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献血人群人类血小板抗原1～5系统基因多态性分布特点
目的：探讨献血人群人类血小板抗原1~5系统基因多态性分布特点。方法采用聚合酶链-序列特异性引物技术（PCR-SSP）对200例无血缘关系的健康献血者进行HPA-1-5系统基因分型,分别计算献血人群的基因型及基因频率,分析其基因的多态性分布特点。结果该研究中献血人群HPA-1a、2a、3a、4a、5a基因频率分别为：0.942、0.741、0.926、0.945、0.773，HPA-1b、2b、3b、4b、5b基因频率分别为：0.058、0.286、0.084、0.045、0.227，各系统均呈多态性分布， ab杂合子依次为64和30例,-2bb4例；HPA-3和-15高度杂合,aa基因型依次为112和80例,很多献血人群属于bb基因型。结论该地区献血人群HPA-1-5系统基因均呈多态性分布,以HPA-3、-2和-5的a与b基因杂合率较高。
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豫北地区汉族无偿献血者血小板特异性抗原多态性研究
目的:研究豫北地区汉族无偿献血人群血小板抗原(HPA-1-5、15)系统多态性,构建一定规模的血小板HPA基因资料库,为临床提供匹配的单采血小板.方法:随机采集豫北5地区500名汉族无偿献血者外周血,用PCR-SSP方法进行HPA-1-5、15系统基因分型.基因及基因型频率采用直接计数法检测,HPA基因频率的群体分布情况采用Hardy-weinberg平衡检验,与其他地区和种族比较采用x2检验.结果:豫北地区无偿献血人群HPA-1-5、15血型系统基因分别为1a0.985、1b0.015;2a0.924、2b0.076;3 a0.469、3b0.531;4a1.000;5a1.000;15a0.532、15b0.468.HPA-1-5、15基因型频率分别为1aa0.970、1ab0.030;2aa0.848、2ab0.152;3aa0.222、3 ab0.494、3 bb0.284;4aa1.000;5aa1.000;15aa0.282、15ab0.500、15bb0.218.与中国汉族人群相比,豫北地区无偿献血人群HPA-3b、5a增高,差异有统计学意义(P＜0.05);与中国少数民族人群相比,HPA-3b、5a也升高,但HPA-2a降低(P＜0.05).与国外不同种族人群相比,HPA-1a、2a、3a、5a均有不同程度的升高.结论:豫北地区无偿献血人群HPA基因分布符合Hardy-weinberg平衡定律.与其他地区和国家资料相比,HPA显示出种族和地域性差异.豫北地区无偿献血人群HPA-3、15具多态性.这为研究同种免疫性血小板减少症和开展血小板同型输注的相关研究提供理论依据.
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黑龙江省蒙古族人群HPA1-17多态性的研究
目的:探讨中国黑龙江地区蒙古族与汉族人群的血小板抗原(HPA)的多态性分布特征,判断HPA抗原不配合比率,确定有临床意义的抗原系统,为建立包含不同民族已知HPA分型的血小板献血者库提供数据基础.方法:选择100例蒙古族的健康无血缘关系的人群为研究对象,以123例健康汉族人群为对照,采用PCR-SSP技术,对HPA 1-17共17个抗原系统34个等位基因进行分型.分别计算其基因频率、基因型频率,并进行分析比较.结果:汉族人群中HPA 4、HPA 7-14、HPA 16,17抗原系统的基因型均为aa,未检测出相应的等位基因HPA-b;HPA 1-3,HPA5-6抗原系统的基因型以aa居多;蒙古族人群中HPA 1、HPA 5-14,HPA 16,17抗原系统的基因型均为aa,未检测出相应的等位基因HPA-b;HPA 2,4抗原系统的基因型以aa居多;两个民族中,HPA 3,15均具有较高的杂合度,易发生血小板不配合而造成的同种免疫.与对照组(汉族)比较,蒙古族HPA 1和HPA 3系统有显著差异(P≤0.05).结论:黑龙江省蒙古族健康人群HPA1-17基因频率的分布与汉族人群相比有相似之处,也有本民族的自身特点.在建立血小板供者分型数据库时,要适当增加蒙古族的供者.
