首页 > 文献资料
-
LC-MS/MS法同时测定护心口服液中11种成分
目的 建立高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法同时测定护心口服液(甘草、黄芪、麦冬等)中苦参碱、氧化苦参碱、丹酚酸B、丹参素、原儿茶醛、甘草苷、黄芪甲苷、桂皮醛、丹参酮ⅡA、麦冬皂苷D、鲁斯可皂苷元的含有量.方法 该药物甲醇提取液的分析采用Ultimate XB-C18色谱柱(4.6 mm×100 mm,3μm);流动相水-甲醇(含0.05％甲酸),梯度洗脱;体积流量0.4 mL/min;柱温25℃.结果 11种成分在各自范围内线性关系良好(r＞0.9990),平均加样回收率96.66％ ～ 103.2％,RSD 1.4％～ 3.4％.结论 该方法灵敏、可靠、准确,可用于护心口服液的质量控制.
-
LC-MS/MS法同时测定养血清脑颗粒中14种成分
目的 采用LC-MS/MS法同时测定养血清脑颗粒(当归、川芎、白芍等)中芍药苷、芍药内酯苷、新绿原酸、绿原酸、儿茶素、表儿茶素、没食子酸乙酯、丹参素、阿魏酸、咖啡酸、没食子酸、原儿茶酸、原儿茶醛、迷迭香酸的含有量.方法 该药物甲醇提取液的分析采用Waters Symmetry Shield RP C18色谱柱(3.9 mm×150 mm,5μm);流动相乙腈-水(含0.1％甲酸),梯度洗脱;体积流量0.4 mL/min;柱温20℃.结果 14种成分在各自范围内线性关系良好(r ＞0.980 0),平均加样回收率85.5％ ～ 107.0％,RSD 2.0％～5.0％.结论 该方法简便、灵敏、准确、重复性好,可用于养血清脑颗粒的质量控制.
-
LC-MS/MS法测定复方祖师麻提取物中8种成分溶出影响
目的 建立一种LC-MS/MS的分析方法同时检测复方祖师麻提取物(祖师麻与甘草质量比3∶2)中8种成分(瑞香素、西瑞香素、7-0H香豆素、甘草酸、甘草苷、异甘草苷、甘草素和异甘草素),并应用此方法考察两者配伍前后活性成分提取率的变化情况.方法 Hypersil Gold-C18色谱柱(50mm×2.1 mm,1.9 μm),乙腈-0.05％甲酸水梯度洗脱,体积流量为0.3 mL/min,柱温为35℃.质谱条件为采用负离子模式,以SRM方式进行定量.结果 甘草配伍祖师麻后,祖师麻中3种活性成分(瑞香素、西瑞香素和7-OH香豆素)的量均有一定程度的增加,其中尤以瑞香素的增加为显著;祖师麻降低甘草中苷类成分(甘草酸、甘草苷和异甘草苷)溶出,而对苷元(甘草素和异甘草素)的溶出稍有提高.结论 该分析方法能快速、特异、灵敏并可重复检测祖师麻和甘草中的主要活性成分,两者配伍对8种成分提取率的影响并不相同.
-
LC-MS/MS法检查保健食品和中成药中非法添加磺胺药
目的 建立LC-MS/MS方法检查保健食品和中成药中非法添加的22种磺胺类药物.方法 磺胺脒、甲氧苄啶、磺胺二甲异嘧啶钠、磺胺醋酰、磺胺嘧啶、磺胺吡啶、磺胺甲嘧啶、磺胺二甲唑、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲氧嗪、磺胺甲二唑、磺胺对甲氧嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺氯哒嗪、磺胺多辛、磺胺甲噁唑、磺胺异噁唑、磺胺苯酰、磺胺喹沙啉、磺胺苯吡唑、磺胺硝苯和磺胺间二甲氧嘧啶的乙腈溶液的HPLC分析,采用C18色谱柱,梯度洗脱;流动相A为0.1％甲酸,流动相B为乙腈,体积流量0.3 mL/min.质谱选择正离子模式和MRM扫描方式.结果 通过比较样品和对照品峰的一级和二级质谱图可测定上述磺胺类药物的小检出量为1 pg.结论 本法对38批保健食品和中成药进行分析,4批样品出现一级和二级质谱与磺胺甲噁唑和甲氧苄啶对照品一致的图谱.
