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垂盆草总黄酮及异鼠李素对对乙酰氨基酚诱导的L02细胞损伤的保护作用
目的:探讨垂盆草总黄酮及异鼠李素对对乙酰氨基酚(APAP)诱导的人正常肝细胞(L02)损伤的保护作用.方法:以不同浓度的APAP刺激L02细胞,制备损伤模型,筛选APAP的有效刺激浓度;复制APAP诱导的L02细胞损伤模型,用细胞增殖与活性试剂(CCK-8)检测细胞存活能力,分析盆草总黄酮及异鼠李素对APAP诱导的L02细胞活性的影响;检测细胞上清液中丙二醛(MDA),谷胱甘肽(GSH)含量,超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的含量.结果:与正常组比较,不同浓度的APAP处理的L02细胞活力显著降低,筛选出的造模条件为10 mmol· L-1 APAP孵育24 h,模型组肝细胞上清液中MDA含量升高(P ＜0.05,P＜0.01),GSH含量降低,SOD,GSH-Px活性降低,AST和ALT含量升高;与模型组比较,垂盆草总黄酮、异鼠李素均能显著提高APAP损伤细胞的存活率,降低MDA含量,提高GSH含量,提高SOD,GSH-Px活性,降低ALT和AST的释放量(P ＜0.05,P＜0.01).结论:垂盆草总黄酮及异鼠李素对APAP损伤的L02细胞具有较好的保护作用.
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垂盆草的化学成分分离鉴定
目的:对景天科植物垂盆草Sedum sarmentosum全草的化学成分进行分离并对分离得到的单体化合物进行结构鉴定.方法:取干燥垂盆草全草15 kg,加10倍量70％乙醇加热回流提取3次,每次2h,合并滤液,浓缩得浸膏.经200～300目硅胶拌样后上硅胶柱,用石油醚-乙酸乙酯(100∶1 ～98∶2～9∶1 ～7∶3),二氯甲烷-甲醇(100∶0 ～95∶5 ～9∶1～8∶2 ～7∶3～6∶4)顺序进行梯度洗脱,得到10个部位.采用反复硅胶柱色谱,羟丙基葡聚糖凝胶柱色谱、反相ODS柱色谱、制备薄层色谱及重结晶的手段对石油醚-乙酸乙酯(98∶2)部位、石油醚-乙酸乙酯(9∶1)部位、二氯甲烷-甲醇(95∶5)部位、二氯甲烷-甲醇(9∶1)部位、二氯甲烷-甲醇(8∶2)部位进行分离纯化,结合化合物理化常数和波谱数据分析来鉴定化合物结构.结果:从垂盆草中分离并鉴定出12个化合物,分别为δ-香树脂醇(1),δ-香树脂酮(2),3-表-δ-香树脂醇(3),β-谷甾醇(4),木犀草素(5),α-香树脂醇(6),山柰素(7),金丝桃苷(8),芹菜素(9),香草酸(10),槲皮苷(11),胡萝卜苷(12).结论:化合物9,10为首次从该属中分离得到,化合物6,7为首次从垂盆草中分离得到.
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高效液相色谱法测定垂盆草药材中小麦黄素苷的含量
目的:建立反相高效液相色谱法测定垂盆草药材中小麦黄素苷的含量.方法:采用YMC-J'Sphere ODS-H80(4 μm,150 mm×4.6 mm)等色谱柱;以异丙醇-水-冰醋酸(15∶8∶2)为流动相;检测波长350 nm.结果:小麦黄素苷在0.099～0.99 μm范围内峰面积与进样量呈良好的线性关系,相关系数r=0.999 8;平均回收率为97.04%.结论:该法简便可行,结果准确可靠,适用于药材质量控制的定量方法.
