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2株不同产志贺毒素大肠埃希菌O157感染症一例
患儿,男,2001年2月20日出生,发育正常,于12月6日开始出现灰白色水样腹泻(6~8次/24 h,未见血性腹泻)、肠鸣、呕吐、厌食等症状,无溶血性尿毒综合征,体温正常,病前有食用牛奶和水果史.采用血清学和生物化学方法,12月8日采集患儿粪便标本(1 ml)增菌培养.增菌培养物经大肠埃希菌(E.coli)O157免疫色层技术(E.coli O157快检金卡,郑州博赛生物技术研究所和美国BINAX公司产品)检测,中国和美国的两种检测卡均显强阳性,增菌培养液浸至检测线区域即呈现出比照线粗且颜色更深的阳性线,随后取增菌培养物和免疫磁珠集菌物分别划线接种于Chromagar O157平板上并于37℃培养24 h,得到许多直径为2 mm、外周透明而中央区呈兰绿色(1号菌)和直径为1 mm外周透明而中央区呈兰红色(2号菌)的两种圆形光滑菌落,其他形态的菌落很少甚至不出现(免疫磁珠集菌物).
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生物化学技术在中医药研究中的应用
生物化学从分子水平探讨生命的本质,为研究人类疾病的产生原因及诊断和治疗奠定基础.特别是近年来人类基因组计划的实施为研究生命科学揭开了崭新的一页.中医药学历史悠久,中医治疗许多疑难病症往往比西医效果更佳.用生物化学的研究方法来研究中医中药在治疗疾病的机理、方法、疗效等方面可获得科学客观的指标.既可对中医中药诊断治疗疾病的疗效作出科学分析和客观评价,从而促进中医药的发展.有发展前景的是利用转基因技术生产新型转基因中草药,还可利用转基因技术将现有的中药进行改造,创造出新的高效、低毒、高产、更利于种植和推广的中草药.本文仅就生物化学技术在中医药理论和实践研究中的应用作一简单探讨.
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诃子对大鼠心肌酶的影响
诃子为使君子科落叶乔本植物Terminalia chebula Retz的干燥果实,具清热解毒,收敛养血等多种功效[1].蒙古药草乌Aconitum carmichaeli Debx,主成分乌头碱及其同系衍生物,属双酯型二萜类生物碱,剧毒.蒙医善用草乌治疗顽疾,以毒攻毒;具体应用中,又多以大剂量诃子配伍应用[2],以调和药性、降低毒性.前人从化学角度证实诃子通过与草乌生物碱特异性结合,起到解毒功效[3].本研究应用生物化学方法,进一步探讨诃子对心脏的作用和解草乌毒机理.
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蛋白质芯片及其在临床医学中的研究进展
人类基因组计划的测序完成后,另一个更加艰巨的任务就是确定基因组编码的所有蛋白质结构和生物学功能.由于蛋白表达水平未完全与mRNA表达水平相一致,得到表达的蛋白要经过翻译后修饰,因此仅用基因芯片研究基因功能是不全面的.虽然,传统生物化学方法在单个蛋白功能研究方面功不可没,但不适用于细胞、组织、微生物中每个蛋白的研究,更不能满足全基因组范围内大规模检测分析的要求.于是,作为一种高通量、高灵敏度、高特异性且微型化的蛋白质分析技术,蛋白质芯片在众多蛋白质测定方法中脱颖而出.
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实验兔饲菌复合失血再灌流时肠屏障功能的变化
业已证明,肠道屏障功能对于维持机体内环境的稳定具有重要作用.因此,研究创伤合并感染状态下小肠屏障功能的损伤,对了解SIRS以及MODS的发生具重要的理论意义.本研究以饲菌合并失血性休克复制创伤后肠源性脓毒症模型,探讨其对肠屏障功能的影响.实验兔来自农科院动物中心,平均体重2.2±0.35kg.经实验室适应性饲养一周后,给予实验兔饲菌(O111B41.5×1011cfu/kg)后,暴露颈静脉、颈动脉并切开插管,经动脉导管快速放血,并维持血压在35~40mmHg范围内2小时;再经颈静脉快速回输失血和等量的林格氏液,设置一种饲菌、失血性休克和缺血再灌流的临床过程,模拟临床创伤合并感染过程.以生物化学方法,分别于伤前、休克、休克末、休克后6、24、48、和72h采血测定血二胺氧化酶(DAO)活性的变化.结果显示,伤后24、48、和72h血DAO活性显著升高(P<0.05,0.01和0.01).大量的创伤动物和临床病人的研究表明,DAO是哺乳动物小肠粘膜绒毛上具有高度活性的细胞内酶,其血中DAO活性的变化能反映肠屏障功能的损作情况,本研究结果提示,兔饲菌合并失血性休克再灌流过程中,小肠屏障功能损伤.动态地测定血DAO活性的变化对判断严重创伤后肠屏障功能损伤,以及可能诱发的肠源性脓毒症和MODS有一定的意义.
