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补肾中药成分配伍调控RUNX2、OSX对大鼠BMSCs成骨分化的影响
目的 观察补肾代表中药淫羊藿、补骨脂、女贞子、何首乌有效成分对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖及向成骨细胞定向分化的影响.方法 将65只SPF级SD雌性大鼠随机分为正常对照组、阳性转化液对照组、补肾中药配伍组(补肾中药1组、2组、3组、4组、5组、6组、7组、8组、9组)、非补肾中药对照组(黄芪甲苷组、川芎嗪组).通过血清药理学方法,对实验大鼠连续灌胃给药3d后,取材获得含药血清,使用各组大鼠含药血清培养骨髓间充质干细胞6d、12d、18d;用茜素红染色对钙化结节进行成骨细胞鉴定;应用MTT法检测骨髓间充质干细胞的增殖率,酶联免疫吸附剂测定(ELISA)法检测碱性磷酸酶(ALP)活性,用实时定量PCR法检测核心结合蛋白因子2(RUNX2)、成骨细胞特异性转录因子Osterix (OSX)的基因表达.结果 补肾中药有效成分不同配伍含药血清作用于体外培养骨髓间充质干细胞72 h,可以促进骨髓间充质干细胞的增殖.ALP在12d达到高峰值.Real-Time PCR结果显示补肾中药有效成分能上调RUNX2、OSX的基因表达.结论 补肾中药有效成分配伍能提高骨髓间充质干细胞增殖率,促进骨髓间充质干细胞分化为成骨细胞,其机制与补肾中药有效成分配伍能上调RUNX2、OSX的基因表达相关.
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九里香叶对去卵巢大鼠体积骨密度、血钙、血磷、碱性磷酸酶、骨组织形态学的影响
目的:观察九里香叶对去卵巢大鼠体积骨密度、血钙、血磷、碱性磷酸酶、骨组织形态学的影响.方法:取60只SPF级SD雌性大鼠,通过切除双侧卵巢复制骨质疏松模型.术后7d分组给药.模型组:生理盐水(0.4 mg/kg·d);对照组:生理盐水(0.4 mg/kg·d);戊酸雌二醇组:0.4 m g/kg·d;九里香高剂量组:200 mg/kg·d;九里香中剂量组:100 mg/kg·d;九里香低剂量组:50 mg/kg·d.连续给药90d.给药结束后,测定大鼠体积骨密度,采用电极法测定血钙;速率法测定血磷、碱性磷酸酶.大鼠右侧股骨HE染色,计量骨小梁平均宽度、骨小梁面积百分率.结果:与对照组比较,模型组大鼠体积骨密度明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05);模型组大鼠血钙、碱性磷酸酶明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05),血磷无差异;模型组大鼠骨小梁平均宽度及骨小梁面积百分率明显降低,差异有统计学意义.与模型组比较,九里香叶高剂量组大鼠体积骨密度明显增高,差异有统计学意义(P＜0.05);九里香叶高剂量组大鼠血钙明显增高,差异有统计学意义(P＜0.05),血磷无统计学意义;九里香叶低剂量组大鼠碱性磷酸酶明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05);九里香叶高剂量组骨小梁平均宽度及骨小梁面积百分率明显增高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:九里香叶影响去卵巢大鼠骨质疏松体积骨密度、血钙、碱性磷酸酶、骨小梁平均宽度及骨小梁面积百分率变化,具有抗骨质疏松作用.
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电针“关元”穴对绝经后骨质疏松症大鼠Wnt信号通路的影响
目的:观察电针“关元”穴对绝经后骨质疏松症大鼠血清骨钙素(BGP)、碱性磷酸酶(ALP)、骨生物力学、骨密度以及Wnt 3 a、β-连环蛋白(catenin)、Runx 2表达的影响,探讨电针治疗绝经后骨质疏松症的可能机制.方法:SD雌性大鼠分为假手术组、模型组、关元组、非经非穴组,每组10只.采用双侧卵巢切除制备绝经后骨质疏松症模型.关元组电针“关元”,非经非穴组电针胁下髂嵴上20～25 mm、后正中线旁开20 mm处,每日电针1次,每次20 min,10d为1个疗程,共治疗3个疗程.治疗后光学显微镜下观察股骨组织形态结构,三点弯曲实验检测股骨生物力学性能,X线检测骨密度,酶联免疫法检测血清BGP,生化分析仪测定血清ALP,RT-PCR法和免疫组化法检测Wnt 3 a、β-catenin、Runx 2表达.结果:电针“关元”穴能够显著改善绝经后骨质疏松症大鼠骨小梁结构松散、排列紊乱、密度降低等骨质疏松形态学改变,提高血清ALP、BGP水平,改善股骨大载荷和断裂载荷,并提高骨密度,与模型组比较差异均有统计学意义(P＜0.05);RT-PCR及免疫组化结果表明电针“关元”穴较模型组能够明显上调Wnt 3 a、β-catenin、Runx 2的表达(P＜0.05).非经非穴组不能显著改善上述生物学指标.结论:通过激活Wnt-β-catenin信号通路、提高骨代谢过程中的骨形成并增强骨强度可能是电针“关元”穴治疗绝经后骨质疏松症的机制之一.
