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异黄酮对前列腺癌细胞及PTEN基因的影响
目的通过大豆异黄酮抑制前列腺癌PC-3和LNCaP细胞生长和相关基因表达的影响,探讨大豆异黄酮类抑制前列腺癌的机制.方法对染料木黄酮和大豆甙元作用后的雄激素非依赖型前列腺癌(PC-3)、雄激素依赖型前列腺癌LNCaP细胞的存活率、细胞毒作用、细胞周期和PTEN基因的mRNA表达等进行了研究.结果染料木黄酮和大豆甙元对PC-3、LNCaP细胞抑制效应具有时间和剂量依赖性,具有诱导凋亡和引起坏死效应;染料木黄酮能诱导PC-3和LNCaP细胞的(PTEN)表达,而大豆甙元只能诱导LNCaP细胞PTEN表达.结论PTEN基因表达的变化可能在染料木黄酮和大豆甙元抑制PC-3和LNCaP细胞中具有重要的意义.染料木黄酮和大豆甙元抑制PC-3和LNCaP细胞可能存在多种作用途径.
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叶黄素、大豆甙元以及卵磷脂对小鼠体内抗氧化体系的影响
目的 通过单独补充叶黄素、大豆甙元、卵磷脂以及三者联合补充,以观察它们对小鼠体内抗氧化体系的影响.方法 采用灌胃方法,各组持续给予受试物6周.取小鼠血清、肝组织以及脑进行与抗氧化相关的生化检验.结果 单独以及联合补充均能提高小鼠血清、脑以及肝组织中谷胱甘肽还原酶(GSH-Px)的活力,其中单独补充叶黄素能显著增加小鼠血清中GSH-Px活力(P<0.05),联合补充能显著增加肝组织中GSH-Px活力(P<0.01),且体现出一定的联合协同效应.单独以及联合补充均能提高小鼠血清、脑以及肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力,只有联合补充能显著提高血清以及肝组织中SOD活力(P<0.05),但在各组中均体现出一定的联合协同效应.单独以及联合补充均能降低小鼠血清、脑以及肝组织中丙二醛(MDA)含量.其中单独补充叶黄素能显著降低小鼠血清中MDA含量(P<0.05),单独补充大豆甙元能显著降低小鼠脑和肝组织中MDA含量(P<0.05),单独补充卵磷脂能显著降低小鼠脑和血清中MDA含量(P<0.05),联合补充对小鼠血清、脑以及肝组织中MDA含量均能显著降低(P<0.01),且在血清和脑组织中体现出一定的联合协同效应.单独以及联合补充均能显著提高小鼠大脑神经细胞膜脂流动性(P<0.05).结论 补充叶黄素、大豆甙元及卵磷脂能明显改善小鼠体内抗氧化体系、脂质代谢以及大脑神经细胞膜脂流动性.
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大豆甙元对子宫内膜癌细胞增殖的影响及其受体作用机制研究
目的 观察大豆甙元对子宫内膜癌细胞增殖及其雌激素受体(ER)表达的影响.方法 体外培养子宫内膜癌HEC-1B细胞,采用MTT法检测不同浓度大豆甙元对子宫内膜癌细胞增殖的影响,同时检测大豆甙元对启动子(ERE)调控的ERα和ER β的荧光素酶报告基因表达的影响.结果 大豆甙元对HEC-1B细胞体外增殖有明显抑制作用,其抑制作用在一定范围内呈剂量及时间依赖性.大豆甙元在低浓度时已可显著诱导报告基因luc的表达,在80 × 10-6 mol/L时达到高值;在高浓度时,其诱导作用逐渐下降;大豆甙元通过ER β介导的报告基因表达水平的升高程度强于ERα.结论 大豆甙元可抑制子宫内膜癌细胞的增殖,这种抑制作用可通过调节子宫内膜癌细胞ER α和ER β的表达、调整ERα/ER β比例而实现.
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大豆甙元对去卵巢大鼠子宫雌激素受体亚型表达的影响
目的研究大豆甙元对去卵巢大鼠的子宫重量、形态及其雌激素受体的影响.方法选择Wistar大鼠40只,随机分为假手术组、模型组、阳性对照组及大豆甙元组,每组10只,给药6周后处死大鼠,分离摘取子宫,称重,常规石蜡包埋,切片,分别进行ERα、β免疫组织化学染色及HE染色.结果大豆甙元能使去卵巢大鼠子宫重量增加,内膜增厚,并上调雌激素受体的表达,但作用弱于雌激素.结论大豆甙元具有雌激素活性.
