全反式维甲酸增强单纯疱疹病毒胸苷激酶基因对前列腺癌PC-3细胞旁观者效应的研究

目的 观察全反式维甲酸(ATRA)对单纯疱疹病毒胸苷激酶基因结合更昔洛韦(HSV-tk/GCV)旁观者效应的增强作用及与Cx43表达的关系.方法 用携带HSV-tk基因的腺病毒液感染人前列腺癌PC-3细胞,半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测HSV-tk基因整合情况,噻唑蓝(MTT)方法观察ATRA对前列腺癌PC-3,PC-3/TK+细胞旁观者效应,RT-PCR检测ATRA诱导Cx43 mRNA表达的作用.结果 ATRA显著提高PC-3/TK对GCV的敏感性.在100μmol/L更昔洛韦(GCV)作用下,以10-8 mmol/L ATRA与不加ATRA的作用比较,在PC-3,PC-3/TK不同比例混合的各组中,细胞的存活率明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).并观察到10-8mmol/LATRA对GCV旁观者效应的增强作用.RT-PCR结果表明,经ATRA处理的PC-3细胞,其Cx43 mRNA的相对拷贝数比值增高约10倍.结论 前列腺癌PC-3细胞中,10-6 mmol/L ATRA具有明显增强HSV-tk/GCV旁观者效应的作用.其主要机制是通过ATRA在转录水平诱导Cx43 mRNA表达上调,导致旁观者效应的增强

HSV-TK/GCV自杀基因系统治疗乳腺癌的研究

目的探讨HSV-TK/GCV自杀基因系统对小鼠乳腺癌细胞系MA782/5S-8102体外及体内杀伤作用及其产生的旁观者效应.方法采用脂质体转染法将GINaTK载体转入包装细胞PA317.取病毒上清液感染小鼠乳腺癌细胞MA782/5S-8102,得到带有HSV-TK基因的MA782/5S-8102/TK细胞,并将其分别用于体外和体内实验.结果载体HSV-TK导入了PA317细胞.体外实验结果显示,当MA782/5S-8102/TK细胞数占混合细胞10%时,低浓度(10μg/ml)的GCV就可将50%左右的肿瘤细胞杀死.体内实验结果显示GCV可明显抑制MA782/5S-8102/TK细胞在BALB/C小鼠体内的肿瘤形成.实验组肿瘤组织与对照组相比存在明显的病理学改变.结论逆转录病毒可介导HSV-TK基因转入小鼠乳腺癌细胞MA782/5S-8102并获稳定表达,HSV-TK/GCV自杀基因系统在体内外对乳腺癌细胞均有杀伤作用,且存在明显的旁观者效应.

tk基因治疗脑胶质瘤时的免疫反应与旁观者效应的关系

目的探讨tk基因(thymidine kinase gene)治疗脑胶质瘤时的免疫反应与旁观者效应的关系.方法将C6tk+与C6tk- 按0%tk+, 10%tk+, 30%tk+, 50%tk+, 100%tk+5种比例混合,接种于SD鼠右侧顶叶,7d后腹腔注射GCV(更昔洛韦),剂量为30mg/kg/d,共10d.细胞接种3周后,处死动物,计算成瘤率,作病理检查,并作CD4+、CD8+的免疫组化染色.结果 50%及100%C6tk+组的成瘤率明显小于其余3组(P<0.05),病理检查发现50%及100%tk+组有淋巴细胞及浆细胞浸润.免疫组化显示每一组之间均有差异,提示有免疫反应存在.结论 tk基因治疗脑胶质瘤时,可激起机体内的免疫反应,增强抗肿瘤作用,它是旁观者效应的作用机制之一.

HSV-tk基因/GCV系统治疗脑胶质瘤时的免疫反应

目的探讨tk基因治疗脑胶质瘤时的免疫反应与旁观者效应的关系.方法将C6tk+与C6tk-按0%tk+,10%tk+,30%tk+、50%tk+、100%tk+五种比例混合,接种于SD鼠右侧顶叶,7天后腹腔注射GCV(更昔洛韦),剂量为30 mg/kg/day,共10天.细胞接种3周后,处死动物,计算成瘤率,作病理检查,并作CD4+、CD8+的免疫组化染色.结果 50%及100%C6tk+组的在瘤率明显小于其余3组(P＜0.05),病理检查发现50%及100%tk+组有淋巴细胞及浆细胞浸润.免疫组化显示每一组之间均有差异,提示有免疫反应存在.结论 tk基因治疗脑胶质瘤时,可激起机体内的免疫反应,增强抗肿瘤作用,它是旁观者效应作用机制之一.

