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以创新谋发展提升实验室管理水平
现代科学技术的进步极大地促进了检验医学的发展.基因测序、生物芯片、大数据的分析,以及蛋白组学、免疫组学、微生物组学等的迅速发展,使精准医学成为备受关注的热门话题与方向;而不断涌现的新技术、新方法,也给实验室管理带来新的挑战.
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小腿小细胞型骨外骨肉瘤临床病理观察
目的 研究骨外骨肉瘤的临床病理特征、诊断和鉴别诊断.方法 运用HE染色、免疫组化和电镜检查,对1例罕见的小腿骨外骨肉瘤进行临床病理形态学研究,并复习文献.结果 巨检:为灰白色牛角样肿物.镜检:肿瘤由大小一致的小细胞构成.瘤细胞的胞质甚少,核呈圆形、卵圆形或不规则形,染色质细,不见核仁,或有2~3个小核仁,核分裂多见.肿瘤被纤维结缔组织分隔成小结节状,伴有结节周围骨化及钙化,并可见到瘤细胞产生的骨基质,及大量互相吻合的编织骨小梁形成.免疫组化:vimentin、CD99、CgA和S-100(-),Syn散在(+),NSE(±).电镜:瘤细胞胞质内见微丝,有丰富的线粒体和内质网,但未见神经分泌颗粒;细胞外有胶原.结论 小细胞型骨外骨肉瘤临床和影像学表现易与骨化性肌炎相混淆.
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初论免疫组化标准化(二)
2.2.2抗原修复液的选择加热抗原修复缓冲液有多种,如柠檬酸盐缓冲液(pH6.0)、Tris(pH7~8)、EDTA(pH8.0)等,目前首选柠檬酸盐缓冲液(pH6.0),优点是染色背景清晰,适合于大多数抗体.Tris和EDTA两种修复液对部分抗原修复效果较强,但其染色背景同时加深,如使用不当易造成假阳性结果.
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免疫组学:21世纪免疫学家的新挑战
编者按随着人类基因组计划的完成,诞生了新的免疫学前沿分支学科--免疫组学(Immunomics),为免疫学的快速发展发挥了重要作用.免疫组学重点研究免疫相关的全套分子、它们的作用靶分子及其功能.免疫组学包括了免疫基因组学(Immunogenomics)、免疫蛋白质组学(Immunoproteomics)和免疫信息学(Immunoinformatics)三方面的研究,特别强调在基因组学和蛋白质组学研究的基础上,充分利用生物信息学、生物芯片、系统生物学、结构生物学、高通量筛选等技术,大规模开展免疫系统和免疫应答分子机理研究,发现新免疫相关分子的功能,为全面系统了解免疫系统和免疫应答提供基础.作者对上述方面作了有重点的论述,我们刊登此文,希望我国免疫学工作者重视免疫组学研究,抓住机遇,发挥各自的优势,开展具有我国特色的各项研究,为免疫组学的研究与开发做出贡献.
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Omics 时代的到来:检验医学的新希望与新挑战
随着人类基因组计划的顺利完成,功能基因组(functional genomic)、蛋白质组学(proteomic)、代谢组学(metabonomics)、激酶组学(kinomic)、免疫基因组学(immunogenomics)、肿瘤免疫组学(cancer immunomics)、免疫组学(immunomics)、抗原组学(antigenome)、抗原表位组学(epitomics)等等组学(omics)研究相继开展,大量有关人类组织细胞结构、功能、代谢及分子间相互作用的信息被发现.所有这些omics研究的目标均是通过一组数据反映人体特定组织器官的功能、代谢等.
