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黄精多糖预处理对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用
目的 研究黄精多糖(Polygona-Polysaccharose,PSP)预处理对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧(anoxia/reoxygenation,A/R)损伤的保护作用及与其抗氧化作用的关系.方法 实验用SD新生大鼠(出生1～3 d)20只,雌雄不拘,常规方法培养心肌细胞,在培养48 h后按随机数字表法分为4组(每组重复实验6次):正常对照组(Control组)、A/R组、缺氧预处理(anoxia preconditioning,APC)组(APC+AR组,3次短暂缺氧复氧,再进行A/R操作)、PSP预处理组(PSP+A/R组).对以下指标进行检测:细胞存活率(MTT法),培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性、脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)活性;心肌细胞凋亡率(流式细胞仪).结果 与对照组比较,A/R组心肌细胞存活率、细胞培养液中SOD活性均明显降低(均P<0.01),而细胞培养液中MDA含量、LDH活性及心肌细胞凋亡率均明显增加(均P<0.01).与A/R组比较,APC+A/R组与PSP+A/R组心肌细胞存活率、细胞培养液中SOD活性均明显增加(均P<0.01),同时细胞培养液中MDA含量、LDH活性及心肌细胞凋亡率均明显降低(均P<0.01).与APC+A/R组比较,PSP+A/R组心肌细胞存活率、细胞培养液中MDA含量及LDH、SOD活性和心肌细胞凋亡率差异均无统计学意义(均P>0.05).结论 PSP预处理可减轻心肌细胞A/R损伤,具有模拟APC作用,其机制可能与PSP的抗氧化作用有关.
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表没食子儿茶素没食子酸酯预处理对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤保护及相关机制的研究
目的 建立乳鼠心肌细胞缺氧/复氧(A/R)损伤模型,探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及相关机制.方法 分离培养SD乳鼠心肌细胞,心肌细胞在培养48 h后随机分为3组(每次取18只乳鼠,每组实验重复6次):正常对照组、A/R组、EGCG预处理组(EGCG+A/R组).采用MTT比色法测定各组心肌细胞存活率,比色法测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的含量,黄嘌呤氧化酶法测定各组心肌细胞内超氧化物歧化酶(SOD)的含量,硫代巴比妥酸法测定各组心肌细胞内丙二醛(MDA)的含量,流式细胞分析仪检测各组心肌细胞内活性氧(ROS)的含量.结果 与对照组比较,A/R 组心肌细胞存活率、细胞内SOD含量均明显降低(均P<0.01),而心肌细胞内MDA、ROS以及细胞释放的LDH均明显增加(均P<0.01).与A/R组比较,EGCG+A/R组心肌细胞存活率、细胞内SOD含量均明显增加(均P<0.01),同时心肌细胞内MDA、ROS及细胞释放的LDH均明显降低(均P<0.01).结论 EGCG预处理可减轻心肌细胞A/R损伤,其机制可能为EGCG增加了细胞的内源性抗氧化剂活性,降低心肌细胞A/R后氧自由基的生成.
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福辛普利拉对培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用
目的 探讨福辛普利拉对培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用. 方法 取SD新生大鼠(1～3 d)120只,培养成心肌细胞,在培养的第4 d随机分为5组(每次取20只,每组重复6次):正常对照组、缺氧/复氧(A/R)组、福辛普利拉剂量l+A/R (F1+A/R)组、福辛普利拉剂量2+A/R(F2+A/R)组、福辛普利拉剂量3+A/R (F3+A/R)组.建立缺氧/复氧损伤模型,以福辛普利拉进行干预,对各组分别观察心肌细胞搏动频率、细胞存活率和培养液中乳酸脱氢酶活性. 结果 ①细胞搏动频率(beat/min): A/R组(11.50±3.39)比正常对照组(99.83±4.22)明显减低(P＜0.01);福辛普利拉各剂量组比A/R组显著加快(P＜0.01),比正常对照组稍慢,但无显著性差异(P＞0.05).②细胞存活率: A/R(26.78±4.25%)组比正常对照组(87.96±2.58)明显降低(P＜0.01);福辛普利拉各剂量组比A/R组明显增高(P＜0.01),与正常对照组相比无显著性差异(P＞0.05).③LDH活性: A/R组(69.50±7.34)比正常对照组(10.33±2.73)明显升高(P＜0.01);福辛普利拉各剂量组比A/R组明显降低(P＜0.01),与正常对照组相比虽有升高但无显著性差异(P＞0.05) . 结论 从细胞水平证实福辛普利拉预处理对心肌细胞对缺氧/复氧损伤具有保护作用.
