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血红素氧合酶对大鼠肝脏缺血再灌注损伤时钙离子-ATP酶及细胞间粘附因子-1的影响
在生理状态下,细胞内Ca2+-浓度主要依赖细胞膜Ca2+-ATP酶的调控,而细胞间粘附因子(ICAM)是介导中性粒细胞与内皮细胞粘附的主要因子,本文应用血红素氧合酶(H0)诱导剂氯高血红素(hemin)和抑制剂锌原卟啉(ZnPP)研究HO对大鼠肝脏缺血再灌注(IR)损伤时Ca2+-ATP酶活力和ICAM-1蛋白表达的影响.
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卵巢癌患者手术治疗前后血清SIL-2R、SCP和 VEGF检测的临床意义
文献证实[1],白细胞介素-2受体(SIL-2R)对恶性肿瘤患者的病程、疗效和预后观察有一定的临床价值.血清铜蓝氧化酶活力(SCP)的变化与恶性肿瘤的发生与发展有十分密切的关系[2].血管生成受血管生成促进因子和血管生成抑制因子的共同调控.血管生成促进因子中血管内皮生长因子(VEGF)的作用强[3].本文对卵巢癌患者手术治疗前后血清SIL-2R、SCP和 VEGF进行联检.现将结果报告如下.1 资料和方法1.1 临床一般资料1.1.1 病人组:32人,均为我院妇产科经临床明确诊断的卵巢癌患者(包括体征、 B超、 CT和实验室的相关检测指标,后经手术后病理切片证实).
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食管癌患者手术前后TNF,SIL-2R和SCP活力的变化
文献报告[1],TNF主要由单核巨噬细胞产生,在免疫病理损伤中具有重要的临床价值.白细胞介素-2受体测定对肿瘤患者的病程、疗效及预后观察均有一定的临床意义[2].近年的研究表明[3],人血清铜蓝蛋白氧化酶活力(SCP)与恶性肿瘤的发生与发展有十分密切的关系.本文报告食管癌患者手术前后血清TNF、SIL-2R和SCP活力的变化.
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肺癌患者手术前后血清CEA,SIL-2R,SCP活力的变化
据文献证实[1],CEA作为肿瘤标志物已广泛应用于临床,对结肠癌、直肠癌、肺癌的诊断和治疗均有重要的临床价值.白细胞介素-2受体测定对肿瘤患者的病程、疗效及预后观察均有一定的临床意义[2].近年的研究表明[3],人血清铜蓝蛋白氧化酶活力(SCP)与恶性肿瘤有密切关系.本文报告肺癌患者手术治疗前后血清CEA、SIL-2R、SCP含量的变化.
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食管癌手术治疗前后血清SIL-2R和SCP活力检测的临床意义
文献报告[1],SIL-2R(白细胞介素-2受体)测定对肿瘤患者的病程、疗程和预后观察均有十分重要的临床价值.血清铜蓝蛋白氧化酶活力的检测对恶性肿瘤的发生和发展有极为重要的临床意义[2].本文报告食管癌患者手术前后血清SIL-2R和SCP(血清铜蓝蛋白)活力的变化,并就临床意义作初步的探讨,现将结果报告如下.
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白血病患者治疗前后血清sIL-2R、SCP活力的变化
文献证实[1],sIL-2R(白细胞介素-2受体)测定对恶性肿瘤患者的病程、疗效和预后观察均有一定的临床价值.近年的研究表明,人血清铜蓝蛋白氧化酶活力的变化与恶性肿瘤有十分密切的关系[2].本文报告白血病患者治疗前后血清sIL-2R、人血清铜蓝蛋白氧化酶活力(SCP)含量的变化,现报告如下.
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葡萄糖酸钙对肌苷发酵中糖代谢途径关键酶酶活力的影响
在肌苷发酵过程中向培养基中添加葡萄糖酸钙,研究其对葡萄糖代谢途径中关键酶酶活力和肌苷合成的影响,结果显示适量的葡萄糖酸钙能提高6-磷酸葡萄糖脱氢酶和葡萄糖激酶的酶活力,促进肌苷的合成.
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氟化钠对林可霉素发酵的影响
研究了在15L发酵罐中添加氟化钠对林可霉素合成的影响.结表明,96h向培养基中添加100mg/L氟化钠,发酵液中林可霉素的效价达5795u/ml,比对照提高12.6%.进一步研究发现,氟化钠可以降低糖酵解途径中丙酮酸激酶的酶活力,使更多碳源流向磷酸戊糖途径,可为林可霉素合成提供更多前体,从而提高林可霉素产量.