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接骨续筋丸影响骨折愈合过程的临床研究
目的:观察接骨续筋丸治疗骨折后骨痂质量及血清碱性磷酸酶(ALP)、血清生长激素(GH)的变化,探讨接骨续筋丸对骨痂改造塑形期的影响.方法:将68例入选病例(男41例,女27例;年龄28～64岁)按随机数字表分为治疗组35例和对照组33例.对治疗组采用接骨续筋丸治疗,对照组采用依普黄酮和钙片治疗,比较两组治疗前后骨痂X线评分、骨痂BMD、血清ALP及GH的改变及两组临床疗效的差异.结果:治疗后治疗组与对照组比较,骨痂BMD、血清ALP差异有显著性意义(P＜0.01),骨痂X线评分、血清GH、两组总有效率比较有统计学差异(P＜0.05).结论:接骨续筋丸对骨折后骨痂改造塑形期愈合有促进作用.
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骨碎补总黄酮对颅骨缺损修复大鼠血清碱性磷酸酶、钙、磷的影响
目的:探讨中药骨碎补总黄酮(assemble flavone of rhizome drynaria,AFDR)在修复大鼠颅骨缺损过程中对血清碱性磷酸酶、钙、磷及肌酐、谷丙转氨酶水平的影响.方法:60只6周龄雄性SD大鼠,饲养1周后Excel表随机分为两组(对照组和AFDR组),每组30只.用电动磨钻在大鼠左右颅骨钻孔建立颅骨缺损模型,右侧缺损可注射骨修复材料(injectable bone regeneration vomposite,IBRC).术后第1天AFDR组中药灌胃,对照组去离子水灌胃.分别于术后2、4、8周采血,检测血清中碱性磷酸酶、磷、钙、肌酐、谷丙转氨酶指标,并进行统计学处理.结果:2周时碱性磷酸酶AFDR组高于对照组,4周时血清钙、磷及钙磷乘积AFDR组高于对照组.血清谷丙转氨酶各时间点两组差异无统计学意义.8周时血清肌酐AFDR组低于对照组.结论:骨碎补总黄酮在大鼠颅骨缺损修复过程中,于2～4周可影响碱性磷酸酶及血清钙磷水平,对肝肾无毒性.
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生骨再造散对家兔骨折愈合影响的实验研究
目的:检验生骨再造散促进骨折愈合的疗效,并探讨其治疗机制.方法:选用42只健康家兔,做双侧桡骨3 mm缺损的骨折,随机分为实验组、药物对照组(仙灵骨葆)和空白对照组,分别以生骨再造散、仙灵骨葆和生理盐水灌胃给药,术后第1、2、3、4周采血,检测血清碱性磷酸酶(ALPase).术后第14天和第31天分批处死兔子取桡骨标本,摄X线片,作生物力学测试和骨痂组织形态学观察.结果:骨折后第14天和第31天,实验组的X线片计分显示骨折修复优于空白对照组,生物力学性能和骨痂组织形态学均显著优于空白对照组(P＜0.05,P＜0.01),与药物对照组无显著性差异.ALPase在第1周和第4周各组间无显著性差异;第2周3组ALPase都不同程度升高,实验组和药物对照组均明显高于空白对照组,但实验组和药物对照组无差异;第3周实验组和药物对照组的ALPase均明显高于空白对照组,且实验组和药物对照组也有显著性差异(P＜0.05,P＜0.01).结论:生骨再造散能缩短骨折愈合过程所需时间,提高骨折愈合质量,与仙灵骨葆疗效相似.