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大豆甙元对子宫内膜癌细胞增殖的影响及其机制研究
目的 探讨大豆甙元对子宫内膜癌细胞增殖的影响及其作用机制,为临床应用植物雌激素提供理论依据.方法 体外培养子宫内膜癌Ishikawa细胞,采用MTT法检测不同浓度大豆甙元对子宫内膜癌细胞增殖的影响,同时采用RT-PCR及Western Blot方法检测细胞中雌激素受体相关受体α(ERRα)mRNΑ及蛋白水平的变化.结果 大豆甙元对Ishikawa细胞体外增殖有明显的抑制作用,并随药物浓度的增加及作用时间的延长其抑制作用逐渐增加,呈剂量及时间依赖性.低浓度(＜40 mmoL/L)大豆甙元对细胞中ERRα mRNΑ及蛋白水平无明显影响,而高浓度(≥40 mmol/L)大豆甙元可上调细胞中ERRα的表达.结论 大豆甙元可抑制子宫内膜癌细胞的增殖,这种抑制作用可能通过调控细胞中ERRα的表达实现.
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大豆甙元对去卵巢大鼠骨代谢酶及骨重建的影响
目的 探讨大豆甙元(daidzein,Daid)改善去卵巢大鼠骨代谢酶学指标及对骨重建的作用.方法 60只3月龄雌性清洁级大鼠随机分为:假手术(Sham)、去卵巢(OVX)和4个不同剂量去势+大豆甙元组(OVX-D1～IVX-D4),共6组.Sham和OVX组大鼠每日灌服等量蒸馏水,OVX-D1、OVX-D2、OVX-D3和OVX-D4四组分别灌服25、50、75和100mg/kg bw的DaM.大鼠6个月后处死,收集血液、肝脏和股骨,测定钙、磷含量及骨代谢酶学指标.结果 Daid可提高去卵巢大鼠血清Ca、P含量及超微量ATP酶的表达水平,降低血清碱性磷酸酶(ALP)、血清骨特异性抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP-5b),其作用与剂量有关.结论 服用一定剂量的Dajd,能够抑制骨代谢相关酶的表达,进而抑制去卵巢大鼠的骨形成与骨吸收,使骨吸收与骨形成作用达到新的偶联平衡,其作用机制主要是通过降低骨转换率来实现.
关键词： 抗酒石酸酸性磷酸酶-5b 碱性磷酸酶 大豆甙元 去势大鼠 -
异黄酮对PC-3细胞凋亡的诱导作用
目的: 通过观察染料木素(genistein, GS)、大豆甙元(daidzein, DA)和黄豆黄素(glycitein, GL)对前列腺癌细胞(PC-3)凋亡的影响,探讨通过膳食途径预防前列腺癌发生危险性的可行性. 方法: 将PC-3细胞在RPMI 1640培养液(含10%小牛血清)中采用开放式单层贴壁培养.实验设溶剂对照及三种受试物各三个剂量组,采用流式细胞术,DNA凋亡片段凝胶电泳和细胞HE染色法分析三种常见异黄酮类物质对PC-3细胞凋亡的影响. 结果: 与对照组相比,流式细胞仪分析结果表明,50 μ mol/L GS、75 μ mol/L DA和75 μ mol/L GL对PC-3细胞处理72 h,二倍体细胞(G1期细胞)相对减少,亚二倍体细胞峰(即细胞凋亡率)逐渐增多,即凋亡细胞比例逐渐增多;DNA凋亡片段凝胶电泳和细胞苏木素染色结果也显示,三种受试物能够诱导PC-3细胞凋亡,且这种作用存在剂量-效应关系. 结论: 异黄酮类化合物染料木素、大豆甙元和黄豆黄素均具有诱导PC-3细胞凋亡的作用,这一结果提示,该类物质是可通过诱导细胞凋亡而发挥其抗肿瘤作用的.