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细胞型血小板活化因子乙酰水解酶Ⅱ活力与急性脑梗死的关系
目的 研究细胞型血小板活化因子乙酰水解酶Ⅱ(PAF-AHⅡ)活力与急性脑梗死的关系.方法 采用PAF-AHⅡ活力检测试剂盒检测120例不同病程、梗死面积及病情的急性脑梗死患者的PAF-AHⅡ活力,并与健康对照组比较.结果 脑梗死组病程1d、2~3d、4~7d PAF-AHⅡ活力明显高于健康对照组(均P<0.01),病程8~14d与健康对照组差异无统计学意义(均P>0.05);病程1d、2~3d、4~7d大面积脑梗死组的PAF-AHⅡ活力比中、小面积脑梗死组明显增高(均P<0.05),病程8~14d两组间差异无统计学意义(均P>0.05);病程≤7d脑梗死患者的PAF-AHⅡ活力与病情严重程度呈正相关(r=0.31,P<0.05),病程8~14d脑梗死患者的PAF-AHⅡ活力与病情严重程度无相关性(P>0.05).结论 PAF-AHⅡ活力与急性脑梗死的发生、发展有密切关系,并对判断脑梗死的严重程度有一定意义.
关键词: 细胞型血小板活化因子乙酰水解酶Ⅱ 酶活力 脑梗死 -
Huntington舞蹈病一家系7例分析
进行性遗传性舞蹈病又称Huntington舞蹈病,是一种少见的基底节及大脑皮层变性的常染色体显性遗传病,现报告一家系4代中7例患者如下.1 临床资料根据先证者线索,调查此家系4代24人,有患者7例,其中男5例,女2例,见家系谱图.1.1 先证者(Ⅲ5) 男,44岁,山东籍农民.36岁时出现站立不稳,手指动作笨拙,不能从事细致工作,尚能参加田间劳动,未予治疗.3~5年后发展为步态不稳,行走时常跌倒 ,耸肩,挤眉弄眼,言语欠流利,流涎.查体:面肌可见不自主抽动、颈部不自主扭转,双侧肢体均见舞蹈样动作,肌力、肌张力正常,肌肉无萎缩,无病理反射.曾服用氟哌啶醇2m g,每日3次,症状略缓解.1.2 Ⅲ8,女,34岁,为Ⅲ5的妹妹,2年前出现动作笨拙,流涎,书写困难,双侧肢体舞蹈样动作,步态不稳,睡眠时舞蹈样动作减少,仍可出现右侧肢体的不自主样动作,亦曾服用氟哌啶醇症状稍缓解.1.3 Ⅳ3,男,32岁,为Ⅲ2的儿子,23岁时出现行为怪异,常无故离家出走,多疑,怀疑其妻与邻居有不正当关系,28岁时逐渐出现面肌不自主抽动、耸肩、扮鬼脸,上肢舞蹈样动作,智能损害,生活不能自理,未予治疗.1.4 Ⅲ2,为Ⅳ3的母亲,30岁出现面肌不自主抽动、耸肩、双上肢舞蹈样动作,构音障碍 ,吞咽尚可,病情进行性加重,46岁死亡,死因不详.1.5 Ⅱ3,为Ⅲ2的父亲,36岁时出现精神障碍,常无故与家人及邻居吵架,行为怪异,面肌不自主抽动、颈部扭转,肢体尚无舞蹈样动作.38岁死于战争.1.6 Ⅱ5,为Ⅲ5的父亲,32岁出现面肌不自主抽动,颈部不自主扭转,行走时摇晃,易跌倒,无精神及智能障碍,58岁死亡,死因不详.1.7 Ⅰ1,为Ⅱ3、Ⅱ5之父,症状与先证者极相似,具体发病年龄及死亡年龄不详.图1 家系谱图2 讨论 Huntington舞蹈病较罕见,1982年前我国仅发现50例,目前文献报告已达200余例[1 ],其中1/3病例为近几年报道,说明本病发病率增加,应引起重视.本家系4代24人中有7例患者,均青春期后发病,病情进展缓慢,进行性加重,临床症状与体征相似,其中有2例合并精神障碍,6例出现智能损害,符合常染色体显性遗传规律.本病发病机制目前认为其基因位于染色体4的短臂上(HP),基因编码蛋白约为348000,病变主要位于大脑皮质和纹状体的尾状核,在尾状核和壳核有广泛小神经细胞缺失和胶质细胞增生.皮质主要是额叶第3、第4层神经细胞缺失.生化方面有GABA减少,其合成酶谷氨酸脱羧酶活力减低,纹状体内乙酰胆碱和胆碱乙酰转移酶活力减退,而多巴胺系统功能增强. 为了减少本病的发生,对本病患者的家庭应积极开展遗传咨询,并劝导其避免生育.
