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视网膜色素变性Rd1小鼠眼球中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达
目的 探讨增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)在Rd1小鼠视网膜上的表达情况.方法 取出生后14 d、21 d、28 d的Rd1小鼠和C57BL/6J小鼠各5只,摘出眼球进行HE染色,观察视网膜形态学结构变化;免疫组织化学染色与实时荧光定量PCR检测PCNA蛋白和基因在不同鼠龄小鼠中的表达.结果 HE染色结果显示:PCNA蛋白均在两种小鼠视网膜神经节细胞中表达;C57BL/6J小鼠视网膜结构完整;与C57BL/6J小鼠相比,Rd1小鼠视网膜发育随着鼠龄的增加,发生进行性退化.免疫组织化学染色结果显示:PCNA蛋白表达仅局限于视网膜神经节细胞,免疫阳性信号出现在第14天和第21天,而在第28天未检测到.PCR实验结果显示:与C57BL/6J小鼠相比较,鼠龄21 d时Rd1小鼠PCNA基因表达水平增高,是C57BL/6J小鼠的2.23倍;鼠龄14 d和28 d时Rd1小鼠PCNA基因表达均低于C57BL/6J小鼠(均为P＜0.05).结论 PCNA基因参与了Rd1小鼠视网膜发育退化过程.
关键词： 视网膜色素变性 增殖细胞核抗原 Rd1小鼠 C57BL/6J小鼠 -
不同剂量链脲佐菌素诱导的1型糖尿病小鼠角膜病变模型的对比研究
目的 比较研究单次高剂量和多次低剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔内注射诱导糖尿病小鼠角膜病变的成模情况及其病理表现的异同. 方法 正常6～8周龄雄性C57BL/6小鼠80只,随机分为正常对照组、多次低剂量1个月组、多次低剂量3个月组(60 mg/kg STZ连续腹腔内注射5次)和单次高剂量1个月组(150 mg/kg STZ腹腔内注射1次),每组20只.比较各模型组小鼠成活率、糖尿病成模率、平均体质量、糖化血红蛋白(HbA1c)水平.各组小鼠均行角膜上皮刮除术,采用荧光素钠染色法检测角膜上皮的缺损面积百分比.采用免疫荧光染色法检测角膜上皮p-Akt、Sirt1和Ki67的表达情况.采用Cochet-Bonnet触觉测量器检测角膜上皮刮除前、刮除后3、7、10和14 d角膜敏感度,采用免疫荧光染色检测角膜上皮刮除前、刮除后14 d角膜神经密度.结果 多次低剂量1个月组、多次低剂量3个月组和单次低剂量1个月组小鼠糖尿病成模率分别为90％、80％和70％.各糖尿病模型组小鼠血液HbA1c水平较正常对照组明显升高,差异均有统计学意义(均P＜0.05);各糖尿病模型组间小鼠血液HbA1c水平比较,差异均无统计学意义(均P＞0.05).角膜上皮刮除后24 h和48 h,多次低剂量3个月组和单次高剂量1个月组小鼠角膜上皮缺损面积百分比均高于正常对照组,差异均有统计学意义(均P＜0.05).多次低剂量3个月组和单次高剂量1个月组小鼠角膜上皮p-Akt、Sirt1和Ki67的荧光强度均低于正常对照组.角膜上皮刮除前和刮除后14d,多次低剂量1个月组小鼠角膜敏感度、角膜神经密度与正常小鼠相比,差异均无统计学意义(均P＞0.05);但多次低剂量3个月组和单次高剂量1个月组小鼠角膜神经敏感度、角膜神经密度明显下降,与正常对照组相比差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 低剂量STZ注射1个月不能诱导糖尿病小鼠出现角膜病变特征,而高剂量STZ注射后1个月和低剂量STZ注射后3个月的糖尿病小鼠出现典型的角膜上皮和神经病变,可作为研究1型糖尿病性角膜病变的理想动物模型.
