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癌痛消颗粒对移植性肝癌模型大鼠缺氧微环境中细胞因子HIF-α mRNA及蛋白表达的影响
目的 观察癌痛消颗粒对移植性肝癌模型大鼠缺氧微环境低氧诱导因子1α(HIF-α)的mRNA及蛋白表达的影响,探讨癌痛消颗粒抗肝癌作用的机制.方法 将35只大鼠随机抽取5只作为正常组,其余30只为造模组,造模过程中死亡5只大鼠,造模成功后的移植性肝癌模型大鼠随机分为5-氟尿嘧啶组(5-Fu组),癌痛消颗粒高、中、低剂量组(药物浓度150、75、27.5 mg/mL),模型组.癌痛消颗粒高、中、低剂量组及模型组每日按照10 mL/kg体重灌胃给药治疗,连续用药14天后停药;5-Fu组按75m g/kg体重腹腔注射治疗,每隔2天腹腔注射1次,连续注射5次,停药24h后处死各组大鼠,取出瘤块,采用实时定量PCR(PT-PCR)、Western印迹技术观察HIF-α mRNA及蛋白的表达水平.结果 癌痛消颗粒高、中、低剂量组及5-Fu组、模型组HIF-α mRNA及蛋白的表达水平与正常组比较差异有统计学意义(P＜0.05);癌痛消颗粒高、中、低剂量组及5-Fu组HIF-α mRNA及蛋白表达水平与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.05),癌痛消颗粒中、低剂量组与5-Fu组比较差异有统计学意义(P＜0.05),癌痛消颗粒高剂量组与5-Fu组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 癌痛消颗粒对移植性肝癌模型大鼠的肝癌有一定的治疗作用,其抗癌机制可能与降低HIF-α mRNA及蛋白的表达有关,且癌痛消颗粒高剂量组的疗效好.
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阳和汤对膝关节骨性关节炎患者血清及滑液中HIF-1α和VEGF表达的影响研究
目的 探讨阳和汤对膝关节骨性关节炎患者血清及滑液中低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响,以探讨其治疗膝关节骨性关节炎的作用机制.方法 选取诊治的膝关节骨性关节炎患者100例,随机分为对照组与研究组,每组50例,对照组给予洛索洛芬钠片、研究组给予阳和汤口服治疗,均治疗8周.观察两组患者治疗前、治疗疗程结束后外周血及病变膝关节滑液中HIF-1 α与VEGF变化,评价治疗疗效.结果 两组患者治疗前血清及滑液中HIF-1 α和VEGF水平比较差异无统计学意义(P＞0.05),治疗后血清及滑液中HIF-1 α和VEGF水平低于治疗前(P＜0.05),研究组治疗后血清及滑液HIF-1α和VEGF水平低于对照组(P＜0.05).研究组治疗总有效率为94.00％,高于对照组78.00％,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 阳和汤治疗膝关节骨性关节炎可降低患者血清及滑液中HIF-1α和VEGF的表达,治疗疗效显著.
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论脾虚是结直肠癌能量代谢障碍与上皮间质转化的关键病机
脾虚证是结直肠癌常见的临床证候.脾失健运呼吸链功能障碍导致低氧状态和HIF-1α表达增高,肥人脾虚产生的慢性炎症及释放细胞因子促进糖酵解,可能是结直肠癌能量代谢障碍,即瓦博格效应的主要原因.脾虚通过低氧诱导因子1α介导的能量代谢障碍促进上皮间质转化,健脾益气中药通过健脾化痰改善结直肠肿瘤细胞的慢性炎症和能量代谢障碍,从而调控肿瘤微环境,抑制EMT,改善结直肠肿瘤的生长和转移.