腺病毒介导的HSV-TK/GCV系统治疗腺样囊性癌的体外实验研究

目的体外观察腺病毒载体介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因及羟基无环鸟苷系统(ADV-HSV-Tk/GCV)对人腺样囊性癌细胞(ACC-2及ACC-M )的杀伤作用.方法分别将人腺样囊性癌细胞株(ACC-2及ACC-M )用腺病毒构建的绿色荧光蛋白按1∶10,1∶20,1∶30转染,在12～36 h内用荧光显微镜观察细胞的转染率.MTT法观察ADV-HSV-TK在不同感染复数(5～60)以及不同浓度GCV处理时对ACC-2及ACC-M的细胞杀伤作用以及“旁观者效应”.结果体外研究发现,ACC-2及ACC-M均能被腺病毒-绿色荧光蛋白转染.小感染复数为10～20,转染率与感染复数呈正相关.在感染复数为5,GCV浓度为25 μg/ml时,能够发挥细胞杀伤效应且出现剂量依赖性.MTT法检测发现经ADV-HSV-TK处理后,当GCV浓度为25 μg/ml或高于该浓度时ACC-2及ACC-M的细胞抑制率为40%-60%,而当GCV单独作用时则无此作用.转染ADV-HSV-TK的细胞与未转染细胞按不同比例混合提示“旁观者效应”的存在,且转染细胞的比例越高,被杀伤的细胞比例越大.结论腺病毒载体介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因及羟基无环鸟苷系统(ADV-HSV-TK/GCV)在体外能够有效抑制腺样囊性癌细胞,然而,其细胞杀伤效应及“旁观者效应”仍有待提高.

紫外线诱导的Molt-4细胞旁观者效应的研究

目的 探讨紫外线诱导的凋亡细胞是否具有旁观者效应.方法 将Molt-4细胞分为阴性对照组、DID对照组、空白对照组和细胞密度分别为2×105/ml和8×105/ml的两个实验组.每个实验组细胞被平分为两部分:一部分作为效应细胞,被标记示踪剂DID染料并予以UV照射40 s;另一部分作为旁观者细胞,不经任何特殊处理.细胞联合培养共24 h,每4 h收获1次.运用Annexin V-FITC/PI法检测旁观者细胞的细胞凋亡率,激光共聚焦显微镜检测旁观者细胞的形态学变化.结果 阴性对照组、DID对照组和空白对照组在0、4、8、12、16、20和24 h各个时间点细胞凋亡率均小于5%. 2×105/ml实验组旁观者细胞凋亡率在0～24 h分别为3.47%、4.58%、7.32%、10.41%、14.82%、19.37% 和25.66%. 8×105/ml实验组旁观者细胞凋亡率在相应时间点分别为3.76%、5.77%、10.17%、14.71%、18.92%、32.28%和38.90%.与对照组相比,实验组旁观者细胞凋亡率随时间的延长而明显升高,且旁观者细胞凋亡率随细胞密度增高而增加.对旁观者细胞进行激光共聚焦显微镜检测,发现一些经典的凋亡和坏死表现,如细胞染色体浓集、磷脂酰丝氨酸翻转、凋亡小体形成、细胞崩解等.结论 经紫外线照射的Molt-4细胞对旁观者细胞具有旁观者效应,且该效应与细胞密度相关.