关键词： 链脲佐菌素 C57BL/6J小鼠 糖尿病 角膜病变 -
内源性大麻素对缺氧缺糖视网膜神经节细胞损伤的保护作用
背景 急性视网膜缺血缺氧性损伤在眼科较为常见,如青光眼急性发作、视网膜中央动脉阻塞、缺血性视神经病变等,可引起视网膜的缺血缺氧损伤,并可致视网膜神经节细胞(RGCs)的死亡.内源性大麻素(CB)及其受体(CBR)参与中枢神经系统外伤、缺血、炎症及中毒等多种生理病理过程. 目的 探讨视网膜神经节细胞(RGCs)在缺氧缺糖损伤中内源性CB的作用及意义.方法 取6周龄正常C57BL/6J小鼠眼球,制备小鼠视网膜垂直冰冻切片,采用免疫荧光染色法检测和验证CB1R和CB2R在RGCs中的表达.10只C57 BL/6J新生鼠浸入75％乙醇消毒后取眼球,在冰上预冷的DMEM培养基中分离视网膜进行RGCs原代培养,采用免疫荧光技术检测培养细胞中RGCs标志物Brn3a的阳性表达并确定培养细胞中CB1R和CB2R的表达.将原代培养14 d的RGCs分为正常对照组和氧糖剥夺(OGD)组,分别用完整培养基+体积分数95％空气+体积分数5％ CO2和无糖培养基+体积分数95％ N2+4％ CO24+体积分数1％ O2条件下培养20 h.采用JC-1染色法检测细胞中线粒体结构变化和RGCs的形态变化.各组细胞分别给予1μmol/L CB1R拮抗剂SR141716A、1μmol/L CB2R拮抗剂SR144528以及5μmol/L、10 μmol/L CB1R和CB2R激活剂WIN 55212-2,采用MTT法比较各组RGCs存活率.结果 正常C57BL/6J小鼠视网膜全层均可见CBR的表达.正常对照组培养的RGCs大小均匀,多呈多角形,细胞间轴突细长并形成网络,细胞中Brn-3a表达阳性;OGD组培养的细胞皱缩或形成碎片,多数细胞轴突消失,Brn-3a表达荧光强度明显减弱.正常对照组RGCs中JC-1染色显示,线粒体的黄色荧光明显强于OGD组,表明OGD组线粒体膜电位明显下降.MTT法检测显示,正常对照组RGCs存活率为(100.00±13.87)％,明显高于OGD组的(89.52±18.16)％,差异均有统计学意义(q=8.065,P=0.008);SR141716A和SR144528作用后OGD组细胞存活率分别为(116.63 ±22.21)％和(112.61±19.02)％均明显高于同组的无药物处理细胞的存活率(89.52±18.16)％,差异均有统计学意义(q=29.780、17.391,均P＜0.01),而SR141716A和SR144528作用后正常对照组细胞存活率的变化差异均无统计学意义(均P＞0.05). 结论 细胞缺氧缺糖时上调CB在细胞中的表达和激活CB活性.在缺氧缺糖条件下,抑制细胞中CBR的激活过程对RGCs有保护作用.
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玻璃体腔注射熊果酸对小鼠氧诱导视网膜新生血管的抑制作用
背景 视网膜新生血管疾病严重影响视功能,目前虽然有较多的抗新生血管药物,但多针对单一的干预靶点,疗效有限.研究证实,熊果酸具有多种生物学效应,其中包括抗血管新生作用,但其对眼科血管疾病的疗效尚不清楚. 目的 观察熊果酸对小鼠氧诱导视网膜新生血管形成的抑制作用. 方法 采用随机数字表法将7日龄清洁级C57BL/6J小鼠60只随机分为6个组,即空白对照组、PBS对照组、阳性对照组和低、中、高剂量熊果酸组.空白对照组小鼠在正常环境中喂养,其他各组小鼠与哺乳的母鼠置于体积分数(75±2)％的高氧环境中连续饲养5d,小鼠12日龄时将模型小鼠及其哺乳母鼠返回正常空气环境中,以诱导视网膜新生血管产生.造模成功后按照分组不同分别于小鼠玻璃体腔注射无菌PBS 3μl、曲安奈德注射液(1 ml∶40 mg)3μl或1.5、3.0、6.0μg熊果酸各3μl.小鼠17日龄时过量麻醉法处死,摘除双侧眼球制备视网膜组织切片.采用组织病理学方法检查各组小鼠视网膜血管新生情况,计数突破视网膜内界膜的新生血管内皮细胞核数目;采用逆转录PCR(RT-PCR)法分别检测和比较各组小鼠视网膜组织中血管内皮生长因子(VEGF) mRNA、环氧合酶-2(COX-2)mRNA及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)mRNA的相对表达量. 结果 视网膜切片后苏木精-伊红染色显示,PBS对照组小鼠视网膜中突破内界膜的新生血管内皮细胞核数为(18.65±3.24)个/视野,明显高于空白对照组的(0.78±0.11)个/视野,差异有统计学意义(t=2.24,P＜0.05);中剂量熊果酸组、高剂量熊果酸组小鼠视网膜突破内界膜的新生血管内皮细胞核数分别为(13.32±1.87)个/视野和(8.93±1.09)个/视野,明显少于PBS对照组和低剂量熊果酸组的(18.65±3.24)个/视野和(15.44±2.02)个/视野,差异均有统计学意义(均P＜0.05),而高剂量熊果酸组小鼠视网膜突破内界膜的新生血管内皮细胞核数与阳性对照组的(9.14±1.13)个/视野接近,差异无统计学意义(t=1.17,P＞0.05).RT-PCR检测表明,PBS对照组小鼠视网膜组织中COX-2 mRNA、VEGF mRNA和MMP-2 mRNA相对表达量均明显高于空白对照组,差异均有统计学意义(t=13.45、12.49、14.32,均P＜0.05),且高剂量熊果酸组小鼠视网膜组织中COX-2mRNA、VEGF mRNA和MMP-2 mRNA相对表达量均明显低于PBS对照组和低剂量熊果酸组,差异均有统计学意义(均P＜0.05),而高剂量熊果酸组与阳性对照组间的差异均无统计学意义(均P＞0.05).结论 熊果酸以剂量依赖的方式下调氧诱导的缺血小鼠视网膜组织中VEGF、COX-2及MMP-2的表达,从而抑制视网膜新生血管的产生.