关键词： 染料木素 大豆甙元 黄豆黄素 前列腺癌细胞PC-3 细胞凋亡 -
叶黄素、大豆甙元及卵磷脂对小鼠认知行为影响
目的 研究叶黄素、大豆甙元、卵磷脂对小鼠认知行为的影响.方法 各组经灌胃持续给药6周,采用跳台和Morris水迷宫对小鼠进行行为学测试,取小鼠血清及脑组织进行生化检测.结果 大豆甙元组、卵磷脂组、混合组脑丙二醛(MDA)含量分别为(3.4±0.4)、(3.4±0.4)、(3.2±0.3)nmol/(mg·prot);明显低于空白对照组的(3.8±0.5)nmol/(mg·prot)(P＜0.05,P＜0.01);叶黄素组、大豆甙元组、混合组及阳性对照组Morris逃避潜伏期分别为(23.09±6.59)、(22.29±7.33)、(21.45±5.45)、(17.54±6.65)s,明显低于空白对照组的(45.80±9.70)s(P＜0.05,P＜0.05);叶黄素组、大豆甙元组、卵磷脂组、混合组脑5-羟色胺(5-HT)含量分别为(210.08±20.46)、(222.95±15.87)、(225.18+24.56)、(237.97±29.30)ng/mL,明显高于空白对照组的(171.61±32.94)ng/mL(P＜0.01),叶黄素、卵磷脂、混合组脑去甲肾上腺素(NE)含量分别为(104.09±7.63)、(106.12±7.25)、(108.84±16.94)ng/mL,明显高于空白对照组的(93.25±7.33)ng/mL,差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论 单独及联合补充对小鼠认知行为能力有不同程度改善作用.
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大豆甙元对小鼠肝癌H22瘤细胞生长抑制作用
目的 探讨大豆甙元( daidzein)诱导H22肿瘤细胞凋亡的作用及机制.方法 用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测不同剂量大豆甙元(0.1～ 150.0 μmol/L)对H22细胞增殖的影响；昆明雄性小鼠60只,随机分为6组,每组10只,腹腔注射给药,分别为模型组、对照组(不含血清的RPMI 1640培养液),低、中、高剂量大豆甙元组(大豆甙元分别为50、100、200 mg/kg),阳性对照组(环磷酰胺30 mg/kg)；给药14 d后比较各组小鼠体重、脾脏指数、胸腺指数及瘤重；采用western blot检测bax、bcl-2的蛋白表达.结果 MTT检测结果显示大豆甙元对H22细胞有抑制作用,150 μmol/L大豆甙元作用72 h,抑制率达30.3％,与低剂量组比较有明显抑制作用(P＜0.05)；大豆甙元能使Bax表达上调,Bcl-2表达下调,与对照组比较,10.0 μmol/L大豆甙元组bax表达灰度值增加50.05％,凋亡抑制基因bcl-2表达减少52.62％;中、高剂量大豆甙元组小鼠胸腺指数和脾脏指数均明显升高(P＜0.01),与模型组比较,大豆甙元各组瘤重指数下降明显(P＜0.01).结论 大豆甙元对小鼠肝癌H22细胞的生长具有明显抑制作用,可诱导H22细胞凋亡,并在一定程度上抑制小鼠移植性肿瘤的生长,增强宿主免疫功能.
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大豆及制品中大豆异黄酮的高效液相色谱分析
近来研究证明,大豆蛋白的降血脂成分可以被甲醇、乙醇等提取出来,证实是属于大豆异黄酮(Isoflavones of soybean,ISO),主要成分为染料木素(Genistein,G)和大豆甙元(Daidzein,D)及与二者对应的葡萄糖甙.为探求快速、准确测定大豆及制品中Genistein、Daidzein方法,本文应用反相高效液相色谱流速梯度荧光法检测分析了大豆及制品中大豆异黄酮含量.现报告如下.
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植物雌激素两种单体对子宫内膜腺上皮细胞作用的比较
目的探讨植物雌激素两种单体在浓度5～80μmol/L对人子宫内膜腺上皮细胞增殖的影响.方法 2003年8～12月应用胶原酶阶梯消化法,原代培养人子宫内膜腺上皮细胞,用MTT方法观察植物雌激素的主要成分金雀黄素和大豆甙元对细胞体外增殖的影响.结果低浓度的大豆甙元能促进子宫内膜腺上皮细胞轻度生长,随浓度的增加其作用明显,但当浓度达到40μmol/L,抑制细胞生长;不同浓度的金雀黄素均抑制子宫内膜腺上皮细胞的增殖.结论植物雌激素两种单体对人子宫内膜腺上皮细胞的作用是明显不同的,提示在应用植物雌激素时要考虑不同成分的差别.
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大豆甙元对去卵巢大鼠阴道和子宫形态的影响
目的研究大豆甙元对去卵巢大鼠的子宫阴道重量、形态的影响.方法选择Wistar大鼠40只,随机分为假手术组、模型组、阳性对照组及大豆甙元组,每组10只,给药六周后处死大鼠,分离摘取子宫、阴道并称取湿重,常规石蜡包埋,切片,HE染色.结果大豆甙元能使去卵巢大鼠子宫及阴道的重量增加,上皮增厚,但作用弱于雌激素.结论大豆甙元具有雌激素活性,对去卵巢大鼠的子宫及阴道有一定的作用.