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基于乳液体系下荧光假单胞菌脂肪酶固定化的研究
构建油包水型乳液体系下假单胞菌脂肪酶固定化,并研究其酶学性质.采用单因素实验,以固定化脂肪酶的水解活力为指标,确定其固定的条件.利用橄榄油乳化法对固定化脂肪酶的催化适温度,热稳定性、适pH、pH稳定性、操作稳定性,酶促动力学参数等进行测定.获得了固定化脂肪酶条件:脂肪酶浓度为25.0 mg/mL,固定化温度为5℃,时间为2.0h,以大豆油作为乳化体系油相,以80.0 μL TritonX-100作为乳液体系的乳化剂,保护剂三丁酸甘油酯添加量为100.0 μL,交联剂戊二醛25%水溶液的添加量为40.0 μL,并测得在该条件下制备的固定化脂肪酶水解活力为9 220.0 U/g.固定化酶的粒径约10~25 μm,固定化酶经过11次重复使用之后仍然有约78%的相对酶活力.基于乳液体系下制备固定化脂肪酶具有工艺简单、条件温和及操作方便的特点.而且,固定化后的脂肪酶稳定性有明显的提高.
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连续监测法测定泥蚶血红蛋白过氧化物酶活性的研究
研究了泥蚶血红蛋白过氧化物酶活性测定的连续监测法.通过对两种Tg-Hb的催化底物、底物浓度、pH及温度的优化选择,确定泥蚶血红蛋白过氧化物酶活性的连续监测方法为:用pH7.0,50 mmol/L的磷酸盐缓冲液作为测定缓冲液,底物愈创木酚和双氧水的浓度为4 mmol/L和2 mmol/L,在25℃用分光光度计在动力学模式下检测470 nm波长下连续监测10~40 sec间的吸光度变化,根据△Aa70/min计算酶活力.与常规检测方法相比,该方法不仅简便易行,且有较高的准确度.
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含纤维素酶细菌的筛选及其纤维素酶生物学性质的研究
以上海崇明养殖场堆肥为筛选材料,通过刚果红染色鉴定,获得一株高活力纤维素酶生产细菌.研究表明该菌为芽孢杆菌,适宜在pH值7.0~8.0、37~42℃条件下生长.该菌的CMC酶活力的适pH值8.0,酶反应的适温度50℃,酶活力大时可达68.6 U/ml.ca2+、Cu2+、CO2+是纤维素酶的促进剂,高浓度的Cd2+和pb2+是纤维素酶的抑制剂,并且该纤维素酶对乙醇热耐受能力较强.
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菠萝蛋白酶的保存稳定性研究
针对菠萝蛋白酶稳定性方面存在的实际问题,研究了湿度条件、温度条件及60Coγ辐射对菠萝蛋白酶活性的影响,结果表明,随着储存时间的延长,湿度条件比温度条件更能影响酶的活性;选用60Coγ辐射(8 kGy)对菠萝蛋白酶进行杀菌,酶活损失率为11.0%.
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怡心力固体复合酶酶活力测定的适反应条件研究
目的 建立怡心力固体复合酶的酶活力测定方法.方法 通过测量还原型辅酶Ⅰ(NADH)在340 nm波长处吸光度的变化来测定固体复合酶的酶活力.结果 固体复合酶的适酶促反应条件为pH 7.6的0.4 mol/L三乙醇胺缓冲液,NADH浓度为0.12 mg/mL,底物浓度为30 mg/mL,酶浓度为10 mg/mL.结论 此法简便、准确,专属性强,可用于怡心力固体复合酶的酶活力测定.