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针刺对实验性脑梗塞(MCAo)模型大鼠脑细胞凋亡及c-fos基因表达影响的研究
脑血管病是威胁人类健康的三大死因之一,其致残率之高,不仅严重影响人类生活质量和健康状况,而且给家庭和社会带来沉重的负担,为此,国内外学者十分关注本病的研究,试图从多方面探讨其发病机理和有效的防治措施。 近年来,从基因水平研究神经功能通路,阐明高级脑功能,以及揭示缺血性脑血管病病理生理过程的本质,成为本病研究的前沿课题。其中有关细胞凋亡和 c- fos基因表达的研究,引起人们的广泛关注。石学敏教授经过近 30年的艰辛探索,创立了“醒脑开窍”针刺法,用以防治脑血管病取得了良好的效果。经多层次研究证实,该针法可改变中风患者血液高粘滞状态;促进实验性脑梗塞大鼠缺血区侧支循环的建立,改善脑微血管的机能及能量代谢;调节 MCAo模型大鼠单胺类和氨基酸类递质异常;抑制 Ca2+细胞内流,对抗再灌注损伤等。本研究是在以上临床及实验研究的基础上,采用现代分子生物学技术和多种生物化学方法对其针刺机制的进一步探讨。从细胞凋亡及 c- fos基因表达变化角度探讨“醒脑开窍”针刺法治疗中风的机理,将有助于揭示该针法的分子调控机制,使针刺研究提高到新的水平。
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利用GIFTEC试验对肿瘤检测的临床观察
Giftec是目前国内推广的新的肿瘤标记物[1],这项试验是1990年Cho,H,I.等用核磁共振法分析癌症患者的尿液时,发现恶性肿瘤患者尿液的NMR中3.00~3.09P.P.M的谱带,而正常人及良性肿瘤病人尿样中无此谱带,他们认为这一谱带的物质基础是酪氨酸在内的一系列对羟基苯类衍生物,既尿酚.根据这一发现人们研制出能检测这种物质的生物化学方法-尿酚肿瘤检测试剂.
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血清二胺氧化酶速率测定法及对先兆流产监测的研究
目前采用常规的生物化学方法测定二胺氧化酶的活性比较烦琐,准确性不高.为探讨一种新的二胺氧化酶(DAO)活性测定方法,以及研究DAO和先兆流产的关系,我们进行了初步的试验测定,现报告如下:
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分子生物学方法在受体研究中的作用
受体的研究方法包括经典的放射配体结合法、药理学方法、蛋白质化学和生物化学方法、免疫学技术和分子生物学方法.受体的分子生物学研究方法对受体的分子结构及基因序列研究起到了极大的推动作用,并能阐明受体的结构与功能的关系,此外,分子生物学方法还能在基因水平上研究受体生理调节和病理变化的分子机制、受体病的分子基础以及细胞内受体与DNA相互作用的机制等.以下简要介绍受体研究中常用的分子生物学方法.
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血液恶性肿瘤血清肿瘤特异性生长因子测定的临床意义
目的探讨血清肿瘤特异性生长因子(TSGF)在血液恶性肿瘤患者中的表达和临床意义.方法用生物化学方法检测93例血液恶性肿瘤患者血清TSGF水平.结果各种恶性血液病患者血清TSGF水平均有不同程度的升高,特别是ANLL、ALL、NHL、MM患者中TSGF阳性检测率较高,分别是94.9%、88.9%、100%、81.8%,而CML慢性期TSGF阳性率低,仅为33.3%,恶性血液病的TSGF总阳性检测率为87.1%.对部分血液肿瘤患者进行治疗后随访,治疗后获得完全缓解的患者血清TSGF水平较初发时明显下降,多数患者TSGF恢复至正常水平.随着肿瘤负荷的减少,TSGF水平而降低,缓解后降至正常水平,但随着病情的复发,TSGF水平再次升高.结论TSGF在不同类型的恶性血液系统肿瘤患者血清中有不同程度的增高,TSGF表达水平与疾病的进程有关.但TSGF的来源有待进一步研究.
