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天然产物与体外杀精
全球每年有2亿多妊娠发生,其中50％是计划外妊娠[1],因此避孕药的研发一直备受关注.杀精子剂在性交前用于阴道以避免妊娠,是一种可由女性主动采用的避孕措施.壬苯醇醚(N-9)是目前市场上占据主要地位的杀精子剂,但N-9会损伤阴道上皮细胞[2]并提高患艾滋病的风险[3～6],而天然产物则具有更好的安全性[7,8].天然产物是指动物、植物、微生物,包括昆虫、海洋生物等的身体组成成分或其代谢产物.研究发现,多种天然产物,尤其是天然植物化合物具有体外杀精活性,可能研发为阴道用避孕剂.从化学结构看,目前发现的天然产物杀精剂可归为皂苷类、氨基酸类、生物碱类、多酚类等,本文就近年来发现的具有杀精活性的天然产物做一综述.
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燕窝真假鉴定技术研究
目的 探索燕窝真假鉴定技术. 方法 分别利用紫外光谱法和氨基酸分析法鉴定燕窝真假,再用液相色谱一串联质谱抽样确证所得结果. 结果 真燕窝在280nm有大紫外吸收.真燕窝氨基酸含量高,而掺杂银耳、猪皮等的假燕窝氨基酸含量低.真燕窝的Asp、Leu、Tyr、Glu、Val、Ser、Phe 比例偏高,而假燕窝的Ile、Giy、Ala比例偏高. 结论 紫外光谱法和氨基酸分析法鉴定燕窝真假具有可行性.
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复合氨基酸胶囊提高缺氧耐受力研究
为观察复合氨基酸胶囊(谷氨酰胺、精氨酸、支链氨基酸)对提高小鼠缺氧耐受力功能的影响,选用3批共132只雌性昆明种小鼠,每批分为低、中、高剂量组和阴性对照组,每组11只,分别灌胃0.42、1.68、2.52g/kg BW d-1的受试物和同等量蒸馏水,共30 d.实验结束后进行常压耐缺氧实验、急性脑缺血性缺氧实验、亚硝酸钠中毒存活实验3项实验.结果表明:与对照组比较,3个剂量组亚硝酸钠中毒存活时间明显延长(P＜0.01),1.68、2.52g/kgBW d-1剂量组急性脑缺血性耐缺氧时间也明显延长(P＜0.05).在本实验条件下,该复合氨基酸胶囊能提高小鼠缺氧耐受力.
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PAG内微量注射OFQ并同时电针对脊髓背角单胺类和氨基酸类递质释放的影响
我们以往的工作表明,大鼠中脑导水管周围灰质(PAG)内微量注射孤啡肽(OFQ)对抗针刺镇痛;并使脊髓背角谷氨酸(Glu)释放增加,ν-氨基丁酸(GABA)、5羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)释放减少;脊髓背角广动力范围(WDR)神经元的C-纤维反应和后放电增多.本研究的目的是采用核团内注射、微透析加高效液相电化学检测的方法,观察PAG内微量注射OFQ并同时电针,对大鼠脊髓背角单胺类和氨基酸类递质释放的影响.
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半夏的HPLC指纹图谱研究
半夏Pinelia ternate(thumb)Breit为天南星科植物的干燥块茎,具有燥湿化痰,降逆止呕,消痞散结之功效,主要含鸟苷、腺苷、胆碱、盐酸麻黄碱等化学成分,当前对半夏的研究主要是含量测定和以氨基酸类成分为主的指纹图谱的研究,但由于药材各产地生境不同,其化学成分出现差异,为更好地控制其生产的质量,本研究根据鸟苷具有改善心脑循环,防止心率失常等作用,选其作为参照物,采用HPLC确定半夏药材的指纹图谱,作为半夏药材的质量控制方法.