DADS提高HSV-tk/GCV自杀基因系统对兔晶状体上皮细胞旁观者效应的机制

目的:探讨二烯丙基二硫化物(dialyl disulfide,DADS)提高重组腺相关病毒(recombinant adenoassociated virus,rAAV)介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶(herpes simplex virus kinase,HSV-tk)/丙氧鸟苷(ganciclovir,GCV)系统对兔晶状体上皮细胞旁观者效应的可能机制.方法:应用免疫组织化学方法检测正常兔晶状体上皮细胞间隙连接蛋白43(conRexin 43,Cx43)及转染HSV-tk基因的晶状体上皮细胞Cx43的表达,以及不同浓度的DADS诱导下的2种细胞的Cx43表达,MTT比色法检测细胞存活率.结果:兔晶状体上皮细胞Cx43及转染HSXV-tk基因的晶状体上皮细胞的Cx43经DADS诱导后表达阳性明显增强,尤其以50μmol/L DADS明显.MTT比色法检测显示DADS增强了HSV-tk/GCV自杀基因系统的旁观者效应.结论:DADS可以提高晶状体上皮细胞Cx43的表达,并可提高HSV-tk/GCV自杀基因系统对兔晶状体上皮细胞的旁观者效应.

旁观者效应在肝癌基因治疗中的作用

目的:观察HSV-tk/ACV(Herpes Simplex Virus thymidine kinase gene/Acyclovir)系统基因治疗恶性肿瘤过程中旁观者效应的作用.方法:HSV-tk基因重组逆转录病毒载体转染PA317细胞为PA317-tk细胞.培养PA317-tk细胞即可获得有感染力的携带HSV-tk基因的病毒颗粒,然后转染肝癌细胞株SMMC-7721细胞为SMMC-tk细胞.SMMC-TK细胞与SMMC-7721细胞以不同百分比混合,用ACV(100ug/ml)培养基培养,MTT法检测ACV对各组细胞抑制率(Inhibit Rate,IR),根据各组IR与该组SMMC-tk细胞数的百分比值(IR/SMMC-tk%,IR/St)的大小判断旁观者效应作用的有无和强弱.结果:旁观效应试验表明,含SMMC-tk细胞10%,20%,30%,40%,50%,60%,70%,80%,90%,100%各组IR/St比值分别为2.15,1.91,1.83,1.47,1.30,1.11,1.02,0.93,0.84,0.76.10%～70%各组IR/St比值均大于1,存在明显旁观者效应,以10%,20%,30%,40%组强,80%～100%三组IR/St比值小于1,旁观者效应不明显.结论:研究结果证实用HSV-tk/ACV系统基因治疗恶性肿瘤,适宜比例TK+细胞时,存在明显的旁观者效应,TK/细胞为10%时旁观者效应强,这对于HSV-TK/ACV系统基因治疗恶性肿瘤具有重要意义.

转自杀基因CD的LoVo细胞死亡机制的研究

目的研究转染逆转录病毒载体(G1CEACDNa)的肠癌细胞LoVo株的死亡机制.方法脂质体法转染G1CEACDNa至LoVo细胞.TRIzol试剂提取总RNA,行RT-PCR间接验证CD基因的表达情况.用含1mmol·L-115-FC的1640培养基培养细胞,MTT法测细胞生长曲线和旁观者效应;透射电镜观察细胞的超微结构;流式细胞仪annexin Ⅴ和PI双重染色行凋亡相关检查.结果RT-PCR产物电泳显示在1.5kb处可见相应的显影条带.MTT比色实验示1mmol·L-15-FC作用下CD+LoVo细胞48h开始生长抑制,72h、96h、120h抑制率分别约为30%、50%、80%.电镜下可见凋亡的早、中、晚期细胞及凋亡小体,同时可见部分细胞呈坏死改变.流式细胞仪显示48h开始有少量细胞出现凋亡,72h、96h细胞群凋亡和坏死的比例分别为23.8%、35.1%和20.4%、26.0%.结论转染G1CEACDNa的LoVo细胞给予5-FC治疗,其细胞死亡机制为坏死和凋亡并存,凋亡相关过程的诱导可能是该治疗过程中旁观者效应的重要机制.

