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大豆黄酮和染料木素对大鼠乳腺癌细胞体外生长的抑制试验
大豆黄酮(Daidzein)和染料木素(Genistein)是天然存在于豆科植物及其制品中的异黄酮类物质,具有多重生物学活性.本实验观察了两者对SHZ-88大鼠乳腺癌细胞株在体外生长的抑制效应.
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大豆异黄酮的药理作用Ⅰ
大豆异黄酮包括金雀异黄素(Genistein)、大豆甙元(Daidzein,又称大豆黄酮)及其相应的葡萄糖甙:金雀异黄甙(Genistin)和大豆甙(daidzin),天然状态下多以甙的形式存在.大豆及大豆制品都含有异黄酮,如大豆粉中含2014μg/g,豆腐中含531μg/g干重,大豆分离蛋白中含987μg/g,大豆农缩蛋白中含73μg/g,大豆速溶饮料中含1918μg/g干重[1].流行病学调查和生物医学研究均发现大豆及大豆制品有广泛的生物功效,如防治癌症、降低血脂、抗动脉粥样硬化和改善妇女更年期症状等,这均和它所含大豆异黄酮有关.本文对大豆异黄酮的主要药理作用作一综述.
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大豆黄酮血管舒张作用与血管内皮的关系
目的研究植物雌激素大豆黄酮(daidzein,Dai)的舒张血管效应与血管内皮M受体,细胞内、外钙的关系.方法采用家兔离体主动脉环进行等长张力实验.结果Dai-3～100μmol·L-1)对苯肾上腺素(phenylephrine,PHE)依内Ca2+性收缩和依外Ca2+性收缩均具有显著的抑制作用;Dai(10～100 μmol·L-1)可使KCl的量效曲线右移,大效应降低;Dai(10～100μmol·L-1)对ACh引起的血管环的舒张反应有浓度依赖性的增强作用,且在用阿托品阻断M受体后Dai对KCl引起的收缩的舒张效应减弱.结论Dai舒张血管效应与抑制内Ca2+释放和外Ca2+内流有关;Dai对血管环的直接舒张作用与ACh相似,也是通过激动内皮上的M受体释放EDRF等而引起的,且具有内皮依赖性.
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大豆黄酮对人肝癌SMMC7721细胞己糖激酶活性和癌干细胞CD133蛋白水平的影响
目的 探讨大豆黄酮对肝癌SMMC7721细胞糖代谢和癌干细胞CD133基因表达的影响.方法 培养人肝癌SMMC7721细胞并用大豆黄酮处理.MTT法测定细胞的成活率,用试剂盒法测定人肝癌SMMC7721细胞中的己糖激酶活性,并用Western Blot方法测定癌干细胞CD133蛋白的水平.结果 大豆黄酮对人肝癌SMMC7721细胞增殖具有抑制作用,同时,可降低人肝癌SMMC7721细胞中己糖激酶活性和癌干细胞CD133蛋白的水平.结论 大豆黄酮能抑制人肝癌SMMC7721细胞的增殖,降低人肝癌SMMC7721细胞中己糖激酶活性和癌干细胞CD133蛋白的水平.