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7株TT病毒部分核苷酸及氨基酸序列分析
目的了解TT病毒(Transfusion transmitted virus,TTV)在我国的流行情况,研究我国TTV株序列特点.方法采用半巢式聚合酶链反应(PCR)扩增TTV DNA,PCR阳性扩增产物直接测序.结果我国7例TTV DNA株部分序列与日本株相比,核苷酸及氨基酸同源性分别为64.7%～98.4%及62.7%～96.4%;7株间的核苷酸及氨基酸同源性分别为63.5%～98.4%及60.2%～96.4%,分别属于两种型及其中一型中的两种亚型.结论我国存在TTV并可能存在多种TTV基因型.
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不同孔径精密输液器对氨基酸所致静脉炎的影响
目的 探讨不同孔径的精密输液器对氨基酸所致静脉炎的影响以及滴速达标情况.方法 将90例患者随机分为2组,均以30滴/min的滴速静脉输注氨基酸,A组(n=45)采用5μm孔径的精密输液器,B组(n=45)采用3μm孔径的精密输液器,观察2组输液滴速达标情况和静脉炎的发生率.结果 2组输液滴速均达标.A组发生静脉炎10例,B组2例,两组差异有统计学意义(P<0.01).结论 采用3 μm孔径的精密输液器可以显著减少静脉炎的发生.
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自制复合氨基酸酊剂用于静脉穿刺输液止痛
静脉输液是临床为常用的治疗手段之一,因静脉穿刺属有创治疗,穿刺时的疼痛反应是造成患者心理恐惧不愿首选这一疗法的主要因素.为大限度地减轻这一痛苦,我们试用混合酊剂作减痛药物,于穿刺前使用,效果满意,现总结如下.
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支链氨基酸不良反应
1 寒颤、发热男,33岁.因乙肝给予支链氨基酸250 ml静滴,滴度为30滴/min,滴入本品约50 ml时,突然出现畏寒、寒颤、发热,t39.2℃,未引起重视,次日再次静滴本品,于输液50 ml时,再次出现上述症状.即停药,更换其他液体,并给予抗过敏治疗,症状逐渐缓解[1].
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复方氨基酸不良反应
复方氨基酸为肠道外营养药,临床应用广泛,近年来国内有文献报道其不良反应,现摘要如下.1恶心、呕吐女,62岁.因席汉氏综合征人院,因全身无力、纳差给予复方氨基酸注射液静脉滴注,输入2h左右,约200 ml时,患者出现颜面潮红,随之恶心、呕吐,呕吐物为粉红色胃内容物约40ml.即停药,予对症治疗,约15 min症状缓解[1].
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破伤风抗毒素与支链氨基酸不宜配伍
破伤风抗毒素系破伤风类毒素免疫马所得的血浆,经胃酶消化后纯化制成的液体抗毒素球蛋白制剂,本品含特异性抗体,具有中和破伤风毒素的作用,可用于破伤风杆菌感染预防.
关键词： 破伤风抗毒素/药理学 氨基酸类 支链/药理学 药物配伍禁忌 -
维持性血液透析患者的氨基酸平衡及管理对策
很多维持性血液透析患者存在消耗状态或营养不良，对血液透析患者的氨基酸谱进行测定是了解患者营养状况的一个重要方面，对于开展营养治疗和补充必需氨基酸具指导意义。本文将概述维持性血液透析对患者氨基酸水平的影响，并分析患者氨基酸失衡的原因，介绍氨基酸失衡的评价指标及管理对策。
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酒精依赖对大鼠边缘系统不同位置氨基酸含量的影响