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VEGFR-1和VEGFR-2在氧诱导视网膜病变小鼠视网膜中表达的变化
背景 早产儿视网膜病变(ROP)是氧动力学异常导致严重视网膜血管病变的致盲眼病.血管内皮生长因子(VEGF)在ROP发病机制中发挥重要作用,但VEGF受体(VEGFR)在ROP发病中的作用研究较少. 目的 研究不同鼠龄氧诱导视网膜病变(OIR)小鼠视网膜中VEGFR-1和VEGFR-2的表达变化.方法 将60只SPF级出生后7 d(P7)的C57BL/6J小鼠与哺乳母鼠一起在体积分数(75±2)％O2条件下饲养5d,建立OIR小鼠模型(OIR组),以60只正常环境饲养的同品系同龄小鼠作为正常对照组.分别于P8、P11、P12、P13、P14、P18鼠龄时摘取2个组小鼠双侧眼球,制备视网膜切片,采用苏木精-伊红染色法检测小鼠视网膜血管的发育情况;采用实时荧光定量PCR法检测不同鼠龄小鼠视网膜中VEGFR-1和VEGFR-2 mRNA的相对表达水平;采用免疫组织化学法观察小鼠视网膜中VEGFR-1和VEGFR-2蛋白的表达.结果 组织病理学结果显示,OIR组P13、P14、P18小鼠有较多的血管内皮细胞核突破内界膜,光学显微镜下内界膜下的细胞增生,排列紊乱,视网膜表面或视网膜前有新生血管芽,但正常对照组各鼠龄小鼠视网膜结构正常.OIR组P12、P13、P14和P18小鼠视网膜中VEGFR-1 mRNA的平均相对表达水明显高于正常对照组,差异均有统计学意义(P=0.046、0.000、0.000、0.042);OIR组P8、P11、P12、P13、P14和P18小鼠视网膜中VEGFR-2mRNA的平均相对表达水平明显高于正常对照组,差异均有统计学意义(均P＜O.01).两个组间P8、P11、P12、P13、P14、P18小鼠视网膜中VEGFR-1蛋白阳性表达强度的差异均无统计学意义(M=50.00、36.00、41.00、31.00、28.00、36.00,均P＞0.05);正常对照组与OIR组间P8和P11小鼠视网膜中VEGFR-2蛋白阳性反应强度的差异无统计学意义(均P＞0.05),正常对照组P12、P13小鼠视网膜中VEGFR-2蛋白的表达减弱,但OIR组同鼠龄小鼠视网膜中VEGFR-2蛋白的表达增强,2组间差异均有统计学意义(均P＜0.01);2个组P14小鼠视网膜中VEGFR-2蛋白表达均明显增强,但OIR组的表达强度仍显著高于正常对照组,差异有统计学意义(P＜0.01).正常对照组P18小鼠视网膜中VEGFR-2蛋白表达减弱,OIR组VEGFR-2表达强度达峰(M=20.11,P＜0.01). 结论 VEGFR参与OIR小鼠视网膜新生血管的形成,VEGFR-2的促新生血管新生作用强于VEGFR-1.
