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低pH值条件下叙利亚地鼠胚胎细胞体外转化试验的研究
叙利亚地鼠胚胎(Syrian hamster embryo,SHE)细胞体外转化系统是一种有效的体外检测化学物潜在致癌性的细胞转化系统[1],但是传统的SHE细胞转化试验在用于致癌物的常规筛选方面存在一定的困难.近年来,国外实验室采用低pH值条件下培养SHE细胞获得成功,使致癌物的检出率有所增加[2].本实验室采用低pH值条件下培养SHE细胞,以苯并(a)芘为受试物,探讨研究SHE细胞体外转化系统的建立.
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诊断剂量彩色多普勒超声对小鼠早孕胚胎组织细胞安全性的影响
目的:检测诊断剂量彩色多普勒超声不同时间照射后对早孕小鼠胚胎组织细胞凋亡及超微结构的影响.方法:应用3.5MHz探头固定持续照射孕鼠腹部,24小时后取出标本,琼脂糖凝胶电泳观察不同照射时间的DNA片段情况及细胞超微结构的变化.结果:琼脂糖凝胶电泳显示,除对照组外,其余3组均出现凋亡梯形,且随时间的延长,梯形越明显.电镜结果显示,除对照组外,其余各组均可见不同程度的凋亡特征改变:细胞核变形,染色质稀疏;线粒体变形、肿胀、嵴模糊、消失、部分空泡化;内质网网腔扩张,核糖体部分脱落;凋亡小体形成.结论: 诊断超声持续照射小鼠胚胎可引起胚胎组织细胞凋亡及超微结构的变化,且这种影响有时间依赖性.
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超声波对鼠胚胎生长发育及其分泌生长因子的影响
目的:研究超声波对小鼠胚胎生长发育及其分泌表皮生长因子(EGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、胰岛素样生长因子-Ⅱ(IGF-Ⅱ)功能的影响.方法:将正常及经超声波照射组的小鼠二细胞胚胎体外培养至囊胚期,观测其生长发育状况, 同时用放免法/酶免法检测胚胎培养液中EGF、TGF-β1、IGF-Ⅱ的含量并进行比较,用原位杂交法检测两组胚胎TGF-β1mRNA的表达. 结果:1、两组胚胎的各项形态学指标比较,差异非常显著(P<0.01).2、正常组胚胎培养液中EGF、IGF-Ⅱ的含量显著高于超声波照射组(P<0.01),且EGF、IGF-Ⅱ含量与胚胎生长发育的形态学指标呈正相关.3、两组胚胎培养液中TGF-β1含量差异无显著性(P>0.05),但超声波照射组TGF-β1mRNA表达明显弱于正常组.结论:超声波能对早期胚胎造成损伤,合成、分泌生长因子功能下降,从而使其生长发育受阻.
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不同频率诊断超声对小鼠早孕胚胎组织细胞凋亡影响的对比研究
目的检测诊断超声不同频率,相同时间照射后对早孕小鼠胚胎组织细胞凋亡影响的差别.方法应用频率3.5MHz和频率6.5MHz的探头固定持续照射孕鼠腹部,不同频率的照射组又分为0min组,5min组,15min组,30min组,24小时后取出标本,琼脂糖凝胶电泳观察不同频率照射后DNA片段情况.结果频率为3.5MHz探头照射组,均出现凋亡梯形,且随时间的延长,梯形越明显;频率为6.5MHz照射组,15min照射组开始出现凋亡梯形,30min照射组凋亡梯形更趋明显.结论不同频率诊断超声持续照射小鼠胚胎可引起不同程度的胚胎组织细胞凋亡,预测使用经阴道高频超声探头检查在诊断中相对更安全.
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Survivin在正常睾丸中的表达和定位
Survivin是1997年由耶鲁大学的Ambrosini等[1]利用效应细胞蛋白酶受体-1(effector cell protease receptor-1,EPR-1)的cDNA在人类基因组库中筛选克隆的一种凋亡抑制基因.Survivin蛋白属于凋亡抑制蛋白(IAP)家族成员,在大多数肿瘤中高表达,在成体已分化的正常组织细胞中几乎检测不到.然而,Survivin不仅仅是一个肿瘤特异性蛋白,有实验证明在鼠胚胎处于分化状态的组织中可以检测到Survivin的表达[2],而且在成体造血系统中也可表达Survivin[3].本研究采用免疫组织化学显色方法检测了不同年龄段人的正常睾丸组织中Survivin蛋白的表达定位,以探讨其在正常生精过程中的作用.