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丹红注射液预处理对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及其机制
目的 探讨丹红注射液(DH)预处理对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及其相关机制.方法 建立乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤模型,分离培养SD乳鼠心肌细胞,在培养3d后随机分为5组(每组实验重复6次):正常对照(control)组、缺氧/复氧(A/R)组,丹红注射液低剂量(终浓度为0.2μmol/ml)(DHL+A/R)组,丹红注射液中剂量(终浓度为0.6μmol/ml) (DHM+A/R)组,丹红注射液高剂量(终浓度为1.8μmol/ml)(DHH+A/R)组.测定各组心肌细胞存活率,培养液中乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)的含量,以及细胞内ATP水平.结果 与对照组比较,A/R组心肌细胞存活率、细胞培养液中SOD活性和细胞内ATP水平均明显降低(均P＜0.01),而培养液中LDH水平明显增加(P＜0.01).与A/R 组比较,DH+A/R各剂量组心肌细胞存活率、细胞内SOD含量和细胞内ATP水平均明显增加(均P＜0.01),而培养液中LDH水平均明显降低(P＜0.01);其中又以DHH+A/R组细胞的存活率升高明显,与DHL+A/R组比较有显著差异(P＜0.05).结论 丹红注射液预处理可减轻心肌细胞A/R损伤,其机制可能为丹红注射液增加了细胞的内源性抗氧化剂活性,改善了心肌细胞能量代谢;且在一定范围内呈剂量依赖性,随着剂量的升高,保护作用更明显.
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GSH对乳鼠缺氧/复氧心肌细胞中MDA、IL-1β和TNF-α的影响
目的:探讨还原型谷胱甘肽(GSH)对缺氧/复氧培养大鼠心肌细胞损伤后MDA、IL-1β和TNF-α的影响.方法:将原代培养的乳鼠心室肌细胞分为对照组、模型组和GSH组,GSH组缺氧、复氧前均给予160 mg/L浓度GSH,缺氧2 h,复氧1 h.复氧1 h后,用比色法检测丙二醛(MDA)含量,用RT-PCR法检测细胞内IL-1βmRNA和TNF-αmRNA水平.结果:与对照组相比,模型组MDA水平、IL-1βmRNA和TNF-αmRNA表达显著升高(P＜0.01).GSH预处理可以减轻MDA、IL-1βmRNA和TNF-αmRNA的上调(P＜0.01 vs模型组).MDA、IL-1βmRNA和TNF-αmRNA的表达在各组间均呈正相关(P＜0.05).结论:在缺氧/复氧损伤的过程中,炎性细胞因子和氧自由基的作用相互联系,还原型谷胱甘肽能清除氧自由基,抑制IL-1βmRNA和TNF-αmRNA的升高,从而保护缺氧/复氧损伤的心肌细胞.