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Tenomodulin抑制氧诱导视网膜病变小鼠模型新生血管形成的研究
目的 探讨Tenomodulin(TeM)蛋白对C57BL/6J小鼠早产儿视网膜病变模型(ROP)视网膜新生血管形成的抑制作用.方法 将60只7d龄C57BL/6J幼鼠随机分为高氧组(ROP组)、正常对照组各15只和TeM组30只.将ROP组小鼠置于体积分数(75%±2%)的高氧环境中5d,随后回到正常氧环境中饲养5d;对照组小鼠饲养在正常氧环境中;TeM组是将鼠1只眼玻璃体腔内注射1μg TeM,对侧眼注射PBS作为对照,然后置于体积分数(75%±2%)的高氧环境中饲养5d,之后返回正常氧环境中.17d时处死全部小鼠,收集各组眼球.视网膜荧光素灌注铺片观察视网膜血管的改变、计算视网膜无灌注区的面积;计数突破内界膜的内皮细胞数反映视网膜血管增生情况,观察TeM蛋白对视网膜新生血管形成的抑制作用及对视网膜可能的毒性反应;Western blot检测TeM蛋白在视网膜内的表达.结果 与高氧组(2.94±0.55)mm~2及TeM组中对侧眼注射PBS(2.83±0.46)mm~2的视网膜铺片中央非灌注区面积(mm~2)相比,注射TeM的视网膜铺片(0.44±0.26)mm~2,其中央非灌注区面积差异有统计学意义(P＜0.01);每个视网膜切面突破内界膜的内皮细胞核数(10.57±2.95)与前二者(44.93±6.78、41.07±7.31)比较差异均有统计学意义(P＜0.01).注射TeM的视网膜冰冻切片未见炎症反应和细胞毒性破坏.Western blot检测结果 显示注射TeM的视网膜呈阳性表达,注射PBS的视网膜未出现条带反应,TeM的相对分子质量约为16000.结论 TeM可有效抑制视网膜新生血管的形成,预示着TeM在预防和治疗眼部新生血管方面具有潜在的作用.
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祛斑汤对小鼠皮肤优黑素及褐黑素合成的影响
目的 观察祛斑汤对雌性C57BL/6J小鼠皮肤中两种黑素即优黑素和褐黑素合成的影响.方法 将雌性C57BL/6J小鼠随机分成空白对照组、祛斑汤低、中、高剂量组、维生素C组.灌胃30日后皮肤取材,采用酶联免疫吸附试验测量皮肤优黑素和褐黑素含量.结果 祛斑汤组与维生素C组优黑素含量低于空白对照组.祛斑汤高剂量组与空白对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).祛斑汤组与维生素C组褐黑素含量高于空白对照组.祛斑汤高、中、低剂量组与空白对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 祛斑汤在抑制黑素合成过程中主要抑制优黑素的生成,并促进优黑素向褐黑素转化.
关键词： 祛斑汤 C57BL/6J小鼠 优黑素 褐黑素 -
九味肝泰对刀豆蛋白A诱导的C57BL/6J小鼠急性免疫性肝损伤的干预研究
目的:建立C57BL/6Jd小鼠急性免疫性肝损伤模型,观察九味肝泰对其免疫损伤及肝功能的影响.方法:按随机原则将30只接种乙型肝炎病毒(HBV)的C57 BL/6J品系转基因雄性小鼠分为对照组、模型组和九味肝泰组.采用尾静脉注射12mg/kg刀豆蛋白A(ConA)的方法诱导C57BL/6J小鼠急性免疫性肝损伤模型;成模8h后九味肝泰组小鼠按(0.5mL/10g·d)灌10％九味肝泰混悬液干预性治疗7d,对照组及模型组小鼠灌胃等量生理盐水.检测干预前和干预7d后小鼠肝功能[总胆红素(TBil)、谷草转氨酶(AST)、谷氨酰转移酶(GGT)、总胆汁酸(TBA)、谷丙转氨酶(ALT)]、还原型谷胱甘肽(GSH)、血清中超氧化物歧化酶(SOD)和肝组织中丙二醛(MDA).结果:九味肝泰组小鼠在干预治疗7d后,TBil、AST、GGT、TBA、ALT与对照组比较,差异无显著性意义;GSH和SOD升高、MDA明显降低,与同组干预前及模型组比较,P＜0.05,差异有统计学意义.结论:九味肝泰可抑制ConA诱导急性免疫性肝损伤小鼠的脂质过氧化反应,促进其肝功能恢复.