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近缘种药材垂盆草与佛甲草的比较鉴定
目的:对属于近缘种、外形极似的药材垂盆草与佛甲草进行鉴定比较研究.方法:采用显微鉴定法研究两者茎的横切面及粉末的显微特征;采用薄层色谱比较两者的异同.结果:垂盆草与佛甲草茎横切面组织特征十分相似,但在导管数目、髓部形状及含紫红色物质的细胞数目等有显著差异.对8月份样品而言,前者导管数一般仅有35-58个,髓部多呈三角形;后者则多达75-150个,髓部呈"Y"形.两者的薄层色谱也有较大不同.此外,不同采集期的样品在显微特征上存在某些明显差异.结论:研究结果为两种药材的应用提供了鉴定参考依据,并提示近缘植物药的显微鉴定应注意排除共性.
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不同产地与不同采收期垂盆草药材的红外光谱鉴别研究
目的:探索不同产地不同采收期垂盆草药材的红外光谱特征.方法:利用傅里叶红外光谱仪检测各样品(全草粉末压片)的红外光谱,对谱图进行比较研究.结果:湖北省4个产地15份垂盆草药材样品的红外光谱中有部分吸收峰的峰位(波数cm-1)、峰强度(吸光度A)或峰强比均与样品的采收期呈明显相关性.就峰位而言,所有春季样品在(1 625±7)cm-1处的峰位均小于1 623cm-1,秋季样品(8-10月)一般大于1 625cm-1;所有春季样品在(1 057±16)cm-1处的峰位均大于1050cm-1,夏秋季样品均小于1 050cm-1.此外,样品的产地也与红外光谱特征有一定相关性.结论:利用红外光谱特征可基本判断鄂产垂盆草的采收期;红外光谱法用于植物药材产季的研究与判断值得重视.
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垂盆草中三萜类成分δ-香树酯酮的含量测定
目的:用HPLC-ELSD测定中药垂盆草中三萜类成分δ-香树酯酮的含量,以期为中药垂盆草的质量控制提供切实可行的技术方法.方法:Zorbax Sil(4.6 mm×150 mm,5 μm)色谱柱,二氯甲烷-甲醇(99:1)为流动相,流速0.5 mL·min-1,ELSD检测器,漂移管温度100℃,氮气流速3.0 L·min-1.结果:δ-香树酯酮在2.12～10.6 μg呈良好的线性关系,药材中该成分的平均回收率为100.5%.结论:该方法简便、准确、分离效果好,无干扰,能准确测定垂盆草中δ-香树酯酮的含量,为制订合理的中药垂盆草的质量标准提供了新的思路.
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垂盆草醇提物抑制HepG2细胞STAT-3信号通路诱导细胞凋亡的研究
目的:研究垂盆草醇提物对STAT-3信号通路的影响,及其诱导细胞凋亡的分子机制.方法:MTT法检测垂盆草醇提物对HepG2细胞增殖的影响;流式细胞术分析结合FITC-Annexin V/PI双标记检测对肝癌细胞凋亡的影响,免疫印迹试验检测细胞凋亡Caspase-3,Caspase-9,PARP,P-STAT-3(Tyr705),STAT-3,Bcl-2,Mcl-1相关蛋白表达水平.结果:垂盆草醇提物可明显抑制HepG2细胞的增殖,诱导HepG2细胞凋亡,且抑制作用呈剂量依赖效应.垂盆草醇提物作用后,抑制STAT-3信号转导通路,下调Mcl-1和Bcl-2的表达,引起凋亡相关蛋白Caspase-3,Caspase-9的降解/活化及PARP的降解,并呈剂量依赖效应.结论:垂盆草醇提物通过抑制STAT-3信号转导通路和Mcl-1和Bel-2的表达,进而抑制HepG2细胞的增殖,诱导其凋亡.