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超声波对胰蛋白酶活力影响的机理研究
目的 探索超声波对胰蛋白酶催化的影响效果和作用方式.方法 研究胰蛋白酶经不同频率、不同功率、不同时间的超声波处理后酶活力的变化;用动力学参数变化和光谱学探索其影响催化的机理.结果 经超声波处理后酶活力普遍升高.用15 kHz、50 W超声波处理胰蛋白酶3 min,酶活力可提高45.4%.将粗酶用SephadexG75凝胶色谱,分部液在聚丙烯酰胺凝胶电泳检验显示出一条带,说明酶被纯化到电泳纯程度.对纯酶进行动力学分析,结果表明经超声波处理后Km值变小,Vmax值也降低,说明超声波处理使酶对底物的亲和力增大.超声波处理不会改变胰蛋白酶分子的构型,但会改变酶分子的构象.结论 超声波对胰蛋白酶催化活性的提高可能是由于改变酶分子的构象、增强酶分子对底物的亲和力的结果.
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高效液相色谱法考察蒜酶活力测定中的影响因素
目的 考察底物蒜氨酸纯度对蒜酶活力测定数值的影响,比较催化温度为25,35,37℃时蒜酶活力测定数值的差异.建立可行的蒜酶活力检测方法 .方法 采用高效液相色谱法,以蒜氨酸的减少量计算蒜酶活力.结果 进行蒜酶活力测定时,底物蒜氨酸的纯度应不小于90%,确定蒜酶催化反应温度为35℃.结论 建立了以95%蒜氨酸为底物,催化温度为35℃的蒜酶活力测定条件.
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纤溶酶产生菌株BS-26的发酵工艺优化
目的 对纤溶酶产生菌株BS- 26发酵工艺进行优化.方法 通过单因素试验和正交试验,确定了摇瓶发酵的佳条件.结果 该菌株产纤溶酶佳的发酵条件为:3%糊精、1%酵母粉、0.02%CaCl2、0.07%MgSO4,初始pH 7.0,接种量为6%,装液量为70/250(mL/mL),摇床温度37℃,转速180 r/min,发酵时间60 h,在该条件下产酶酶活可达593.03 U/mL,是原发酵培养条件下产酶活力的4.5倍.结论 此发酵条件可以很好地提高纤溶酶的活力,为发酵规模的扩大奠定了基础.
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温度及不同浓度乙醇对胰酶活力的影响
目的找出胰酶在制剂工艺过程中酶活力损失较大的主要原因。方法根据胰酶的制剂生产工艺条件,选取40℃及不同浓度乙醇(20%~100%),分别考察对胰酶活力的影响。结果 40℃ 8~12h胰脂肪酶活力降低10%左右;吸湿更容易降低胰脂肪酶和胰淀粉酶活力。结论胰酶制剂好不用湿法制粒。
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乌拉地尔干预急性心肌缺血的细胞机制
目的新的α肾上腺素受体拮抗剂乌拉地尔(阻断α1受体为主),治疗高血压急症、急性心肌缺血和肺水肿有效.本研究试图阐述乌拉地尔对缺血心肌内能量代谢状态、SR钙泵活力和钙释放通道的作用,探讨其治疗急性心肌缺血的分子和细胞机制.方法制备急性心肌缺血家兔模型,给予乌拉地尔1.0mg@kg-1@d-1,3天后测定缺血和非缺血区心肌内ATP、ADP、AMP和乳酸量,计算能荷;测定SR Ca2+ATP酶活力和钙释放通道[3H]Ryanodine结合的Bmax的与Kd值.测定心肌细胞缺氧培养及药物干预时的SR钙泵活力.结果缺血和梗死区心肌内ATP、ADP、AMP含量比非缺血区下降31%、40%和33%,乳酸含量急剧升高65%,差异显著(P<0.05和0.01);SR Ca2+ATP酶活力从(1.19±0.11)μmol/g降至0.94μmol/g(P<0.05);钙释放通道数目下降,亲和力不变.治疗组缺血心肌内ATP、ADP、AMP含量明显回升、能荷升高,SR Ca2+ATP酶活力及释放通道数目均恢复正常(P<0.05和0.01).缺氧培养乳鼠心肌细胞钙泵活力下降53%,乌拉地尔和拉西地平药物干预时钙泵活力无明显变化.结论乌拉地尔通过α受体改善缺血心肌内能量代谢、减少乳酸堆积、调节SR Ca2+泵和钙释放通道功能、减轻钙超载是治疗的分子和细胞机制之一.