关键词： 血小板抗原 蒙古族人群 HPA 1-17基因 -
山西地区血液病患者人类血小板抗原基因分型研究
目的：系统分析山西地区血液病患者人类血小板抗原（HPA）基因分型及其多态性，为 HPA 基因库建设提供实验数据和理论依据，为本地区血小板输注无效（PTR）患者的血小板（PLT）有效输注建立理论和临床基础。方法：选取血液病住院患者97例，分为输注有效组（52例）和输注无效组（45例），提取全血 DNA，采用聚合酶链反应-序列特异性引物技术（PCR - SSP）进行 HPA -1～6，15抗原系统基因分型。结果：输注有效组 HPA -1，4，5，6主要以 aa 型为主，HPA -3和 HPA -15杂合度较高。输注无效组 HPA -1，4，5，6主要以 aa 型为主，HPA -2，HPA -3，HPA -15杂合度较高。结论：山西地区人类血小板同种抗原血型系统基因多态性表现出人群特点。人类血小板抗原血型中 a 基因频率明显较高；血液病患者 HPA -2，HPA -3，HPA -15抗原对配偶不配合比例高。提示临床治疗中对于反复输注PLT 的血液病患者需高度关注 HPA -2，HPA -3，HPA -15基因型，并对其进行检测，尽量同型输注，避免产生血小板同种抗体，引起血小板输注无效。
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复输血者输注单采血小板效果分析
目的:分析反复输血者输注单采血小板(PLT)者的效果,以提高单采PLT的输注效果.方法:随机化输注采用凝聚胺配血法,选择ABO血型相合的单采PLT输注,PLT交叉配合采用简易致敏的红细胞PLT血清学技术,选择ABO血型、PLT血型均相同的单采PLT输注.结果:反复输血者采用随机化输注法,输注单采PLT时,输注前血液中PLT计数为(4.04±1.16)×109/L,输血后24 h血液PLT计数为(4.75±1.56)×109/L,P＞0.05,输注后PLT增值变化不明显;经PLT交叉配合后输注,PLT增值明显增加,CCI值＞15×109/L.结论:对于反复输血者输注单采PLT时,只及经ABO血型相合输注方法,无效率达79.3%.因此,在输注单采PLT之前,须对患者进行PLT抗体的检测,并进行PLT交叉配合,选择ABO血型、PLT血型均相合的血型输注.
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新生儿同种免疫性血小板减少症的诊治
新生儿同种免疫性血小板减少症(NAIT)是导致新生儿严重血小板减少症及足月儿颅内出血的主要原因之一.本文对NAIT的发病机制、临床特点、辅助检查、诊断及干预和治疗等方面进行重点阐述.
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血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa基因多态性与血小板输注疗效的关系
目的 通过对98例患者血小板膜糖蛋白(GP)Ⅱb/Ⅲa基因多态性及血小板抗体的检测,探讨其与血小板输注疗效的关系.方法 采用聚合酶链反应(PCR)扩增结合测序的方法检测患者GPⅡb/Ⅲa基因中5个外显子的9个多态性位点,采用固相凝集法检测患者血小板抗体.结果 98例患者中只检测到GPⅡb基因的第26外显子存在T18809G变异,导致Ile843Ser多态性,产生HPA-3aa/ab/bb血型的3种基因型.此3种基因型均与血小板抗体产生相关,造成血小板输注无效.98例患者的血小板抗体阳性率为52.0％,1 468袋血小板输注总有效率为77.8％,其中65袋配合性血小板输注的有效率为83.1％.3种基因型之间均无明显差异.结论 血小板特异性及相关性抗体的存在是造成血小板输注无效的主要免疫性因素,GPⅡb基因上的HPA-3多态性与血小板输注无效有关.