-
LC-MS/MS同时测定左金丸和香连丸中6种生物碱的含量
目的:建立左金丸(黄连、吴茱萸)和香连丸(黄连(吴茱萸制)、木香)中6种生物碱含量的LC-MS/MS测定方法.方法:色谱条件:Phenomenex Lunac_(18)柱(5μm,250mm×4.60mm);乙腈-水(4mmol/L乙酸铵和0.08%甲酸)为流动相,梯度洗脱;质谱条件:采用电喷雾离子源(ESI),正离子检测,MRM模式.结果:左金丸中药根碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱、吴茱萸碱和吴茱萸次碱的平均回收率分别为101.0%,101.3%、101.2%、100.2%、99.6%、99.7%,RSD分别为1.1%、1.8%、0.98%、1.0%、1.3%、1.3%,香连丸中药根碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱和吴茱萸碱的平均回收率分别为101.6%、99.8%、101.9%、101.0%、101.3%,RSD分别为1.0%、1.9%、0.75%、1.1%、1.9%.结论:本方法可同时测定左金丸和香连丸中药根碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱、吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量,具有快速、简便等特点.
-
女贞子中橄榄苦苷与羟基酪醇在大鼠血浆中的药动学差异
目的 比较女贞子中橄榄苦苷与羟基酪醇在大鼠血浆中的药动学差异.方法 大鼠灌胃0.4 mmol/kg橄榄苦苷与羟基酪醇,于给药前后不同时间点(0.083、0.167、0.25、0.5、1、1.5、2、3、4、6、8、10h)眼眶采血,液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定两者血药浓度,绘制血药浓度-时间曲线,计算药动学参数.结果 橄榄苦苷与羟基酪醇分别在10～1 000 ng/mL(R2=0.999 0)和200～30 000 ng/mL(R2=0.999 6)范围内线性关系良好,平均加样回收率均大于95％,RSD均小于8％.两者Tmax分别为(1.7±0.3)h和(0.2±0.0)h,t1/2z分别为(1.7±0.2)h和(3.0 ±0.1)h,Cmax分别为(356.4 ±45.0)ng/mL和(24 170.0±3 458.4) ng/mL,AUC0 ～10 h分别为(1 223.1±107.4)ng/(mL·h)和(30 535.4 ±5 636.5)ng/(mL·h),药动学行为均符合二室模型特征.结论 等剂量下橄榄苦苷与羟基酪醇的药动学行为有显著差异,后者较前者更有利于机体吸收.女贞子酒蒸后药效加强,可能与蒸制过程中橄榄苦苷水解生成羟基酪醇有关.
-
微透析法研究环维黄杨星D透皮贴剂透皮吸收行为
目的 采用微透析法研究环维黄杨星D透皮贴剂经皮给药后的药物动力学行为.方法 线性微透析探针植入Wistar大鼠真皮在线取样.液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)法测定透析液中环维黄杨星D的回收率与其体内稳定性.结果 环维黄杨星D在0.1 ～90 ng/mL范围内线性关系良好(r=0.999 34),定量限为10 pg/mL.透皮贴剂的皮肤局部药物动力学行为符合单室模型,药物平均滞留时间在12 h以上.基质药物质量浓度越高,单位时间透皮量越大,但不呈比例增加.结论 经皮微透析在微创条件下,可满足环维黄杨星D透皮贴剂连续取样及动态分析的要求.
-
桂枝汤类方主要成分在大鼠体内药代动力学比较研究
目的 比较桂枝汤类方不同配伍大鼠体内的药动学差异.方法 LC-MS/MS法分析大鼠灌服桂枝汤、桂枝加桂汤和桂枝加芍药汤后在大鼠体内的桂皮酸、马尿酸、芍药苷和甘草次酸血药浓度和药动学参数的差异,以及配伍对芍药苷肠菌代谢的影响.结果 大鼠灌服桂枝汤类方血浆中桂皮酸、马尿酸及甘草次酸的药动学参数经剂量校正后差异均无统计学意义.但桂枝加芍药汤中芍药苷的Cmax升高(P<0.05).大鼠灌胃芍药苷后其AUC和Cmax与给药剂量呈线性关系.配伍甘草对芍药苷肠菌代谢的抑制作用强.结论 桂枝汤类方的不同配伍对芍药苷在大鼠体内的药动学有影响,其机理可能是抑制了芍药苷的肠菌代谢.