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钉螺食物诱螺效果及在颗粒灭螺剂中的应用
目的 利用钉螺对某些食物具有的趋向性和嗜食性,筛选出诱集钉螺效果较好的食物引诱物,并探讨其在颗粒灭螺剂中的作用.方法 比较垂盆草混合物(食物C)和面粉发酵物(食物M)在不同湿度、光照等环境条件下的诱螺效果,并将它们分别与灭螺植物绞股蓝水提物配伍制成颗粒火螺剂进行灭螺实验.结果 在室温(25℃)条件下,不同钉螺食物的诱螺率差异有统计学意义.湿度对诱集钉螺影响较大,80%湿度比40%要好,多因素方差分析表明:湿度(F1.64=60.209,P<0.001)、钉螺食物(F3.64=344.820,P<0.001)和时间(F3.64=724.429,P<0.001)对诱螺率均有显著影响,钉螺食物M>钉螺食物C.光照对诱集钉螺影响较小.用钉螺食物M和C分别制成颗粒灭螺剂诱杀钉螺,7 d钉螺死亡率与对照组、实验组相比分别提高了42.68%和30.00%.结论 在25 ℃、80%湿度条件下,钉螺食物M诱螺效果较好,将其添加到灭螺药物中,能大大提高钉螺的死亡率.
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中医汤药治疗对肝癌肝动脉化疗栓塞术后肝功能及生活质量的影响
目的 探讨中医汤药治疗对肝癌肝动脉化疗栓塞术后肝功能及生活质量的影响.方法 随机将本院于2014年12月～2018年3月接收的众多肝癌且需行肝动脉化栓塞术治疗的86例患者纳为本次研究样本,并根据术后治疗方案的差异性将其分别分为一般组与中药组,每组各43例.术后予以一般组患者常规性治疗(肝泰乐、复方甘草酸苷片、盐酸甲氧氯普胺与散利痛),对中药组患者则在前者的基础上严格遵医嘱引导其术后按时服用中医汤药(由垂盆草、五味子、白术与土茯苓等多味中草药熬制而成).而后由参与本次研究的医护人员就两组患者接受不同术后治疗后的临床疗效、肝功能指标变化情况以及AFP-L3表达情况与生活质量进行客观性对比分析.结果 研究结果显示,经差异性治疗后,中药组患者在上述一系列临床相关指标的数据中均优于一般组患者,且两者在该系列数据中的差异具有统计学意义(P＜0.05).其中,一般组患者的临床治疗总有效率为72.09％,中药组患者的临床治疗总有效率为93.02％.结论 与单一性的常规治疗相比,将其与中医汤药相结合对行肝动脉化疗栓塞术肝癌患者进行联性术后治疗,不仅能够优化临床治疗效果,稳定患者的肝功能指标,并且还可在一定程度上不断提高其生活质量,进而加快其康复速度,值得临床大力借鉴与推广.
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垂盆草水煎液对不同小鼠急性肝损伤模型的疗效作用
目的：复制四氯化碳（CCl4）、D-氨基半乳糖胺联合内毒素（D-GalN/LPS）、D-氨基半乳糖胺联合肿瘤坏死因子-α（D-GalN/TNF-α）及刀豆蛋白A（ConA）诱导小鼠急性肝损伤模型，筛选针对垂盆草（Sedum Sarmentosum，SS）水煎液有效的急性肝损伤小鼠模型。方法采用152只雄性6～8周龄C57BL/6小鼠，其中80只小鼠随机分为CCl4＋H2O组、CCl4＋SS组、D-GalN/LPS＋H2O组、D-GalN/LPS＋SS组、D-GalN/TNF-α＋H2O组、D-GalN/TNF-α＋SS组、ConA＋H2O组及ConA＋SS组共8组，每组10只，观察各组生存率。其余72只小鼠随机分为Normal组、CCl4＋H2O肝功能组、CCl4＋SS肝功能组、D-GalN/LPS＋H2O肝功能组、D-GalN/LPS＋SS肝功能组、D-GalN/TNF-α＋H2O肝功能组、D-GalN/TNF-α＋SS肝功能组、ConA＋H2O肝功能组及ConA＋SS肝功能组共9组，每组8只，检测血浆ALT、AST和乳酸脱氢酶（LDH）水平。