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130例不同生育状态男性精浆中三种前列腺素含量的观察
目的了解3种前列腺素在不同生育状态男性精浆中的变化.方法用放免法检测1 30例不同生育状态(正常生育对照组,不育组,少精组及无精组)精浆中PGE2和PGF1α的含量;其中66例还测定了精浆PGF2α含量.结果少精组精浆PGE 2浓度高于正常组,少精组的PGF2α浓度略高于不育组,其差异无统计学意义.不育组精浆PGF2α浓度低于正常组;无精组精浆PGE2,PGF1α和PGF2α浓度均低于生育组.结论精浆中前列腺素PGE2、PGF2α的含量与男性生殖力有明显关系.
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精液乳酸脱氢酶C4同功酶的底物选择性测定法
目的建立一种简便、准确测定精浆、精子中的LDH-C4同功酶的检测方法.方法采用特异底物的酶动力学分光光度法测定人精子、精浆中LDH-C4同功酶活性.其结果与常规的丙稀酰胺凝胶电泳分离,活性染色,光密度扫描法进行比较.结果两种方法间存在较好的相关(r=0.932,n=128).以5.0mmol/L的α-酮己酸底物浓度可以选择性的检测出精液样品的LDH-C4活性.结论本方法具有微量、快速的优点,适于在临床检验中推广应用.
关键词： 乳酸脱氢酶C4同功酶 精子 精浆 酶动力学测定 -
维持夫妻感情的化学物质
维持夫妻感情的化学物质主要包括精液和阴液.精液,并非"精华"的碳水化合物精液是由睾丸产生的精子和由前列腺分泌的前列腺液、精囊腺分泌的精囊液、尿道球腺分泌的尿道球腺液共同组成的.精液除少量的精子外,大多数为精浆.
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人精浆中人鹅型溶菌酶2(HLysG2)的纯化及其酶学活性分析
目的 从人精浆中分离纯化天然人鹅型溶菌酶2 (HLysG2)并对其酶活性进行分析.方法 通过Western blot法检测HLysG2在精液中的分布;分别使用阳离子交换层析、甲壳素亲和层析和分子筛层析技术从精浆中分离目的蛋白并利用Westernblot法及质谱分析对其进行鉴定;使用高效液相色谱(HPLC)法分析纯化产物的纯度;使用比浊法测定HLysG2的适pH值、适离子浓度、适温度和标准酶活性;使用克隆形成单位法测定HLysG2的杀菌活性.结果 利用Western blot法在精浆中检测到HLysG2的存在;从人精浆中分离到相对分子质量(Mr)约21 500的目的蛋白并通过Western blot法及质谱分析鉴定其为HLysG2.纯化产物纯度达到99.0％以上.在pH6.4,30℃,Na+浓度为0.09 mol/L的条件下,HLysG2高酶活性达到13 800 U/mg.体外检测显示HLysG2对溶壁微球菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌具有杀菌作用,但对铜绿假单胞杆菌和大肠埃希菌的杀菌作用不显著.结论 使用层析方法可以从人精浆中成功分离纯化到天然HLysG,其在体外具有对Gram阳性菌的杀菌活性,提示其可能在男性生殖系统的先天免疫中发挥作用.