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空肠弯曲菌28-31 ku外膜蛋白的免疫原性
目的:探讨空肠弯曲菌28-31 ku外膜蛋白的免疫原性.方法:将BALB/c小鼠分为正常对照组和不同剂量抗原的免疫组,正常对照组不予抗原免疫,而免疫组采用28-31 ku蛋白(纯)或甘氨酸提取的外膜蛋白(粗),分别加用或不加用完全弗氏佐剂(F),采用sc,在0,1,2,3,4 wk免疫,于末次免疫后10 d,用双向免疫琼脂扩散试验测定各免疫组抗血清效价,待效价达到1:4至1:16时.分别采集各免疫组及对照组小鼠的血清、空肠及回肠内的肠液,用间接ELISA法检测各组标本的特异性抗体IgA,IgG.结果:不同剂量的抗原sc免疫BALB/c小鼠后,免疫组血清及肠液中特异性IgA,IgG抗体水平较正常对照组及实验对照组显著升高(P<0.05).结论:空肠弯曲菌的28-31 ku外膜蛋白是一种良好的免疫原,能够诱导BALB/c小鼠产生特异性抗体,可能成为空肠弯曲菌亚单位疫苗候选的重要组分.
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急性压力超负荷致心肌肥大过程中心肌内分泌因子活化及相互作用
目的探讨急性压力超负荷致大鼠心肌肥大过程中心肌内分泌活化及相互间的作用.方法放免法、比色法及免疫组组织化学检测腹主动脉缩窄高血压大鼠心肌组织中血管紧张素Ⅱ、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)蛋白表达及一氧化氮含量的变化,并观察卡托普利对它们的作用.
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166 在大鼠的中耳炎模型中病毒复合感染并不降低疫苗对抗不能分型流感嗜血杆菌的能力
急性中耳炎是通常侵袭婴幼儿及儿童的一种中耳炎症。以往的许多研究报告合并病毒感染有加重细菌性中耳炎的作用。该作者旨在通过进一步研究评定在合并仙台病毒感染后免疫组鼠与非免疫组鼠对中耳清除活性不能分型流感嗜血杆菌能力的影响。……
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免疫组合Opdivo+Yervoy治疗黑色素瘤获巨大成功
百时美施贵宝(B M S)公布了备受业界关注的免疫组合疗法Opdivo+Yervoy用于黑色素瘤一线治疗的数据。与Yervoy单药疗法相比,Opdivo+Yervoy组合疗法取得了非常高的客观缓解率(61%v s11%),完全缓解率22%,疾病恶化或死亡风险降低60%,疗效之强劲在黑色素瘤治疗领域前所未有。
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IL-23与支气管哮喘的动物实验研究
目的:探讨白细胞介素23(IL-23)在哮喘发病中的作用.方法:将30只健康雌性BALB/C小鼠按完全随机设计原则分为3组,每组10只,分为哮喘模型组(A组)、激素干预组(B组)和正常对照组(C组).ELISA法检测血清IL-23的水平.收集支气管肺泡灌洗液(BALF),做嗜酸性粒细胞(EOS)计数.HE染色观察肺组织的病理改变,半定量评定支气管周围炎症细胞浸润程度.免疫组化SP法检测各组小鼠肺组织中IL-23的表达.结果:①哮喘组小鼠的行为学改变,BALF中的EOS显著增高,肺部组织病理学见到明显的EOS浸润为主的炎症反应,均证明哮喘模型制备成功.②哮喘组小鼠血清中IL-23的水平(155.56 ±12.5)pg/ml高于对照组(51.49±6.34)pg/ml,差异有统计学意义(P<0.01);激素干预组小鼠血清IL-23的水平(88.00±6.43)pg/ml低于哮喘组,差异有统计学意义(P<0.01).③哮喘组小鼠肺组织中IL-23的含量高于对照组(P<0.01);而激素干预组小鼠肺组织中IL-23的含量低于哮喘组(P<0.01).④哮喘组血清中及肺组织中IL-23含量均与EOS无相关性.结论:IL-23参与哮喘的发病,糖皮质激素对其有抑制作用.IL-23不直接影响EOS的产生.