结果垂盆草水煎液将CCl4小鼠急性肝损伤模型的生存率由55%提高到90%（P =0.0128）。造模24小时后，CCl4＋SS组ALT为（5500.00±426.20）U/L，AST为（4383.00±358.00）U/L，LDH为（6764.00±691.30）U/L，分别低于CCl4＋ H2O组ALT[（10521.00±1374.00）U/L]、AST[（7328.00±947.80）U/L]、LDH[（13589.00±1542.00）U/L]，差异均有统计学意义（P均＜0.05）。结论垂盆草水煎液对CCl4诱导小鼠急性肝损伤模型有保护作用。
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垂盆草提取物对马兜铃酸致大鼠肾小管上皮细胞损伤的改善作用
目的 研究马兜铃酸(AA)致肾小管上皮细胞损伤的分子机制及垂盆草提取物(SSBE)对AA损伤的干预机制.方法 将体外培养的大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E加入AA1,5,10,50和100 mg·L-1;或AA 10 mg·L-1 +SSBE 10,50,100,500和1000 mg·L-1,培养24 h后,采用倒置相差显微镜观察细胞形态变化;Hoechst 33258染色和流式细胞仪检测NRK-52E细胞凋亡;ELISA和免疫细胞荧光染色检测巨噬细胞移动抑制因子(MIF)的表达;实时荧光定量RT-PCR和Western蛋白质印迹法检测凋亡相关基因c-Myc和p53 mRNA和蛋白的表达.结果 随着AA浓度的增加,NRK-52E细胞损伤愈加明显.与正常对照组相比,AA10和50 mg· kg-1诱导细胞凋亡,并促进了c-Myc和p53明显表达(P＜0.05);AA 10和50 mg·kg-1损伤肾小管上皮细胞后,MIF的分泌和表达量明显增加(P＜0.05).与AA 10 mg·L-1组相比,SSBE 1000 mg·L-1不仅减轻了AA所致的损伤,而且明显下调了MIF的表达(P＜0.05).同时,SSBE1000 mg·L-1也明显抑制了c-Myc和p53的表达(P＜0.05).结论 AA损伤肾小管上皮细胞,诱导细胞凋亡,并促进MIF的表达,进而影响炎症应激反应过程中巨噬细胞的浸润和活化.SSBE的干预可明显降低AA所致的损伤,这可能与MIF的表达下调有关.
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垂盆草的化学成分研究(Ⅰ)
目的从景天科垂盆草Sedum sarmentosum Bunge.全草中分离鉴定化合物,寻找有效成分.方法通过硅胶等色谱手段分离化合物,借助UV、IR、MS和NMR等手段测定,解析其光谱鉴定化合物结构.结果从垂盆草的95%乙醇提取液的乙酸乙酯部分得到7个化合物,分别鉴定为小麦黄素-7-O-β-D-葡萄糖苷(tricin-7-O-β-D-glucoside Ⅰ)、木犀草素(LuteolinⅡ)、异鼠李素(Isorhamnetin Ⅲ)、异甘草素(Isoliquiritigenin Ⅳ)、槲皮素(quercetin Ⅴ)、双十八烷基硫醚(dioctadecyl sulfide Ⅵ)、棕榈酸(palmic acid Ⅶ).结论其中化合物Ⅵ、Ⅶ首次从该植物中得到.化合物Ⅰ有明显保肝作用.
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清热解毒的垂盆草
中药垂盆草别名狗牙半支、狗牙瓣、石指甲、佛指甲等,为景天科植物垂盆草的新鲜或干燥全草.其原植物的茎纤细,长可达20cm以上,部分节上可见纤细的不定根.3叶轮生,叶片倒披针形至矩圆形,绿色,肉质,长1.5~2.8cm,宽0.3~0.7cm,先端近急尖,基部急狭,有距.气微,味微苦.中药垂盆草一般在夏、秋二季采收,除去杂质,可鲜用或干燥.其产地主要有福建、贵州、四川、湖北、湖南等.朝鲜和日本也有出产.