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男性不育患者精浆miR-551b水平变化及其临床价值
目的 检测和分析男性不育症患者精浆miR-551b水平变化,探讨其作为男性不育症辅助分子标志物的可能性.方法 选取2008年11月～2015年3月在南京总医院生殖医学中心和江苏省中医院男科门诊确诊的92例男性不育症患者及同期招募的34例年龄匹配正常生育男性精液标本,记录患者及对照临床资料,测定患者及对照精液参数包括精子密度、精子活率、a级精子比例、a+b级精子比例及部分精浆生化指标α-糖苷、酸性磷酸酶、肉毒碱、果糖水平.实时荧光定量PCR技术(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测和比较弱精症、非梗阻性无精症患者及正常生育男性精浆中miR-551b含量变化,统计分析精浆miR-551b临床价值及与精液参数、精浆生化指标相关性.结果 qRT-PCR结果显示,正常生育组精浆miR-551b水平为20.63(9.59,37.83)fmol/L,弱精症患者为62.29(25.22,101.43)fmol/L,较正常生育组显著升高(U=297.00);无精症患者精浆miR-551b水平为4.70(2.41,13.71)fmol/L,较正常生育组明显降低(U=356.00),差异均具有统计学意义(P<0.001).受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)分析显示,精浆miR-551b区分弱精症、无精症患者与正常生育组的ROC曲线下面积(AUC ROC)分别为0.810(95％CI 0.718～0.902)和0.772(95％CI 0.667～0.878);鉴别弱精症和无精症患者的AUC ROC为0.932(95％CI 0.885～0.979).Spearman秩相关性分析显示,男性不育患者精浆miR-551b水平与精子密度(r=0.735)、精子活率(r=0.643)、a级精子比例(r=0.672)、a+b级精子比例(r=0.682)及α-糖苷(r=0.375)呈正相关,差异均具有统计学意义(均P<0.05).逐步多元线性回归结果显示,男性不育症患者精浆miR-551b水平与精子密度呈显著独立相关(β=0.618,P<0.001,校正r 2=0.368).逻辑回归分析显示,精浆miR-551b是弱精症[OR=24.889(95％CI 5.302～116.843),P<0.001]和无精症[OR=6.303(95％CI 1.316～30.179),P=0.021]的潜在危险因素.结论 男性不育症患者精浆miR-551b水平与正常生育男性存在明显差异,且与精子密度和活力密切相关,有潜力成为男性不育患者辅助诊断和鉴别诊断的新型分子标志物.
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微量分光光度法测定人精浆中柠檬酸含量
报道一种测定人精浆中柠檬酸含量的微量分光光度法.该法稳定、灵敏、特异,测定范围为2.38～76.14 mmol/L,小检出量0.071 4 mmol/L;批内和批间重复试验的变异系数分别为2.13%和2.93%;平均回收率为101.6%.测定34例正常人精浆柠檬酸含量为18.65～55.87 mmol/L.文中对实验条件及该测定的临床意义作了研讨,提出了临床和科研实用的操作方案.
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不育男性弓形虫感染与附属性腺功能测定
目的 探讨弓形虫(toxoplasmosis)感染对男性附属性腺功能的影响.方法 应用化学法分别检测38例正常生育男性(正常对照组)和42例弓形虫感染不育男性(弓形虫感染组)的精浆中酸性磷酸酶(ACP)、果糖(Fru)和α-葡糖苷酶(α-Glu)含量.结果 弓形虫感染组中精浆ACP和α-Glu含量明显低于对照组,两组之间存在显著性差异(P＜0.05),而Fru两组之问无显著性差异(P＞0.05).结论 弓形虫感染对前列腺和附睾功能具有干扰作用,测定精浆中ACP,FrU和α-Glu含量可帮助判断弓形虫感染所致男性不育者的状态,指导临床对其进行有效的治疗.