关键词： 大豆黄酮 人肝癌干细胞 MTT CD133蛋白 Western blot -
葛根及其提取物治疗心脑血管疾病药理和临床研究进展
葛根始载于《神农本草经》，列为中品，为豆科植物野葛和粉葛的干燥根，具有解肌退热、生津透疹、升阳止泻的功效，其化学成分复杂。含有异黄酮、葛根素、葛根素木糖苷、大豆黄酮、大豆黄酮苷及β-谷甾醇、大豆苷、大豆苷元、多量淀粉等。主要有效成分为大豆苷元和葛根素，现已人工合成［1，2］。葛根的临床应用非常广泛，对心脑血管疾病、消化系疾病、视网膜疾病具有良好疗效。本文就葛根及其提取物治疗心脑血管疾病的药理和临床研究作一简要综述。1 药理研究1.1 对冠脉循环的作用葛根水煎剂、酒浸膏、总黄酮、葛根素均有明显的扩张冠脉血管的作用。正常狗静注30 mg/kg总黄酮，其冠脉血流量增加40%，血管阻力降低29%，且这种作用随剂量的增加而增加［3］，葛根素的作用要强于总黄酮。从急性心肌缺血狗的右室旁路静注葛根素15～20 mg/(kg·min)，连续15 min使进入缺血区冠脉侧枝血流量增加，非缺血区的冠脉血流量亦增加［4］，利血平给药后，总黄酮和葛根素对冠脉循环的作用仍保持，表明其作用是通过直接松弛血管平滑肌而实现的。此外，总黄酮和葛根素能对抗垂体后叶素引起的大鼠急性心肌缺血。
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大豆黄酮对痴呆模型神经元的抗凋亡作用
目的 观察大豆黄酮对神经元细胞内三种与老年痴呆相关蛋白(淀粉样前体蛋白(APP)、β-分泌酶(BALE)、一氧化氮合酶1(NOS1)的表达影响.方法 用新生24 h内的SD大鼠,经解剖分离海马,培养海马神经元细胞,生物性状稳定时,用于实验.实验分5组,分别为正常对照组、硝普钠(SNP)诱导凋亡组及三种浓度的大豆黄酮预处理组.培养至第11-12 d使用免疫组化法对海马神经元进行鉴定,并对5组细胞分别进行上述三种痴呆相关蛋白的免疫化学染色分析,采用显微照像系统对免疫组化后的细胞照相,然后通过Digital Imaging System v1.6对细胞免疫组化的图片测出阳性区平均灰度值,进行统计分析.结果 1.成功建立了SD大鼠海马神经元体外培养模型,并建立了SNP诱导的体外培养海马神经元凋亡模型;2.细胞免疫化学染色显示大豆黄酮在试验范围内有剂量依赖关系.与对照组相比,SNP处理的海马神经元的APP,BACE,NOSI的表达显著增加(P<0.05);与SNP组相比,低、中浓度大豆黄酮组的细胞内APP和NOSI的表达水平显著降低(P<0.05),高浓度大豆黄酮组的细胞内APP,BALE,NOSI的表达水平显著降低(P<0.05).结论 成功建立了SNP诱导的体外培养海马神经元凋亡模型,大豆黄酮具有抑制神经元凋亡作用,其机制与通过抑制细胞内淀粉样前体蛋白、β-分泌酶和神经型一氧化氮合酶的产生密切相关.
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二仙汤及大豆黄酮对绝经综合征模型大鼠卵巢形态学及功能的影响
目的:通过复制酒精性更年期综合征大鼠模型,观察二仙汤及大豆黄酮对该模型大鼠卵巢形态学及功能的影响,探讨两种药物对绝经综合征症状改善的机理.方法:卵巢注射无水乙醇法制备绝经综合征SD大鼠模型,以戊酸雌二醇作为阳性对照药,测定血清E2(雌二醇)及FSH(促卵泡生成激素)含量,肉眼及HE染色显微镜下观察卵巢的形态学改变,并检测卵巢雌激素受体β.结果:灌胃4周后,除模型组外,各组体重均增加.二仙汤组与模型组比较,SD大鼠血清E2水平明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01).二仙汤组、大豆黄酮组与模型组SD大鼠血清FSH水平比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).肉眼及HE染色观察卵巢与子宫结果示:除假手术组外,均发生明显异常;二仙汤组卵巢部分组织有成熟卵泡、囊腔有新生组织出现;大豆黄酮组卵巢初级、次级卵泡较多,囊腔有大量新生组织出现,子宫结缔组织致密.各组卵巢雌激素受体β比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论:二仙汤能明显升高绝经综合征大鼠模型血清E2水平,促进卵巢卵泡成熟及囊腔新生组织出现;大豆黄酮能促使卵巢初级、次级卵泡增多及囊腔新生组织大量出现,增加子宫结缔组织致密性.本研究为二仙汤、大豆黄酮对绝经综合征症状改善提供理论基础.
