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登革病毒DNA疫苗的研究进展
目前登革病毒（ dengue virus ）感染已成为全球严重的公共卫生问题，亟待有效的疫苗进行特异性预防。与减毒活疫苗、灭活疫苗等传统疫苗相比，DNA疫苗具有制备简便、价格低廉、无感染风险、便于储运以及长效性好等特点，成为近年来登革病毒疫苗研究的热点。该文综述了登革病毒DNA疫苗构建策略、接种方式、免疫策略、免疫佐剂、免疫效果等方面的研究进展。
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增强DNA疫苗免疫效果策略研究进展
在近年发展的疫苗策略中,DNA疫苗由于具备独特的优势而成为研究的热点.然而,虽然DNA疫苗的效果已经在多种动物模型中得到了证实,但是在人体临床试验的结果却不尽如人意.近年来,研究人员发展了多种新的方法来提高DNA疫苗的免疫效果.本文就这一领域的进展进行综述,并对DNA疫苗的应用前景做一展望.
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鼻腔免疫微球研究进展
可生物降解微球作为鼻腔免疫疫苗的载体有延长免疫时间、增强免疫作用等优点.本文从鼻腔免疫微球的包裹材料、制备工艺、鼻腔免疫后的体内分布情况、免疫机制、鼻腔免疫DNA微球等方面对近年来的研究进展作一综述.
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治疗型HBV DNA疫苗的研究与应用前景
全世界约有3.5亿例乙型肝炎(简称乙肝)病毒(HBV)慢性携带者[1].HBV 慢性感染是导致肝硬化、肝癌的首要病因,每年有100万～200万患者死于该类疾病.发生 HBV 感染慢性化的主要原因,在于机体不能形成足够强的特异性细胞免疫应答以清除病毒.
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生物防御用DNA疫苗
DNA疫苗的优点包括可快速大量制造、能引起广谱免疫反应、可用非侵入性手段给药等.此外,疫苗还可以表达多种抗原、预先设定诱导的恰当免疫反应等特点.这些优点使DNA疫苗成为开发生物防御疫苗的良好途径.本文讨论了潜在的生物防御DNA疫苗.
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实时定量PCR技术研究DNA疫苗在小鼠体内的生物分布
目的:建立并确证实时定量PCR(RT-PCR)定量检测生物基质中质粒DNA的方法,并应用于治疗性核酸疫苗HIV-PV的体内生物分布研究.方法:建立SYBR Green荧光定量PCR绝对定量方法(Q-PCR),考察方法的特异性、灵敏度、精密度、准确度以及生物基质对PCR的抑制效应.小鼠尾静脉注射裸质粒DNA、小鼠尾静脉注射和灌胃2种途径免疫HIV-PV DNA疫苗,考察建立的Q-PCR方法对于不同形式的质粒DNA疫苗以及不同免疫方式的适用性.结果:Q-PCR方法可特异检测目标DNA,定量检测范围为10～107拷贝/100 ng基因组DNA(gDNA),定量下限(LLOQ)为10拷贝/100 ng gDNA.批内和批间精密度分别<11%和8%;由高至低4种浓度(107,104,100,10拷贝/100 ng gDNA)QC样品准确度分别为(1.57±0.02)%,(1.60±0.01)%,(2.20±0.02)%和(2.28±0.02)%.用Q-PCR方法成功得到不同形式DNA疫苗和不同免疫途径(尾静脉注射和灌胃HIV-PV疫苗)下该质粒DNA的生物分布模式.结论:利用RT-PCR技术,建立了符合DNA疫苗生物分布研究要求的定量检测生物基质中质粒DNA的方法学,并成功应用于不同质粒DNA疫苗形式和不同免疫途径下的DNA疫苗的生物分布研究.
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DNA-天坛痘苗复合型艾滋病疫苗Balb/c小鼠重复给药毒性研究
目的:对DNA-天坛痘苗复合型艾滋病疫苗进行重复给药毒性研究,以支持其Ⅰ期临床研究方案的制定.方法:Balb/c小鼠肌肉注射DNA疫苗3次后,皮内接种痘苗1次加强免疫.检测疫苗对一般毒理学指标的影响、监测疫苗的免疫原性、免疫毒性.结果:DNA-天坛痘苗复合型艾滋病疫苗具有较强的免疫原性,可以诱导较强的T细胞免疫反应且可以维持较长时间.未见疫苗相关的一般毒性和免疫毒性.结论:DNA-天坛痘苗复合型艾滋病疫苗可以诱导较强的体液免疫和细胞免疫反应,对一般毒理学指标未见显著影响,未见明显免疫毒性.目前该疫苗正处在临床研究阶段.