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解脲支原体感染对男性不育者精浆活性氧与细胞因子的影响
目的：研究解脲支原体（Uu）感染对男性不育者精浆活性氧（ROS）、细胞因子及精子质量的影响，探讨其在男性不育中的作用机制。方法选择83例 Uu 感染男性不育者为实验组（Uu＋不育组），30例无 Uu 感染男性不育者（Uu－不育组）和30例正常男性已育者为对照组（正常生育组），分别测定精浆丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、IL-6，IL-10， IL-18和 TNF-α水平并分析其相关性。结果Uu＋不育组 MDA 含量为19.56±5.22 nmol／ml，IL-6含量为58.31±8.94 pg／ml，IL-18含量为38.16±17.02 pg／ml 和 TNF-α含量为42.68±11.18 pg／ml，均明显高于 Uu－不育组和正常生育组（t＝4.35～20.43，P 值均＜0.001），而 IL-10含量为8.62±2.98 pg／ml 和 SOD 活性为95.36±20.03μmol／L，均明显低于Uu－不育组和正常生育组（t ＝3.67～23.74，P 值均＜0.001）。相关分析发现，Uu＋不育组 MDA 与 TNF-α，IL-18呈正相关（r＝0.61，0.55，P ＜0.001），而与 SOD 活力和 IL-10呈负相关（r＝－0.55，－0.53，P ＜0.001）。结论Uu 感染导致精浆活性氧增加、细胞因子异常表达并影响精子质量，检测男性不育者精浆活性氧和细胞因子对男性不育的治疗具有重要意义。
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IL-6在慢性前列腺炎患者精浆中的表达及其临床意义
目的 探讨慢性前列腺炎/慢性骨盆疼痛综合症(CP/CPPS)患者精浆中IL 6的表达及临床意义.方法 采用电化学发光免疫分析法(ECLIA)对52例炎症型慢性骨盆疼痛综合征(ⅢA型)、38例非炎症型慢性骨盆疼痛综合征(ⅢB型)患者及36例健康志愿者精浆中IL-6含量进行测定分析,并将ⅢA、ⅢB型IL-6的表达与其NIH-CPSI评分进行相关性分析.结果 CP/CPPS患者ⅢA[(27.46±5.29)ng/mL]、ⅢB型[(9.83±2.09) ng/mL]精浆中IL-6含量均明显高于健康对照组[(4.94±1.55) ng/mL](P＜0.01).在CP/CPPSⅢA、CP/CPPSⅢB型患者精浆中IL-6的含量有明显差异(P＜0.01).CP/CPPS患者ⅢA型精浆中IL-6的含量与NIH-CPSI总评分呈正相关(r=0.590,P＜0.01),与疼痛评分呈正相关(r=0.436,P＜ 0.01),与排尿评分呈正相关(r=0.557,P＜ 0.01),与生活质量评分正相关(r=0.321,P＜ 0.01).CP/CPPS患者ⅢB型精浆中IL-6的含量与NIH-CPSI总评分呈正相关(r=0.404,P＜0.05),与疼痛评分呈正相关(r=0.597,P＜ 0.01),与排尿评分无相关性(r=-0.262,P=0.226),与生活质量评分无相关性(r=0.290,P=0.179).结论 精浆中IL-6含量可能作为CP/CPPS分型诊断指标,精浆中IL-6含量有望作为评价CP/CPPS病情程度的分子生物学指标.
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精浆C反应蛋白测定在慢性细菌性前列腺炎诊疗中的临床意义
目的 探讨C反应蛋白(CRP)在慢性细菌性前列腺炎诊疗中的临床意义.方法 采集37例慢性细菌性前列腺炎患者精浆进行CRP测定,与31例正常男性的精浆CRP进行对照,并对病例组病人治疗前后的精浆CRP进行对比.结果 病例组精浆CRP为71.63±23.19 mg/L,对照组精浆CRP为4.55±3.62 mg/L,病例组精浆CRP显著高于对照组(P＜0.01);病例组治疗后精浆CRP明显下降,基本正常;不同病原生物感染者精浆CRP无明显差异(P＞0.05).结论 精浆CRP测定在慢性细菌性前列腺炎诊疗中有重要临床意义.
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铅暴露男性精子功能和脂质过氧化评价
该研究人群包括健康、有生育力的锌和铅金属制造业的工人.铅暴露的工人分成2组:中度铅暴露组和重度铅暴露组.对照组为无职业性铅暴露史的机关工作人员.检测血液和精浆中铅、镉和锌水平,血中锌原卟啉,尿中δ-氨基乙酰丙酸,精浆中丙二醛;并进行精子分析.研究人群的血液和精浆中镉和锌浓度无差异.与对照组相比,重度铅暴露组的丙二醛浓度(反映脂质过氧化)显著升高了约56%,而1 h后的活动精子数减少了约34%.其他精子分析参数与铅暴露参数之间以及血液和精浆中铅、镉和锌浓度之间均无统计学相关性.铅中毒参数(血铅浓度、血中锌原卟啉、精浆铅浓度)与精浆丙二醛浓度之间有正相关性,而与精子活动力(血铅浓度、血中锌原卟啉)呈负相关性.丙二醛浓度的增加伴随着精子活动力的下降.总之,铅暴露,尤其是血铅浓度超过400 μg/L时,导致男性精子活动力降低,其可能的原因是脂质过氧化的增加.