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低氧增加人皮肤微血管内皮细胞系迁移并促进凋亡
目的 研究低氧环境对人皮肤微血管内皮细胞(HDMEC)迁移、凋亡及相关因子HIF-1α、VEGF、iNOS基因及蛋白表达的影响.方法 低氧培养人微血管内皮细胞,分为常氧组(对照组)和低氧组(CoCl2模拟化学低氧).CCK-8细胞生存实验确定合适处理浓度(200 μ mol/L CoCl2),划痕实验检测细胞迁移能力,流式细胞技术观察细胞凋亡;用RT-PCR和 Western blot技术检测HIF-1α、VEGF、iNOS mRNA和蛋白表达.结果 与常氧组比较,低氧组细胞迁移能力增加(P<0.05),凋亡增多(P<0.05),均呈时间依赖性.低氧组HIF-1α、HIF-1β、VEGF、iNOS mRNA表达较常氧组比较均增加(P<0.05),HIF-1α、VEGF、iNOS蛋白表达较常氧组比较均增加(P<0.05),具有一定时间依赖性.结论 低氧能增强人皮肤微血管内皮细胞迁移能力,并促进其细胞凋亡,其可能机制与HIF-1α、VEGF、iNOS蛋白表达升高有关.
关键词： 低氧 低氧诱导因子1α 静脉性溃疡 人皮肤微血管内皮细胞 -
RNA干扰沉默HIF-1α基因对宫颈癌HeLa细胞定植和侵袭的影响
目的 探讨HIF-1α基因短发夹干扰RNA(shRNA)低氧条件下对宫颈癌HeLa细胞定植和侵袭能力的作用.方法 针对HIF-1α基因没计并合成2条寡聚DNA片段,退火后将其克隆入pSilencer2.1-U6-neo质粒中,构建shRNA真核表达质粒,脂质体转染人宫颈癌细胞株HeLa细胞.低氧培养后,应用Western blot和定量PCR法检测HIF-1α蛋白及mRNA表达水平;用软琼脂克隆形成实验和体外侵袭实验检测HeLa细胞的定植和侵袭能力.结果 成功构建的HIF-1α shRNA真核表达载体转染宫颈癌HeLa细胞,低氧条件下HeLa细胞的HIF-1α蛋白及mRNA表达下降;同时细胞在软琼脂中克隆形成数和穿透Matrigel膜的细胞数减少.结论 HIF-1α的shRNA真核表达载体在低氧条件下可抑制宫颈癌细胞的定植和侵袭能力.
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二甲氧乙二酰甘氨酸对缺血性急性肾衰竭小鼠的保护作用
目的 观察二甲氧乙二酰甘氨酸(DMOG)对小鼠缺血性急性肾衰竭的影响及其与低氧诱导因子1α(HIF-1α)活化之间的关系.方法 雄性C57/BL小鼠25只,随机分为5组:正常对照组(Control组),DMOG组(20 mg/kg,ip),假手术组(Sham组)及肾缺血-再灌注组(I/R组)和DMOG预处理组(DMOG+I/R组).采用夹闭双侧肾蒂30 min的方法建立小鼠缺血性急性.肾衰竭模型,DMOG注射6 h或缺血-再灌注24 h后采血并处死小鼠,全自动生化分析仪检测小鼠的肾功能,通过HE染色对肾组织病理学进行评分,免疫组织化学染色检测肾组织中波形蛋白的表达,TUNEL法检测细胞凋亡,Western blot方法检测肾HIF-1α活化情况.结果 DMOG组小鼠肾组织中HIF-1α的表达明显高于正常对照组(P＜0.01);DMOG+I/R组小鼠.肾功能病理学评分明显低于I/R未处理组[BUN,(26.3±6.5) vs (65.8±2.6);Scr,(27.0±14.1) vs (229.5±11.2),P＜0.01],DMOG+I/R组细胞凋亡程度和小管波形蛋白的表达较I/R组明显减少[(5.7±1.5) vs (23.3±2.1),P＜0.05;(12.9±5.7) vs (69.6±22.7),P＜0.01].结论 DMOG可通过诱导HIF-1α活化对缺血性急性肾衰竭小鼠发挥保护作用.