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缺氧后处置心肌细胞CYP2J3/EETs变化及PPOH对其的影响
目的 探讨缺氧后处置心肌细胞内源性细胞色素P450表氧化酶2J3/环二十碳三烯酸系统(CYP2J3/EETs)变化及细胞色素氧化酶抑制剂PPOH对其的影响.方法 取Wistar乳鼠(12～24 h)心脏做原代心肌细胞培养并分为对照组、缺氧/复氧组、缺氧后处置组、二甲基亚砜组、PPOH抑制剂组,分别行相应处理后.MTT法检测心肌细胞活力,Western Blotting法检测CYP2J3蛋白表达,HPLC法检测心肌细胞培养液中11,12-EETs浓度.结果 心肌细胞活力、CYP2J3蛋白表达、11,12-EETs浓度,缺氧/复氧组明显低于对照组,缺氧后处置组明显高于缺氧/复氧组,PPOH组心肌细胞活力、CYP2J3蛋白表达、11,12-EETs浓度比缺氧后处置组明显下降.结论 缺氧后处置可通过升高CYP2J3/EETs缓解心肌缺氧/复氧损伤.PPOH可抑制缺氧后处置中CYP2J3升高,从而减弱缺氧后处置的心肌保护作用.
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远志皂苷对缺氧／复氧损伤新生大鼠神经细胞的保护作用及其机制
目的：观察远志皂苷（ Sen）对缺氧／复氧损伤（ H／R）新生大鼠神经细胞的保护作用，并探讨其机制。方法对数生长期新生大鼠神经细胞分为A、B、C、D、E组，A、B、C、D组分别加入800μmol／L的H2 O2无血清DMEM培养液培养1 h，使神经细胞发生H／R。 A、B、C组分别加入终浓度为50、100、200μmol／L Sen的DMEM培养液，D、E两组加入等量细胞培养液。分别于培养24、48、72 h时取各组细胞，采用MTT法检测各组细胞生存情况，计算细胞存活率。培养48 h时检测各组细胞上清液Caspase-3、Bax、Bcl-2、乳酸脱氢酶（ LDH）及细胞超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）。结果随Sen浓度升高，细胞生存率升高，且随培养时间增加，细胞生存率升高，P均＜0．05。与D组比较，A、B、C组上清液Caspace-3，Bax表达降低， Bcl-2／Bax升高，SOD活性增加，LDH、MDA表达降低，P均＜0．05。结论 Sen可减轻新生大鼠神经细胞H／R损伤程度，其机制可能与其下调Caspase-3、Bax表达、提高细胞膜稳定性有关。
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氢气预处理对乳鼠海马神经元细胞缺氧/复氧损伤后细胞活力的影响
目的 探讨氢气对乳鼠海马神经元细胞缺氧/复氧损伤后细胞活力的影响.方法 原代培养的SD乳鼠海马神经元细胞,随机分成对照组,缺氧/复氧组和氢气预处理组.对照组常规培养;缺氧/复氧组在100% N2中培养15 min后复氧30 min;氢气预处理组在2% H2+98% N2中培养15 min后复氧30 min.采用MTT法检测乳鼠海马神经元细胞活力.结果 氢气预处理能够增强细胞活力(P<0.05).结论 氢气预处理对海马神经元细胞缺氧/复氧损伤具有保护作用,可能与提高细胞活力有关.
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SITS在实验性心肌细胞缺氧/复氧损伤中的作用
目的 阐明SITS所产生的心肌保护作用.方法 建立缺氧/复氧损伤(A/R)模型及SITS预适应模型,测定心肌细胞的搏动频率、细胞存活率以及细胞培养液中LDH的变化.结果 SITS预处理能明显提高A/R损伤后细胞存活率,减少LDH的漏出.与A/R组相比均有显著性差异(P<0.01).结论 SITS预处理对心肌细胞A/R具有保护作用.此研究为寻找特异性阻断剂,探讨心肌保护药物的新靶点提供理论与实验依据.