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精浆微量元素锌、铜、及铅对精子质量的影响
目的:通过比较男性不育症患者及健康男性在精子质量和精浆微量元素的差异,探讨锌、铜、铅等微量元素对精子质量的影响.方法:选择45例男性不育症患者与45例健康男性,检测精液常规和精浆中锌、铜、铅的含量,分析锌、铜、铅的含量与精子密度、活动率、活力的相关性.结果:不育组的精子质量显著低于对照组,其精浆中锌显著低于对照组,铅含量显著高于对照组,铜在两组见无显著差异.同时,精浆中锌含量与精子密度、活动率、活力(a、b)呈显著正相关,与活力d呈显著负相关,铅含量与上述相反.铜与精子质量无显著相关性.结论:精浆中锌可增加精子密度及活动率,增加a级和b级活力比例其作用机制可能与促进精子生成、成熟等有关,而铅可对精子质量呈现毒性作用.
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高效液相色谱—串联质谱多反应监测鉴定人精浆脂质成分
目的 鉴定男性精浆中脂质成分,为其在生殖领域中的研究和应用提供参考.方法 采用高效液相色谱—串联质谱(HPLC-MS/MS)多反应监测技术,对人精浆中脂质类化合物成分及含量进行分析.结果 共鉴定出24个脂质大类,包含273种脂质种类.按化学结构可分为5类:甾醇类,包括游离胆固醇(Cho)、胆固醇酯(CE);甘油酯类,包括三酰甘油(TAG)、二酰甘油(DAG);磷脂酰胆碱类,包括卵磷脂(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰甘油(PG)、磷脂酰肌醇(PI)、磷脂酰丝氨酸(PS)、磷脂酸(PA);溶血磷脂类,包括溶血磷脂二酸(LBPA)、溶血磷脂酰胆碱(LPC)、溶血磷脂酰乙醇胺(LPE)、溶血磷脂酸(LPA)、溶血磷脂酰肌醇(LPI)、溶血磷脂酰丝氨酸(LPS);鞘脂类,包括鞘磷脂(SM)、神经酰胺(Cer)、葡糖神经酰胺(GluCer)、乳糖神经酰胺(LacCer)、神经节苷脂(GM3)、红细胞糖鞘脂(Gb3)、1-磷酸鞘氨(S1P)、鞘氨醇(Sph).在这24个脂质大类中,相对含量高的前3类分别是Cho、SM和PC,包含种类多的前3类分别是PC、PE和TAG.结论 应用脂质组学分析方法显示男性精浆脂质,为今后分析不同病理状态下精浆内各种脂质代谢物的变化、了解脂质代谢的特征提供数据基础,为将来通过HPLC-MS/MS脂质组学技术发掘可预测精子质量的敏感、特异的脂质标志物提供新技术手段.
关键词： 精浆 脂质组学 高效液相色谱—串联质谱 多反应监测 -
自体精浆为保护剂在微滴精子玻璃化冷冻的应用
目的 探索微滴自体精浆作为冷冻保护剂在精子玻璃化冷冻中的应用价值.方法 选择30份精液标本每份标本3组,A组为精液原标本,B组加入等量的冷冻保护剂,C组梯度离心后沉淀中加入上层精浆.3组均分别采用"1 拉细的巴斯特管直接滴入液氮"和"2微滴直接滴入液氮"两种冷冻方法,记录各组精子浓度和活力,分析其差异程度.结果 B组冷冻前后较A、C组冷冻前后精子浓度和活力均低,差异有统计学意义,各组内冷冻前后精子浓度差异无统计学意义;C1组的精子活力较C冷冻前(P＜0.05)偏低,但较A组冷冻前(P＜0.05)、A1(P＜0.05)、A2(P＜0.05)、C2(P＜0.05)偏高,均有统计学意义.结论 采用拉细的巴斯特管,将精液梯度离心后沉淀中加入自体上层精浆混匀后,微滴直接滴入液氮冷冻精液活动精子回收率高.