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HIF-1α基因RNA干扰质粒在胃癌细胞中的构建与鉴定
目的:构建转录因子HIF-1α表达的RNA干扰(RNA interference,RNAi)质粒,为研究HIF-1α参与的细胞信号通路及以HIF-1α为靶点的基因治疗提供稳定转染细胞的RNAi.方法:选取HIF-1α基因的19nt特异性序列,设计针对HIF-1α的shRNA序列,应用基因重组技术克隆到pSilencer 1.0-U6表达载体中,利用EcoRⅠ和paⅠ双酶切和DNA测序鉴定重组克隆.低氧条件下,将包含HIF-1α基因RNAi序列的重组载体转染人胃癌细胞SGC-7901,转染48 h后,收集细胞裂解液,Western blotting分析低氧条件下对照组与转染组HIF-1α蛋白的表达水平.结果:双酶切证实shRNA插入pSilencer 1.0-U6质粒,DNA测序证实插入的序列正确;HIF-1α基因RNAi质粒转染胃癌细胞SGC-7901成功;Western blotting结果显示与空质粒对照组比转染组细胞HIF-1α表达下调.结论:成功构建人HIF-1α基因RNAi质粒,为研究HIF-1α参与的细胞信号通路提供了稳定转染细胞的干扰质粒.同时,阻断HIF-1α的信号通路将为肿瘤基因治疗提供一个较好的靶点,研究结果为以HIF-1α为靶向的基因治疗提供了有利工具.
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Toll样受体9和低氧诱导因子1α在胰腺癌中的表达及其意义
目的 研究Toll样受体9(TLR9)和低氧诱导因子1α(HIF-1 α)在胰腺癌组织中的表达,探讨其临床意义.方法 采用实时定量PCR法、蛋白质印迹法及免疫组织化学法检测30例胰腺癌组织及其相邻癌旁组织、10例正常胰腺组织中TLR9和HIF-1α的表达,分析两者表达的相关性、与肿瘤临床病理特征的关系以及对患者生存时间的影响.结果 胰腺癌TLR9 mRNA及HIF-1αmRNA表达量分别为正常胰腺组织的2.32(1.41～3.22)倍和2.26(1.62～2.89)倍,癌旁组织表达量分别为正常胰腺组织的1.23(1.18 ～1.28)倍和1.36(1.17～1.55)倍,胰腺癌的表达量显著高于癌旁组织(t=2.642,P=0.023;t=4.076,P=0.001).胰腺癌组织TLR9和HIF-1α蛋白阳性表达率分别为73.3％(22/30)和70.0％(21/30),癌旁组织分别为33.3％ (10/30)和36.7％ (11/30),正常胰腺组织分别为20％(2/10)和10％(1/10),呈递减趋势(x2=13.99,P=0.001;x2=13.15,P=0.001).胰腺癌组织TLR9 mRNA与HIF-1 αmRNA表达呈正相关(r=0.537,P=0.003),TLR9和HIF-1α蛋白阳性表达率亦呈正相关(r =0.511,P=0.001).胰腺癌组织TLR9和HIF-1α表达与肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移呈正相关,与患者的生存时间呈负相关.结论 胰腺癌组织TLR9和HIF-1α基因均高表达,且与肿瘤细胞的恶性生物学行为及患者预后差有关.