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HPLC法测定垂盆草提取物中异鼠李素的含量
目的:用HPLC法测定垂盆草提取物中异鼠李素的含量.方法:采用ODS-C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.4%磷酸(55:45);流速1.0 ml/min;检测波长360nm.结果:异鼠李素浓度在2.82～28.20μg/ml范围内线性良好,r=0.999 8(n=8),平均回收率为100.18%,RSD为1.73%(n=9).结论:本法可用于控制垂盆草中有效成分的含量,简便、准确、灵敏度高.
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垂盆草中总黄酮含量测定方法研究
目的 建立垂盆草中总黄酮含量的测定方法.方法 以50%的乙醇为溶剂超声提取垂盆草中的黄酮类成分,用聚酰胺柱吸附黄酮类化合物,再以芦丁为对照品,用紫外可见分光光度法(UV)测定总黄酮的含量.结果 总黄酮在10～68μg/ml浓度范围内线性关系良好(r=0.999 8,n=7),平均加样回收率为95.7%,相对标准偏差RSD=0.84%(n=6),重复性的RSD为0.63%.结论 本方法简便、快速、灵敏度高,测定结果 准确、重现性好,能满足垂盆草药材及制剂质量控制的要求.
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浅谈阳黄与阴黄的中医辨析与中药治则
阳黄,黄疸两大类型之一.见<景岳全书·黄疸>.多因感受外邪,湿热侵及肝胆,胆热液泄,外渗肌肤所致.症见发热口渴,身目呈橘黄色,小便黄如浓茶汁,食欲减退,恶心呕吐,大便秘结,腹胀胁痛,苔黄腻,脉弦数等.治宜清利肝胆湿热为主.方如茵陈蒿汤、栀子檗皮汤、麻黄连翘赤小豆汤、大柴胡汤等;药如金钱草、垂盆草、半枝莲、五味子、板蓝根、田基黄等,均可随症选用[1].
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正交试验优选垂盆草的提取工艺研究
垂盆草系景天科植物垂盆草Sedum sarmentosum Bunge的新鲜或干燥的全草,味甘、淡、性凉,具有清热解毒、利尿消肿、排脓生肌之效.
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垂盆草的化学成分研究
中药垂盆草Sedum sarmentosum Bunge 为景天科景天属多年生草木植物，我国分布广泛。它具有清热解毒，抗菌消炎作用，临床上广泛用于治疗咽喉肿痛、热淋、疔痈、水火烫伤、蛇虫咬伤及各种急慢性活动性肝炎［1］。广泛的临床应用已证明垂盆草及其制剂具有显著的抗肝炎作用。为了广泛筛选该中药中抗肝炎活性成分，为药材和制剂质量标准规范化研究奠定基础，我们对垂盆草的化学成分进行了研究，从中分得5 个化合物，经化学反应和光谱分析鉴定为δ-香树酯酮(δ-amyrone)，β-谷甾醇(β-sitost-erol)，胡萝卜苷(doucosterol)，苜蓿苷(tricin-7-β-D-glucopyranoside)以及丁香酸(syringic acid)。1 仪器和试剂 熔点用X4型显微熔点测定仪测定(温度未校正)；红外用PE983R-400型红外测定仪测定(KRr压片)；氢谱和碳谱用Kruker ACF-300型核磁共振仪测定(溶剂DMSO-d6或(CD3)2CO，内标TMS)；质谱用AZB-HX型质谱仪测定；层析用硅胶由青岛海洋工厂生产。药材购于南京市药材公司，经本校鉴定教研室王春根教授鉴定为景天科植物垂盆草全草。2 提取与分离 干燥全草5 kg，用85%乙醇回流提取3 次，合并醇提液，减压浓缩成流浸膏；加适量水热溶；再静置冷却，过滤去除沉淀。水液分别用石油醚，乙酸乙酯，正丁醇萃取，得石油醚部分80 g，乙酸乙酯部分57 g，正丁醇部分130 g。取正丁醇部分进行硅胶柱层析，以氯仿-甲醇系统梯度洗脱，每500 mL为一流分，得4 个单体，分别为化合物Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ。 取乙酸乙酯部分进行硅胶柱层析，以石油醚-乙酸乙酯系统梯度洗脱，每500 mL为一流分，得2 个单体，分别为化合物Ⅱ和Ⅴ。3 鉴定 化合物Ⅰ：无色柱晶(无水乙醇)，mp 202 ℃～203 ℃，Liberman-Burchard 反应为紫红色，提示为三萜类化合物。从质谱-计算机联用检索出的可能结构式以及与文献报道的齐墩果烷-13(18)-烯-3-酮的IR，MS，1HNMR基本一致［4］。所以确知该化合
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垂盆草治疗颈痈50例
颈痈是颈后部的多个相邻的毛囊和皮脂腺的急性化脓性感染,初起即有粟粒样脓头, 热红肿、胀痛,易向深部及周围扩张,溃后状如蜂窝.笔者以鲜垂盆草外敷治疗颈痈,疗效显著.现将用鲜垂盆草外敷治疗颈痈50例总结如下.