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应用高效液相色谱法检测男性不育患者精浆丙二醛水平
目的:探讨高效液相色谱法(HPLC)检测精浆中脂质过氧化产物丙二醛(MDA)水平的意义.方法:93例不育男性分为:阻塞性无精子症组(12例);非阻塞性无精子症组(15例);少精子症组(21例);弱精子症组(19例);少弱精子症组(16例);少弱畸精子症组(10例).18例生育男性作为对照组.采用HPLC检测生育与不育男性精浆MDA含量.结果:生育组精浆MDA值除与阻塞性无精子症组差异无显著性(P＞0.05)外,与其他各组相比均有极显著性差异(P均＜0.01).各不育男性组间精浆MDA值也有统计学差异.结论:应用HPLC检测精浆MDA水平是诊断活性氧产生过高所致男性不育的一个重要指标.
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试纸法测定精液pH的技术误差及校正
酸碱度测定是常规精液分析的一项内容.单纯性精浆酸碱度异常,过高或过低,被认为是临床诊断男性副性腺感染的辅助指针[1].世界卫生组织认为精浆pH正常值在7.2～7.8之间[2],推荐使用检测范围为pH6.4～8.0的pH试纸,作常规的精液pH检查.同时提出,无论使用何种试纸,在常规地用于精液分析前,应由已知标准的校正试纸法来评估其准确性[2];但并未指明应该使用何种方法进行校正.由于每份精液的体积通常只有2ml左右,普通的pH计难以用于精液分析,从而实际上缺乏可靠的校正方法.本文用血气分析仪的pH电极测定精浆pH;以此为标准,分析pH试纸法的技术误差及其可接受程度,探讨以二者之间的回归方程作为校正公式,校正试纸法所获的可行性.
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精液微量元素锌、硒对精子质量的影响
自1921年Betrand Vladesco首次发现精液中锌浓度明显高于其他体液含量后,随即对精液和精浆中微量元素进行大量研究.迄今报道在精液或精浆中测出的微量元素就有十多种.研究表明,微量元素与男性的性功能、性激素分泌及生殖系统发育密切相关,某些元素的代谢紊乱甚至可导致男性不育.
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锌硒宝治疗男性不育患者精浆锌离子与超氧化物歧化酶含量的研究
研究证明精浆中氧自由基的含量直接影响到精液的质量.微量元素锌(Zn)直接参与超氧化物歧化酶(SOD)的结构与活性中心[1].精浆中锌的含量比外周血液中高出100倍以上,故锌对生育能力有密切的关系.
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男性不育症诊断与治疗
1男性不育的定义世界卫生组织(WHO)规定,夫妇同居1年以上,未采用任何避孕措施,由于男方因素造成女方不孕者,称为男性不育.男性生殖环节很多,主要的有男性生殖系统的神经内分泌调节,睾丸的精子发生,精子在附睾中成熟,精子排出过程中与精囊、前列腺分泌的精浆混合成精液,精子从男性生殖道排出体外并输入到女性生殖道内,精子在女性输卵管内与卵子受精等等环节,若这些环节受到疾病或某种因素的干扰和影响,都可发生生育障碍.因此,男性不育症不是一种独立的疾病,而是由某一种或很多疾病与因素造成的结果.
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分期治疗男性不育症116例
笔者自1997年8月～2001年11月分期治疗男性免疫性不育症116例，疗效较好，报道如下。 1 临床资料 116例为门诊患者，经查血清或精浆AsAb阳性，平均年龄28±3.2岁；病程平均4.0±1.8年。……