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大豆甙元对慢性应激大鼠海马BDNF和NPY表达及非特异免疫调节的作用
目的：探讨大豆甙元（ Daidzein）对慢性应激抑郁模型大鼠海马脑源性神经生长因子（ BDNF）、神经肽Y （NPY）蛋白表达和非特异免疫调节作用的影响。方法：取健康成年SD大鼠40只，雄性，体质量（210±19）g，清洁级，用1％蔗糖水喂养4 d，使动物原来的饮水习惯发生改变。第5天开始24 h禁水，但不禁食，第6天给予1％蔗糖水4 h，测1％蔗糖水的偏嗜度。根据1％蔗糖水偏嗜度和体重随机分成4组，每组10只，糖水偏嗜度和体重各组间没有显著差异（ P＞0.05）。正常对照组（ CG）、模型对照组（ MG）、氟西汀对照组（ FG，10.0 mg／kg）、大豆甙元组（ DG，80.0 mg／kg）。造模同时灌胃给药，每日1次，连续给药32 d。造模方法为慢性轻度不可预见性的应激模型加孤养。观察大鼠的行为改变，免疫蛋白印记（ Western blot）技术和免疫组织化学法检测海马BNDF和NPY表达，观察淋巴细胞增值功能，脾脏指数，外周血白细胞数目及抗体分泌细胞功能。结果：与正常对照组相比慢性应急刺激大鼠体重、蔗糖消耗量及大鼠旷场试验得分显著降低，游泳不动时间延长，海马BNDF和NPY表达水平低下，差异有统计学意义（P＜0.01）。氟西汀治疗组和大豆甙元治疗组与模型对照组相比大鼠体重、蔗糖消耗量、大鼠旷场试验得分以及海马BNDF和NPY表达水平显著增加，差异有统计学意义（ P＜0.05或P＜0.01）。大豆甙元组大鼠外周血白细胞数目、抗体分泌细胞功能及淋巴细胞增殖力显著高于模型组。大豆甙元剂量脾脏指数显著高于模型组（ P＜0.01）。结论：大豆甙元能显著拮抗慢性应激模型大鼠抑郁症状，大豆甙元可增加海马内BDNF和NPY蛋白的含量，并且有增强慢性应激模型大鼠体液免疫应答和淋巴细胞增殖能力的作用，大豆甙元拮抗慢性应激模型大鼠抑郁作用的机制可能与大豆甙元治疗后海马中BDNF和NPY蛋白含量增加及免疫调节作用有关。
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大豆甙元对去卵巢大鼠雌二醇、维生素D和骨矿沉积的影响
目的 研究不同剂量大豆甙元对去卵巢大鼠雌二醇(E2)激素水平和骨矿沉积的影响.方法 60只3月龄雌性大鼠分为6组:对照组、模型组、4个去卵巢+大豆甙元组,每日分别灌服10 mg/kg蒸馏水和25、50、75、100 mg/kg大豆甙元;9月龄时处死,分别测定骨灰分、Ca、P、Mg、Zn和血清中E225-羟基维生素D(25-OH-D)及骨钙素(BGP).结果 服用大豆甙元后,去卵巢大鼠血清E2水平未升高,但25-OH-D和BGP水平恢复正常,从而增加了骨Mg和Zn沉积.结论 大豆甙元通过调高(25-OH-D)及BGP水平,帮助骨矿沉积,可获得与雌激素替代疗法(ERT)近似的临床效果,但不诱导雌激素高表达,使用安全性高.
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染料木素与大豆甙元对子宫内膜癌细胞株ERRα的影响
,24 h以低浓度抑制较为明显,48 h组各浓度之间增值率的差异不明显.结论 大豆甙元和染料木素在低浓度时均可上调ERRα mRNA并抑制Ishkawa细胞增殖,在高浓度时却对Ishkawa细胞ERRα mRNA的上调作用不明显,染料木素高浓度时促进Ishkawa细胞增殖,大豆甙元高浓度时抑制Ishkawa细胞增殖作用较低浓度为差.