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右归饮对激素性股骨头坏死患者股骨近端骨髓骨活性影响的实验研究
目的:观察右归饮含药血清对激素性股骨头坏死患者股骨近端骨髓体外分化为成骨细胞的影响.方法:将右归饮含药血清加入人骨髓间充质细胞诱导分化成骨细胞的培养体系,采用观察细胞学形态、MTT法、细胞内ALP含量及矿化结节形成,并与普通血清组进行比较.结果:与普通血清组相比,形态学观察及MTT法表明,右归饮含药血清对激素性股骨头坏死患者股骨近端骨髓体外分化成骨细胞的增殖起促进作用(P<0.01);矿化结节染色及细胞内ALP含量测定表明右归饮对成骨细胞的活性有促进作用(P<0.01).结论:右归饮对激素性股骨头坏死患者股骨近端骨髓间充质干细胞诱导分化的成骨细胞的增殖和活性起促进作用.
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髋关节血管外皮瘤一例
患者,男性,46岁;1990年10月因左侧髋部行走疼痛1月余,门诊以:"左股骨颈部肿瘤"收入.X线检查:左侧股骨颈部骨皮质变薄,呈现溶骨性破坏,其中骨质部分硬化.各项化验检查均无异常发现.12月行"局部肿瘤切除,带缝匠肌蒂髂骨瓣转移修复骨缺损术".病理诊断为:"骨不典型纤维组织细胞瘤".手术后,髋人字石膏固定3个月,可独立行走,无特殊不适感,定期X线拍片检查,均显示病变部位,骨愈合良好,可作一般轻体力劳动.1996年4月间行走时突然感到左侧髋部疼痛,行走加剧,逐渐出现夜间疼痛,局部肿胀,只能扶拐行走.1996年4月再次入院,检查:局部压痛、无明显肿胀、托马斯征60°阳性,X线及CT检查:显示左侧股骨颈部骨质失去连续性,密度减低、呈溶骨性破坏,植骨部分愈合.碱性磷酸酶105U/L,1996年5月7日肿瘤局部刮除、同侧腓骨带血管移植手术,术中见:肿瘤实质呈灰白色鱼肉状,已经侵入周围肌层,沿血管束分布界限尚清、股骨头颈大部侵蚀破坏,术后常规苏木精--伊红染色、免疫组织化学染色,电子显微镜检查均为血管外皮瘤改变.该病人在术后2个月肿瘤再次局部复发,并出现肺部转移.
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肿瘤样钙化一例
患者女性,34岁.因右肘部外伤后疼痛15天,经拍X线片以"右肘部肿物待查”,于2000年8月22日入院.该患者15天前右肘关节外侧不慎碰到铁桶上,当时仅觉伤处轻微疼痛,无其他不适感,未予注意.3天前偶然发现右肘外侧有一活动性肿物,大小如蚕豆,不痛不热,当日我院以:①右肱骨外髁陈旧性骨折?②右肘部肿物待查?收入院.查体:右肘关节无肿胀,皮色正常.右肘关节外侧可触及蚕豆大肿物,质韧硬,活动度良好,有压痛.肘关节活动不受限.X线所见:右肘关节外侧可见一约2cm×0.8cm椭圆形密度增浓影,边缘圆滑,内有不规则密度减低区.长轴与肢体方向一致(见图1).化验室检查:血钙、磷、碱性磷酸酶及尿酸均正常.
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苍术类药材提取物体外对成骨细胞增殖及酶活性的影响
目的:观察不同产区苍术的不同提取部位体外对成骨细胞增殖及碱性磷酸酶活性的影响.方法:分别以苍术生药量1×10-4,1×10-6 g·mL-12个质量浓度进行新生大鼠成骨细胞、MG-63成骨细胞株增殖和碱性磷酸酶活性测定.结果:茅苍术对大鼠成骨细胞、MG-63成骨细胞株增殖的效果比北苍术好；在挥发油、水煎液、醇提液3个不同提取部位比较中,发现水煎液的效果较好,且道地产区茅苍术的效果佳,对成骨细胞、MG-63细胞株增殖率分别是11.27％,13.57％；大鼠成骨细胞的ALP活性测定,以茅苍术的水煎液和挥发油的碱性磷酸酶活性高,均为5.22 U·L-1.结论:苍术类药材对骨质疏松症的治疗有一定的疗效,且茅山地区产茅苍术水煎液对MG-63细胞株、成骨细胞增殖效果佳.