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福辛普利拉预处理对心肌细胞缺氧/复氧损伤的预防作用
目的:探讨福辛普利拉对培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧(A/R)损伤的预防作用.方法:取SD新生大鼠(1～3 d),培养成心肌细胞,在培养的第4天随机分为5组:①正常对照组,②A/R组,③0.2 mmol/L福辛普利拉预处理组(F1组),④0.6 mmol/L福辛普利拉预处理组(F2组),⑤1.8 mmol/L福辛普利拉预处理组(F3组).分别观察各组心肌细胞搏动频率、细胞存活率、培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性、心肌细胞肌浆网钙泵(SERCA)mRNA的表达水平和心肌细胞内游离[Ca2+]浓度.结果:①细胞搏动频率:A/R组比正常对照组明显减低(P<0.01);福辛普利拉各剂量组比A/R组显著加快(P<0.01),比正常对照组稍慢(P>0.05).②细胞存活率:A/R组比正常对照组明显降低(P<0.01);福辛普利拉各剂量组比A/R组明显增高(P<0.01),而与正常对照组相比差异无统计学意义(P>0.05).③LDH活性:A/R组比正常对照组明显升高(P<0.01);福辛普利拉各剂量组比A/R组明显降低(P<0.01),与正常对照组相比虽有升高但差异无统计学意义(P>0.05).④SERCA mRNA的表达水平:A/R组比正常对照组mRNA表达下调,为正常对照组的(0.78±0.30)倍(P<0.01);福辛普利拉各剂量组比A/R组显著上调(P<0.01).⑤心肌细胞内游离[Ca2+]浓度:A/R组比正常对照组明显升高(P<0.01);福辛普利拉各剂量组比A/R组明显降低(P<0.01),而与正常对照组相比差异无统计学意义(P>0.05).结论:福辛普利拉预处理后对A/R心肌细胞损伤具有预防作用,其机制可能与SERCA表达上调、减轻细胞内Ca2+超载有关.
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缺氧预适应抑制内皮细胞冷缺氧/温复氧损伤
目的研究缺氧预适应对内皮细胞冷缺氧/温复氧损伤的作用及可能机制.方法培养的内皮细胞ECV-304分成4组,A组,对照组;B组,冷缺氧/温复氧(A/R)组95%N2/5%CO2缺氧装置中用4℃UW液保存24 h;C组,缺氧预适应组(APC),内皮细胞在缺氧前遭受4个循环短时间缺氧/复氧;D组,缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)抑制组:缺氧预适应前,细胞培养液中加入5μmol/L的HIF-1α抑制剂NS398,余同C组.缺氧结束后,各组37℃5%CO2 95%空气中复氧6 h.分别以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法、Western blot法检测各组HIF-1α mRNA和蛋白表达,内皮细胞保护作用通过细胞存活率(台盼蓝拒染法)、LDH释出率及ICAM-1的表达判定.结果缺氧预适应明显上调HIF-1α mRNA和蛋白表达,显著抑制冷保存内皮细胞缺氧/复氧损伤,表现为更高的细胞存活率,更少的LDH释出和ICAM-1的表达.而HIF-1α抑制剂可逆转这种保护作用.结论缺氧预适应能有效地抑制冷保存内皮细胞缺氧/复氧损伤,这种细胞保护作用可能是通过HIF-1α介导的.
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云南鼠尾草提取物对大鼠H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用
目的: 研究云南鼠尾草提取物对大鼠H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤保护作用的机制.方法: 建立大鼠H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤模型,并采用云南鼠尾草提取物进行干预.将体外培养的H9c2大鼠心肌细胞随机分为6组:正常对照(C)组、缺氧/复氧模型(H/R)组、缺氧/复氧模型+维拉帕米阳性对照(H/R+V)组、缺氧/复氧模型+云南鼠尾草低(H/R+L, 0.01 mg·L-1)、中(H/R+M, 0.1 mg·L-1)、高(H/R+H, 1.0 mg·L-1)剂量组.采用噻唑蓝(MTT)法测定细胞存活率,利用检测试剂盒测定丙二醛(MDA)的含量和乳酸脱氢酶(LDH)的活性,通过荧光酶标仪测定荧光吸光度(A)值反映细胞内活性氧 (ROS)水平.结果: 与模型组比较,云南鼠尾草低、中、高剂量组均能显著提高心肌细胞存活率(P＜0.05或P＜0.01),云南鼠尾草高剂量组显著减少细胞内LDH漏出量(P＜0.05或P＜0.01)、胞浆内MDA的含量(P＜0.01)和细胞内ROS水平(P＜0.05).结论: 云南鼠尾草提取物对大鼠H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤具有保护作用,其相关作用机制可能与其减少脂质过氧化物和清除细胞氧自由基有关.