关键词： 九味肝泰 C57BL/6J小鼠 刀豆蛋白A 急性免疫性肝损伤模型 肝功能 -
刀豆蛋白A诱导的C57BL/6J小鼠急性免疫性肝损伤模型的研究
目的:通过单次尾静脉注射不同剂量的刀豆蛋白A(ConA)诱导C57BI/6J小鼠急性免疫性肝损伤,探讨ConA诱导建立C57BL/6J小鼠急性免疫性肝损伤模型的实验条件.方法:①50只雄性C57BL/6J小鼠,随机分为5组,每组10只,通过尾静脉分别注射生理盐水和6mg/kg、12mg/kg、20mg/kg、30mg/kg的ConA,8h后眼球取血处死小鼠.②另40只雄性C57BL/6J小鼠,随机分为4组(0、1、4、8h),每组10只,0h组小鼠使用生理盐水,另外3组小鼠使用12mg/kg ConA尾静脉注射,分别在注射后0、1、4、8h后眼球取血,测定不同剂量及不同时间点尾静脉注射ConA后C57BL/6J小鼠血清ALT、AST水平及肝脾组织病理学变化情况.结果:与对照组相比,分别注射6mg/kg、12mg/kg、20mg/kgConA 8h后小鼠血清ALT、AST均明显升高(P＜0.05),并呈剂量依赖性.注射30mg/kgConA的小鼠8h内全部死亡.与对照组相比,随注射ConA剂量增加,8h内小鼠肝组织呈进行性病变,终发展为肝实质灶性坏死.12mg/kg剂量组小鼠染毒后,4h后脾脏病变达高峰;血清ALT、AST水平在早期呈上升趋势,并在8h达到高峰(P＜0.05),呈显著性肝损害.对照组小鼠以上指标无显著变化.结论:小鼠尾静脉注射ConA可建立急性免疫性肝损伤小鼠模型,佳剂量为12mg/kg.
关键词： 刀豆蛋白A 急性免疫性肝损伤 C57BL/6J小鼠 模型 -
肝癌干细胞表面标志物CK19在化学诱癌过程中的差异表达
目的 检测CK19基因在化学诱发C57BL/6J小鼠肝癌过程中各阶段的表达差异.方法 对50只C57BL/6J雄性小鼠通过化学法诱发肝癌,以50只正常C57BL/6J雄性小鼠为对照组.观察诱癌小鼠的生长状况,每4周处死一批小鼠获取组织标本进行病理学、荧光实时定量PCR(FQ-RT-PCR)法、Western blot等检测CK19基因及蛋白表达差异.结果 在化学诱癌第16周后处死的小鼠出现明显的灰白色小结节,直径为2 mm大小,第20周时肝癌结节直径在5～25 mm之间,呈多发性.早期病理改变主要是肝细胞排列结构轻度紊乱,细胞轻度的异型增生.病理切片显示为中、高分化的肝癌细胞,可见瘤巨细胞和病理性核分裂,间质肝纤维组织增生,提示有肝硬化改变；RT-PCR,Western blot结果显示,实验组小鼠在化学诱癌第16周开始CK19-mRNA表达升高,第20周时明显增强；荧光定量结果显示,CK19 mRNA在化学诱癌第4、8、12、16及20周的小鼠肝癌组织中的表达水平分别为(2.133±0.470)、(2.395±0.472)、(2.767±0.729)、(3.217±0.627)和(14.095±5.812),与同期对照组比较差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 肝癌干细胞标志物CK19参与了肝癌的发生发展,其表达量随诱癌时间的延长而逐渐增加,但其对肝癌发生发展的确切调控机制有待深入研究.
关键词： 肝癌 干细胞 CK19 C57BL/6J小鼠 -
C57B L／6J 小鼠随年龄增长耳蜗内毛细胞带状突触数量变化的观察
目的：探讨C57BL／6J小鼠随年龄增长耳蜗内毛细胞带状突触（ribbon synapses ，RS ）的数量变化情况。方法分别取2、6、10、12月龄C57BL／6J小鼠耳蜗基底膜（每组5只），应用免疫组织化学染色方法对RS前、后膜进行双重标记，激光共聚焦显微镜下定位成像，并应用三维重建技术对基底膜各段RS的数量进行计数。结果与2月龄小鼠相比较，6月龄C57BL／6J小鼠耳蜗基底膜RS数量减少主要发生在底回，10月龄时各回RS数量均明显减少，12月龄时顶回、中回 RS数量继续减少，底回反而有少许增多。结论 RS 数量减少可能发生在C57BL／6J小鼠老年性聋的早期阶段，探索阻止RS数量减少的治疗措施可能成为早期干预老年性聋的重要途径。
关键词： C57BL/6J小鼠 内毛细胞 带状突触 -
ConA不同给药途径所致C57小鼠急、慢性肝损伤模型的建立与比较
目的 用ConA通过尾静脉注射、腹腔注射两种给药途径对C57小鼠分别建立急、慢性肝损伤模型,观察ConA不同给药途径造模是否存在差异,并研究ConA造成肝损伤的作用机制.方法 用6mg/kg的ConA分别通过尾静脉注射、腹腔注射方法干预C57小鼠,注射8h后处死小鼠建立急性肝损伤模型;用6mg/kg的ConA每周注射1次,连续4周,建立慢性肝损伤模型,观察两种给药途径能否成功建立慢性肝损伤模型,及造成的慢性肝损伤程度有无差异.结果 在ConA用量为6mg/kg时通过尾静脉注射能成功的建立急、慢肝损伤模型.而用腹腔注射给药建立急、慢性肝损伤模型存在结果不稳定性,不能成功建立肝损伤模型.结论 给药途径对于ConA的药效发挥存在影响,尾静脉注射造成的肝损伤更为严重.