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黄芪散对高糖作用下成骨细胞相关功能的影响
目的:观察黄芪散含药血清对高糖条件下成骨细胞功能的影响及与糖尿病性骨质疏松发病机制相关基因的影响,探讨黄芪散(HQS)对糖尿病性骨质疏松症的疗效机制.方法:选用健康清洁级5周龄Wistar大鼠10只,随机分为正常组和药物组.制备黄芪散含药血清和空白血清,选用健康清洁级新生大鼠乳鼠4只,体外以酶消化法分离培养新生乳鼠颅骨成骨细胞(0b),行细胞计数(CCK-8)法测定高糖条件下(25.5 mmol·L-1)5％,10％,20％,30％含药血清对细胞增殖的影响,选取增殖活性佳血清浓度,采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)法检测黄芪散对成骨功能相关基因骨桥蛋白(OPN),骨钙素(OC),碱性磷酸酶(ALP)和胰腺-骨骼相关基因骨保护素(OPG),叉头转录因子1(FoxO1)表达的影响.结果:10％和30％血清浓度组细胞增殖较空白组有明显升高(P＜0.05);20％血清浓度组较空白组有显著升高(P＜0.01).与空白组比较,5％浓度条件下,OPN,OPG mRNA表达明显下调(P＜0.05);10％浓度条件下,OC,ALP,OPNmRNA表达明显上调(P＜0.05,P＜0.01);OPG,FoxO1 mRNA较空白组表达显著下调(P＜0.01).20％浓度和10％浓度条件差异性一致,OPN,OPG,FoxO1 mRNA影响趋势较10％浓度药物血清组更明显.20％浓度血清条件下,与空白组比较,OC和OPN蛋白表达显著上调(p＜0.01),OPG蛋白表达显著下调(P＜0.01).结论:黄芪散对糖尿病性骨质疏松的疗效机制可能与其促进高糖作用下成骨细胞增殖作用有关,与下调胰腺-骨骼相关基因OPG,FoxO1表达有关.
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左归丸含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞骨向分化中碱性磷酸酶含量的影响
目的:研究左归丸含药血清对间充质干细胞骨向分化过程中碱性磷酸酶含量变化的影响.方法:采用全骨髓贴壁法培养间充质干细胞,连续进行3次差速贴壁法纯化间充质干细胞.常规诱导组以户甘油磷酸钠、地塞米松、维生素C诱导间充质干细胞骨向分化,实验组在常规诱导组基础上加以左归丸含药血清.使用茜素红染色钙结节、碱性磷酸酶染色鉴定诱导成功.分别在0,7,14,21 d用比色法检测细胞中碱性磷酸酶含量.结果:全骨髓贴壁法和差速贴壁法联合使用可得到较为均一间充质干细胞.用比色法测得碱性磷酸酶含量随着诱导时间延长而增加.结论:大鼠间充质干细胞经药物诱导后可以分化为成骨细胞.左归丸含药血清能够促使诱导过程中碱性磷酸酶含量表达增加.
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肠上皮细胞模型不同培养条件的优化及适应性研究
目的:建立肠上皮(Caeo-2)细胞单层模型,探讨不同培养条件对细胞单层模型的影响,优化适宜的条件,提供稳定、重复性好的Caco-2细胞模型.方法:将细胞接种Transwell培养板上进行体外培养,并比较3种Transwell培养板及包被鼠尾胶原蛋白对细胞单层的影响,通过透射电镜和倒置显微镜观察细胞单层的形态学特征,通过测定细胞单层的电阻值、细胞两侧碱性磷酸晦含量、荧光素钠的透过量验证细胞单层的完整性、极性、通透性.结果:经过21 d培养,24孔Transwell培养的细胞单层的完整性、极性高于12孔Transweil培养的细胞单层,而透过性低于12孔Transwell培养的细胞单层;包被鼠尾胶原蛋白的Transwell于细胞单层生长前期跨上皮细胞电阻值(transepithelium electrical resistance,TEER)迅速升高,对细胞单层生长的中后期无显著性影响.结论:3种Transwell均可成功培养Caco-2细胞单层,24孔站立式Transweli适用于样品需求量少、检测灵敏度高的物质,可应用于大量样品的高通量筛选;12孔悬挂式Transwell提供检测的样品量和透过率较大,适于实验室的常规操作和常用仪器的样品需求.