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胰岛素通过激活P13K/mTOR通路诱导人肾小系膜细胞血管内皮细胞生长因子转录
目的 探讨胰岛素诱导人肾小球系膜细胞(HMC)血管内皮细胞生长因子(VEGF)基因转录机制. 方法 (1)用VEGF报告质粒或低氧诱导因子1(HIF-1)结合位点畸变的VEGF mut报告质粒转染HMC,荧光素酶分析法检测其转录活性;(2)应用Real-time PCR、Western blot法分别检测HIF-1α mRNA和蛋白表达. 结果 (1)胰岛素呈剂量依赖性增加VEGF基因转录,在100nmol/L时达高峰,为未刺激组的2.14±0.17倍(P<0.01),但对转染VEGF mut报告质粒的HMC VEGF基因转录无影响;(2)Ly294002和雷帕霉素均可抑制胰岛素诱导的VEGF基因转录(P<0.01);(3)胰岛素呈时间依赖性上调HIF-1α蛋白表达,4h达高峰,为对照组的2.35±0.35倍(P<0.01),但对其mRNA表达无影响. 结论 胰岛素通过激活P13K/mTOR通路和上调HIF-1α蛋白表达诱导HMC VEGF基因转录.
关键词： 胰岛素 磷脂酰肌醇3激酶 雷帕霉素靶分子 低氧诱导因子1α 血管内皮细胞生长因子 -
低氧条件下人成骨细胞长链非编码RNA5'aHIF-1α的表达
目的 观察低氧条件下人成骨细胞HIF-1α反义转录物5′aHIF-1α的表达变化,探讨低氧对人成骨细胞分化影响的调控机制.方法 采用人成骨肉瘤细胞系(MG63),随机分为4组,分别在不同氧体积分数(10%、6%、3% 和1% O2)条件下培养72 h.用Trizol法提取总RNA,用实时荧光定量PCR法检测5′aHIF-1α表达;用Western blot法检测HIF-1α蛋白表达.结果 10% O2组MG63细胞5′aHIF-1α表达水平是对照组(6% O2)的2.06±0.07倍,3%和1% O2组MG63细胞5′aHIF-1α表达水平分别是对照组的0.63±0.08和0.43±0.03倍.10% O2组5′a HIF-1α蛋白表达水平明显降低,3%和1% O2组HIF-1α蛋白表达水平随氧体积分数降低而逐渐升高.结论 低氧条件下,长链非编码RNA-5′aHIF-1α可能在转录或转录后水平抑制MG63细胞HIF-1α的表达,但随着氧体积分数的降低,其抑制作用逐渐减弱.
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2型糖尿病不同尿白蛋白排泄率患者血清微小RNA-124-3p与沉默信息调节因子1水平及其相关性
目的：探讨2型糖尿病(T2DM)不同尿白蛋白排泄率患者血清微小RNA-124-3p (Mir-124-3p)与沉默信息调节因子1(Sirt1)水平及其相关性。方法将2013年9月至2015年9月508例T2DM患者根据尿蛋白排泄率(尿白蛋白/尿肌酐，ACR)分为正常蛋白尿组(D1组193例)、微量蛋白尿组(D2组175例)、临床蛋白尿组(D3组140例)。随机选择性别、年龄、体质指数（BMI）与病例组匹配的我院健康体检者211名作为正常对照组(C组)。采用实时聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组血清Mir-124-3p，采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测血清Sirt1、低氧诱导因子1α(HIF-1α)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和纤维黏连蛋白(FN)水平。采用单因素方差分析、Pearson相关分析及多元逐步回归分析对所得数据进行统计学分析。结果单因素方差分析发现T2DM患者血清Mir-124-3p水平[2.85(2.78~2.92)ng/mg]显著高于对照组[0.91(0.87~0.95)ng/mg]，且随着尿蛋白排泄率增加，分别在D1、D2、D3组逐渐升高(F=1348.7，P<0.001)。与对照组相比，T2DM患者血清Sirt1水平显著降低，并在D1、D2、D3组逐渐降低(F=44.5，P<0.001)。