病毒导向酶联药物前体5-FC疗法对前列腺癌的抑制作用研究

前列腺癌是男性常见肿瘤之一,在我国的发病率及死亡率也有逐年增加及年轻化的趋势,一旦诊断明确已失去手术治疗机会.传统的化疗易使肿瘤细胞产生药物毒性作用及耐受性,而CD(cytosine deaminase)/5FC自杀基因疗法恰可弥补上述不足.CD基因存在于细菌中,其编码产物CD可催化无毒性的5-氟胞嘧啶(5FC)脱氢变为有毒性的5-氟尿嘧啶,可在实体瘤或全身使用,降低化疗的毒性作用,提高敏感性.目的和方法:采用腺病毒作为载体,将CD基因导入后,观察其对前列腺癌细胞系的敏感性、感染率、旁观者效应、在体内表达的时间及对荷瘤动物的疗效.结果:伴有CD基因的腺病毒载体在不同时间不同浓度感染前列腺癌细胞系Du-145、LNCap(人)和Rm-1(小鼠)随着培养时间的延长和病毒浓度的增加,可至100%感染,且对5FC没有毒性作用,伴有CD基因的病毒载体的LNCap细胞的表达高峰在第5 d,Du-145在第3 d,而Rm-1在第1 d,但在细胞内均可维持11 d.用少量的已感染CD基因的腺病毒载体可使大部分细胞死亡,其中LNCap和Rm-1细胞仅需5%的已感染细胞就可使100%的肿瘤细胞死亡,而Du-145则需50%的已感染细胞才能使肿瘤细胞100%死亡.动物实验也证实用已感染CD基因的Rm-1细胞接种C57BL/6小鼠,并分别在接种前24 h、接种同时或接种后48 h给予5FC,结果在对照组小鼠100%产生肿瘤,存活时间为12～23 d,在接种前给药的小鼠发病率为3/5,发病小鼠的存活时间为24～37 d之间,即使接种后48 h给药,虽然发病率100%,但存活时间也延长至21～30 d.结论:以上结果给CD/5FC方案治疗前列腺癌提供了实验依据.

腺病毒介导的CD-TK融合基因联合GCV和/或5-Fc对人膀胱癌细胞的杀伤作用

目的:研究腺病毒介导的CD-TK融合基因联合前体药物对人膀胱癌细胞的杀伤作用.方法:利用含有CD-TK融合基因及绿色荧光蛋白(GFP)基因的复制缺陷腺病毒转染人膀胱癌细胞株T-24细胞,GFP表达可作为转染是否成功的间接标志,PCR扩增后琼脂糖凝胶电泳检测转染后细胞CD及TK基因序列的表达情况.用丙氧鸟苷(GCV)和/或5氟胞嘧啶(5-Fc),作为前体药物,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测其对转染后T-24细胞的杀伤作用及旁观者效应.结果:腺病毒在体外能高效转染T-24细胞,72h转染效率可接近100%.GCV和/或5-Fc均能有效杀伤转染后膀胱癌细胞,给予相同浓度前体药物时,联合用药组显示出较强的肿瘤杀伤作用.0.5mg/ml GCV、0.1mg/ml 5-Fc和GCV+5-Fc作用于转染后T-24细胞72 h细胞生存率分别为23.30%、20.63%、10.10%.旁观者效应杀伤实验表明5-Fc组较GCV旁观者效应明显,而联合用药组显示出更强的旁观者效应.利用Hoechst-PI双染色法检测经前体药物作用后转染细胞,各组均可见凋亡细胞,但联合用药组凋亡细胞较单一用药组多.结论:CD-TK融合基因联合应用GCV和/或5-Fc能有效杀伤膀胱肿瘤细胞,并存在较强的旁观者效应,其杀伤机制可能与凋亡相关,为适用于人膀胱癌的治疗提供一条新思路.

双自杀基因HSV-tk/CD对胆管癌体内体外旁观者效应的研究

目的研究双自杀基因HSV-tk/CD的体内外旁观者效应.方法在体外将tk/CD阳性的胆管癌QBC939细胞与亲本细胞按不同的比例混合,并与单自杀基因组对照,观察给予前体药物后对混合细胞的生长抑制情况.建立荷瘤裸鼠模型,在瘤体内注入不同数量的tk/CD阳性胆管癌细胞,观察给予前药后的旁观者效应.结果融合基因组在体外产生明显强于单基因组的BSE,tk组的BSE出现较晚,阳性细胞的比例需达到40%,而CD组和融合基因组中,阳性细胞仅占20%时,就可观察到明显的BSE.体内实验也观察到BSE,强度与注入阳性细胞数有关(P＜0.05);本研究没有观察到"远处旁观者效应".结论腺病毒介导的双自杀基因HSV-tk/CD在体外和体内均可产生旁观者效应.