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哈蟆油蛋白对骨质疏松预防及ALP,Osteocalcin,Runx-2基因表达的调节作用
目的:观察哈蟆油蛋白(ROP)的抗骨质疏松作用,并探讨其对骨生长相关基因的调节作用.方法:采用去势法建立大鼠骨质疏松模型,随机分为空白组,模型组,戊酸雌二醇组,ROP高、中、低剂量组(0.15,0.075,0.037 5 g·kg-1);利用X射线技术测量股骨和腰椎骨密度(BMD);利用骨骼强度仪检测股骨的大载荷量;应用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)技术检测骨生长相关基因的表达.结果:与空白组比较,模型组股骨、腰椎骨密度明显降低(P ＜0.05,P＜0.01),碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP),Osteocalcin,Runx-2基因表达均显著下调(P＜0.01);与模型组比较,ROP高、中剂量组腰椎BMD均有显著增加(P＜0.01),ROP高剂量组ALP,Osteocalcin,Runx-2基因表达显著上调(P＜0.01).结论:ROP能显著提高大鼠BMD和大载荷量;ROP可能通过上调ALP,Osteocalcin,Runx-2基因的mRNA表达,促进成骨分化,调节骨代谢平衡,从而发挥防治骨质疏松的作用.
关键词： 哈蟆油蛋白 骨质疏松 碱性磷酸酶 Osteocalcin Runx-2 -
淫羊藿苷对体外培养大鼠股骨组织的影响
目的:研究淫羊藿苷对体外培养大鼠股骨组织的影响.方法:无菌条件下体外分离培养大鼠股骨组织,采用培养液中终浓度为1 ×10-5 mol·L-1的淫羊藿苷进行药物干预,检测碱性磷酸酶活性( alkaline phosphatase,ALP)、钙盐沉积量以及Real-Time RT-PCR检测骨保护素(osteoprotegerin,OPG),Ⅰ-型胶原(collagen-1),Runt-related transcription factor 2(Runx-2)mRNA的表达情况.结果:1×10-5mol· L-1淫羊藿苷处理组ALP活性从第6～12天呈升高趋势,第12 ～ 18天降低；6～15d各组钙盐沉积量呈升高趋势,第18天降低；淫羊藿苷组处理股骨组织2～4d时促进Runx-2 mRNA的表达水平,处理8d时抑制Runx-2 mRNA的表达；淫羊藿苷组处理股骨组织2～8d时促进Collage-1 mRNA的表达水平；淫羊藿苷组处理股骨组织2～4d时能促进OPG mRNA的表达水平,处理6,8d时与对照组比较无统计学意义.结论:淫羊藿苷可显著提高体外培养大鼠股骨组织中骨代谢相关基因的表达水平、增加钙盐沉积量以及ALP活性.
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左、右归丸对大鼠骨髓间充质干细胞骨向分化中TGF-β1mRNA的影响
目的:研究左、右归丸含药血清对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化的作用.方法:将28只大鼠随机分为4组,分别以左归丸(ZGW)、右归丸(YGW)、阳性对照药戊酸雌二醇片(estradiol valerate tablets,EVT)和蒸馏水给大鼠灌胃,各组灌胃剂量分别为18.9,20.52 g·kg-1,0.36 mg· kg-,1.0 mL·kg-1,日2次,于第4天给药2h后,腹主动脉取血,离心,56℃水浴灭活30 min后,大鼠含药血清制备完成.再配制10％各组含药血清的α-MEM分别加入诱导剂(YDJ)(10-7mol· L-1地塞米松、50μmol· L-维生素C、10 mmol·L-1β-甘油磷酸钠)与单纯诱导剂组共5组对BMSCs(1×105/L)进行干预9d,用Westernblot法检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、Ⅰ型胶原(type Ⅰ collagen,COL Ⅰ)蛋白表达,用RT-PCR法检测转化生长因子β1(transforming growth factor beta 1,TGF-1)mRNA表达.结果:Control组比较:ZGW+ YDJ组、YGW+ YDJ组、EVT+ YDJ组均可促进BMSCs的ALP,COLⅠ蛋白的表达,上调BMSCs TGF-β1 mRNA表达(P＜0.05)；与YDJ组比较:ZGW+ YDJ组、YGW+ YDJ组可促进BMSCs的ALP,COL Ⅰ蛋白的表达,上调BMSCs TGF-β1mRNA表达(P＜0.05)；且ZGW+ YDJ组优于YGW+ YDJ组(P＜0.05).结论:左、右归丸含药血清能协同诱导剂促进BMSCs成骨分化,且左归丸组更为有效,表明中医“滋肾阴”对BMSCs的成骨诱导更为有效.