关键词： 二仙汤 大豆黄酮 酒精性更年期综合征模型 E2及FSH 卵巢形态学 -
大豆异黄酮对大鼠睾丸支持细胞的影响
目的:研究大豆异黄酮对体外培养的大鼠睾丸支持细胞(sertoli cells,SCs)增殖以及卵泡雌激素受体(follicle-stimulating hormone receptor,FSHR)、抑制素α亚基(inhibinα,INHα)、抑制素βB亚基(inhibinβB,INHβB)、雄激素结合蛋白(androgen binding protein,ABP)、转铁蛋白(transferrin,Tf)和波形蛋白(vimentin) mRN水平的影响.方法:体外培养大鼠SCs,用0.03,0.3,3及30 μmol/L的大豆黄酮(daidzein,Dai)和0.05,0.5,5及50 μmol/L的染料木黄酮(genistein,Gen)处理细胞,MTT检测细胞增殖,实时荧光定量PCR检测FSHR,INHα,INHβB,ABP,Tf和vimentin mRNA的相对表达量.结果:与对照组相比,其余各组细胞增殖和INHβB,ABP mRNA相对表达量差异均无统计学意义(p＞0.05),Dai (0.3及3μmol/L)和Gen (0.05 μmol/L)组INHα mRNA表达增加,Dai (30 μmol/L)和Gen所有浓度组的FSHR mRNA表达下降,Dai (30 μmol/L)和Gen(5μmol/L和50 μmol/L)组Tf mRN表达下降,Dai(3μmol/L及30 μmol/L)和Gen (50 μmol/L)组vimentin mRN表达下降.结论:大豆异黄酮可能通过抑制SCs重要功能蛋白的mRNA转录而影响其功能发挥,从而对雄性生殖系统产生负面影响.
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大豆黄酮对重组人蛋白激酶CK2全酶的抑制作用及其动力学分析
目的:体外观察大豆黄酮对重组人蛋白激酶CK2的抑制效果及酶动力学分析以确定其抑制作用类型.方法:利用基因工程技术进行克隆、表达和纯化,获得重组人CK2的α'及β亚基在体外等摩尔混合构成CK2全酶,并测定大豆黄酮对酶的抑制作用及采用IC50结果的回归方程分析其动力学.结果:大豆黄酮能显著抑制重组人蛋白激酶CK2的活性(IC50 =2.38 μmol/L),抑制作用明显强于已知的CK2抑制剂5,6-二氯-1-β-D-呋喃核糖苯并咪唑(DRB) 和N-(2-氨乙基)-5-氯萘-1-硫胺(A3).酶动力学分析表明,大豆黄酮与ATP(Ki=3.02μmol/L)及酪蛋白(Ki = 2.22μmol/L)均呈混合型抑制CK2的活性.结论:大豆黄酮是一种较强的体外蛋白激酶CK2的抑制剂.
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大豆黄酮对人乳腺癌MCF-7细胞系体外增殖和细胞周期的影响
目的观察大豆黄酮对人乳腺癌MCF-7细胞体外增殖及细胞周期的影响并探讨其作用机制.方法分别采用台盼蓝拒染法、流式细胞术,在不同条件下测定大豆黄酮对细胞增殖抑制率及细胞周期分布的影响.蛋白激酶C(PKC)活性通过测定转移到CK2底物上的[γ-32P]ATP的32P的放射性活度来检测.结果大豆黄酮能够显著地抑制MCF-7细胞的体外增殖,作用24 h可使MCF-7细胞的细胞周期阻滞于G2/M期和S期.细胞内PKC活性分析表明:大豆黄酮能够显著地抑制MCF-7细胞内PKC的活性并呈剂量依赖性关系,其IC50为13.27 μmol/L.结论大豆黄酮可抑制人乳腺癌MCF-7细胞的体外增殖,其作用机制可能与细胞周期G2/M期和S期阻滞及抑制PKC的活性有关.
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黄芩素和大豆黄酮对人白血病细胞系HL-60体外增殖的抑制作用
目的观察黄芩素和大豆黄酮对HL-60细胞体外增殖的抑制作用.方法分别采用台盼蓝拒染法和MTT比色法,在不同条件下测定细胞增殖的抑制率.结果 MTT比色法并不适用于检测黄芩素和大豆黄酮对HL-60细胞体外增殖的影响.应用台盼蓝拒染法,发现黄芩素和大豆黄酮能够显著地抑制HL-60细胞的体外增殖并且呈现时效及量效关系.结论黄芩素和大豆黄酮是两种能够明显抑制HL-60细胞体外增殖,具有潜在抗白血病作用的黄酮类化合物.