关键词： ConA 急性肝损伤 慢性肝损伤 C57BL/6J小鼠 -
黄芪多糖的胰岛素增敏作用及其对蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B的影响
目的:探讨黄芪多糖(APS)对遗传性胰岛素抵抗小鼠的胰岛素增敏作用及其机制.方法:8周龄C57BL/6J小鼠分别饲以高脂饮食或正常饮食4周,高脂饮食小鼠以胰岛素耐量实验(ITT)证实成功复制胰岛素抵抗模型后,将动物随机分为2组:胰岛素抵抗+APS组[APS 700 mg/(kg·d),灌胃],胰岛素抵抗组(等体积生理盐水灌胃)继续饲以高脂饮食;正常饮食小鼠随机分为对照组和APS组,APS剂量和方法同前.每组动物8只,继续喂养8周后取血检测血糖及胰岛素耐量,免疫印迹法检测骨骼肌胰岛素受体p亚单位(IR-β)和胰岛素受体底物1(IRS-1)的表达,以及蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B(PTP1B)的活性.结果:胰岛素抵抗组小鼠体重增加,血糖、血胰岛素水平显著高于对照组,胰岛素敏感性明显低于对照组.经APS治疗8周后,胰岛素抵抗小鼠的体重、餐后血糖和血胰岛素水平显著降低;骨骼肌IR-β和IRS-1酪氨酸磷酸化水平显著增强,PTP1B活性显著降低.APS治疗对对照组小鼠无明显影响.结论:APS对胰岛索抵抗小鼠具有胰岛素增敏作用;其机制与增加骨骼肌IR-β和IRS-1酪氨酸磷酸化水平,抑制PTP1B活性,增强胰岛素信号转导有关.
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中链脂肪酸改善高脂饲料短期和长期喂养C57BL/6J小鼠的脂蛋白水平的作用
目的 观察中链脂肪酸( MCFA)对高脂饲料短期和长期喂养的C57BL/6J小鼠血清和肝脏脂蛋白水平的影响. 方法 长期实验将36只C57BL/6J雄性小鼠随机分2％MCFA+高脂组、4％ MCFA+高脂组和4％长链脂肪酸(LCFA)+高脂组3组,喂饲16周.短期实验对36只C57BL/6J雄性小鼠喂饲高脂饲料,随机分2mg/kg MCFA组、4mg/kgMCFA组和4mg/kgLCFA组,灌胃2周.长期和短期实验结束时,测定小鼠体重、体脂肪重和肝脏重,观察小鼠血清和肝脏脂蛋白水平的变化. 结果 长期研究结束时,2％MCFA组小鼠体重、附睾周围脂肪垫重及肝脏重、血清甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL -C)水平均显著低于LCFA组(P＜0 05),高密度脂蛋白胆固醇(HDL -C)及HDL -C/LDL-C比值显著高于LCFA组(P＜0.05).4％ MCFA组小鼠体重、附睾周围脂肪垫重及肝脏重显著低于LCFA组(P＜0 05),肝脏匀浆载脂蛋白A1(ApoA1)水平显著高于LCFA组(P＜0.05).短期研究结束时,低剂量MCFA组肝脏重及肝脏匀浆中载脂蛋白B(ApoB)水平显著低于LCFA组(P＜0.05),血清HDL -C/LDL -C比值显著高于LCFA组(P＜0.05).无论长期还是短期实验,低剂量和高剂量MCFA两组小鼠肝脏匀浆的ApoA1/ApoB比值均显著高于LCFA组(P＜0.05). 结论 MCFA可降低长期高脂饲料喂养的C57BL/6J小鼠体重、体脂肪重、肝脏重及血清甘油三酯浓度,且长期、短期内均可改善小鼠血清和肝脏脂蛋白水平.