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多次输血后患者血小板输注无效的血小板抗体检测与分析
目的 探讨与检测多次输血后血小板输注无效(PTR)患者的血小板(PLT)抗体阳性率、特异性,并分析其影响因素.方法 对2012年1月～2014年7月72例住院患者经多次输血后血小板输注无效的血清标本,采用固相凝聚法检测血小板抗体,统计血小板同种抗体与人类白细胞抗原(HLA)、人类血小板抗体(HPA)的特异性和阳性率,并进一步分析其与年龄、输血次数、所输入血液成分和性别的关系.结果 血小板输注无效患者血小板同种抗体检出率为64.0％(46/72);其中同种HPA抗体阳性率为22.2％(16/72),同种HLA抗体阳性率为42.0％(30/72),抗体HLA占所有免疫性抗体的6 5.2％(30/46);在检出HPA抗体的患者中有56.0％(9/16)的患者同时检出HLA抗体;血小板自身抗体检出阳性率为13.0％(9/72).女性患者血小板抗体检出阳性率为69.2％(27/39),高于男性患者58.0％(19/33),差异无统计学意义(x2=1.05,P＞0.05).血小板抗体随着输血次数增多而增高(x2=17.68,P＜0.01).不同类型血液成分输注所产生的血小板抗体阳性率中,少白细胞悬浮红细胞27.8％(5/18)低于悬浮红细胞72.2％(13/18),单采血小板72.2％(13/18)低于浓缩血小板83.3％(15/18),差异有统计学意义(x2=14.21,P＜0.01).结论 多次输血患者血小板输注无效中以同种HLA抗体多见,其次为HPA抗体,少数血小板自身抗体;血小板同种抗体阳性率随输血次数增多而增高,与输入血液成分不同而产生的血小板抗体密切相关,与性别无关.
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岳阳地区无偿献血者HPA1-6,15基因分型及频率调查
目的 了解岳阳地区汉族人群血小板抗原1-6,15多态性分布及基因频率.方法 采用PCR-SSP方法对岳阳地区204名无血缘关系固定血小板无偿捐献者进行HPA1-6及HPA-15系统的基因分型.结果 岳阳地区无偿献血者HPA1-6,15基因分型未发现HPA-1bb、-2bb、-4bb、-5bb.其中基因频率占98％以上的有HPA-1aa、-4aa、-5aa,本研究首次发现HPA-6bb,说明HPA-6具有多态性,杂合程度较低.结论 岳阳地区汉族人群HPA分布具有本地人群特点,调查数据分布符合Hardy-Weinberg平衡定律,HPA-3和15系统具有多态性,在同种免疫性血小板随机输注时易产生同种免疫反应.
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血小板血型抗原HPA-2在CHO细胞中的表达
目的在CHO细胞中表达血小板血型抗原HPA-2a和2b.方法从人巨核细胞系MO7e中采用RT-PCR方法扩增出血小板血型抗原HPA-2抗原位点所在的血小板糖蛋白Ⅰb氨基端302个氨基酸的cDNA,并将第434位的C突变为T,使得相应的氨基酸苏氨酸(Thr)突变为蛋氨酸(Met).将HPA-2a和2b基因插入真核表达质粒pcDNA3.1(+),将重组质粒pHPA2a和pHPA2b以脂质体介导的转染方法导入CHO细胞中,以G418筛选获得抗性克隆,表达产物用瑞斯托菌素诱导血小板凝集试验的抑制作用测定活性.结果获得了人血小板血型抗原HPA-2a和HPA-2b的基因,并在CHO细胞中进行了表达.表达产物具有vWF结合功能.结论成功地表达了人血小板血型抗原HPA-2a和HPA-2b,对进一步研究血型抗原特定表位及功能、检测同种异体抗体和研究同种抗原引起的免疫性血小板减少性紫癜的发病机制具有重要意义.