目的探讨酒精依赖对大鼠边缘系统的不同位置的谷氨酸（ glutamic acid，Glu）、天门冬氨酸（aspartic acid，Asp）、γ-氨基丁酸（GABA）、丙氨酸（alanine，Ala）含量的影响，以期筛选出氨基酸受影响明显的部位。方法利用6％的酒精含量的纯净水作为惟一饮用来源持续喂养25只大鼠4周，然后进行突然戒断筛选出形成酒精依赖的大鼠15只作为实验组，同时选择15只大鼠利用饮用水进行同期喂养作为对照组。断头取脑后选择左侧海马、扣带回、伏隔核和双侧杏仁核、丘脑前核组织，氨基酸分析仪测定各组部位的氨基酸递质含量变化，并分析Glu/GABA 的比值变化。结果4周后实验组酒精戒断评分在12分以上者占88％，戒断症状出现在停止饮用酒精饮料后11～27 h。实验组杏仁核和丘脑前核的4种氨基酸与对照组比较均有统计学差异（ P＜0.05），海马部位实验组两种抑制性氨基酸均明显下降，实验组扣带回的GABA、Asp和伏隔核的Glu、Asp与Ala含量明显低于对照组。海马和杏仁核Glu/GABA含量实验组较对照组均有提高（ P＜0.05）。结论酒精依赖大鼠多个部位的氨基酸含量下降，其中海马和杏仁核的Glu/GABA增高，兴奋性相对增强。
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儿童脑脊髓液氨基酸及酰基肉碱参考范围的初步建立
目的 初步建立儿童脑脊髓液氨基酸及酰基肉碱参考范围,为临床诊治遗传代谢病提供依据.方法 回顾性分析了采用串联质谱检测2010至2014年间来上海交通大学医学院附属新华医院儿科就诊的152例癫痫儿童脑脊髓液中氨基酸及酰基肉碱水平,分析其与年龄、性别的相关性;分析其中60例儿童脑脊髓液与血液氨基酸及酰基肉碱水平的差异.数据采用方差分析、Wilcoxon秩和检验及Spearman相关分析.结果 初步建立了儿童脑脊髓液氨基酸及酰基肉碱参考范围.血甲硫氨酸水平为18.66(15.24 ～ 24.11) μmol/L,戊二酰基肉碱水平为0.03(0.02 ～0.04) μmol/L,与脑脊髓液水平[23.41(13.80 ～28.58) μmol/L、0.03 (0.02～0.04) μmol/L]相近,差别无统计学意义(Z值分别为-0.69、-0.09,P均＞0.05);血精氨酸水平为3.82(2.00 ～8.36) mol/L,低于脑脊髓液水平[38.37(34.15 ～48.41) μmol/L],差别有统计学意义(Z=-6.74,P＜0.05);其余9种氨基酸、13种酰基肉碱血液浓度均高于脑脊髓液浓度,差异有统计学意义(P均＜0.05).结论 本研究初步建立了脑脊髓液氨基酸、酰基肉碱参考范围.
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应用百分位数法联合 ROC 曲线探讨建立新生儿11种氨基酸非衍生化串联质谱法的正常值范围
目的：探讨如何确定实验室的非衍生化串联质谱法11种氨基酸正常值范围。方法收集南京市妇幼保健院分娩的22430名健康新生儿及14例氨基酸代谢障碍性疾病患儿的11种氨基酸初次筛查数据，其中包括有丙氨酸（Ala）、精氨酸（Arg）、瓜氨酸（Cit）、甘氨酸（Gly）、异亮-亮氨酸（Leu＋Ile）、蛋氨酸（Met）、鸟氨酸（Orn）、苯丙氨酸（Phe）、脯氨酸（Pro）、酪氨酸（Tyr）、缬氨酸（Val），将所得到的新生儿氨基酸数据设定成不同的临界值，应用百分位数法并结合ROC曲线法确定该11种氨基酸的正常值范围。结果频数分布直方图提示除精氨酸呈偏态分布以外，其余10种氨基酸近似正态分布，确定0.2％～99.8％作为该11种氨基酸的佳百分界值。结论百分位数法结合ROC曲线法可用于确定新生儿氨基酸非衍生化串联质谱法的参考值范围，为其他筛查中心制定其实验室的截断值提供了参考依据。（中华检验医学杂志，2016，39：756-760）