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大豆黄酮玻璃体腔注射对大鼠视神经损伤的影响
目的：大豆黄酮( Daidzein)玻璃体腔内注射是否对视神经急性损伤有保护和修复作用。
方法：SD雄性大鼠72只,建立大鼠急性视神经钳夹损伤模型,随机分为正常组、PBS阴性对照组、大豆黄酮治疗组(10μmol/L,100μmol/L,1000μmol/L)、鼠神经生长因子(mNGF,100ng/mL)阳性对照组；玻璃体内注射3d后处死各组大鼠,用组织病理( HE )、免疫组化检测以及Western Blot分析来观察和评价视网膜形态变化及进行各组间视网膜 Caspase-3蛋白和 GAP-43蛋白表达的比较。
结果：与正常组和阴性对照组相比,不同浓度的大豆黄酮各治疗组和阳性对照组的视网膜形态结构较完整, Caspase-3蛋白的表达相对降低,GAP-43蛋白的表达相对较高,其差异有统计学意义(P<0.05)。
结论：大豆黄酮玻璃体腔注射对大鼠急性视神经损伤具有修复和保护作用。 -
大豆黄酮对心血管的药理作用
大豆黄酮,即大豆苷元(daidzein,二羟异黄酮,Da),是一种异黄酮类植物雌激素,主要存在于黄豆、鹰嘴豆、小扁豆和蚕豆等豆类中.大量研究表明,植物雌激素有扩张血管、抑制平滑肌增殖及抗氧化、降血脂等作用,纠正心血管疾病的危险因素如高胆固醇血症、动脉粥样硬化等[1],从而对心血管具有良好的保护效应.
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植物雌激素大豆黄酮对大鼠阴茎组织一氧化氮合酶表达的影响
目的:探讨黄酮对大鼠阴茎海绵体一氧化氮合酶(NOS)表达的影响.方法:将40只成年雄性SD大鼠,随机均分为5组.分别给予1 ml生理盐水(A组)、2 mg/kg(B组)、20 mg/kg(C组)、100 mg/kg(D组)大豆黄酮及0.1 mg/kg己烯雌酚(E组)灌胃,qd×90 d.阿朴吗啡试验评价阴茎勃起功能.免疫组化染色检测大鼠阴茎海绵体内内皮型一氧化氮合酶(eNOS)及神经型一氧化氮合酶(nNOS)表达水平的变化.结果:阿朴吗啡试验B组勃起次数(1.8±0.5次)及潜伏期(11.2±4.0 min)与A组比(2.6±0.4次;6.8±1.3 min),无显著差异(P>0.05),而C、D组勃起次数减少(1.0±0.3次;1.3±0.4次),潜伏期延长(19.0±3.8 min;17.8±4.2 min),差异有显著性(P<0.05).与A组比较,B组大鼠阴茎海绵体eNOS表达无显著变化(P>0.05),C、D组及E组表达显著减少(P<0.01);而各组nNOS的表达均无显著变化(P>0.05).结论:长期摄入较高剂量的植物雌激素大豆黄酮可导致海绵体内eNOS表达减少,这可能是大豆黄酮导致勃起功能减弱的分子机制之一.
关键词： 大豆黄酮 成年大鼠 阴茎海绵体 一氧化氮合酶(NOS) 勃起功能 -
药食皆优的野蔬——苜蓿
苜蓿,细分又有紫花苜蓿、黄花苜蓿、南苜蓿(花菜、草头、黄花菜等)、萱草花、紫苜蓿、母鸡头等俗称.为豆科草本植物,主产于湖南、江苏、山西、山东、河南、四川、安徽等地.而以湖南、江苏、山两等省产量多,质量也好.适应力极强,在河边,溪旁潮湿处,即能生长.苜蓿含有蛋白质、脂肪、膳食纤维、碳水化合物、维生素D、E、K、B1、B2、B12、尼克酸、维生素C、胡萝卜素、钙、磷、铁、镁、锰、锌、钠、铜等成分.此外,还含有苜蓿酚、苜蓿素、大豆黄酮、葡萄糖甙、果胶酸.