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合肥地区献血者血小板抗原多态性的初步分析
目的探讨人类血小板抗原的多态性.方法采用PCR-SSP法对合肥地区120名无关献血者的血小板抗原HPA-1,2,3,4,5进行DNA分析.结果 HPA-1b、4b和5b属低频率,所有120名献血者均为HPA-4a.在检测中没有发现一例同时具有两个低频率抗原.结论合肥地区HPA-1a,4a,5a基因型较为常见,HPA-1b,5b基因型较为罕见,未发现有4b基因型.
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福建汉族人群人类血小板抗原HPA-15多态性分析(附113例报告)
目的 分析福建汉族人群人类血小板抗原(HPA)-15基因多态性,为临床血小板输注提供依据.方法 采用聚合酶链反应-序列特异引物法(PCR-SSP)技术对113名福建汉族健康个体进行HPA-15基因分型.结果 HPA-15aa、HPA-15ab及HPA-15bb的分布频率分别为0.274、0.522和10.204,与我国其他省份汉族人群比较,差异无统计学意义.HPA-15a、HPA-15b抗原不配合率分别为0.116和10.133.结论 HPA-15基因多态性区域差异不明显.HPA-15a/b抗原不配合率较HPA其他系统高,可能导致产生同种免疫性血小板抗体的概率增加,在临床血小板输注中的作用值得重视.
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血小板抗原谱细胞的建立和应用
目的 根据广东汉族人群血小板抗原的基因频率,组建血小板抗原谱细胞系,为血小板抗体的特异性鉴定奠定技术基础.方法 采用PCR-SSP技术对来自广东省汉族人群的388例无关献血者的血小板抗原HPA1-6和15进行基因分型,并根据基因频率挑选O型血小板抗原细胞建立谱细胞系.结果 在134例O型献血者中挑选出8个可覆盖HPA1-6和15系统中共13个抗原的血小板细胞,并初步应用于1例同种免疫患者的血小板抗体检测.结论 血小板特异性抗原谱细胞的建立,可为同种免疫引起的血小板输注无效等疾病的诊断和研究提供实验依据.
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丙型肝炎患者HPA多态性与血小板计数的关系
目的:研究丙型肝炎患者血小板抗原(HPA)多态性与血小板计数的相关性.方法:对丙型肝炎患者进行HPA-2、-3、-5和HPA-15基因分型及血小板计数.结果:不同HPA基因型的丙型肝炎患者,其血小板计数差异无统计学意义.结论:HPA多态性与丙型肝炎患者血小板计数无相关性.
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SYBR Green Ⅰ实时PCR用于血小板抗原HPA-2、3基因分型的研究
目的:应用SYBR Green Ⅰ实时PCR技术,建立一个血小板抗原HPA-2、3的基因分型方法.方法:应用SYBR Green Ⅰ实时PCR,分别扩增样本的HPA-2、3的a和b等位基因.在PCR反应后,依据a和b等位基因Ct值的差值△Ct,使用聚类分析K-means cluster分析法,确定HPA-2、3的基因型.将SYBR Green Ⅰ实时PCR的基因分型结果和常规PCR-SSP法进行比较.此外对该法的重复性进行评价.结果:105个血液样本的SYBR Green Ⅰ实时PCR基因分型结果和常规PCR-SSP法完全一致.10个血样的2次SYBR Green Ⅰ实时PCR基因分型结果是一致的.结论:HPA的SYBR Green Ⅰ实时PCR分型方法具有快速、简单、准确、通量高、重复性好等优点,要优于常规的PCR-SSP法.
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广州汉族人群HPA-9多态性调查
目的 调查广州地区汉族人群血小板抗原HPA-9多态性分布情况.方法 用PCR-SSP技术对144例广州地区固定机采血小板供者进行HPA-9基因分型.结果 检出HPA-9a 144例,未检出HPA-9bw.研究人群HPA-9的基因型分布与H-W法则吻合.与不同国家和地区HPA-9基因频率比较无显著性差异(P>0.900).结论 填补了广州地区人群HPA-9多态性分布数据的空白,可以作为本地区血小板供者HPA资料库.