Pearson相关分析发现Ln(ACR)与年龄、糖尿病病程、空腹血糖、空腹胰岛素、稳态模型胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、糖化血红蛋白、低密度脂蛋白胆固醇、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、血肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）、尿酸（UA）、HIF-1α、Mir-124-3p、TNF-α、FN呈正相关(r=0.105～0.813，均P<0.05)，与高密度脂蛋白胆固醇、Sirt1呈负相关(r=-0.113、-0.360，均P<0.05)。多元逐步回归分析发现Mir-124-3p、FN、TNF-α、HIF-1α、TC、糖尿病病程、BUN、Sirt1、UA以及年龄是影响Ln(ACR)的主要因素，其方程为：Ln(ACR)=-3.617+1.005× Mir-124-3p+0.002× FN+0.014× TNF-α+0.035×HIF-1α+0.131×TC+0.016×糖尿病病程+0.148×BUN-0.031×Sirt1+0.001×UA+0.008×年龄。结论血清Mir-124-3p可能成为早期诊断糖尿病肾病新的生物学标记物。血清Mir-124-3p可能通过促进慢性炎症反应、肾脏纤维化等途径参与糖尿病肾病的发生和发展。
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联合抑制低氧诱导因子1α与信号转导和转录活化因子3对人喉鳞状细胞癌裸鼠移植瘤放疗的影响
目的 探讨联合抑制低氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)与信号转导和转录活化因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)对裸鼠人喉鳞状细胞癌(简称鳞癌)移植瘤放疗增敏作用其机制.方法 将制备的喉鳞癌移植瘤裸鼠随机分为空白对照组(A)、放疗组(B)、放疗联合AG490组(C)、放疗联合PX-478组(D)和放疗联合AG490加PX-478组(E).测量并计算移植瘤体积的变化,应用免疫组织化学法检测Ki67和HIF-1α表达.应用Westernblot法检测PA R P-1裂解片段表达.结果 荷瘤小鼠肿瘤体积在E组与C组、D组相比均明显减小,差异具有极显著性(t=12.367、11.598,P均<0.01).HIF-1α表达在E组与C组、D组相比明显减低((t=5.422、3.000,P均<0.05).Ki67指数在E组与C组、D组比较统计学均有极显著性差异(t=4.479、4.352,P均<0.01).PARP-1表达E组与C组、D组相比均明显增高(t=5.507、7.102,P均<0.05).结论 喉癌裸鼠移植瘤体内实验证明联合抑制STAT3和HIF-1α信号途径对放疗有明显增敏作用.
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腺病毒介导的人诱变型低氧诱导因子1α对大鼠后肢缺血模型血管新生的影响
目的 探讨腺病毒介导的人诱变型低氧诱导因子1(简称Ad-H561)在大鼠急性后肢缺血模型中的表达及促进血管新生的作用.方法 ①重组腺病毒在HEK 293A细胞内大量扩增,氯化铯浓度梯度离心,透析纯化后用分光光度计法测定病毒滴度.②建立大鼠急性后肢缺血动物模型,将72只大鼠随机均分为4组:Ad-LacZ组、Ad-HIF1a0组、Ad-HIF1a564组和对照组,其中在测定HIF-1αmRNA表达时取生理盐水组作为对照组,在血管造影和铸型时取假手术组作为对照组.实验组分别以Ad-LacZ、Ad一H0和Ad-H564转染术侧后肢骨骼肌,对照组注射生理盐水,假手术组不做任何处理.③于转染后1、3、5、7d,以生理盐水组为对照,采用RTPCR法测定肌肉中的HIF-1 mRNA表达;④基因转染后28d,以假手术组为对照,选择性后肢动脉造影及血管铸型观察血管密度.结果 ①经PCR及基因测序鉴定,扩增纯化后的腺病毒所携带的目的 基因信息无丢失或变异,病毒滴度达1011OPU/ml.②RT-PCR 结果显示:Ad-H564组基因相对表达量高(平均0.544 7±0.141 2),与生理盐水组,Ad-LacZ组相比差异有统计学意义(P=0.000),但与Ad-H0组(平均O.533 0±0.041 6)的差异不显著(P=0.368);各组均以基因转染后7d表达量高,Ad-H564组与其他各组对照间差异有统计学意义(P=0.000).③基因转染28d后造影结果显示:A小H564组和Ad-H0组的侧支血管密度均大于对照组,但两组间无显著差异.动脉血管铸型结果显示:Ad-H564组的微小血管密度较其他各组明显增多.结论 单一位点诱变型人HIF-1α基因能够增强局部肌肉内基因表达,促进缺血组织中血管新生,但与野生型基因相比差异无统计学意义.