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垂盆草复方提取物对D-氨基半乳糖所致小鼠急性肝损伤的影响
目的 观察垂盆草复方提取物对D-氨基半乳糖(D-GalN)所致小鼠急性肝损伤的保护作用.方法 将60只雄性ICR小鼠随机分为6组,即空白组、模型组、双环醇组及垂盆草复方提取物低、中、高剂量组,每组10只.空白组、模型组予0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶液10 mL/kg灌胃,双环醇组予双环醇300 mg/kg灌胃,垂盆草复方提取物低、中、高剂量组分别予垂盆草复方提取物18、36、72 g/kg灌胃,每日1次,连续灌胃7 d.末次给药后1 h,空白组腹腔注射0.9%氯化钠注射液10 mL/kg,其余组小鼠腹腔注射D-GalN 800 mg/kg建立急性肝损伤模型.模型建立24 h后,检测各组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)及肝组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)水平,镜下观察各组小鼠肝损伤的程度并进行病理学评分,计算小鼠肝脏指数.结果 模型组、双环醇组及垂盆草复方提取物低、中、高剂量组ALT、AST水平高于空白组(P＜0.05);双环醇组及垂盆草复方提取物低、中、高剂量组ALT、AST水平均低于模型组(P＜0.05);垂盆草复方提取物低、中剂量组ALT、AST水平均高于双环醇组(P＜0.05),垂盆草复方提取物高剂量组ALT、AST水平与双环醇组比较差异无统计学意义(P＞0.05);垂盆草复方提取物高剂量组ALT、AST水平低于垂盆草复方提取物低、中剂量组(P＜0.05).与空白组比较,模型组肝脏指数升高,GSH-Px活性降低,MDA含量升高(P＜0.05);与模型组比较,双环醇组及垂盆草复方提取物低、中、高剂量组肝脏指数降低,GSH-Px活性升高,MDA含量降低(P＜0.05);与双环醇组比较,垂盆草复方提取物低、中剂量组肝脏指数升高,GSH-Px活性降低,MDA含量升高(P＜0.05),垂盆草复方提取物高剂量组各项水平与双环醇组比较差异无统计学意义(P＞0.05);与垂盆草复方提取物低、中剂量组比较,垂盆草复方提取物高剂量组肝脏指数降低,GSH-Px活性升高,MDA含量降低(P＜0.05).模型组、双环醇组及垂盆草复方提取物低、中、高剂量组肝脏病理学评分均高于空白组(P＜0.05);双环醇组及垂盆草复方提取物低、中、高剂量组肝脏病理评分均低于模型组(P＜0.05);垂盆草复方提取物低、中剂量组肝脏病理学评分均高于双环醇组(P＜0.05),垂盆草复方提取物高剂量组与双环醇组比较差异无统计学意义(P＞0.05);垂盆草复方提取物高剂量组肝脏病理学评分低于垂盆草复方提取物低、中剂量组(P＜0.05).结论 垂盆草复方提取物对D-GalN诱导的小鼠急性肝损伤有明显保护作用.