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活血通络汤预防激素性股骨头缺血性坏死兔造模过程中对AKP、Jagged1表达的影响
目的:研究活血通络汤预防性治疗激素性股骨头缺血性坏死(SANFH)兔造模过程中对碱性磷酸酶(AKP)、Jagged1表达的影响.方法:将192只日本大耳兔随机分为空白组、模型组、治疗组、预防组4组,各48只.除空白组外,均在第3周开始运用贺西京造模法造模,造模周期为6周.观察造模前、造模中、造模后相对应的时间点即第2、5、8周末家兔股骨头大体形态、血清AKP、Jagged1的动态变化.同时做股骨头镜检(光镜)、计算空骨陷窝率.结果:Jagged1表达方面,4组均呈逐渐递增趋势,模型组高,预防组、治疗组两组间无可比性.AKP浓度方面,预防组、治疗组、模型组均呈递增趋势,预防组的AKP含量低于治疗组、模型组,模型组浓度高.空骨陷窝率方面,预防组有下降趋势,治疗组、模型组均逐渐上升,但治疗组上升幅度小于模型组.结论:活血通络汤可以明显下调Jagged1、AKP的表达,促进新生血管的形成、促进骨钙量上升、促进骨代谢、减少骨钙流失、促进骨质成熟,有效改善股骨头局部缺血缺氧环境,从而有效干预股骨头缺血坏死的形成.
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巴戟天药物血清对成骨细胞生物学特性的影响
目的:通过观察巴戟天药物血清对体外培养成骨细胞(OB)增殖及其活性的影响,探讨巴戟天壮骨作用的实质.方法:取新生SD大鼠头盖骨提取成骨细胞,给巴戟天药物血清,测定巴戟天对成骨细胞(OB)增殖、分泌碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OC)及转化生长因子(TGF-β1)的影响.结果:巴戟天醇提物及巴戟天正丁醇部位能显著刺激OB增殖;巴戟天中正丁醇部位低剂量组可促进分化中的OB分泌ALP和OC,并可促进OB表达TGF-β1.结论:巴戟天中正丁醇部位低剂量组能够促进OB分泌碱性磷酸酶、表达TGF-β1 mRNA,从而促进骨的生长.
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女贞子提取物及其成分促骨髓间充质干细胞成骨分化的作用
目的:探讨女贞子提取物及其成分对小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的影响及其机制.方法:比较实验组(加入成骨诱导剂和女贞子提取物及成分)、成骨诱导组与空白对照组之间碱性磷酸酶(ALP)活性.茜素红染色鉴定钙结节,qRT-PCR检测骨钙素,LRP6和Runx2的基因表达情况.结果:与成骨诱导组比较,10、100μ g/mL的女贞子提取物处理的BMSCs ALP活性分别提高了52.38％和95.23％.20μg/mL特女贞苷、女贞苷G13和油女贞苷处理的BMSCs ALP活性分别提高了59.52％、95.23％和100.04％.20μg/mL 3种成分增加钙化结节数量,提高了骨钙素、Runx2和LRP6 mRNA表达.结论:女贞子提取物及其3种成分可能通过诱导Wnt通路的激活促进BMSCs向成骨细胞分化,是发挥抗骨质疏松活性的主要成分.
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杜仲含药血清对成骨细胞的影响
目的:研究不同浓度杜仲含药血清对体外培养小鼠MC3T3-E1 Subclone 14成骨细胞增殖、分化的影响.方法:大鼠灌胃给予杜仲后制备含药血清,取MC3T3-E1 Subclone 14成骨细胞,分别加入空白血清(空白对照组)和含2％、5％、10％的杜仲含药血清(给药组)的培养基培养,用MTT法检测MC3T3-E1 Subclone 14成骨细胞增殖情况,ELISA法检测细胞中的碱性磷酸酶(ALP)、骨钙蛋白(OTC)、破骨细胞抑制因子与核因子κB受体活化因子配体(OPG/RANKL)系统活性.结果:与空白对照组同浓度比较,杜仲含药血清各浓度明显促进细胞增殖并上调ALP、OTC、OPG/RANKL的比值(P＜0.05,P＜0.01).结论:杜仲能促进体外培养的MC3T3-E1Subclone 14成骨细胞增殖与分化.