-
HPLC结合LC-MS/MS法快速检测穿山甲中掺加的12种黄色色素
目的 通过HPLC结合LC-MS/MS法快速检测穿山甲Manis Squama中掺加的12种黄色色素(柠檬黄、日落黄、酸性橙10、栀子黄、碱性嫩黄O、碱性橙21、碱性橙2、酸性橙2、皂黄、碱性橙22、酸性嫩黄G、奶油黄).方法 穿山甲70％甲醇提取液的HPLC分析采用Agilent Poroshell 120 EC C18色谱柱(100 mm ×4.6 mm,2.7 μm,亚3μm核壳填料);以甲醇-乙酸铵为流动相,梯度洗脱;柱温40℃;体积流量1.0 mL/min;检测波长450 nm.再通过LCMS/MS法进行验证.结果 各色素在各自范围内均呈良好的线性关系(r≥0.999 0),平均加样回收率76.9％～103.7％,RSD 2.0％～9.5％.60批样品中有1批掺加了栀子黄.结论 该方法准确灵敏,可用于快速检测穿山甲中掺加的黄色色素.
-
LC-MS/MS法检测皮肤科中药制剂中掺加的8种糖皮质激素
目的 建立液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法检测9种皮肤科中药制剂中掺加的8种糖皮质激素(倍氯米松、醋酸泼尼松、醋酸氟轻松、甲基泼尼松龙醋酸酯、可的松、泼尼松龙、氢化可的松、曲安奈德).方法 12批样品甲醇提取液的分析均采用Agilent C18色谱柱(50 mm×20 mm,5μm);流动相乙腈-水,梯度洗脱;体积流量0.4mL/min;柱温40℃.结果 8种糖皮质激素在各自范围内均呈现出良好的线性关系,低检测限0.5～1.0 ng/mL,低定量限1.0 ～4.0 ng/mL,加样回收率88.2％～112.4％,RSD 0.6％ ～ 13.1％.除醋酸氟轻松和曲安奈德外,各糖皮质激素均被不同程度地掺加进9批样品中(样品E、G、H除外).结论 该方法简便快捷,准确灵敏,可用于检测皮肤科中药制剂中掺加的糖皮质激素.
-
LC-MS/MS法同时测定滇龙胆中4种苯甲酸酯类成分
目的 建立LC-MS/MS法同时测定滇龙胆中抗老年痴呆的4种主要成分gentiside A,gentiside J,gentiside B,gentiside K的量.方法 使用岛津LC-MS/MS 8030液质联用仪,色谱柱为Shim-pack XR-ODS Ⅲ(75 mm×2.0 mm,1.6 μm);流动相为甲醇-0.1％甲酸,等度洗脱;离子源为电喷雾电离源(ESI),采用负离子多反应监测模式.结果 Gentiside A,gentiside J,gentiside B,gentiside K分别在39.0～444.4μg/mL、39.0 ～ 444.4μg/mL、59.0 ～444.4μg/mL、26.0 ～444.4 μg/mL范围内线性关系良好,相关系数为0.998 9～0.999 6;所测的滇龙胆根部中,4种苯甲酸酯类成分的含有量分别为0.284、0.358、0.654、0.267 mg/g;加样回收率为98.1％～102.6％,RSD为0.7％ ～1.7％.结论 该方法专属性好、精密度高,可用于滇龙胆中苯甲酸酯类成分的检测.
-
中草药及制剂中吴茱萸内酯的LC-MS/MS测定方法
目的:用LC-MS/MS法测定中药吴茱萸、黄柏、白鲜及其制剂中吴茱萸内酯的含量.方法:分析柱:Discovery C18,150mm×2.1mm;预柱:Symmetry C18;柱温20℃.流动相:A:水-0.1%醋酸;流动相B:乙腈-0.1%醋酸;梯度洗脱;流速:0.2mL@min-1.检测通道1(1S)187.0＞130.9;检测通道2(吴茱萸内酯)471.7＞161.2供试品用甲醇-氯仿(1:3)提取,与适量内标溶液(补骨脂素)混合后进样分析.结果:吴茱萸内酯在25～1000ng@mL-1浓度范围内呈良好的线形关系,其回归方程为C=3.124As/Ai-1.935×10-3,r=0.9996;样品的平均加样回收率100.2%.结论:本法的检测灵敏度高、专属性强,样品预处理简便、分析测试过程快捷.