"旁观者效应"有效治疗癌症

重组腺病毒介导的KDR-CDglyTK基因靶向杀伤胃癌细胞的体外实验研究

目的 探讨腺病毒介导KDR启动子驱动的双自杀基因体系对人胃癌细胞SCG7901靶向杀伤作用以及是否存在旁观者效应.方法 用MOI=100时,将携带融合基因重组腺病毒Ad-KDR-CDglyTK及Ad-CMV-CDglyTK体外感染SCG7901、ECV304和HepG2细胞,检测细胞的感染效率以及转基因肿瘤细胞在mRNA水平上融合基因的表达;在前药5-氟胞嘧啶(5-FC)和/或更昔洛韦分别按不同浓度、不同作用时间和方式下,观察双自杀基因体系对SCG7901细胞的靶向杀伤作用和旁观者效应.结果 携带双自杀基因(CDglyTK)和报告基因(GFP)的重组腺病毒载体,感染复数为100时,95%以上的受感染SCG7901、HepG2和ECV304细胞中有GFP表达.感染腺病毒Ad-CMV-CDglyTK的各细胞以及感染腺病毒Ad-KDR-CDglyTK的SCG7901及ECV304细胞对单一前药具有较高的敏感性,细胞的存活率各随单一前药浓度的增加而递减;而感染腺病毒的Ad-KDR-CDglyTK的HepG2细胞对前药不敏感.感染腺病毒Ad-KDR-CDglyTK的SCG7901及ECV304细胞分别在同一浓度前药的作用下,细胞的存活率与时间存在依赖关系,而感染腺病毒Ad-KDR-CDglyTK的HepG2细胞不存在依赖关系.将感染腺病毒的细胞与未感染的细胞按不同比例混合培养,观察到该体系明显的旁观者效应,并随转基因细胞的比例增加逐渐递增.转基因SCG7901和同种细胞混合,在联合应用前药时,不同混合细胞比例下均出现药物协同作用.结论 Ad-KDR-CDglyTK双自杀基因可在体外靶向杀伤SCG7901、ECV304细胞并观察到在细胞中存在旁观者效应,联合应用前药可产生明显的协同作用.

脂质体介导的CD/5-FC自杀基因体系协同干扰素体内抑瘤及旁观者效应的观察

目的 观察阳离子脂质体介导的CD/5-FC自杀基因体系协同γ-干扰素活体内对肿瘤的抑制效应及远端旁观者效应.方法 采用阳离子脂质体介导CD基冈瞬时转染小鼠肝癌H22及未转染的H22细胞,分别接种于昆明小鼠双侧前腋下皮下;向小鼠体内注射5-FC及γ-干扰素,观察在γ-干扰素协同作用下5-FC对转染瘤体的抑制作用和远处无转染瘤体的抑制即远端旁观者效应.结果 5-FC对转染CD基因侧瘤体抑制明显,抑制率为79.39%(P＜0.05);在γ-干扰素的协同下CD/5-FC的抑瘤作用得到了增强,抑制率为93.47%,与无γ-干扰素协同相比,对癌细胞抑制作用明显增强(P＜0.05);存在远端旁观者效应,远端未转染瘤体的抑制率为54.42%(P＜0.05);在γ-干扰素的协同下远端旁观者效应得到显著增强,抑制率达到88.43%.同无γ-干扰素相比有差异有显著性(P＜0.05).结论 体内CD/5-FC自杀基因体系联合γ-干扰素对肝癌细胞有更好的抑制效应,对肝癌的治疗有很好的应用前景.

旁观者效应在HSV1-TK/GCV杀灭肺癌细胞A549中的作用

目的 研究旁观者效应在TK/GCV系统杀灭肿瘤细胞中的作用。方法 转TK基因肺癌细胞A549-TK与亲代细胞A549分别以不同比例、高低密度混合培养，加50 mmol/L GCV作用5 d，MTT法测活。结果 当细胞以高密度接种（104/孔），TK+细胞占20%就能观察到较对照细胞出现明显的生长抑制（P<0.05），而细胞以低密度接种（103/孔），TK+细胞占50%出现较对照细胞明显地生长抑制 （P<0.05）。结论 旁观者效应在TK/GCV系统杀灭瘤细胞中起重要作用，且这一效应与细胞间密切接触有关。

