首页 > 文献资料
-
河豚毒素小鼠多克隆抗体的中和毒素效应及其活性-质量关系
目的:制备河豚毒素(TTX)的小鼠多克隆抗体,研究抗体中和TTX的效果,以探讨开发TTX抗素素的可能.方法:以中国鲎血蓝蛋白(TTH)为载体,通过甲醛与TTX化学连接,制成人工抗原(TTX-TTH)并免疫BALB/c小鼠;以福氏佐剂诱导腹水抗体.酶联免疫分析方法检测血清和腹水抗体质量;将TTX与抗体在体外共温育而被中和,然后腹腔注射于KM小鼠,作体内攻毒实验,检验抗体的抗毒活性,并计算抗体的免疫当量.结果:经人工抗原免疫并福氏佐剂诱导,获得了20株具有不同亲和力的腹水抗体,与血清抗体具有同质性,其表观亲和力为10-4~10-7M.抗体可在体外和体内、完全或部分地中和毒素的毒性,有效保护中毒动物免于死亡.抗体体外中和毒素,高可保护1.5×LD的TTX攻击,动物全部活存(1LD=14 μg/kp,i.p.);抗体的高免疫当量达1 300 μg TTX/L腹水;抗体的抗毒活性与抗体滴度、亲和力和质量因子显著相关(分别为P<0.05,P<0.01,P<0.001).抗体在体内预防4 d时,可保护1.3×LD的TTX攻击动物活存.结论:TTX小鼠腹水多克隆抗体可在体外和体内有效中和毒素,其抗毒活性依赖于抗体质量,提示了免疫防治对抗河豚毒素中中毒的希望.研究提出的抗体"质量因子"是评价抗毒素质量的有效参数.
-
聚乙二醇化生物技术药物面临的免疫原性挑战
聚乙二醇(PEG)化可有效延长药物半衰期,是目前生物技术药物变构化学中重要成熟的技术之一.在早期研究中,PEG并未表现出免疫原性及抗原性,一直被认为是生物惰性材料.然而随着越来越多的PEG化药物进入临床应用,关于患者体内产生抗PEG抗体造成药效损失的报道不断出现,有关PEG化蛋白药物重复给药后引发副反应的报道也逐渐增多.本文就PEG化生物技术药物面临的免疫原性问题及由此引发的加速血液清除(ABC)现象,综述了影响抗PEG抗体产生的关键因素及目前的应对策略.
-
毛细管电泳免疫分析
免疫分析(immunoassay)是建立在抗原和相应抗体之间免疫结合反应的基础上,利用抗体(或抗原)作为选择性试剂测定抗原、半抗原(或抗体)的方法.根据示踪物的标记方法不同,传统的免疫分析方法包括放射免疫分析、酶免疫分析、荧光免疫分析、发光免疫分析等[1].免疫分析的主要特点是有极高的选择性和灵敏度,可用于血浆、尿液等复杂样品中激素、药物等痕量组分的分析测定,在临床化学分析、药物分析等方面有极重要地位[2,3].
-
鬼臼毒素人工抗原的合成与鉴定
目的合成和鉴定鬼臼毒素人工抗原,以获取具有特异性和高度亲和性的鬼臼毒素多克隆抗体.方法通过酯化反应合成半抗原鬼臼毒素半琥珀酰酯;利用活泼酯法和混合酸酐法偶联成免疫和包被所需的人工抗原;按常规免疫法,从免疫的兔血清中获取高效的抗鬼臼毒素抗体.结果质谱、核磁共振和红外分析表明两种不同方法均成功地合成了半抗原鬼臼毒素半琥珀酰酯.人工抗原的偶联比因载体蛋白和合成方法的不同而有所不同,Hapten-BSA1为88.6,Hapten-BSA2为40.3,Hapten-OVA1为17.8和Hapten-OVA2为54.2.利用兔M4440产生的抗血清建立的ELISA方法对鬼臼毒素的低检测浓度为0.12 μg·mL -1,半数抑制浓度为2.21 μg·mL -1.结论成功地合成了鬼臼毒素人工抗原,并获得了抗鬼臼毒素抗体,为鬼臼毒素免疫分析方法的进一步研究提供了条件.
-
1例注射青霉素致过敏性休克抢救成功的体会
临床上使用某些药物时,常可引起不同程度的过敏反应,甚至过敏性休克,如不及时抢救,可危及生命.过敏反应是由于抗原、抗体相互作用而引起.青霉素G是一种半抗原,进入人体后与组织蛋白质结合而成全抗原,刺激机体产生特异性抗体.
-
MBS和戊二醛连接hPTH载体特异抗体及载体抗体的比较研究
目的:比较间-马来酰亚胺苯甲酸-N-羟基琥珀酰亚胺酯(MBS)和戊二醛连接人甲状旁腺激素(hPTH)载体后抗体的产生效果.方法:MBS法和戊二醛一步法分别将hPTH(1-84)与载体牛血清白蛋白(BSA)连接后作为免疫原免疫家兔;间接ELISA法比较两组兔中特异性hPTH(1-84)抗体和BSA抗体的产生,并使用免疫吸收和亲和层析吸附清除BSA抗体,对清除情况进行比较.结果:MBS组抗hPTH(1-84)抗体效价总体上高于戊二醛组,抗载体BSA抗体效价低于戊二醛组;MBS组在同一时间hPTH(1-84)抗体效价高于BSA抗体,戊二醛组获取的抗血清中BSA抗体效价则明显高于hPTH(1-84)抗体.MBS组经亲和层析吸附BSA抗体被清除完全,戊二醛组经免疫吸收和亲和层析吸附仍有残留BSA抗体.结论:采用MBS法连接半抗原载体制备hPTH(1-84)抗体,降低了载体抗体的影响,提高了hPTH(1-84)抗体的特异性,可应用于hPTH药理作用和代谢途径等研究工作中.
-
抗海洛因成瘾疫苗的研究进展
海洛因是我国流行广的毒品,危害严重,复吸率极高.现有的抗海洛因成瘾疗法存在很多局限.毒品疫苗诱导机体产生针对毒品的特异性抗体,阻断毒品进入中枢发挥作用,在预防复吸,治疗成瘾方面显示了卓越的前景.本文就近年来抗海洛因成瘾疫苗的研究进展作一综述,针对疫苗的作用机制与疫苗的构建方式,分析了海洛因疫苗的研究现状和未来面临的挑战.
-
青霉素型免疫性溶血性贫血的临床研究
青霉素型(半抗原型)免疫性溶血性贫血,是指青霉素与组织蛋白结合后形成半抗原,吸附于红细胞,与膜蛋白结合后产生很强的免疫原性,刺激机体产生IgG型抗体,破坏与青霉素结合的红细胞…所致的溶血性贫血.
-
福氏佐剂的替代物和抗体生产
以抗原免疫动物获得抗血清是制备抗体的经典方法.为了提高免疫效果,在免疫的时候,常辅以佐剂以改变抗原的物理状态而延长其在体内的滞留时间,使抗原缓慢释放,同时非特异性的促进局部吞噬细胞反应来增强动物的免疫效果.佐剂的类型较多,目前常用的还是福氏佐剂(Freund's Adjuvant,FA).它是一种对大多数抗原都有效的佐剂,但由于它的一些副作用限制了它在实验动物上的使用.因此,福氏佐剂只能在确实需要的情况下(如使用的抗原为小分子可溶性抗原或半抗原)和强佐剂活性时使用.
-
间隔36小时再次应用青霉素发生过敏性休克1例
青霉素有抗菌作用强、疗效高、毒性低、价格便宜等优点,广泛应用于临床.青霉素是一种半抗原,再次用药后可引起机体发生严重的过敏反应.曾有报道,青霉素在临床应用中过敏反应发生率为0.7%~10%,其中50%的患者在用药后数秒至5分钟内发生,严重者可发生过敏性休克,非常凶险,故用药前的皮试已成为常规.但停药36小时后,皮试阴性,患者再次用药后发生严重过敏反应的却很少见,笔者曾遇1例,报道如下:
-
皮试液临床配制注意事项
针对临床用药中对皮试液配制存在不规范问题,本文查阅相关文献,对皮试液配制中药物和溶媒的选择、皮试液浓度等注意事项进行了探讨,旨在为临床提供参考,以减少过敏反应,保证患者用药安全.
-
毒死蜱人工抗原的合成与分析
目的 制备毒死蜱人工抗原,为建立其酶联免疫吸附检测方法提供技术储备.方法 以毒死蜱为原料,在弱碱性条件下与3-巯基丙酸反应,合成半抗原O,O-二乙基-O-[3,5-二氯-6-(2-羧乙基)硫代-2-吡啶基]硫代磷酸酯之后,分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)通过EDC方法合成人工抗原,前者为免疫原,后者为包被原,并对其进行质谱鉴定.结果 合成的半抗原分子量为419.7,与理论值(420)一致.免疫原中毒死蜱半抗原与蛋白BSA的偶联比为13:1,包被原中毒死蜱半抗原与蛋白OVA的偶联比为5:1.结论 成功合成毒死蜱的半抗原和人工抗原,为建立检测毒死蜱的ELISA方法奠定了基础.