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常压模拟高住低练对大鼠心肌低氧诱导因子1α基因表达的影响
目的:探讨常压下不同低氧(14.5%、12.6%氧含量)模拟高住低练对低氧诱导因子1α(HIF-1α)mRNA表达的影响,为运动与低氧适应提供理论依据.方法:采用RT-PCR技术检测大鼠心肌HIF-1α mRNA水平.结果:与低住安静组和低住低练组比较,模拟海拔3000m急性模拟高住低练组和模拟高住低练组HIF-1α mRNA表达均显著上调;模拟海拔4000m急性模拟高住低练组HIF-1α mRNA表达显著上调,模拟高住低练组则无显著性差异,而显著性低于急性模拟运动组.提示不同海拔低氧刺激与运动对HIF-1α mRNA表达的影响不同,3000m海拔比4000m更为适宜.
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运动预处理对局灶性缺血再灌注大鼠脑梗死和HIF-1α基因表达的影响
目的:探讨运动预处理对局灶性脑缺血再灌注诱导的大鼠脑梗死的影响及其可能机制.方法:将60只雄性SD大鼠随机分为缺血再灌注组(IR组,n=24)、假手术组(sham组,n=12)和运动预处理组(EP组,n=24),EP组进行持续4周的中等负荷游泳训练后,IR组和EP组采用线拴法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型.Sham组行假手术代替缺血再灌注.采用2％TTC(氯化三苯基四氮唑)溶液对各组大鼠脑组织染色,计算脑梗死体积及梗死百分比.采用荧光定量RT-PCR、免疫组织化学及Western blot检测低氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因及其蛋白表达.结果:sham组未见脑梗死现象及明显HIF-1α表达,EP组大鼠脑HIF-1α基因转录和蛋白翻译水平显著高于IR组(P＜0.05),梗死面积较IR组减少37.01％(P＜0.05).结论:运动预处理能减少局灶性缺血引起的大鼠脑梗死体积,可能通过上调HIF-1α表达产生保护作用.
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抑制低氧诱导因子-1α对PC12细胞存活的影响
目的 通过抑制低氧诱导因子-1α转录活性,研究低氧诱导因子-1α在低氧诱导的细胞死亡中的作用.方法 ①将PC12细胞接种于12孔板,在20％常氧和3％低氧环境中培养24h,在光镜下拍照并应用计数方法记录PC12细胞的生长情况.②将PC12细胞接种于96孔板,在常氧和低氧环境中培养24h后,用细胞活力检测剂(a novel tetrazolium compound,3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl) -2- (4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium inner salt,MTS)检测PC12细胞的生长情况.③在常氧和低氧条件下分别用5 nmol/L、50 nmol/L、500 nmol/L的低氧诱导因子-1α抑制剂棘霉素处理PC12细胞24 h和48 h后,用MTS法检测细胞活力.结果 ①细胞计数和MTS法检测细胞活力的结果均显示3％的低氧条件可明显诱导PC12细胞死亡.②不同浓度的低氧诱导因子-1α抑制剂棘霉素处理PC12细胞24h之后,低氧和常氧的细胞活力没有显著区别.③不同浓度的低氧诱导因子-1α抑制剂棘霉素处理PC12细胞48 h之后,低氧不再促进细胞死亡,相反,低氧条件处理的细胞活力明显好于常氧.结论 低氧会促使PC12细胞死亡,棘霉素抑制HIF-1α的转录活性24h后,低氧对PC12细胞的促死亡作用减弱；48 h后,低氧组的细胞活力还可超过常氧组.这表明,低氧下过量的HIF-1α转录激活对细胞是有害的.