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大豆异黄酮的药理作用Ⅰ
大豆异黄酮包括金雀异黄素(Genistein)、大豆甙元(Daidzein,又称大豆黄酮)及其相应的葡萄糖甙:金雀异黄甙(Genistin)和大豆甙(daidzin),天然状态下多以甙的形式存在.大豆及大豆制品都含有异黄酮,如大豆粉中含2014μg/g,豆腐中含531μg/g干重,大豆分离蛋白中含987μg/g,大豆农缩蛋白中含73μg/g,大豆速溶饮料中含1918μg/g干重[1].流行病学调查和生物医学研究均发现大豆及大豆制品有广泛的生物功效,如防治癌症、降低血脂、抗动脉粥样硬化和改善妇女更年期症状等,这均和它所含大豆异黄酮有关.本文对大豆异黄酮的主要药理作用作一综述.
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PEG/(NH4)2SO4双水相系统中葛根素分配系数的测定和关联
葛根是多年生缠绕藤本植物,葛Pueraria Lobata (willd)Ohwi 或Pueraria Thomsonii Benth 的根,具有解肌退热、生津透疹、生阳止泻的功效[10].葛根的主要有效成分是葛根素,大豆甙,大豆甙元等多种异黄酮类物质.这些物质对改善高血压,动脉硬化患者的脑血流,扩张脉血管,调节血液循环有明显效果.葛根传统的提取方法有醇提取法和铅盐法,污染大且收率较低[1].
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大豆异黄酮对YAC-1细胞和小鼠ESC艾氏肉瘤生长的抑制作用1
目的 观察大豆异黄酮对YAC-1细胞及小鼠ESC艾氏肉瘤生长的抑制作用及对免疫功能的影响.方法用MTT法测定大豆异黄酮对YAC-1细胞生长的抑制率和小鼠淋巴细胞转化刺激指数;LDH释放法测定小鼠NK细胞活性;称重观察肿瘤生长和脾指数和胸腺指数.结果金雀异黄素和大豆甙元剂量依赖性抑制YAC-1细胞生长,并随时间延长作用增强;大豆异黄酮50、100、400 mg·kg-1 灌胃给药均明显升高雌性小鼠脾指数和淋巴细胞转化的刺激指数,对雄性小鼠则无明显作用;大豆异黄酮100、400 mg·kg-1 明显抑制小鼠ESC艾氏肉瘤生长,同时50、100、400 mg·kg-1 均降低异常增高的脾指数,增加NK细胞活性.结论大豆异黄酮明显抑制YAC-1细胞和小鼠ESC艾氏肉瘤的生长,同时增强非特异性免疫功能,并可增强正常雌性小鼠免疫功能.
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葛根用于颈椎病治疗的研究进展
葛根为豆科植物葛的根,其主要成分有:①多种异黄酮(大豆甙、大豆甙元、葛根素等);②葛根甙;③三萜类;④生物碱类.传统中药学认为葛根味甘辛,性平,归脾胃经,具有解肌退热、透发斑疹,鼓舞胃气、生肌止渴、升阳止泻的功效.主要用于外感发热、头项强痛、斑疹不透、脾虚泄泻、高血压、冠心病等.葛根用于治疗颈椎病由来己久,<伤寒论>中既有葛根汤、桂枝加葛根汤治疗"项背强几几"的记载.
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金雀异黄素对低密度脂蛋白氧化修饰及氧化型低密度脂蛋白诱导的血管内皮细胞c-myc mRNA表达的抑制作用
为探讨大豆异黄酮(金雀异黄素和大豆甙元)在防止低密度脂蛋白氧化方面的作用以及对氧化型低密度脂蛋白诱导的血管内皮细胞原癌基因c-myc表达的影响,采用Cu2+介导的低密度脂蛋白体外氧化方法,通过测定硫代巴比妥酸反应物质生成和琼脂糖电泳迁移率的变化来观察大豆异黄酮对低密度脂蛋白氧化修饰的抑制作用;采用Northern blot杂交技术,分析氧化型低密度脂蛋白对人脐静脉内皮细胞c-myc原癌基因mRNA表达的作用以及金雀异黄素对此表达的影响.结果发现,金雀异黄素能够浓度依赖性减少硫代巴比妥酸反应物质生成,降低低密度脂蛋白的相对电泳迁移率(P<0.05);氧化型低密度脂蛋白(200 mg/L)刺激人脐静脉内皮细胞c-myc mRNA在1～2 h内表达增高,表达量为对照水平的3倍,4 h回到对照水平以下;金雀异黄素(100 μmol/L)能有效抑制氧化型低密度脂蛋白诱导的c-myc mRNA表达增高.以上结果提示,金雀异黄素不仅能防止低密度脂蛋白发生氧化,而且能够抑制氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞c-myc mRNA表达增高.