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PKC及缝隙连接蛋白Cx43改变在吗啡和舒芬太尼预处理缺氧复氧损伤心肌中的作用
目的:探讨蛋白激酶C(PKC)信号通路及心肌缝隙连接蛋白Cx43改变在阿片药物预处理中的作用.方法:原代心肌细胞分离培养.将培养5 d的心肌细胞分成8组.正常对照组(C组)不给予任何处理,建立培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤模型(I/R组),吗啡组(MF组)加入吗啡至终浓度0.3μmol·L-1,舒芬太尼组(SF组)加入舒芬太尼至终浓度0.000 3 μmol·L-1,PKC激动剂PMA+吗啡组(PMA+ MF组)加入PMA至终浓度0.02 μmol·L-1,再进行吗啡预处理;PKC抑制剂Rot-tlerin+吗啡组(ROT+ MF组)加入Rottlerin至终浓度5μmol·L-1,再进行吗啡预处理;PKC激动剂PMA+舒芬太尼组(PMA+ SF组)加入PMA至终浓度0.02μmol· L-1,再进行舒芬太尼预处理;PKC抑制剂Rottlerin+舒芬太尼组(ROT+ SF组)加入Rottlerin至终浓度5μmol· L-1,再进行舒芬太尼预处理.各组做上述相应处理后取材检测细胞存活率.免疫荧光共聚焦技术检测缝隙连接蛋白Connexin 43 (Cx43)的平均光密度(AOD),用Western-blot检测细胞Cx43总蛋白及其磷酸化水平(P-Cx43)的表达量.结果:与C组比较,其余各组心肌细胞存活率、Cx43 AOD值、心肌细胞Cx43总蛋白表达及P-Cx43表达降低(P＜0.05);与I/R组比较,MF组、SF组、ROT+ MF组、ROT+ SF组、PMA+ MF组、PMA+ SF组心肌细胞存活率、Cx43 AOD值、Cx43总蛋白和P-Cx43表达增高(P＜0.05);与MF组比较,ROT+ MF组心肌细胞存活率、Cx43 AOD值、Cx43总蛋白及P-Cx43表达降低(P＜0.05),SF组心肌细胞存活率、Cx43 AOD值和Cx43总蛋白降低(P＜0.05),而P-Cx43表达增高(P＜0.05),PMA+ MF组心肌细胞存活率、Cx43 AOD值、Cx43总蛋白和P-Cx43表达均增高(P＜0.05);ROT+ SF组较SF组心肌细胞Cx43 AOD值、Cx43总蛋白和P-Cx43表达低(P＜0.05),而PMA+ SF组较SF组心肌细胞存活率、心肌细胞Cx43 AOD值、Cx43总蛋白和P-Cx43表达高(P＜0.05).结论:吗啡和舒芬太尼预处理可减轻心肌细胞缺氧/复氧损伤,且吗啡对心肌细胞的保护作用较舒芬太尼强,这种心肌细胞保护作用可能与PKC信号通路的激活有关.