-
2种方法制备小肽免疫原的免疫特性比较
目的:探讨用不同方式制备的免疫原所产生的针对36肽半抗原的免疫应答特性.方法:分别用载体蛋白偶联小肽半抗原的方法与原核表达重组融合蛋白的方法构建免疫原免疫家兔,对其刺激产生的抗体应答动力学进行比较.结果:2种方法制备的免疫原免疫家兔后均于初次免疫后3个月左右产生了峰值效价,偶联蛋白方法制备的免疫原免疫家兔后产生的高效价可达1∶12 000,基因工程方法制备的免疫原免疫后高效价为1∶6 000,但后者诱导产生的免疫反应较为持久.结论:偶联蛋白方法与基因工程方法制备的免疫原均可成功刺激家兔免疫系统产生针对36肽半抗原的有效抗体,但两者具有较为不同的免疫特性,偶联蛋白方法更加迅速有效.
-
青霉素迟发过敏反应致发热1例
青霉素过敏反应系由抗原、抗体相互作用而引起.青霉素属半抗原,进入人体后与组织蛋白相结合而成为全抗原,在刺激机体后可产生抗体,并存于体内.属过敏体质的人遇到相应的抗原,在进入机体后,即可产生过敏反应,其常见的过敏反应分为两种:一种是速发过敏反应,另一种是迟发过敏反应.速发过敏反应多在进行皮肤过敏试验注射完数秒钟或数分钟内即出现全身反应,有时甚至呈闪电式的反应;
-
抗变态反应药物
变态反应是抗原或半抗原作用于机体靶细胞或靶器官,通过免疫学机制而引起的异常免疫反应,即病理性的免疫反应.变态反应按照发病机制可分为四型[1].本文概述四型变态反应发生机制、临床症状以及五类抗变态反应药物作用特点及临床应用.
-
水解性稳定的半抗原和Th1佐剂对疫苗效果的影响研究
目的:探讨一种含水解性稳定的半抗原类似物和Th1佐药(CpG ODN)的疫苗,与之前疫苗进行检测对比观察其效果.方法:选取每组5只雄性老鼠用KLH进行免疫(对照组),免疫偶联物在第0,14,28 d时对老鼠进行腹腔注射.21 d和42 d时收集血浆.疫苗效力用ELISA进行测量,评估其抗体效价,并用竞争性ELISA评估抗体的亲和力和特异性.结果:ELISA结果显示,半抗原结构能显著影响抗体特性.此外,佐药对海洛因有显著的抗体特异性和亲和力.结论:疫苗的组成成分,即一个化学性不稳定的半抗原和由明矾引发的特异Th2体液免疫反应,其作用是显著的,此组成成分是生产下一代疫苗的关键.
-
青霉素皮试结果判断误差成因探讨
青霉素是一种临床广泛应用的抗生素,其疗效显著毒副作用小,但因其是一种人工合成半抗原,进入人体与机体蛋白质结合成全抗原易引起过敏反应,因此使用前必须做皮肤过敏试验.
-
青霉素过敏反应的特殊临床表现一例
青霉素是半抗原,容易发生过敏反应,大多数发生在皮试或注射青霉素后,也可通过某些特殊途径发生过敏.现就我院1例患者对青霉素发生过敏反应的特殊临床表现报道如下.
-
兔抗Cap43多克隆抗体制备和初步纯化
目的 制备兔抗Cap43多克隆抗体.方法 以30个氨基酸组成的多肽为半抗原与钥孔血蓝蛋白(mcKLH)通过碳化二亚胺(EDC)法化学偶联成完全抗原(多肽-mcKLH)免疫家兔;制备兔抗Cap4443多克隆抗体;斑点ELISA法检测抗体效价,经辛酸-硫酸铵法初步纯化抗体后,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)电泳考马斯亮蓝检测其纯化后的纯度.结果 经免疫11周得到兔抗Cap43多克隆体,抗体效价为1:500.结论 采用EDC化学偶联半抗原和大分子载体蛋白mcKLH,使其成为同时具有免疫原性与免疫反应性的完全抗原,用其免疫家兔获得多克隆抗体.
-
乌头碱羟基琥珀酰亚胺酯及其BSA结合物的制备
为建立乌头碱酶免疫测定法,合成了乌头碱衍生物,用羟基琥珀酰亚胺酯的方法制备半抗原(活性酯),并用其半抗原与BSA(Bovine Serum Albumin)在有机溶媒/磷酸缓冲液(pH7.3)的条件下制备了抗原性BSA结合物.结果显示,这种活性酯的方法可用于乌头碱酶免疫测定法中与BSA或酶交联的有效方法.
关键词: 乌头碱 半抗原 N-羟基琥珀酰亚胺酯 抗原性BSA结合物 合成