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串联质谱两种前标本处理法检测新生儿氨基酸的比较研究
目的 比较串联质谱两种前标本处理方法(衍生化法和非衍生化法)检测新生儿滤纸干血片上丙氨酸(Ala),精氨酸(Arg),瓜氨酸(Cit),甘氨酸(Gly),亮氨酸(Leu),甲硫氨酸(Met),鸟氨酸(Orn),苯丙氨酸(Phe),酪氨酸(Tyr),缬氨酸(Val) 10种氨基酸水平分布和差异,为实验室开展新生儿氨基酸代谢障碍疾病筛查提供方法学依据.方法 方法比较研究.选择2012年1至6月在上海市儿童医院新生儿筛查中心进行遗传代谢性疾病筛查滤纸干血片标本,共计4135份.采用衍生化法和非衍生化法及相应试剂盒:(1)同时检测100份新生儿滤纸干血片标本,以配对方式比较10种氨基酸水平之间差异；(2)分别各自检测2000份正常新生儿滤纸干血片标本,了解正常新生儿10种氨基酸水平分布；(3)同时检测经临床确诊的7种氨基酸代谢异常标本35份,验证两种方法临床判断的一致性.采用配对t检验.结果 正常新生儿的10种氨基酸水平经K-S单标本正态分布检验,Z值在1.997 ～6.229之间,呈偏态分布(P＜0.01)；除Leu和Tyr外,其余8种氨基酸非衍法比衍生法检测浓度低,两种方法检测均值差异,除Met高达47.8％外,其他9种氨基酸水平差异均＜10％,平均为7.8％；除Met、Phe和Tyr,两种方法测得的7种氨基酸水平差异无统计学意义(P＞0.05)；以0.5～99.5百分位数建立的10种氨基酸正常参考值范围,衍生法均比非衍法高,平均高25.3％,正常参考值范围有重叠；经临床验证,对于确诊患儿异常指标的检测,两种方法间无统计学意义(P＞0.05),两种方法均能检测出疾病患儿,检出率均为100％.结论 衍生法和非衍法检测多种氨基酸水平有差异,但对氨基酸代谢障碍疾病的异常指标的检测结果无差异,对疾病的临床判断无影响；两种方法均可用于新生儿氨基酸代谢障碍疾病的筛查.
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高效毛细管电泳法快速测定血清中游离氨基酸
目的建立快速测定人血清中游离氨基酸的方法.方法用高效毛细管电泳法检测了40例健康人,32例肾病患者血清氨基酸.结果在8分钟内分离16种氨基酸,线性在10～700 μmol/L范围,低检出限为2.5～7.9 μmol/L,回收率为86.3%～107.4%,批内精密度为2.8%～10.3%,批间精密度为3.5%～11.6%.对32例肾脏病患者血清中氨基酸测定结果与40例正常人对照组氨基酸测定值进行统计分析.结论高效毛细管电泳法具有快速、准确、灵敏等特点,为临床及科研工作中测定氨基酸提供了一种有效的方法.
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汉坦病毒M基因区核苷酸序列及G1膜蛋白部分氨基酸共享序列分析
目的对青岛地区31株汉坦病毒分离株M区基因序列测定及基因分型研究,为疫苗接种提供依据.方法从64例肾综合征出血热(HFRS)患者发热期血清标本中提取RNA,应用套式逆转录聚合酶链反应扩增汉坦病毒基因组M片段,G1基因区克隆并测定核苷酸序列和部分共享氨基酸序列,且对测定结果应用DNA Star和Prosis软件进行分析.结果 64份标本中测出汉滩型(HTN)6份,占9%;汉城型(SEO)25份,占39%;总阳性率48%.SEO型汉坦病毒间核苷酸序列的差异相对较小,其基因的离散度为0.3%～8.9%.HTN型汉坦病毒变异率较高,基因的离散度为2.6%～11.2%.结论 SEO型汉坦病毒基因型相对保守,而HTN型变异率较高;M区段可编码一个具有稳定的保守抗原表位.