关键词： 中链脂肪酸 脂蛋白 高脂饲料 C57BL/6J小鼠 -
非酒精性脂肪性肝病进展中血清溶血卵磷脂水平降低
目的 研究血清溶血卵磷脂(LPC)水平在非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)进展中的变化及机制.方法 雄性C57/BL6小鼠60只,分为高脂模型组(HFD)和正常对照组,分别给予高脂纯化饲料和低脂纯化饲料.高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)于饲养第4、8、12、16、20周分批测定两组小鼠血清中几种LPC的含量变化.Milliplex多因子检测法测定血清白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平.重组白细胞介素-6(IL-6)体外干预小鼠肝原代细胞,实时荧光定量PCR测溶血卵磷脂酰基转移酶1-4(LPCAT1-4)的基因表达.结果 高脂模型组血清LPC16:0、LPC18:0和LPC18:1水平从16周开始出现明显降低,第20周LPC16:0和LPC18:1的水平均显著低于正常对照组.高脂模型组血清IL-6水平在第16周和20周显著高于正常对照组;TNF-α水平在第16周显著高于正常对照组.此外,IL-6可诱导LPCAT1-4基因表达升高.结论 在NAFLD进展中血清溶血卵磷脂(LPC)水平下降,可能与肝脏内激活的炎症信号通路有关.
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何首乌提取物对C57BL/6J小鼠毛发生长的影响及其机制初探
目的:探讨何首乌对C57BL/6J小鼠毛发生长及皮肤温度和体外血小板聚集的影响.方法:采用小鼠体外局部脱毛给药的方式,观察何首乌提取物对C57BL/6J小鼠毛发生长的影响；通过测量给药后不同时间点的小鼠皮肤温度,研究何首乌提取物对小鼠皮肤温度的影响；采用浊度法,观察何首乌提取物对体外血小板聚集功能的影响.结果:给药后第21天何首乌提取物高中剂量组与模型组比较有显著性差异(P＜0.05),给药1h后,何首乌提取物高中剂量组能显著提高小鼠皮肤温度(P＜0.05)；体外实验何首乌提取物中、高浓度对PAF诱导大鼠5 min时血小板聚集有显著抑制作用(P＜0.05),呈浓度依赖作用.结论:何首乌提取物可促进C57BL/6J小鼠的毛发生长,其机制可能与提高皮肤温度、扩张毛细血管、抑制血小板凝集、改善血液循环等有关.
关键词： 何首乌 C57BL/6J小鼠 皮肤温度 血小板聚集 -
近交系C57BL/6J小鼠的脱毛特征
目的 了解近交系C57BL/6J小鼠脱毛的性质和脱毛的特征.方法 在各代鼠详细观察记录脱毛出现的时间、状况和缓解情况；利用对照组2对来自不同父母鼠的F1雌雄鼠进行交配实验和回盒饲养实验,观察脱毛和脱毛缓解的特征,在F2小鼠观察脱毛特征的遗传性,对脱毛区域皮肤进行病理分析.结果 脱毛(头、颈或背部)多出现在3～6只同养的雌性鼠中(对照组32.4％,实验组16.3％),脱毛-新毛生长的过程交替进行,交配有缓解脱毛的作用并能维持新毛的生长状态,脱毛的特征可以遗传.皮肤病理显示皮肤各层结构、毛囊和毛囊球上皮无明显病理性改变.结论 脱毛可能是本品系在特定饲养条件下适应环境压力失败及缺乏生理活动的一种表现,具有经过良性、可缓解、特征可遗传等特点.
关键词： C57BL/6J小鼠 脱毛 脱毛特征 皮肤病理 精神压力 -
环境污染水对C57BL/6J小鼠繁殖发育的毒性影响
目的:考察工业和生活排污水中可疑卤代芳烃化合物的污染对C57BL/6J小鼠繁殖和发育的影响.方法:成年雌性小鼠40只,随机分4组,每组10只,Ⅰ组:饮用自来水作为正常对照组;Ⅱ组:饮用浓度2ng/L2,3,7,8-四氯苯对二噁英(TCDD)标准水为阳性对照组;Ⅲ组:饮用实验1号污染水;Ⅳ组:饮用实验2号污染水.连续繁殖3代,观察两种污染水对小鼠繁殖和发育的影响.结果:Ⅱ组和Ⅲ组的亲代(P2)受孕率分别为(84.62±6.08)%、(87.50±33.61)%,比正常对照组下降(P<0.05);Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组的亲代(P2)活产率均下降,分别为(80.00±40.00)%、(57.14±49.49)%、(58.06±49.35)%,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).Ⅱ组和Ⅳ组子代(F3)离奶体重降低为(8.59±1.59)g、(8.94±1.12)g,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.001);Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组子F2代和F3代离奶成活率均下降,分别为(50.21±48.14)%、(75.34±40.22)%、(61.48±42.09)%和(41.33±40.66)%、(74.38±43.03)%、(74.61±39.53)%,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论:广州部分工业和生活废水有低剂量卤代芳烃化合物污染,长期接触将影响雌性小鼠生殖功能,造成受孕率和活产率的下降、出现流产和初生后子鼠死亡率升高、断乳成活率和重量的降低.