全反式维A酸增强双自杀基因系统对乳腺癌旁观者效应的观察

目的:观察全反式维A酸(ATRA)对腺病毒为载体的双自杀基因系统治疗乳腺癌旁观者效应的增强作用及与Cx43表达的关系.方法:MTT法观察ATRA对双自杀基因系统治疗乳腺癌旁观者效应的影响；RT-PCR和FCM法检测ATRA作用前后乳腺癌MCF-7细胞内连接蛋白Cx43基因和蛋白的表达情况.结果:以不同比例混合MCF-7和MCF-7/CDTK细胞在前药作用下细胞存活率ATRA组较对照组明显降低(P＜0.05).RT-PCR和FCM分析结果表明,经ATRA处理的MCF-7细胞,其Cx43基因和蛋白的表达明显提高.结论:乳腺癌MCF-7细胞中,ATRA具有明显增强CD/TK双自杀基因系统旁观者效应的作用,细胞内Cx43的表达增强可能是旁观者效应增强的机制之一.

去唾液酸糖蛋白-人端粒酶逆转录酶-胸苷激酶/丙氧鸟苷的靶向促HepG2细胞凋亡作用及旁观者效应

目的 观察去唾液酸糖蛋白(AF)-pGL3-人端粒酶逆转录酶(hTERT)-胸苷激酶(TK)对肝癌细胞株HepG2细胞生长及凋亡的影响.方法 培养细胞并构建pGL3-hTERT-TK质粒、AF脂质体复合物后,转染HepG2细胞和L02细胞,通过单光子液闪计数仪,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法和流式细胞仪观察自杀基因对肝癌细胞生长和凋亡的影响,以及其对自杀基因的旁观者效应.结果 在肝癌细胞HepG2中,TK基因可以被hTERT启动子驱动高效的表达,而不影响正常肝细胞L02的生长,AF通过识别去唾液酸糖蛋白受体结合到HepG2细胞表面,其携带的TK基因更易进入肝癌细胞,同时增强自杀基因TK的高效表达,在旁观者效应机制的参与下,肝癌细胞总的凋亡率达85%±3%,而正常肝细胞则仅为16%±2%.结论 AF-pGL3-hTERT-TK可以靶向攻击肝癌细胞,对正常肝细胞几乎无影响,其基因传递系统具备靶向治疗肝癌的潜力.

自杀基因引导的旁观者效应对鼠膀胱癌的作用

目的研究单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶(herpes simplex virus thymidine kinase, HSVtk)基因联合丙氧鸟苷(ganciclovir, GCV)治疗对膀胱癌的旁观者效应.方法用逆转录病毒载体HSVtk转染鼠源性膀胱癌细胞株T739,体外检测其对GCV的敏感性.将不同比例的T739和T739TK细胞共培养观察体外旁观者效应.在同基因鼠,将不同比例的T739和T739TK细胞混合建立膀胱癌腹腔肿瘤模型.当肿瘤B超显示0.5～0.8 cm,腹腔GCV给药6 d,然后观察肿瘤大小变化及动物存活时间.结果转染HSVtk基因的T739细胞对GCV的敏感性,RT-PCR分析证实TK基因mRNA的表达.细胞混合培养发现,当T739TK细胞占10%强时就可显示出明显的旁观者效应.在GCV的作用下,动物体内肿瘤生长受到显著抑制,动物存活时间明显延长,证明存在体内旁观者效应.结论转染HSVtk基因的鼠膀胱癌细胞可引导产生体内外旁观者效应,这种效应有助于加强 HSVtk/GCV系统对膀胱肿瘤的抗癌作用.

HSV-TK/GCV系统治疗鼠膀胱癌细胞T739旁观者效应的实验研究

目的为探讨HSV-TK/GCV系统治疗鼠膀胱癌细胞T739的旁观者效应.方法台盼蓝染色计数法对GCV单独作用T739-TK细胞、T739细胞或其两者按不同比例混合在不同容积等情况下的杀伤作用进行研究.结果 HSV-TK/GCV系统有效的杀伤T739-TK细胞,且这种作用有明显的旁观者效应,旁观者效应的强弱与T739-TK细胞所占比例以及细胞间接触程度成正相关.结论 HSV-TK/GCV系统不仅能有效的杀伤T739-TK细胞,而且对T739细胞有明显的旁观者效应.