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高效液相色谱-荧光检测法在慢性肾功能不全患者血清芳香族氨基酸检测中的临床价值
目的 建立同时测定血清AAA含量的HPLC-FLD法，探讨CRI患者血清AAA含量变化及其临床应用价值。方法血清标本来自于100名健康体检者和80例CRI患者。将CRI患者按2002年美国肾脏基金会(NKF)诊断分期标准进行分期：CKD 2期4例、CKD 3期12例、CKD 4期12例和CKD 5期52例；按CRI不同病因分组：慢性肾炎型32例、糖尿病型36例和高血压型12例。血清经高氯酸去蛋白后，离心取上清液测定，外标法定量。采用Megres C18色谱柱，流动相为乙腈：水（体积比为1∶9），流速为1.0 ml/min,荧光检测器在不同时间段设定特定波长对血清AAA进行测定。对健康对照组和CRI患者组血清中AAA总量、Tyr、Phe和Trp含量及不同分期和不同病因CRI患者血清Tyr、Phe和Trp含量进行比较，同时评价血清AAA总量诊断CRI的敏感度与特异度。结果Tyr、Phe和Trp线性范围分别为0.550～275.000、3.050 ～1 220.000和0.049～49.000 μmol/L，低检测限分别为0.014、0.500和0.005 μmol/L,平均回收率分别为100.9％、101.3％和98.5％，日内精密度为2.32％～3.92％（平均为3.13％），日间精密度为3.18％ ～4.20％（平均为3.58％）。CRI患者组血清AAA总量、Tyr、Trp含量及Tyr/Phe比值分别为(135.74±12.23)、(52.27±8.25)、(21.49±4.25) μmoL/L和[0.87（0.68 ～1.05）]，低于健康对照组的(174.47±11.57)、（63.53±4.68）、(44.22±3.67) μmol/L和[0.97（0.94～1.00）]，差异均有统计学意义（t=- 14.709、4.452、22.100,U=266.000,P均＜0.05）。不同分期CRI患者Tyr、Phe和Trp含量差异无统计学意义；Tyr含量在慢性肾炎组、高血压组和糖尿病组间差异无统计学意义，Phe在慢性肾炎组与高血压组、慢性肾炎组与糖尿病组间差异有统计学意义（U= 114.00、395.00，P均＜0.05），Trp在慢性肾炎组与糖尿病组间差异有统计学意义(U=349.00,P＜0.05)。血清AAA总量诊断CRI的敏感度、特异度分别为90％ (72/80)和100％ (100/100)。结论HPLC-FLD法测定血清AAA简便、快速，敏感度高及特异度好，同时测定血清AAA含量对CRI患者的诊断和评价有一定价值。
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人类免疫缺陷病毒/艾滋病患者中和抗体保守表位氨基酸变异研究
目的探讨人类免疫缺陷病毒/艾滋病(HIV/AIDS)患者中和抗体保守表位氨基酸变异特征,为开展中和抗体免疫治疗和疫苗设计奠定理论基础.方法 RT-PCR及nest-PCR扩增HIV/AIDS患者HIV-1 外膜env C2～C3区基因,双脱氧终止法进行核酸序列测定,翻译为氨基酸序列,并与HIV-1 Sequence Database参考毒株中和抗体表位数据比对辨别其保守表位氨基酸突变情况.结果 HIV-1外膜蛋白gp120 C2～C3区,HIV感染者和AIDS患者CD4结合位点(CD4BS)、CD4诱导(CD4i)、2G12三种类型中和抗体保守表位氨基酸均存在突变,两组病例表位突变率差异无统计学意义(均P＞0.05); CD4BS保守表位突变有370E/Q (12.1%),370E/K (4.5%),266A/S (1.5%), 368D/E (1.5%); CD4i保守表位突变有370E/Q (12.1%),370E/K (4.5%), 381E/D (7.6%),381E/V(1.5%);2G12保守表位突变有295N/V(19.7%),295N/T (6.1%),295N/D、295N/K、295N/E (各1.5%),297 T/I (9.1%),297T/S、297T/N(各1.5%).结论我国HIV/AIDS患者HIV-1 外膜蛋白gp120 C2～C3区中和抗体CD4BS、CD4i、2G12保守表位氨基酸均存在突变,但尚处于低突变水平;不同类型中和抗体保守表位各氨基酸位点的变异程度有差异.
关键词： 人类免疫缺陷病毒 获得性免疫缺陷综合征 氨基酸类