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减毒沙门菌载体在应激性溃疡基因治疗中的研究现状
近年来基因疗法发展迅速，减毒沙门菌介导的真核表达载体防治应激性溃疡的基因治疗方法已经逐步从实验及基础研究过渡到临床试用阶段，理论和技术层次上日趋成熟。而基于低氧诱导因子1α与角质细胞生长因子防治应激性溃疡的研究现状一直缺乏整理与总结，该文整理了携带双基因的重组减毒沙门菌的实现情况及存在问题，为进一步研究提供帮助。
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低氧诱导因子1α在骨损伤修复中的研究进展
骨损伤时,局部组织或细胞常处于低氧状态,骨损伤修复是一个复杂的受多种细胞因子调控的修复过程.低氧导致一系列转录诱导因子的表达,其中低氧诱导因子(HIF-1α)是调节细胞低氧反应的关键因子,它所调控的一些因子在骨修复过程中作用十分广泛,主要涉及血管化和骨再生.现就HIF-1α的成血管作用,及其对成骨细胞、破骨细胞的调控作用予以综述.
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神经干细胞移植对脑缺血/再灌注损伤大鼠HIF-1α和HIF-3α表达的影响
目的 探讨神经干细胞(NSCs)移植对大鼠脑缺血/再灌注损伤海马区低氧诱导因子1α(HIF-1α)和低氧诱导因子3α(HIF-3α)表达的影响.方法 线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血/再灌注模型,大鼠随机分为假手术组、模型组、NSCs组.再灌注72 h后神经功能损害评分表(NSS)法行神经功能评分,免疫组化法检测海马区HIF-1α和HIF-3α蛋白表达.结果 NSCs移植后可见PKH26标记的NSCs在海马区有表达.与模型组比较,NSCs组NSS评分显著降低(P＜0.05),海马区HIF-1α和HIF-3α蛋白表达显著上调(P＜0.05).结论 神经干细胞移植可上调脑缺血/再灌注损伤大鼠海马区HIF-1α和HIF-3α表达,促进脑缺血损伤神经功能恢复.
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缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑低氧诱导因子1αmRNA的表达及参麦注射液的干预作用
目的 研究缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠脑组织低氧诱导因子1α(HIF-1α)mRNA的表达及参麦注射液的干预作用.方法 新生7 d龄SD大鼠随机分为假手术组、生理盐水组、参麦组,又各分为缺血缺氧后2、12、24 h,3、7、14 d 6个哑组,每亚组9只.采用反转录(RT)-PCR法检测鼠脑HIF-1α mRNA;流式细胞仪膜联蛋白V/碘化丙啶双染色法检测细胞凋亡.结果 (1)缺氧缺血后2 h,生理盐水组和参麦组右侧海马神经元凋亡率即均高于假手术组(均P<0.05),于24 h达到峰值后开始下降[(16.80±1.44)%、(11.95±1.13)%],14 d各组差异均无统计学意义(均P>0.05).参麦组海马神经元凋亡率在缺血缺氧后12、24 h,3和7 d均明显低于生理盐水组(均P<0.05).(2)缺血缺氧后2 h生理盐水组、参麦组新生大鼠右侧大脑中HIF-1α mRNA的表达即均高于假手术组(均P<0.05),于24 h达峰值后开始下降[(她32±4.03)%、(35.63±3.73)%],14 d各组表达差异均无统计学意义(均P>0.05);参麦组大脑中HIF-1α mBNA的表达在缺血缺氧后12、24 h,3和7 d均明显高于生理盐水组(均P<0.05).结论 新生大鼠HIBD时HIF-1α mBNA表达增强,参麦注射液可提高新生大鼠HIBD后的HIF-1α mRNA的表达,减少新生大鼠缺氧缺血后神经元凋亡的发生.