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血小板抗原基因分型在随机血小板输注中的意义
目的 对海南岛黎族人群血小板-1～6、15抗原系统进行基因分型.探讨血小板抗原分布与随机血小板榆注的关系以及血小板抗原分布与疾病的相关性,为黎族人群临床血小板输注提供实验依据.方法 采用PCR-SSP方法对180名黎族人进行HPA-1～6、15抗原进行基因分型.结果 本研究揭示了海南岛黎族人HPA-1～6、15抗原基因频率分布概况,证实黎族人HPA-2、-3、-5、-6、-15系统具有多态性.结论 研究结果提示黎族人在随机血小板榆注中,供受者HPA-3系统不配合的机会为37.49%,HPA-15系统不配合的机会为36.93%,是随机血小板输注的关注重点.HPA-5系统不配合的机会为6.23%,HPA-2、-6系统不配合的机会只有0.56%.而HPA-1、-4抗原未检出相应HPA-b基因,同种免疫发生的危险性会非常低.
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血小板抗原抗体检测与血小板输液的临床应用
血小板输注适用于预防和治疗血小板减少或血小板功能缺陷患者的出血,近年来在临床上的使用日益普及.但是部分患者在多次输注血小板后可产生血小板相关抗体,导致血小板输注无效;也有部分患者由于其他原因,使血小板输注无效.本文对血小板抗原抗体的部分检测方法及血小板输注的临床应用作一综述.
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海南岛黎族人血小板1～17抗原系统基因多态性研究
目的 调查海南岛黎族人群血小板抗原基因(human platelet alloantigens,HPA)1～17等位基因多态性,分析不同民族的差异,评估其在随机输血中供受者HPA不配合比例,为黎族人群临床血小板输注提供实验依据.方法 采用聚合酶链反应-序列特异性引物方法 对180名黎族人HPA-1～17抗原系统34个等位基因分型.结果 黎族人HPA的等位基因频率分别为:HPA-2a:0.9972,-2b:0.0028,-3a,0.4889,3b:0.5111,5a:0.9667,-5b:0.0333,-6a:0.9972,-6b:0.0028,-15a:0.4250,-15b:0.5750,其余HPA-1、-4、7、-14、-16、-17系统未检出相应HPA-b等位基因.结论 本研究结果 揭示了黎族人HPA-1～17基因型和等位基因频率分布概况,提示黎族人HPA基因频率分布具有黎族人独有的特点.在随机血小板输注中,HPA不配合的机会依次为:HPA-3为37.49%、HPA-15为36.93%、HPA-5为6.23%,只需检测供、受者HPA-3、-5、-15基因相合,就可基本达到血小板匹配性输注.
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北京地区汉族献血人群血小板HPA1-17基因多态性的研究
目的 分析北京地区588名汉族无偿献血人群HPA基因多态性分布特点,计算HPA抗原不配合率的大小,分析有临床意义的HPA抗原系统并建立已知HPA基因型的血小板供者数据库.方 法基因分型采用PCR-SSP(Polymerase Chain Reaction with Sequence-Specific),计算基因频率、基因型频率和x2值,确定是否符合哈迪——温伯格平衡定律,并与国内外不同人群进行比较分析是否存在差异.结果 588名献血者均表达出HPA-a基因中的1a-17a基因;仅表达HPA-b基因中的1b-8b和15b;在基因型中主要以aa纯合子表达为多,其次是ab基因型表达较多,bb纯合子表达少.具有高杂合度的是HPA-3和HPA-15,HPA-3的aa、aa、ab基因型频率分别是0.352 0、0.4286、0.219 4;HPA-15的aa、bb、ab基因型频率分别是0.205 8、0.471 1、0.323 1.HPA9-14、16、17只表达a基因,抗原不配合率低.x2检验计算结果,HPA-3基因分布不符合哈迪——温伯格平衡定律,其余基因符合哈迪——温伯格平衡定律.结论 该研究表明北京地区588名献血者的HPA基因分布具有自身特点,建立北京地区HPA基因供者库,在临床治疗方面具有重要意义.