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汉黄芩素对高脂喂养加小剂量STZ诱导的2型糖尿病小鼠空腹血糖的影响
目的：观察汉黄芩素对高脂喂养加小剂量链脲佐菌素（ STZ）诱导的2型糖尿病小鼠空腹血糖的影响。方法将造模成功的20只2型糖尿病小鼠分为3组：糖尿病模型组（DM组，n＝6）、二甲双胍组（Met组，n＝6）以及汉黄芩素组（Wog组，n＝8），普通饲料组则作为正常对照组（NC组，n＝10）。 Met组以二甲双胍0.30 g／kg灌胃，Wog组以汉黄芩素40 mg／kg灌胃，NC组及DM 组则用等量生理盐水灌胃，1次／d，在同一时间，连续2周。实验过程中除NC组动物予普通饲料外，余组小鼠均继续给予高脂饲料饮食，自由摄水。检测体重、药物干预前后空腹血糖变化、空腹胰岛素（ FINS）及血脂，应用半定量反转录聚合酶链式反应（ RT－PCR）测定小鼠骨骼肌蛋白激酶B（AKT／PKB）及葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）的mRNA表达，应用Western blot检测小鼠骨骼肌磷酸化AKT（p－AKT）（Ser473）及GLUT4的蛋白表达。结果至第5周末，与NC组比较，DM组、Met 组及Wog 组小鼠体重增加；STZ腹腔注射及灌胃后各组小鼠体重呈下降趋势，但差异均无统计学意义；至第8周末，各组小鼠体重差异均无统计学意义（P＞0.05）。与药物干预前比较，Met组及Wog 组药物干预后空腹血糖降低，而两组间降糖幅度无差异。与NC组比较，DM 组、Met 组及Wog 组FINS均降低，TC、HDL－C、LDL－C 分别升高，DM 组AKT、GLUT4 mRNA及蛋白表达均减少，而3组间以上指标差异无统计学意义（P＞0.05）；4组间TG差异均无统计学意义（P＞0.05）。与DM 组比较，Met组及Wog 组FINS有所升高，Met 组AKT mRNA 及蛋白表达差异无统计学意义（P＞0.05）、GLUT4 mRNA及蛋白表达增加（ P＜0.05）；而Met 组较Wog 组FINS、AKT、GLUT4的mRNA 及蛋白表达水平高（P＜0.05）。结论汉黄芩素可降低2型糖尿病小鼠的空腹血糖，可能与其上调骨骼肌AKT的基因表达及蛋白活化，增加GLUT4基因及蛋白表达，促进骨骼肌利用葡萄糖相关。
关键词： 汉黄芩素 C57BL/6J小鼠 空腹血糖 Akt/PKB GLUT4 -
PRX2和AKR1B10在二阶段化学诱发小鼠肝癌形成过程中的表达及意义
目的：探讨PRX2和AKR1B10在二阶段化学诱发小鼠肝癌形成过程中的表达及意义。方法90只C57BL/6J雄性小鼠随机分为实验组（60只）和正常对照组（30只），用DEN/CCl4/乙醇诱发小鼠肝癌。于第4周、第8周、第12周、第16周和第20周5个时点处死小鼠，观察其肝脏病理组织的改变，应用实时荧光定量PCR法、免疫组化SP法分别检测小鼠肝组织PRX2 mRNA和AKR1B10 mRNA及蛋白质的表达水平。结果①实验诱发小鼠肝癌过程中的第4周见肝细胞肿胀，炎细胞浸润，肝脏呈炎症病变；第8周见肝组织炎症病变加重，出现纤维组织增生及肝细胞再生；第12周见肝组织呈不典型增生；第16周有典型假小叶形成；第20周可见典型的小鼠肝癌病理改变。②化学诱癌的第4周至第20周实验组小鼠肝组织PRX2 mRNA和AKR1B10 mRNA和蛋白质的表达均高于正常对照组（P<0.05），且两者的表达水平随着时间的延长，均呈逐步升高的趋势；至第20周肝癌形成时，实验组两者的表达均显著高于癌前各时间点（P<0.05）。③在二阶段化学诱发小鼠肝癌形成过程中，PRX2 mRNA和AKR1B10 mRNA的表达水平呈正相关（r=0.674，P=0.05）。结论在二阶段化学诱发小鼠肝癌形成过程中PRX2和AKR1B10的高表达是化学诱发小鼠肝癌形成的早期事件，PRX2和AKR1B10可能在化学诱发小鼠肝癌的发生、发展和促进过程中起重要作用。
关键词： 肝肿瘤 小鼠肝癌 C57BL/6J小鼠 Prx2 AKR1B10
