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竹节参总皂苷干预自然衰老大鼠肝脏炎症的实验研究
目的 探讨竹节参总皂苷干预自然衰老大鼠肝脏炎症的作用.方法 以自然衰老大鼠为对象,将SPF级SD大鼠按月龄分为3月龄组(3 M组)、9月龄组(9 M组)、15月龄组(15 M组)、24月龄组(24 M组)及24月龄的竹节参总皂苷(TSPJ)低、中、高剂量组,每组12只大鼠.TSPJ低、中、高剂量组的大鼠从18 M开始,分别给予竹节参总皂苷10、30、60 mg·kg-1灌胃至24个月,每周停药1 d,连续6个月.采用HE染色观察组织病理形态学变化,RT-PCR检测肝脏白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-12(1L-12)、白介素17α(IL-17α)、干扰素-γ(IFN-γ)mRNA的表达,Western blot检测肝脏IL-1β和TNF-α蛋白表达.结果 随着大鼠年龄的逐渐增长,HE染色发现肝组织中肝索及肝血窦的排列紊乱加重,脂肪空泡和炎症细胞增多,TSPJ(10、30、60 mg·kg-1)各剂量组均能在一定程度上改善其病变情况;IL-1β、IL-6、IL-12、IL-17α、TNF-α、IFN-γ mRNA和IL-1β、TNF-α蛋白的表达随着年龄的增长逐渐升高,TSPJ各剂量组均在一定程度上降低其表达.结论 竹节参总皂苷对自然衰老大鼠肝脏有一定的保护作用,可能与其对抗肝脏炎症有关.
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均匀设计优化竹节参总皂苷提取工艺
目的 优化超声波提取竹节参总皂苷的工艺.方法 以竹节参总皂苷得率为评价指标,以乙醇浓度、溶剂倍数、提取时间、提取温度为考察因素,采用均匀设计实验优化竹节参总皂苷的提取工艺.结果 优化的提取工艺为乙醇浓度为50%、乙醇用量为12 倍、提取时间为40 min,提取温度为30℃.结论 优化的提取工艺提取率高,操作简便,可为竹节参总皂苷工业化提取提供重要的参考.
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竹节参总皂苷对佐剂关节炎大鼠血清TNF-α和IL-1β表达的影响
目的 探讨竹节参总皂苷治疗关节炎的可行性和作用机制.方法 将40只雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组、白芍总苷组、竹节参总皂苷低剂量组和高剂量组,每组8只.空白对照组不做任何处理,余组建立弗氏完全佐剂诱导的佐剂关节炎模型,造模成功后第14天开始给药,高、低剂量组分别每天予竹节参总皂苷200、50 mg/kg灌胃,白芍总苷组予白芍总苷50 mg/kg灌胃;模型组予等量生理盐水灌胃,灌胃时间均为7 d.造模后第12天开始,每隔3 d测量各组左右足容积,计算足肿胀率.于造模后第21天采用ELISA法测定各组血清TNF-α和IL-1β水平.结果 造模后21 d ,白芍总苷组、高、低剂量组足肿胀率均低于模型组,高剂量组明显低于其他各组.血清TNF-α和IL-1β水平模型组均高于其他各组(P均＜0.05);高剂量组低(P＜0.01).结论 竹节参总皂苷治疗大鼠佐剂关节炎效果确切,作用机制可能为下调血清TNF-α与IL-1β表达水平.
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竹节参总皂苷抗炎作用的研究
目的:观察竹节参总皂苷抗炎作用.方法:建立二甲苯致小鼠耳肿胀和弗氏完全佐剂诱导大鼠的足肿胀炎症模型,观察竹节参总皂苷对急、慢性炎症的治疗效果.结果:与模型组比较,竹节参总皂苷高剂量组能够显著时抗二甲苯所致的炎症(P<0.01),且可明显减轻佐剂关节炎大鼠的足肿胀程度(P<0.01).结论:竹节参总皂苷具有较显著的抗炎作用.
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竹节参总皂苷对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜细胞增殖抑制作用的研究
目的 研究竹节参总皂苷(TSPJ)对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜细胞增殖的影响.方法 酶消化法进行胶原诱导性关节炎大鼠滑膜细胞的原代培养,MTT法检测TSPJ对滑膜细胞增殖的影响,流式细胞仪检测TSPJ对滑膜细胞凋亡率的影响.结果 TSPJ可明显抑制体外培养的CIA大鼠滑膜细胞的增殖,TSPJ可诱导滑膜细胞凋亡.结论 TSPJ可有效抑制体外培养的胶原诱导性关节炎大鼠滑膜细胞的增殖,这可能是其治疗类风湿关节炎的机制.
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竹节参皂苷的免疫佐剂活性研究
目的 通过对竹节参总皂苷进行分段研究,确定其发挥佐剂效应的佳段位.方法 正丁醇萃取的总皂苷过D101大孔吸附树脂,通过用不同醇浓度洗脱,得到不同洗脱段,将各个段所得皂苷与蛋白共同注入小鼠体内进行免疫,每周免疫1次,共3次,后1次免疫后5天处死小鼠取血,测定抗体效价;然后根据HPLC色谱分析及含量测定确定.结果 Elisa实验表明90％浓度的醇过大孔树脂所得皂苷的免疫佐剂活性强,10％次之,30％和60％相当;HPLC及含量测定证明了皂苷的佐剂活性.结论 90％醇浓度洗脱的皂苷具有显著的佐剂效应.
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竹节参总皂苷镇痛作用的实验研究
目的 观察竹节参总皂苷的镇痛作用,以确定竹节参镇痛作用的活性部位.方法 镇痛实验采用热板法和扭体法,观察灌胃不同剂量的竹节参总皂苷后小鼠的痛阈值和扭体反应的次数.结果 竹节参总皂苷高、低剂量组对小鼠痛阚值明显增加,扭体次数明显减少(P<0.01).结论 竹节参总皂苷具有明显的镇痛作用,是竹节参发挥镇痛作用的主要活性部位.
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竹节参总皂苷免疫调节作用
目的 观察竹节参的有效成分竹节参总皂苷(total saponins of Panax japonicus,TSPJ)的免疫调节作用.方法 灌胃给TSPJ 14 d,测定小鼠巨噬细胞碳清除率、血清溶血值,二硝基氟苯诱导的小鼠迟发性超敏反应(DTH),放射免疫法检测血中IL-2,TNF-α含量,观察TSPJ对小鼠免疫功能的影响.结果 与空白组比较,TSPJ对胸腺指数及碳清除率无明显影响;降低血清溶血素水平及抗体生成细胞数;能降低血中IL-2,TNF-α含量;25 mg·kg-1 TSPJ ig对DTH反应有一定的增强作用,100 mg·kg-1TSPJ ig则有抑制作用.结论 TSPJ能明显调节小鼠免疫功能,这可能是其治疗风湿类疾病的机制之一.
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竹节参总皂苷的提取工艺研究
目的:优选竹节参总皂苷的提取工艺.方法:采用L9(34)正交试验对竹节参总皂苷的提取工艺优化,以比色法测定不同工艺提取物中竹节参总皂苷含量.结果:竹节参总皂苷佳提取工艺为,提取次数2次、浸提时间1.0 h、乙醇含量70%,固液比为1:20时总皂苷的得率高,平均为7.57%.结论:此方法提取率高,方法重复性好,为今后竹节参资源工业化开发提供了一定理论参考.
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竹节参总皂苷成分的抗疲劳活性
目的:比较竹节参地上部分和根茎部分中总皂苷成分的抗疲劳活性,开发竹节参药材新的药用部位.方法:将昆明种小鼠按体质量随机分组,分别给予注射用水、香菇茵多糖片阳性对照药、竹节参地上部分总皂苷提取物、根茎部分总皂苷提取物,观察小鼠的体质量变化情况、负重游泳时间、血乳酸、血清尿素氮和肝糖元含量等指标.结果:竹节参地上部分总皂苷提取物中、高剂量组及根茎部分总皂苷提取物低、中剂量组均可不同程度地延长小鼠负重游泳时间,降低运动后小鼠血乳酸和血清尿素氮的含量,提高小鼠肝糖元值.结论:竹节参地上部分总皂苷提取物具有与根茎部分总皂苷提取物相似的抗疲劳活性.
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竹节参总皂苷抗炎机制的研究
目的 观察竹节参的有效成分竹节参总皂苷(TSPJ)的抗炎作用并探讨其抗炎机理.方法 采用小鼠巴豆油耳肿胀实验、冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高实验及小鼠角叉菜胶足肿胀实验观察TSPJ的抗炎作用,检测小鼠腹膜炎时血清MDA、SOD、GSH-PX值.结果 TSPJ(75、150、300mg·kg-1) 灌胃能显著抑制巴豆油所致的小鼠耳肿胀、冰醋酸引起的小鼠腹腔毛细血管通透性增强和角叉菜胶所致的小鼠足肿胀,可减少血中MDA的生成,恢复小鼠胸膜炎血清SOD、GSH-PX的活力.结论 TSPJ具有明显的抗炎作用,其机制可能与减少炎症部位自由基生成,抑制脂质过氧化反应的生成有关.
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竹节参总皂苷对不同时间段脑出血模型大鼠脑损伤的保护作用
目的：研究竹节参总皂苷（TSPJ）对脑出血大鼠脑损伤不同时间段的影响。方法采用胶原酶法制备脑出血动物模型，将48只大鼠随机分为假手术组、模型组、TSPJ低、高剂量组共4组，每组12只；造模后6h灌胃给药，每12h 1次，于造模后12、72h测各组大鼠脑组织含水量，超氧化物歧化酶、丙二醛含量，IL-6、TNF-α水平。结果与模型组比较，72 h高剂量TSPJ组脑组织含水量减少，超氧化物歧化酶活性增高，丙二醛含量下降， IL-6、TNF-α水平下降，12h时TSPJ高剂量组超氧化物歧化酶活性增高，TNF-α下降；丙二醛、IL-6含量变化不明显。结论TSPJ能减轻出血性脑损伤，对受损脑组织发挥保护作用，且有时间依赖性。
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竹节参总皂苷对类风湿性关节炎大鼠的抗炎作用及其机制研究
目的 观察竹节参的有效成分竹节参总皂苷(TSPJ)对类风湿性关节炎大鼠(RA)抗炎效果,并探讨其抗炎机制.方法 建立RA大鼠模型后,灌胃给TSPJ 10d,采用冰醋酸致大鼠腹腔毛细血管通透性增高实验检测TSPJ抗炎效果,测定大鼠巨噬细胞碳清除率、血清IgG、二硝基氟苯诱导的大鼠迟发性超敏反应(DTH),研究TSPJ对类风湿性关节炎模型大鼠抗炎机制.结果 与模型组比较,TSPJ能抑制冰醋酸所致RA大鼠腹腔毛细血管通透性的增高,TSPJ对RA大鼠碳清除率无明显影响,能降低RA大鼠血清IgG水平,100mg/kg TSPJ对DTH反应有抑制作用.结论 TSPJ对RA大鼠有抗炎作用,其机制可能是通过抑制RA大鼠血清IgG水平及DTH反应而实现的.
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竹节参总皂苷对Triton WR-1339诱发的高脂血症小鼠降血脂作用研究
目的:研究竹节参总皂苷的降血脂作用.方法:采用Triton WR-1339诱发急性高脂血症小鼠模型,将66只雄性小鼠随机分为空白组、模型组、非诺贝特组、竹节参总皂苷低剂量组、竹节参总皂苷中剂量组、竹节参总皂苷高剂量组,每组11只.观察竹节参总皂苷对各组小鼠血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平的影响.结果:与模型组比较,非诺贝特组可显著降低小鼠血清TC、TG、LDL-C水平(P＜0.01);竹节参总皂苷低剂量组(100mg/kg)可降低小鼠血清TC水平(P＜0.05),显著降低小鼠血清TG水平(P＜0.01);竹节参总皂苷中剂量组(200mg/kg)可显著降低小鼠血清TC、TG水平(P＜0.01),降低小鼠血清LDL-C水平(P＜0.05);竹节参总皂苷高剂量组(400mg/kg)可显著降低小鼠血清TC、TG、LDL-C水平(P＜0.01).结论:竹节参总皂苷具有一定的降血脂作用,且呈剂量依赖性.
关键词： 高脂血症 小鼠 竹节参总皂苷 Triton wr-1339 -
竹节参总皂苷对DSS诱导溃疡性结肠炎小鼠PPAR-γ信号通路及炎症因子的影响
目的:观察竹节参总皂苷对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导小鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的改善作用及对PPAR-γ信号通路和炎症因子的影响.方法:将小鼠随机分为6组:正常对照组、模型组、柳氮磺吡啶(SASP)阳性对照组及竹节参总皂苷高、低剂量组.通过自由饮用4％ DSS诱导建立小鼠UC模型,各组连续灌胃给予不同药物10 d,正常对照组和模型组给予等体积溶剂.记录疾病活动指数(DAI).以HE染色、免疫组化、分光光度法和ELISA法分别检测结肠病理变化、PPAR-γ表达、结肠匀浆髓过氧化物酶(MPO)活性和血清IL-1β、IL-10、IL-17、IFN-γ含量.结果:竹节参总皂苷能显著降低UC模型小鼠的DAI,减轻结肠黏膜损伤,降低结肠组织MPO活性和血清IL-1β、IL-17、IFN-γ含量,而升高结肠组织PPAR-γ的表达及血清IL-10的含量.结论:竹节参总皂苷可能通过上调PPAR-γ的表达,抑制促炎因子IL-1β、IL-17、IFN-γ的释放,提升IL-10水平而产生对实验性UC的保护作用.
关键词： 竹节参总皂苷 溃疡性结肠炎 PPAR-γ信号通路 炎症因子 -
从内质网应激途径探讨竹节参总皂苷对自然衰老大鼠脑组织的保护作用
目的:研究竹节参总皂苷对自然衰老大鼠脑组织的保护作用及其机制.方法:将40只18月龄雄性SD大鼠随机分为4组,即自然衰老组及竹节参总皂苷低、中、高剂量组,以6月龄大鼠作为青年对照组,每组10只.竹节参总皂苷低、中、高剂量组大鼠从18月龄开始分别灌胃给予10、30、60 mg/kg的竹节参总皂苷,青年对照组和自然衰老组大鼠灌胃等体积生理盐水.灌胃持续6个月,每周连续灌胃6d,停药1d.HE染色观察大脑皮层的形态,TUNEL法检测各组大鼠大脑皮层中细胞凋亡情况,Western blot检测大脑皮层中GRP78、p-JNK、JNK、CHOP、Bcl-2和Bax蛋白表达.结果:与自然衰老组比较,竹节参总皂苷各剂量组大脑皮层组织形态结构有所改善,且细胞凋亡数量减少;竹节参总皂苷还能显著升高自然衰老组大脑皮层中Bcl-2蛋白表达,抑制GRP78、CHOP、Bax和p-JNK蛋白表达.结论:竹节参总皂苷对自然衰老大鼠脑组织具有保护作用,其机制可能与抑制内质网应激,减少脑细胞凋亡有关.
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从内质网应激角度研究竹节参总皂苷对自然衰老大鼠结肠炎症反应的调节作用
目的:观察竹节参总皂苷对自然衰老大鼠结肠炎症反应的影响,并从内质网应激反应研究其可能机制.方法:将SD雄性大鼠分为5组:青年组(6月龄)、自然衰老组(24月龄)及竹节参总皂苷低、中、高剂量组.采用D-乳酸试剂盒检测大鼠血清D-乳酸水平,RT-PCR法检测各组结肠炎症因子IL-1β、TNF-α mRNA表达,Western blot法检测各组结肠COX-2和内质网应激反应标志蛋白GRP78、CHOP和p-eIF2α的表达.结果:与青年组比较,自然衰老大鼠血清D-乳酸水平,结肠炎症因子IL-1β、TNF-α mRNA水平,COX-2蛋白表达水平,内质网应激相关蛋白GRP78、CHOP、p-eIF2α表达均显著增高,给予竹节参总皂苷干预后大鼠血清D-乳酸水平,结肠炎症因子IL-1β、TNF-α mRNA水平,COX-2和内质网应激相关蛋白GRP78、CHOP、p-eIF2α表达与自然衰老组比较均显著降低.结论:自然衰老大鼠肠黏膜屏障功能发生障碍,结肠存在炎症反应和内质网应激反应,而竹节参总皂苷可降低肠道炎症,其机制可能与降低内质网应激反应相关.
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竹节参总皂苷对自然衰老大鼠小肠上皮细胞紧密连接蛋白的调节作用及其机制研究
目的:研究竹节参总皂苷对衰老大鼠肠道上皮细胞紧密连接蛋白表达的调节作用及其可能机制.方法:SPF级SD大鼠分为成年组(6月龄)、衰老模型组(24月龄)及竹节参总皂苷高、中、低剂量组5组.免疫组织化学方法检测各组大鼠回肠上皮细胞间紧密连接蛋白Occludin、ZO-1,抗氧化应激相关蛋白Nrf2、HO-1、NQO-1,线粒体相关蛋白Sirt1、PGC-1α,及p-AMPK蛋白的表达情况.结果:与成年组大鼠比较,自然衰老大鼠Occludin、ZO-1、Nrf2、HO-1、NQO-1、Sirt1、PGC-1α、p-AMPK蛋白表达均显著降低(P＜0.01).与自然衰老大鼠比较,竹节参总皂苷各组大鼠Occludin、ZO-1、Nrf2、HO-1、NQO-1、Sirt1、PGC-1α、p-AMPK表达显著升高(P＜0.05或P＜0.01).结论:自然衰老大鼠细胞间紧密连接蛋白表达减少引起的回肠黏膜屏障功能障碍可能与线粒体氧化应激密切相关,而竹节参总皂苷可能通过调节衰老大鼠线粒体氧化应激的水平,从而上调肠上皮细胞间紧密连接蛋白的表达,改善衰老大鼠肠道黏膜屏障功能障碍.
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竹节参总皂苷通过线粒体途径保护H2O2诱导的SH-SY5Y神经细胞损伤
目的:探讨竹节参总皂苷对SH-SY5Y细胞的保护作用机制.方法:SH-SY5Y细胞随机分为正常对照组,H2 O2模型组(600 μmol/L H2O2),药物干预组(600μ mol/L H2O2 +0.1、1、5、20 μg/mL竹节参总皂苷).竹节参总皂苷预处理12h后,再加入H2 O2继续培养12 h.JC-1法检测线粒体膜电位变化,Western blotting检测Sirt1、PGC-1α、Foxo3a、LC3-Ⅱ和Beclin1的表达.结果:600μmol/L H2O2与SH-SY5Y共同孵育12h后,线粒体膜电位下降,Sia1、PGC-1α、Foxo3a、LC3-Ⅱ和Beclin1的蛋白表达下调,预孵育竹节参总皂苷能明显提高细胞线粒体的膜电位,增强Sia1、PGC-1α、Foxo3a、LC3-Ⅱ和Beclin1的蛋白表达.结论:竹节参总皂苷对H2 O2致SH-SY5Y神经细胞损伤具有保护作用,其机制可能与调节线粒体功能及自噬相关蛋白有关.
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竹节参总皂苷通过ERK/Nrf2通路对H2O2致SH-SY5Y细胞氧化损伤的保护作用研究
目的:探讨竹节参总皂苷对H2O2致SH-SY5Y细胞氧化应激损伤的保护作用及其分子机制.方法:H2O2作用SH-SY5Y细胞建立氧化应激损伤模型,以不同浓度竹节参总皂苷(0.1、1、5、20 μg/mL)预处理12 h,再加入H2O2继续培养12h.通过MTT检测细胞活力;酶生化法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量;Western blotting检测Nrf2、p-ERK、p-P38蛋白表达;Real-Time PCR检测NQO1、GCLC的mRNA表达.结果:各浓度竹节参均能显著提高H2O2所导致的细胞活力降低、提高SOD活性、降低MDA含量,并能上调Nrf2、p-ERK蛋白及NQO1、GCLC mRNA表达.结论:竹节参总皂苷对H2O2致SH-SY5Y细胞氧化应激损伤具有保护作用,其作用机制可能与调控ERK/Nrf2通路,从而增强抗氧化基因表达有关.