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脂质体作为免疫佐剂的应用进展
目的 概述脂质体作为免疫佐剂的应用进展.方法 检索近十年来国内外关于脂质体作为免疫佐剂的相关文献,并进行分析、归纳.结果 综述了脂质体在黏膜疫苗、DNA疫苗中的应用,以及病毒小体的应用进展.结论 脂质体在黏膜疫苗、DNA疫苗中具有广阔的应用前景,病毒小体在开发预防性和治疗性疫苗中具有巨大的潜能.
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DNA疫苗微球给药系统的研究进展
目的介绍以生物降解材料制备DNA疫苗微球给药系统(microspheres drug delivery system,以下简称MDDS)的研究进展,为此领域的研究提供参考.方法根据国内外文献,较全面地综述了DNA疫苗MDDS的优点,载体材料的种类、规格及其优缺点,微球的制备方法,微球的理化特性要求,给药剂型和给药途径,体内外免疫效果的评价,药动学、组织器官分布和体内转运机制的研究以及目前MDDS研究中需解决的问题.结果与结论与常规冻干粉针剂相比,DNA疫苗MDDS的研究结果显示出明显的优势,必将会为DNA疫苗的临床应用提供一个免疫效果好和安全性能高的给药系统.
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鼠疫疫苗的研究现状和进展
目的 对鼠疫疫苗的研究进展进行综述,为新型鼠疫疫苗的研究和应用提供参考.方法 通过查阅近年来与鼠疫疫苗有效性和安全性研究相关的国内外文献,进行归纳总结.结果与结论 现有鼠疫疫苗因其在保护力和安全性方面的限制,需要开发更为安全有效的新型鼠疫疫苗.鼠疫亚单位疫苗、DNA疫苗和应用新佐剂及改变接种途径的鼠疫疫苗等是目前和今后一段时间内的研究热点.对鼠疫菌候选抗原的研究是鼠疫亚单位疫苗研究的基础.新型鼠疫疫苗对增加使用者依从性、提高疫苗免疫效果和安全性具有重要意义.
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DNA疫苗经皮给药系统的研究进展
目的 评述DNA疫苗经皮肤给药免疫近年来的研究进展.方法 综合国内外文献,阐述DNA疫苗经皮肤给药的3个主要方式,即化学、物理和机械途径,并对它们存在的问题进行探讨,特别是着重介绍DNA疫苗微针经皮给药的优势及其应用前景.结果 与结论经皮免疫是一种新的DNA免疫策略,当前的研究方向是选择更加合适的给药系统,提高用药的安全性和顺应性.
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DNA疫苗的研究现状
DNA疫苗的概念提出已有十几年的时间,其间针对DNA疫苗的研究工作取得了很大进展,其有效性已在动物体内得到了验证,而且部分疫苗已进入临床试验阶段,但在取得进展的同时也遇到了许多制约其发展的难题.本文对DNA疫苗发展现状,遇到的问题,采取的策略及可能引起的副反应加以综述.
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DNA-天坛痘苗复合型艾滋病疫苗小鼠体内生物分布研究
目的 考察DNA-天坛痘苗复合型艾滋病疫苗在小鼠体内生物分布情况.方法 采用定量PCR方法分别对复合疫苗免疫后DNA疫苗的分布情况以及复合疫苗组分HIV-痘病毒载体疫苗单独免疫后的生物分布情况进行测定.结果 复合疫苗免疫后5d和30d,主要是在注射部位检测到质粒DNA残留,在免疫后第56d,各脏器均未检测到质粒DNA残留.HIV-痘病毒载体疫苗单独免疫后第5d,仅在给药部位检测到DNA残留,免疫后第36d,各脏器均未检测到DNA残留.结论 复合疫苗免疫机体后短期只在注射部位分布,且随时间延长减少至消失,不会长期在机体内存留.
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天花疫苗的研究现状和进展
目的 对现行天花疫苗和天花疫苗的研究进展进行综述,为天花疫苗的研究和应用提供参考.方法 通过查阅近年来与天花疫苗有效性和安全性研究相关的国内外文献,进行归纳总结.结果 扩大天花疫苗储备已成为全球性的需要,传统天花疫苗的有效性已得到充分验证,但会引起很多副作用,需要开发更为安全有效的天花疫苗.人们先后研发了几种不同类型的天花疫苗,包括细胞培养的活病毒疫苗、复制型和复制缺陷型的减毒活疫苗、蛋白亚单位疫苗、DNA亚单位疫苗、载体亚单位疫苗等.结论 减毒活疫苗与传统疫苗相比具有更好的安全性,但其免疫原性相对较低,目前,亚单位天花疫苗的研究仍处于起步阶段,需要进行更多和更深入的研究来验证其临床应用的可行性.新型天花疫苗的研发对增加使用者依从性、提高疫苗免疫效果和安全性具有重要意义.
关键词： 天花疫苗 减毒活疫苗 复制缺陷型减毒活疫苗 蛋白亚单位天花疫苗 DNA疫苗 -
基因枪介导pVAX1-2PFcGB融合肿瘤抗原基因疫苗小鼠体内抑瘤活性研究
目的:探讨基因枪免疫pVAX1-2PFcGB融合肿瘤抗原基因疫苗对小鼠移植瘤生长的抑制作用.方法:在基因枪介导下,向接种EMT6乳腺癌肿瘤细胞的Balb/c小鼠导入融合肿瘤抗原基因疫苗pVAX1-2PFcGB,通过观察计算免疫动物的成瘤时间、肿瘤体积、抑瘤率来评价该基因疫苗的抗肿瘤作用.结果:基因枪介导的pVAX1-2PFcGB融合肿瘤抗原基因疫苗能够明显推迟和抑制移植瘤的生长,显示出明显的抗肿瘤效果.结论:基因枪介导的DNA疫苗pVAX1-2PFcGB能够有效诱导机体的免疫应答,预防和抑制小鼠移植瘤的生长.
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治疗性HBV DNA疫苗的研究及进展
HBV DNA疫苗是通过向体内递送编码HBV抗原的外源性重组质粒，刺激机体产生特异的体液免疫反应和细胞免疫反应，由于其能较好的诱发Th1型细胞介导的细胞毒反应，而且同蛋白质疫苗相比设计相对简单，生产高纯度产品所需成本更低，因此DNA疫苗成为对慢性乙肝进行免疫治疗的一种选择，它不仅可作为预防性疫苗，也可作为治疗性疫苗，在乙型肝炎预防和治疗中具有广阔的应用前景。
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结核病DNA疫苗研究现状及其应用前景
DNA疫苗是90年代初刚刚兴起的免疫学新技术,目前已成为世界瞩目的传染病防治研究工作的一个重点和热点,DNA疫苗将成为21世纪新型的结核病预防和治疗性疫苗.本文概述了结核病DNA疫苗研究的现状及其应用前景.
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口服pCDNA3.1+/Ag85A DNA疫苗在小鼠肠道的表达
目的 分析口服pCDNA3.1+/Ag85A DNA疫苗在小鼠肠道局部的表达情况.方法 用脂质体包裹pCDNA3.1+/Ag85A DNA质粒制成口服疫苗.对照组雌性C57BL/6小鼠5只用生理盐水灌胃,实验组雌性C57BL/6小鼠5只用脂质体包裹的Ag85A DNA疫苗灌胃.共免疫3次,每次间隔14 d.免疫结束后14 d处死小鼠,取小肠组织固定于4％多聚甲醛中备用.采用免疫荧光和免疫组化方法检测两组小鼠小肠派氏淋巴结、派氏淋巴结内的树突状细胞和小肠黏膜上皮细胞中Ag85A的表达情况.结果 在实验组小鼠的小肠黏膜上皮细胞、派氏淋巴结以及派氏淋巴结内的树突状细胞中均检测到重组pCDNA3.1 +/Ag85A DNA疫苗的表达,而且不同部位的小肠黏膜上皮细胞中Ag85A的表达强度不同,靠近固有层的小肠黏膜上皮细胞内Ag85A的表达强度比靠近肠腔侧的小肠黏膜上皮细胞高(P＜0.05).在对照组小鼠上述部位无重组DNA疫苗的表达.结论 脂质体包裹的口服DNA疫苗能够被小鼠肠道吸收,同时可诱导特异性黏膜免疫反应.
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活体电穿孔导入法增强恶性疟原虫核酸疫苗免疫反应研究
目的 采用活体电穿孔免疫方法,研究恶性疟原虫DNA核酸疫苗不同免疫剂量对于动物免疫反应的影响,并对载体中CpG寡脱氧核苷酸基序的免疫刺激活性进行了初步探讨.方法 将恶性疟原虫多表位嵌合抗原M.RCAg-1基因克隆于真核表达载体VR1012中,使用电穿孔导入方法免疫小鼠,采用ELISA检测抗体效价、ELISPOT测定细胞因子分泌水平,探索基因疫苗佳免疫剂量以及考察免疫反应类型.使用计算机分析恶性疟核酸疫苗中特殊CpG基序组成,实验验证基因疫苗中CpG基序的免疫刺激活性.结果 相同DNA免疫剂量下,电穿孔免疫法与单纯肌内注射免疫法相比较,小鼠血清IgG抗体效价提高118倍,且能显著诱导体内特异性Th1和Th2型细胞反应.电穿孔免疫小鼠血清可识别天然虫体抗原,抗体效价可达1∶1200.恶性疟原虫核酸疫苗抗原DNA含有24个CpG免疫活性基序,可以有效的刺激人外周血单个核细胞(PBMCs)增殖与IL-6分泌.结论 活体电穿孔方法可以显著提高恶性疟原虫DNA疫苗体液免疫和细胞免疫水平.
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DNA疫苗的研究进展
DNA疫苗是当前免疫学和分子生物学中的研究热点之一.本文拟对DNA免疫的原理、应用、发展状况及其存在的问题作一简要介绍.