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卵子可"批量生产"男人能"产卵"生子
2003年5月2日,一位美国教授在世界权威科学期刊<科学>杂志撰文称,他们已经将盛放在实验室器皿中的普通老鼠的胚胎细胞转变成了卵细胞,妇女生育的生物钟将不再有效,生育专家将可无限量向绝经妇女提供卵子,这项研究将有助于缓解不育诊疗的卵子短缺状况.美国费城大学的斯科勒尔教授领导的研究组宣布,他们从早期雄鼠及雌鼠胚胎中提取干细胞,并在实验室环境下利用这些干细胞成功培育成卵子,随后又育成胚胎.
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胰岛素样生长因子-1受体在肿瘤细胞的内化和泛素化分析
我们采用免疫印迹法(Western blot)、免疫沉淀技术(IP)和流式细胞仪(FACS)技术对鼠胚胎成纤维瘤三种细胞株胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)的内化进行检测,探讨IGF-1R的内化在受体下行调节和β-arrestin在IGF-1R蛋白内化/泛素化降解中的作用.
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胎肝造血前体细胞特征及其临床应用的研究进展
肝脏是胎儿时期的主要造血器官,鼠胚胎12~15 d[1,2]和人胚胎6周至4月是肝脏造血活跃期.在个体发育阶段上,胎肝造血干细胞(HSCs)较骨髓造血干细胞原始;从生理需求角度讲,骨髓HSCs的功能是维持终生造血稳定,其分裂采取群体不对称方式,因此骨髓HSCs数目在人体内保持恒定.而胎肝造血是处于由胚胎造血系统分化形成转向为胎儿日益扩张的循环容量和氧需提供足够红细胞的过渡时期,因此,胎肝HSCs有一个对称分裂以增加自身数目的性能和过程,以便为终生造血稳定提供足够的干细胞贮备[1,3,4].因此可以推测,胎肝造血前体细胞在增殖潜力、多系分化和自我更新能力方面应该比骨髓相应细胞更具优势.本文就近年有关胎肝造血前体细胞生物学特征及其临床应用方面的进展作一综述.
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心脏营养素-1与心血管疾病的关系
心脏营养素-1(cardiotrophin-1, CT-1)是Pennica[1]等于1995年利用鼠胚胎干细胞模型克隆的一种促心肌细胞肥大因子,属于IL-6家族/糖蛋白130受体偶联的细胞因子家族[2],发现其不但在心脏发育和促心肌细胞肥大中有重要作用,且能拮抗心肌损伤,对周围血管有扩张作用,为一参与心血管疾病发生与发展的重要细胞因子,本文现将其研究成果综述如下.
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小鼠不同胎龄全胚切片标本的制作与观察
用小白鼠胚胎制成标本,作为教学或科研的实验材料,具有很多有利条件.小白鼠出生后2~3个月即达成熟;妊娠时间较短,仅19~21 d;每胎产仔一般为8~10只,属于高产实验动物,故在短期内可获得较多的实验标本.许多实验室用妊娠小白鼠作为实验材料,进行发育生物学、胚胎致畸学及各种药物筛选等研究[1-4].
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诊断级超声对活鼠胚胎生物学效应的研究进展
超声波是一种波动形式,它可以用于探测人体的生理和病理信息.超声波又是一种能量形式,当达到一定剂量的超声波在生物体系内传播时,通过它们之间的相互作用,可能引起生物体系的功能、结构或状态发生变化,即超声生物效应.超声波是通过热作用、机械作用和空化作用产生其生物效应,对于诊断超声对胎儿的生物学效应,国内外学者做了不少研究,目前主要集中在对胎儿的内耳、绒毛组织、脑组织、骨髓淋巴细胞的影响等方面[1].