-
马钱子减毒总生物碱的制备及毒性
目的 制备去除大部分士的宁的马钱子减毒总生物碱,并考察马钱子总生物碱减毒前后成分及毒性的变化.方法 用不同体积分数的乙醇溶解马钱子总生物碱,经磁力搅拌、离心后制备得到马钱子减毒总生物碱,HPLC法测定马钱子减毒总生物碱中马钱子碱和士的宁的量.用Q-TOF-MS技术比较鉴定了马钱子总生物碱减毒前后的主要生物碱类成分.通过小鼠口服急性毒性试验考察了马钱子总生物碱减毒前后的毒性变化情况.结果 以20％乙醇为溶剂制备的马钱子减毒总生物碱去士的宁效果好,同时不影响其他19种生物碱类含有量.小鼠口服急性毒性LD5o实验表明马钱子减毒总生物碱与马钱子总生物碱的LD5o分别为31.08 mg/kg、10.92 mg/kg.结论 马钱子总生物碱中士的宁占38.49％,减毒后仅占14％,减毒工艺提高了马钱子总生物碱临床使用的安全性.
-
LC-MS/MS法确认生脉注射液指纹图谱的特征峰
目的:确认生脉注射液指纹图谱的特征峰.方法:应用LC-MS/MS法,以Waters symmetryshield TMRP18(4.6mm×250mm;5.0μm)色谱柱为分析柱,以乙腈-水为流动相,梯度洗脱;检测波长为203nm.离子阱质谱.结果:对生脉注射液20个特征峰进行确认,使其中的10个特征峰得到了确认.结论:本方法共确认了生脉注射液指纹图讲的特征峰,方法简单准确,具有实用价值.
-
LC-MS／MS 测定小鼠肝脏中10种胆汁酸浓度的方法与应用
目的：建立 LC-MS／MS 法同时测定小鼠肝脏中10种游离型与结合型胆汁酸的浓度。方法肝组织样品匀浆经乙腈沉淀蛋白后进行 LC-MS／MS 分析，空白基质经活性炭（100 mg／mL）吸附获得，色谱柱为 Zorbax Eclipse XDB-C18柱（5μm，150 mm×4.60 mm），流动相为乙腈-含0.05％甲酸和4 mmol／L 乙酸铵溶液，梯度洗脱，流速1 mL／min，进样10μL，采用电喷雾离子源（ESI）、负离子的多级反应模式（MRM）监测。结果在定量范围内，各胆汁酸的线性关系良好，检测时间较短（14 min），精密度、准确度、提取回收率等均符合要求。结论建立的方法灵敏度高、专属性好，可用于肝组织样品中胆汁酸浓度的测定。
-
质谱法分析旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白的组分
目的 分析旋毛虫( Trichinella spiralis)肌幼虫排泄分泌蛋白(excretory-secretory protein,ESP)的组分,寻找其抗肿瘤活性组分.方法 收集纯净的旋毛虫脱囊肌幼虫,制备旋毛虫肌幼虫ESP.采用15％十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离ESP,将分离获得的所有蛋白条带进行胰蛋白酶酶解,采用液质联用质谱法(LC-MS/MS)进行鉴定.利用Gene Ontology (GO)对已鉴定蛋白质进行细胞组分、分子功能和生物过程的富集分析.结果 经SDS-PAGE电泳分离获得清晰的蛋白质条带,相对分子质量(Mr)为10 000～142 000.质谱分析共鉴定出162种蛋白质,其中63种为已明确鉴定的蛋白质,34种为假定蛋白质,65种为未鉴定的蛋白质.鉴定出6种与抗肿瘤相关的蛋白质,即原肌球蛋白、组蛋白H2A、剪切聚腺苷酸化特异因子亚基2、Kazal 4型丝氨酸蛋白酶抑制剂、犰狳极性蛋白和真核起始因子4A.GO富集分析显示,已鉴定的蛋白质具有54种不同的分子功能,参与细胞构成并参与382种生物过程.结论 旋毛虫肌幼虫ESP组分复杂,有多种未鉴定的蛋白质,从已知的63种蛋白质中筛选出6种与抗肿瘤相关的蛋白质.
