔淀粉作为淫羊藿总黄酮固体分散体的载体,选取淫羊藿苷为指标成分,比较淫羊藿总黄酮固体分散体与原料药体外溶出度的差异,采用扫描电镜法、差示扫描量热法和X射线粉末衍射法对淫羊藿总黄酮固体分散体进行物相表征.扫描电镜下固体分散体呈不规则块状,未见淫羊藿总黄酮与多孔淀粉的粉末特征,差示扫描量热法和X射线粉末衍射法分析结果分别显示,固体分散体中淫羊藿总黄酮的特征吸热峰和特征结晶衍射峰均消失,提示淫羊藿总黄酮以无定形形式分散在固体分散体中.体外溶出试验结果表明,当淫羊藿总黄酮与多孔淀粉比例为1∶2时,即能显著增加淫羊藿苷的溶出速率.多孔淀粉作为中药固体分散体载体值得进一步研究.
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基于体内自组装胶束形成机制探究羊脂油炙淫羊藿对大鼠温肾助阳的增效作用
淫羊藿传统炮制方法为羊脂油炙,具有增强淫羊藿温肾助阳的作用.该文采用腹腔注射氢化可的松法建立大鼠肾阳虚模型,以大鼠体征,血清睾酮、皮质酮含量,组织病理学检查等为评价指标,研究在辅料羊脂油的作用下,淫羊藿总黄酮在体内自组装形成胶束后对肾阳虚大鼠的增效作用.肾阳虚大鼠灌胃淫羊藿总黄酮和总黄酮胶束后,2组大鼠与模型组相比,体征及各项生化指标趋于正常,下丘脑-垂体-肾上腺-胸腺轴功能紊乱得到有效改善.实验结果表明,淫羊藿总黄酮及其自组装胶束都具有温肾壮阳的作用,其中以炙淫羊藿增强效果为佳.证明在羊脂油作用下,淫羊藿总黄酮可在体内自组装形成胶束,改善下丘脑-垂体-肾上腺-胸腺轴及主要性腺组织睾丸的病理状况,发挥增强淫羊藿温肾助阳的功效,进一步揭示了淫羊藿炮制辅料羊脂油的增效机制.
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中药仙灵骨葆对绝经后骨质疏松症肠钙吸收障碍的影响
绝经后肠钙吸收障碍在绝经后骨质疏松症的发生和发展中有很重要的意义.雌激素替代疗法可改善绝经后的肠钙吸收障碍,但患者对长期雌激素疗法依从性较差.中草药尤其是含有类似雌激素结构的植物雌激素(例如以淫羊藿为主要成分的中药仙灵骨葆复方和淫羊藿总黄酮)显示出良好的提高肠钙吸收和改善骨密度的作用.中药对绝经后骨质疏松肠钙吸收的改善是防治骨质疏松的作用机制之一,但其对增加骨密度的程度多少仍需在绝经后骨质疏松患者中进一步验证.