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产前监测中生化及生物物理方法的临床应用与评价
产前监测一直是全世界产科医生关注的主题.尤其对母婴均无任何损害的非侵入性产前监测方法更为广大孕妇所青睐.其中,测量胎儿胎盘功能的生物化学方法和测量胎儿生理活动的生物物理学方法的应用多,但它们的真正价值尚有争议.本文就它们的临床应用和局限性加以综述.
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正畸牙牙周膜微循环变化的研究方法
正畸移动牙牙周膜微循环的变化主要是指正畸组织变化过程中,牙周膜内血管形态和数量的改变及血流量的变化.血管变化的强弱是评价正畸牙牙周组织改建活跃程度的一项重要指标.自1932年微循环首次被引入正畸领域后,国外学者首先通过血管内注射色素法开始研究牙移动牙周膜血管的变化.但早期的研究仅限于血管形态学方面的观察.随着科学的进展,逐步建立和完善了许多研究方法,如二维组织切片观察法、血管铸型三维观察法,以及近年来出现的牙周组织的血流量测定法等.微循环的研究方法可概括为形态学方法、生理学方法及生物化学方法.
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蟾蜍胃组织冻融碱性磷酸酶活性组化研究
本文用光镜组织化学分析方法分析了不同情况下冻融胃组织碱性磷酸酶活性.选择处于冬眠状态下蟾蜍,体温10℃~15℃,体重50~70 g,性别不限,随机分为4组,每组5只,将蟾蜍分为整体冷冻组,开胸冷冻组,冷冻复温组,正常对照组.在蟾蜍心跳呼吸停止,肢体僵直状态下,将冷冻蟾蜍放于500 mL溶液实验杯内.30℃复温.复温溶液为4%任氏溶液,10%甘油,5%葡萄糖.冷冻蟾蜍2~10 min复活.蟾蜍心跳呼吸胃肠蠕动正常,速将胃取出.用冷丙酮固定24 h.经组织化学常规处理,光镜组化:冷冻3组,胃组织结构清楚可见.粘膜下层,斜行,纵行肌玻璃样变.这可能是冷冻冰晶所致.胃上皮,小动脉,小静脉,毛细血管周围酶活性反应物,呈膜状分布.但比正常对照组酶活性低.实验结果表明;蟾蜍胃组织可以在低温-25℃内保存活性和功能.低限度为60 min以上,胃组织酶有活性.组织复温为30~60℃/min为宜.我们认为:利用组织化学和生物化学方法测定器官低温保存的活性,对于细胞、组织和器官保存和移植,有一定意义.
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胞外5'-核苷酸酶检测消化道肿瘤的临床价值
消化道肿瘤是常见的恶性肿瘤之一,全世界每年胃癌新发病例达60万,居各种恶性肿瘤发病的首位,结肠癌发病为20.67万,居第五位[1],它们严重危害人类的健康,要提高肿瘤患者的生存率,关键在于对肿瘤的早期发现、早期诊断和及时手术切除治疗.然而,目前临床采用的内窥镜检、X线双对比造影和断面影像(US、CT、MRI)等影像学方法确诊消化道肿瘤时,肿瘤多已属中晚期[1].由于肿瘤在大体形态学改变之前已有分子水平的变化,因而以分子水平、生物化学方法检测对肿瘤的早期诊断已越来越受到人们的重视.探测肿瘤的分子标志物(marker)已成为肿瘤早期诊断研究的方向之一.恶性肿瘤是以细胞的过度增殖及异常分化为特征,而细胞增殖的基础是大量核甘酸的合成.5'-核甘酸酶(5'-NT)是嘌呤核甘酸代谢中的关键酶之一[1],测定该酶活力,可了解核甘酸的合成情况,将有助于了解肿瘤发生发展的状况.国外学者研究表明:5'-核甘酸酶活性水平可在一些消化道肿瘤患者的组织中升高,而在体液中活性减低,转移性肝癌病人该酶活性则较早出现异常变化,这些改变表明该酶的活性测定对消化道肿瘤的早期诊断有一定意义[2-14].现将有关研究进展综述如下: