首页 > 文献资料
-
马齿苋总黄酮对缺氧/复氧致心肌细胞损伤的影响及机制研究
目的:研究马齿苋总黄酮(PTF)对缺氧/复氧致心肌细胞损伤的影响及机制.方法:利用体外培养的H9c2心肌细胞建立缺氧/复氧模型.将培养的心肌细胞分为5组:正常对照组、缺氧/复氧损伤模型组、缺氧/复氧损伤加10 mg·L-1 PTF组、缺氧/复氧损伤加20 mg·L-PTF组、缺氧/复氧损伤加40 mg·L-1PTF组.MTT法检测心肌细胞存活率,荧光分光光度法 测定心肌细胞内钙离子浓度,比色法测定心肌细胞培养液中一氧化氮(NO)浓度,流式细胞术检测心肌细胞凋亡率、RT-PCR检测心肌细胞凋亡基因Caspase-3 mRNA的表达.结果:与A/R组比较,PTF组(终质量浓度为10,20,40 mg·L-1)均可明显提高缺氧/复氧损伤的心肌细胞存活率,降低NO浓度、细胞内钙离子浓度、细胞凋亡率[(18.25 ±2.64,P＜0.05),(13.83±1.52,11.21 ±1.76,P＜0.01)],PTF组可有效减少缺氧/复氧损伤心肌细胞内Caspase-3 mRNA的表达.结论:PTF可通过抑制心肌细胞内钙超载、减轻过量NO的细胞毒性作用、下调Caspase-3表达,从而保护心肌细胞.
-
马齿苋总黄酮对缺血缺氧刺激下血管平滑肌细胞蛋白激酶C活性的影响
目的 观测马齿苋总黄酮(PTF)对缺血缺氧刺激下血管平滑肌细胞钙超载及蛋白激酶C(PKC)的影响.方法 用Fura-2/AM作Ca2+指示剂,检测PTF对正常培养及缺血缺氧作用下家兔主动脉血管平滑肌细胞Ca2+浓度及PKC的活性的改变.结果 PTF对正常培养家兔主动脉血管平滑肌细胞[Ca2+]i浓度无明显影响；PTF(8,16,32,64 mg· L-1)剂量依赖性抑制缺血缺氧缺氧致血管平滑肌细胞[Ca2+]i升高；PTF对正常培养家兔主动脉血管平滑肌细胞胞浆、胞膜PKC活性均升高；PTF处理后胞浆PKC活性下降,胞膜PKC活性上升.结论 PTF可能抑制缺氧致血管平滑肌细胞钙超载,调节缺氧条件下血管平滑肌细胞PKC活性.
-
马齿苋总黄酮对氧自由基引发人红细胞膜损伤的保护作用
目的研究马齿苋总黄酮对超氧阴离子(O-2)引发的人红细胞膜氧化损伤的保护作用.方法采用邻苯三酚自氧化产生的O-2引发人红细胞膜氧化损伤模型,研究马齿苋总黄酮对红细胞膜氧化损伤的影响.结果O-2能引起红细胞膜脂质过氧化,丙二醛(MDA)含量、自氧化速率显著增加,膜脂流动性及膜封闭度下降.而红细胞膜经一定量马齿苋总黄酮(60,120,240,480 μg·mL-1)预先处理后,膜MDA含量明显减少,自氧化速率明显降低,膜脂流动性和膜封闭度显著增高.结论马齿苋对氧自由基引发的人红细胞膜氧化损伤有一定的保护作用.
-
马齿苋总黄酮对血管平滑肌细胞增殖的影响
目的 观察马齿苋总黄酮对大鼠主动脉平滑肌细胞(RASMC)增殖的抑制作用及机制.方法 由细胞计数、MTT法测定细胞增殖率,采用羟胺法、TBA方法分别测定培养液中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量.结果 马齿苋总黄酮(16.0、32.0、64.0μg/ml)以浓度依赖方式抑制RASMC及氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)诱导RASMC增殖,可诱导少量RASMC凋亡.马齿苋总黄酮预处理24 h后已出现明显的抗增殖作用,提高培养液中SOD活性[(95.2+25.6)U/nd比(73.6+21.4)U/m1]、降低MDA含量[(3.78±0.52)nmol/L比(4.52±0.74)nmol/L],与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 马齿苋总黄酮具有抗RASMC增殖作用,该作用与提高SOD活性、降低MDA含量有关.
-
马齿苋总黄酮对大鼠心功能和动脉血压的影响
目的:观察马齿苋总黄酮对麻醉大鼠心功能和颈动脉血压的影响.方法:采用powerlab生物信号记录分析系统同步动态记录动脉血压、Ⅱ导心电图、心室大收缩功能、心室大舒张功能、左室内压大上升速率(dp/dtmax)、左室内压大下降速率(-dp/dtmax).结果:马齿苋总黄酮2.25 mg/100 g、4.50 mg/100g、9.00 mg/100g分别静脉给药,给药后5 min开始起效,0.5 h～1 h达高峰,可持续2 h～4 h.与对照组比较,治疗组各项指标均具有显著性差异.结论:马齿苋总黄酮剂量依赖性增强心功能,升高血压,但对心率几乎无影响.
-
马齿苋总黄酮对人红细胞膜封闭能力的影响
目的建立超氧阴离子自由基(O-2)引发人红细胞膜氧化损伤实验模型,研究马齿苋总黄酮对红细胞膜重封闭能力的影响.方法以邻苯三酚在碱性条件下自氧化产生(O-2)引发人红细胞膜氧化损伤,并以此为实验模型研究马齿苋总黄酮对红细胞膜封闭能力的影响.结果 O-2能引起红细胞膜重封闭能力显著降低,其平均封闭度为41.9%,而预先加入不同浓度的马齿苋总黄酮后能显著增加膜封闭能力,且存在明显的剂量效应关系.结论马齿苋总黄酮对红细胞膜封闭能力具有保护作用.
-
马齿苋总黄酮对人红细胞膜的保护作用
为建立超氧阴离子自由基(O2· -)引发人红细胞膜氧化损伤实验模型,研究马齿苋总黄酮对红细胞膜氧化损伤的保护作用.以邻苯三酚在碱性条件下自氧化产生(O2· -)引发人红细胞膜氧化损伤,并以此为实验模型研究马齿苋总黄酮对红细胞膜封闭能力唾液酸、丙二醛(MDA)含量的影响.结果显示:(O2·-)能引起红细胞膜重封闭能力显著降低,其平均封闭度为41.9%,红细胞膜唾液酸含量较正常膜显著下降,MDA 含量显著增加.而预先加入不同浓度的马齿苋总黄酮后能显著增加膜封闭能力,红细胞膜唾液酸含量较氧化膜显著增加,MDA 含量显著降低.且存在明显的剂量效应依赖关系.提示:马齿苋总黄酮对红细胞膜氧化损伤具有保护作用.
-
马齿苋总黄酮对异丙肾上腺素致心肌缺血损伤的影响
目的:观察马齿苋总黄酮(portulaca oleracea total flavones,POTF)对异丙肾上腺素(isoproteronol,ISO)致小鼠实验性心肌缺血的保护作用,并探讨其可能的作用机制.方法:采用腹腔注射ISO诱导小鼠造成心肌缺血的动物模型,记录小鼠标准Ⅱ导联心电图(ECG)及心肌含水量(MWC)、心肌指数(MI)的变化,检测血清中肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)含量和心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、Ca2+-ATPase活性变化;观察小鼠常压密闭条件下的存活时间.结果:POTF给药组能明显降低J点抬高程度;提高小鼠耐急性缺氧的能力;降低心肌缺血小鼠血清中LDH、CK、MDA的含量;升高心肌组织SOD、Ca2+-ATPase活性,MDA含量降低;心脏重量参数显示对POTF心肌水肿有明显的抑制作用.结论:POTF对急性心肌缺血损伤具有保护作用,其作用可能与增强抗氧化能力、抑制过氧化脂质、提高耐缺氧能力有关.
-
马齿苋总黄酮对血小板源性生长因子致家兔血管平滑肌细胞增殖的抑制作用
目的:研究马齿苋总黄酮(Portulaca total flavone,PTF)对血小板源性生长因子-BB型(PDGF-BB)致血管平滑肌细胞(Vascular smoothmuscle cell,VSMC)增殖的影响并探讨其机制.方法:采用组织贴壁法培养家兔胸主动脉血管平滑肌细胞,细胞计数法观察PTF(8、24、72 mg/L)对PDGF-BB所致的VSMC增殖作用的影响；氚-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入方法测定VSMC DNA的合成；流式细胞仪分析增殖细胞周期,荧光分光光度计测定VSMC内[Ca2+]i.结果:PTF以浓度依赖方式抑制PDGF-BB诱导的VSMC增殖、DNA合成,血管平滑肌细胞处于G1/G0期的细胞数增多,而G2/S期的细胞数显著减少(P＜0.01)；能抑制高K-诱导的VSMC内[Ca2+]1升高(P＜0.01).结论:PTF可明显抑制PDGF-BB诱导的VSMC增殖,其作用机制可能与其降低VSMC内高钙浓度[Ca2+]i有关.
-
马齿苋总黄酮对缺氧/复氧致心肌细胞凋亡的影响
目的 观察马齿苋总黄酮(PTF)对缺氧/复氧致H9c2心肌细胞凋亡及凋亡相关基因Caspase-3 mRNA表达的影响.方法 利用体外培养的H9c2心肌细胞建立缺氧/复氧模型,采用荧光染色法观察心肌细胞凋亡形态变化,流式细胞术检测心肌细胞凋亡率、RT-PCR检测心肌细胞凋亡基因Caspase-3的表达.结果 与A/R组比较,PTF组缺氧/复氧损伤后有部分细胞发生凋亡形态变化,但数量较A/R组明显较少;PTF组均可明显降低细胞凋亡率(P＜0.05);PTF组可有效减少缺氧/复氧损伤的H9c2心肌细胞内Caspase-3 mRNA的表达.结论 PTF可抑制模拟缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡,其作用可能是通过下调Caspase-3表达实现的.
-
马齿苋总黄酮对肝纤维化大鼠转化生长因子-β1信号因子表达的影响
目的：观察马齿苋总黄酮对肝纤维化大鼠转化生长因子( TGF)-β1基因及其蛋白表达的影响,探讨马齿苋总黄酮对肝纤维化的治疗作用机制。方法 SD大鼠48只,随机分为正常对照组、模型对照组、复方甘草酸苷组、马齿苋总黄酮组,各12只。除正常对照组外,其余各组大鼠腹腔注射四氯化碳( CCl4)溶液2 mL · kg-1· d-1复制肝纤维化模型。复方甘草酸苷组灌胃复方甘草酸苷溶液15.75 mg·kg-1,马齿苋总黄酮组灌胃马齿苋总黄酮溶液35.6 mg·kg-1,正常对照组和模型对照组灌胃等体积纯净水。30 d后麻醉处死动物剖取肝脏,实时-聚合酶链反应( RT- PCR)和Western-Blot法检测肝脏细胞TGF-β1基因及蛋白表达。结果正常对照组、模型对照组、复方甘草酸苷组、马齿苋总黄酮组大鼠肝脏细胞中TGF-β1基因的相对表达量分别为0.725±0.130,7.493±1.410,3.016±1.240,2.668±1.150。马齿苋总黄酮可显著下调TGF-β1基因(P<0.01)及TGF-β1蛋白(P<0.01)的表达。结论马齿苋总黄酮可通过下调大鼠肝纤维化细胞TGF-β1基因及蛋白表达有效治疗肝细胞纤维化病变。
-
马齿苋总黄酮微乳的制备及经皮渗透研究
目的:以马齿苋总黄酮为模型药物,制备治疗湿疹的经皮给药中药有效组分微乳.方法:通过单因素试验及伪三元相图的绘制筛选微乳组分,并以药物体外经皮渗透速率进一步优化微乳处方.结果:优选处方为肉豆蔻酸异丙酯—Cremophor EL—丙三醇—水(6.5∶29.25∶29.25∶35),平均粒径为24.54nm;马齿苋总黄酮稳态透皮速率为114.70μg·cm-2·h-1,比原湿疹搽剂的透皮速率提高了17倍.结论:马齿苋总黄酮微乳性状均一,澄清透明,质量稳定,透皮性能好.
-
马齿苋总黄酮对异丙肾上腺素致心肌缺血损伤的影响
目的 观察马齿苋总黄酮(Portulaca oleracea total flavones,POTF)对异丙肾上腺素(isoproteronol,ISO)致小鼠实验性心肌缺血的保护作用,并探讨其可能的作用机制.方法 60只昆明种小鼠随机分为6组,即正常对照组、缺血模型组、POTF给药组(80、40、20 mg/kg)、普萘洛尔给药组(5 mg/kg);采用腹腔注射ISO诱导小鼠造成心肌缺血的动物模型,记录小鼠标准Ⅱ导联心电图ST段(J点)上移值及心肌含水量(MWC)、心肌指数(MI)的变化,观察小鼠常压密闭条件下的存活时间;检测血清中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)含量和心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)、MDA、Ca2+-ATPase活性变化.结果 POTF给药组能明显降低J点上移值;延长心肌缺血小鼠常压缺氧存活时间(P＜0.05);降低心肌缺血小鼠血清中LDH、CK、MDA的含量(P＜0.05);升高心肌组织SOD、Ca2+-ATPase活性,降低MDA含量(P＜0.05);明显减少MWC、MI.结论 POTF对小鼠急性心肌缺血损伤具有保护作用,其作用可能与增强抗氧化能力、抑制脂质过氧化、提高耐缺氧能力有关.
-
马齿苋总黄酮对氧化应激损伤血管内皮细胞的影响
目的 观察马齿苋总黄酮对过氧化氢诱导人血管内皮细胞氧化损伤的保护作用.方法 采用体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),实验分为5组:正常对照组、过氧化氢损伤组、马齿苋总黄酮低、中、高剂量组.MTT法测定各组细胞活力,荧光分光光度计测量各组细胞线粒体膜电位水平.结果 与正常对照组比较,过氧化氢损伤组血管内皮细胞活力、线粒体膜电位显著降低(P＜0.01);与过氧化氢损伤组比较,马齿苋总黄酮干预组血管内皮细胞活力、线粒体膜Ratio值明显升高(P<0.05),且存在明显的剂量依赖关系.结论 马齿苋总黄酮对氧化应激诱导血管内皮细胞损伤具有一定的保护作用,其机制可能与其抗氧化、维持线粒体膜电位有关.
-
马齿苋总黄酮对缺血再灌注心肌细胞损伤的保护作用
目的 研究马齿苋总黄酮(portulaca total flavone,PTF)对新生大鼠心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用.方法 取体外培养的新生大鼠心肌细胞于缺氧24h复氧lh造成缺血再灌注(I/R)损伤模型,观察细胞损伤情况,并将PTF终浓度为5、10、20mg/L分别加入培养基中,预处理24h后,再置于上述缺氧复氧环境中培养,测定以上不同条件下心肌细胞上清液中的乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量,并测定各组细胞内Ca2+浓度.结果 与正常对照组相比较,缺血组和再灌组细胞上清液中LDH、CK、MDA含量明显升高(P＜0.01),SOD活力则显著降低(P＜0.01),缺血组和再灌组细胞内Ca2+浓度均明显升高(P＜0.01).而用PTF预处理后缺血组和再灌组的LDH、CK、MDA显著低于用药前(P＜0.01),SOD高于缺血组和再灌组(P＜0.01)；PTF组(20mg/L)对正常心肌细胞内Ca2+浓度影响小(P＞0.05)；与PDGF-BB诱导增殖组比较,PIF(5、10、20 mg/L)药物干预组心肌细胞Ca2+浓度明显降低(P＜0.05),且存在明显的剂量效应关系.结论 PTF对缺血再灌心肌细胞有保护作用,其作用机制可能与增强抗氧化能力、减轻钙超载有关.
-
马齿苋总黄酮对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响
目的 观察马齿苋总黄酮对大鼠主动脉平滑肌细胞(RASMC)增殖的抑制作用及机制.方法 由细胞计数、MTT法测定细胞增殖率,采用羟胺法、TBA方法分别测定培养液中SOD活性、MDA含量.结果 马齿苋总黄酮(16.0、32.0、64.0 μg/ml)以浓度依赖方式抑制RASMC增殖及抑制氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)诱导RASMC增殖,可诱导少量RASMC凋亡,马齿苋总黄酮预处理24 h后已出现明显的抗增殖作用,提高培养液中SOD活性、降低MDA含量.结论 马齿苋总黄酮具有抗RASMC增殖作用,该作用与提高SOD活性、降低MDA含量有关.
-
马齿苋不同提取部位抗氧化活性的比较
目的:研究马齿苋不同提取部位的体外抗氧化活性.方法:采用苯酚-硫酸比色法测定马齿苋提取物中多糖含量,紫外分光光度法测定马齿苋提取物中总黄酮含量；在体外化学模拟条件下,采用Fenton反应法和模拟机体中黄嘌呤与黄嘌呤氧化酶反应系统分别测定马齿苋多糖、总黄酮对羟自由基和超氧阴离子自由基的清除能力.结果:用紫外分光光度法测得马齿苋多糖提取物中多糖百分含量为39.6％,黄酮提取物中总黄酮百分含量为10.51％；多糖剂量为4.53 mg/ml对O2的抑制率只有2.4％,与多糖比较,黄酮对O2和OH·均有良好的清除能力,在剂量为0.59 mg/ml时清除O2-可达43.7％,剂量在0.59 mg/ml～ 4.92 mg/ml对O2-有良好的清除作用；而两者对OH·的清除能力明显强于O2-,多糖在剂量为0.04 mg/ml～0.49 mg/ml,对OH·的抑制率为37.0％～ 90.7％,黄酮提取物剂量在0.02 mg/ml～0.18 mg/ml时对OH·的抑制率为32.0％～ 90.2％,且均呈良好的量效关系.结论:在两种测定方法中马齿苋总黄酮的抗氧化能力明显强于多糖,表明总黄酮是马齿苋抗氧化活性的主要成分.