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因中药免疫组学而进行的中药免疫调节作用的实验研究
传统的中药多以复方为主,多种单味中药的不同组合构成了数量浩瀚的中药方剂,为此我们提出中药免疫组学(Immunomics of traditional Chinese medicine),试图通过对单味中药的免疫效应推测和阐述任意中药组合(方剂)可能存在的免疫调节作用.显然,对单味中药免疫特点的研究是中药免疫组学研究的基础工作.
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类似于卵巢性索间质肿瘤的子宫肿瘤临床病理和免疫组化观察
目的 观察类似于卵巢性索间质肿瘤的子宫肿瘤(UTROSCT)临床病理和免疫组化染色特点.方法 回顾性观察和分析3例手术切除病理确诊的UTROSCT的临床病理特征以及免疫组化表达谱.结果 2例表现为异常子宫出血,1例因体检偶然发现.肿瘤大直径分别为3 cm、5 cm以及6.3 cm.1例肿瘤表现为突向宫腔的息肉样肿物行肿瘤切除术,另2例肿物位于肌壁间行次全子宫切除+双侧卵巢及输卵管切除术.组织学上3例肿瘤均表现为索状、梁状以及缎带状、肾小球样的性索样成分伴有低级别梭形细胞肉瘤成分,性索样成分所占比例分别为25%,60%以及75%,2例肿瘤内可见泡沫样组织细胞聚集.免疫组化染色,性索样成分:3例均弥漫表达钙网蛋白和孕激素受体;2例弥漫表达角蛋白AE1/AE3,1例局灶表达;3例局灶表达抑制素.低级别梭形细胞肉瘤成分:3例弥漫表达CD10,2例局灶表达SMA.3例肿瘤分别随访18、37、47个月均未见复发或转移的证据.结论 UTROSCT是一种罕见的低度恶性子宫肿瘤,预后较好.组织学上存在明显的异质性,容易造成鉴别诊断混淆,免疫组化染色显示具有多表型特点,具有向上皮、性索间质以及子宫内膜间质分化的特征.
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BALB/C鼠对不同布氏杆菌抗原免疫的反应性
本文以布氏杆菌单抗,布氏杆菌牛的阳性血清,布氏杆菌独特型抗体(兔抗鼠)及布氏杆菌S19苗作为抗原,用不同免疫程序对不同性别的BALB/C鼠进行免疫.不同时段采血,分离血清,用直接ELISA法进行检测,观察其对各类抗原的免疫反应性.结果显示布氏杆菌二抗、单抗及布氏杆菌S19号苗免疫组产生了不同滴度的免疫反应.
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弓形虫GRA4基因真核表达重组质粒DNA免疫小鼠的研究
用pVAC-GRA4真核表达重组质粒免疫小鼠,观察其诱导的免疫应答及对弓形虫感染的保护性作用.大量制备pVAC-GRA4真核表达重组质粒,经基因枪腹部皮内注射免疫BALB/c小鼠三次,以pVAC空质粒及不经任何处理的空白组为对照.于末次免疫4周后每组各取5只作免疫指标测定(包括MTT法测定小鼠脾脏T淋巴细胞增殖活性、间接免疫荧光法测定T淋巴细胞亚群数目、双夹心ELISA法测定细胞因子IFN-γ及IL-4的含量、间接ELISA法测定IgG抗体滴度),其余的作攻毒试验后观察小鼠存活情况.脾淋巴细胞增殖各组间无显著差异(P>0.05);T细胞亚群分析,pVAC-GRA4组CD3+CD4+T细胞无明显改变(P>0.05),CD3+CD8+T细胞数明显增加(与pVAC对照组比P<0.05,与空白对照组比P<0.01),其CD3+CD4+/CD3+CD8+比值也较空白对照组明显降低(P<0.01);免疫鼠细胞因子IFN-γ及IL-4检测,pVAC-GRA4免疫组IFN-γ比对照组略高,但差异不显著(P>0.05),而IL-4的检测值各组间无明显变化(P>0.05);pVAC-GRA4组虽可诱导产生GRA4蛋白抗原特异性的IgG抗体,但抗体滴度不高;抗攻击感染结果,pVAC-GRA4免疫组小鼠的存活率明显高于两个对照组,其死亡小鼠的平均存活天数与空白对照组相比,差异显著(P<0.05).用pVAC-GRA4重组质粒DNA免疫小鼠,可诱导产生以细胞免疫为主的免疫应答及对弓形虫RH强毒株攻击感染的部分保护性作用.