-
雷替曲塞经不同给药方式的药动学分析
目的 通过兔肝VX2肿瘤模型,考察雷替曲塞经股静脉灌注、肝动脉灌注、肝动脉碘油混悬液注入、肝动脉灌注后明胶海绵栓塞给药的药动学情况.方法 将40只VX2肝肿瘤模型新西兰兔按雷替曲塞不同给药方式随机分成股静脉灌注(A)组、肝动脉灌注(B)组、肝动脉碘油混悬液灌注(C)组、肝动脉灌注后明胶海绵栓塞(D)组,用LC-MS/MS法测定血浆中雷替曲塞的浓度,并计算药动学参数.结果 A, B, C, D 4组给药后,tmax均为5 min;t1/2分别为(5.88±1.39),(7.31±2.60),(9.86±5.10),(7.19±2.27),其中C组t1/2长,与A组相比差异有统计学意义(P＜0.05); 分别为(2 056.40±139.17),(1 389.21±180.28), (911.84±105.62),(1 133.41±181.42) ng-m1-1h-1, A组 Cmax 明显高于 B, C, D 3组,差异有统计学差异(P＜0.05),其中 C组低;AUC0-t 分别为(5 482.72±1 007.07), (4 156.99±1 475.77),(2 785.13±1107.36), (3 903.64±947.25) ng·ml-1·h-1.A组 AUC0-t 明显高于 B,C,D 3组,差异有统计学意义(P＜0.05),其中C组低.结论 与经股静脉灌注相比,雷替曲塞经肝动脉灌注、肝动脉碘油混悬液注入、肝动脉灌注后明胶海绵栓塞有可能使药物更多沉积在肿瘤区,增加局部药物浓度,可能增强其疗效,同时降低血浆中药物浓度,减轻副作用.
-
液相色谱-质谱法测定血药浓度试验中提高灵敏度的方法概述
血浆中药物(或内源性物质)浓度检测是药代动力学的基础,也是药物临床前和一期临床研究重要组成部分,还是一些疾病和胎儿早期筛查的重要指标.目前血浆中药物浓度检测广泛采用液相色谱-质谱法(LC-MS/MS).而LC-MS/MS测定过程中,常遇到药物的检测灵敏度不够的问题.检测灵敏度不够主要是由于药物浓度过低或药物结构质谱响应低造成的.本文概述了LC-MS/MS法血药浓度检测中提高灵敏度的主要途径,即根据药物结构,从质谱方法、色谱方法、样品制备方法和避免低浓度样品污染四个方面来联合提高药物检测灵敏度的解决方案,从而为解决血浆中药物检测灵敏度不够的困难提供帮助.
-
小分子抗肿瘤药物SPH0396在大鼠体内的药代动力学
目的：建立定量测定大鼠血浆中抗肿瘤药aSPH0396的LC-MS/MS方法，并将其应用于大鼠体内药代动力学研究。方法：血浆样品在Waters BEH C18柱上以0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈溶液进行梯度洗脱；采用MRM方式进行定量测定，监测离子对为m/z553.4→453.4（SPH0396）和m/z 533.3→259.9（内标ponatinib）。结果：SPH0396在1.11～2488.50 ng/ml的浓度范围内呈良好的线性关系（R2=0.999），定量下限为1.11 ng/ml，回收率和精密度均符合生物样品检测要求。大鼠静注3 mg/kg SPH0396后，t1/2为3.43±0.37 h，CL为2.13±0.21L/h·kg，Vdss为6.76±0.26 L/kg。大鼠口服5、15和50 mg/kg的SPH0396后吸收较慢，Tmax为4～6 h。大鼠口服不同剂量的SPH0396，Cmax和AUC(0-t)的增加比例均高于剂量增加比例，生物利用度分别为17.15%、25.58%和36.19%。结论：本研究首次建立了特异、灵敏、便捷的定量检测大鼠血浆中SPH0396的LC-MS/MS方法，并成功应用于SPH0396的大鼠药代动力学研究。
-
LC-MS/MS法测定人血浆中西布曲明代谢物(M2)
西布曲明代谢物M2(N-双脱甲基西布曲明)是减肥药西布曲明(N-[1-[1-(4-氯苯基)环丁基]-3-甲基丁基]-N,N-二甲基胺,sibutramine)的主要活性代谢产物,其体内浓度较低,难以用常规的HPLC-UV法进行测定.国内至今未有西布曲明血药浓度测定的相关报道,为了解西布曲明制剂的体内过程,我们参考有关文献[1],采用液相色谱-质谱/质谱(LC-MS/MS)法建立了西布曲明主要活性代谢产物M2的血药浓度分析方法,可较好地满足研究工作的需要.1 材料和方法1.1 仪器 Waters 2690高效液相色谱仪(美国Waters公司);QuattroLC质谱仪(英国质谱公司,micromass).XW-80A旋涡混合器(上海医科大学仪器厂);CQ50超声波清洗器(上海超声波仪器厂);80-2型离心机(上海手术器械厂);LNG-T83台式快速离心浓缩干燥器(江苏太仓医用器械厂);SHB-Ⅲ循环多用水泵(郑州长城仪器厂);TGL.16G台式高速离心机(上海医用分析仪器厂).