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弓形虫SAG1真核表达质粒的体外表达及其诱导的细胞免疫应答
分析弓形虫SAG1基因真核表达质粒的体外表达及其诱导小鼠的细胞免疫应答.重组表达质粒pVAX1-SAG1瞬时转染vero细胞,Western blot法检测在细胞中的表达.将重组真核表达质粒pVAX1-SAG1及空质粒pVAX1于0周、4周分别经肌注免疫BALB/c小鼠;第8周杀鼠,取脾,分离淋巴细胞,分别经ConA和抗原刺激,用MTT法测定免疫鼠脾脏T淋巴细胞转化率;使用直接免疫荧光法,用流式细胞仪对CD4+、CD8+T细胞亚群进行测定;两组小鼠经弓形虫速殖子攻击感染,计算存活期.Western blot法分析转染细胞,发现存在弓形虫感染血清识别的26kDa的特异带,与理论值相符;抗原刺激小鼠脾T淋巴细胞发生增殖反应,免疫组与空质粒对照组间差异有显著性(P<0.05),但ConA刺激小鼠后,两组间差异无显著性(P>0.05);T细胞亚群CD4+、CD8+动态分析,CD4+、CD8+T细胞数量均升高,免疫组与空质粒对照组差异均有显著性(P1<0.05,P2<0.05).弓形虫攻击感染,免疫组鼠的平均存活时间较空质粒对照组延长.真核表达质粒pVAX1-SAG1在vero细胞中获得表达,且能诱导BALB/c小鼠产生细胞免疫应答.
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榄香烯诱导免疫原性细胞死亡及SAP62的作用
目的:探讨免疫原性细胞死亡和剪接体相关蛋白62(splicesome-associated protein 62,SAP62)增强榄香烯复合瘤苗免疫原性的作用和机制。方法:(1)取30只健康BALB/c(SPF)小鼠分为瘤苗免疫组、生理盐水对照组和联用细胞因子组,所有小鼠在末次免疫后10 d(记为攻击后第0天)于左腋下接种Hca-F细胞。观察肿瘤生长情况和生存时间。(2) MTT法测细胞增殖。(3) Western blot法、间接免疫荧光和流式细胞术检测Hca-F细胞中SAP62的变化。结果:(1) EC-TCV单用或与细胞因子联合都有明显的免疫保护效应。(2)榄香烯、丝裂霉素C单用或联合均能抑制Hca-F细胞增殖(P<0.05)。(3)榄香烯和丝裂霉素单独或联合处理的细胞SAP62表达下降(P<0.05)。结论:榄香烯复合瘤苗细胞中观察到的细胞死亡具有免疫原性细胞死亡的特征,SAP62表达下降,藉此影响mRNA成熟和选择性剪接异常而发挥作用。
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MTT法测定新城疫病毒对人肝癌细胞的抑制杀伤作用
目的:研究新城疫病毒(NDV)对人肝癌细胞株的作用.方法:利用MTT方法检测NDV对人肝癌细胞株的杀伤性.结果:NDV作用后的人肝癌细胞林的细胞活性比对照的细胞活性有显著下降,且NDV血凝效价显著升高,表明NDV能杀死肿瘤细胞.结论:NDV能够直接杀死肿瘤细胞,可作为治疗肿瘤的一种新生物制剂.
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突触素标记结合光学体视框计数神经终末膨大
显示神经终末的方法很多,根据递质的性质来显示神经终末的免疫组方法只能显示某一类神经终末……