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葛根素对外周血内皮祖细胞缺氧/复氧损伤的保护作用
目的:研究葛根素对外周血内皮祖细胞(EPCs)缺氧/复氧损伤的保护作用.方法:采用密度梯度离心法和贴壁培养法相结合,使用专用培养基EGM-2,成功分离纯化EPCs,通过形态学、细胞表面分子标志物检测、内皮祖细胞吞噬功能对其鉴定;采用Krebs液建立缺氧/复氧损伤模型,用葛根素干预后,采用MTT法测定细胞活力、2,4-二硝基苯肼显色法测定细胞外乳酸脱氢酶(LDH)释放量、黄嘌呤氧化酶法测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性、硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量、硝酸还原酶法测定一氧化氮(NO)含量;Western blot法考察胞核、胞质Nrf2和全细胞HO-1蛋白表达.结果:与模型组相比,葛根素20.8 mg·L-1及41.6 mg·L-1组显著提高细胞活力(P＜0.05,P＜(0.01);葛根素20.8mg·L-1及41.6 mg·L-1能显著降低NO、MDA含量和LDH释放量(P＜0.01);葛根素20.8 mg·L-1,41.6 mg·L-1,83.2 mg·L-1均显著提高缺氧/复氧后细胞SOD活性(P＜0.01),并上调细胞HO-1、胞核Nrf2蛋白表达(P＜0.01),显著降低胞浆Nrf2蛋白表达(P＜0.01).结论:葛根素可显著拮抗缺氧/复氧对EPCs的损伤,可能与其抑制细胞过氧化损伤,增强细胞抗氧化能力有关.
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巴戟天正丁醇提取物对乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的防护作用
目的:研究巴戟天正丁醇提物对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤(H/R)的防护作用.方法:采用培养的乳鼠心肌细胞建立缺氧/复氧损伤模型,实验分正常细胞培养组、缺氧/复氧损伤模型组、巴戟天醇提物小、中、大剂量组.观察心肌细胞形态并测定活性氧(ROS)、内皮素(ET-1)的含量变化.结果:巴戟天醇提物可明显改善缺氧/复氧损伤的心肌细胞形态及搏动程度;降低ROS、ET-1的含量.结论:巴戟天正丁醇提物对缺氧/复氧损伤的心肌细胞有防护作用;其防护作用可能与降低细胞液中ROS、ET-1的含量有关.
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巴戟天正丁醇提取物对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤后炎性细胞因子的影响
目的: 观察巴戟天正丁醇提取物对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤后炎性细胞因子的影响.方法:采用培养的乳鼠心肌细胞建立缺氧/复氧损伤模型,实验分正常细胞培养组、缺氧/复氧损伤模型组、巴戟天正丁醇提物小、中、大剂量组.平衡法测定TNF-α、IL-1β、IL-6的含量变化.结果:巴戟天正丁醇提物可明显改善缺氧、复氧损伤;降低TNF-α、IL-1β、IL-6的含量.结论:巴戟天正丁醇提取物对缺氧/复氧损伤的心肌细胞有防护作用;其防护作用可能与降低TNF-α、IL-1β、IL-6的含量有关.
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硫化氢后处理对缺氧/复氧损伤心肌的保护及其机制
目的:探讨硫化氢(H2S)后处理对H9C2细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及其机制.方法:细胞随机分为:正常对照组(con)、缺氧/复氧组(H/R)、NaHS后处理组(H/R+NaHS)、CSE阻断剂干预组(H/R+PAG).倒置显微镜、流式细胞仪检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR检测胱硫醚-7-裂解酶(CSE) mRNA表达;Western blotting检测p50ATF6、GRP78蛋白表达.结果:H/R组CSE mRNA表达较对照组明显降低(P＜0.01);H/R+NaHS组CSE mRNA表达较H/R组明显升高(P＜0.01).H/R组p50ATF6、GRP78表达较对照组明显升高(P＜0.01);NaHS后处理后p50ATF6和GRP78表达较H/R组升高(P＜0.05);给予PAG后,p50ATF6、GRP78表达较H/R组降低(P＜0.01).结论:H2S后处理对H9C2细胞缺氧/复氧损伤具有保护作用,其机制可能与H2S可活化ATF6,上调GRP78表达,降低内质网应激有关.
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Na+/H+交换体阻滞剂在培养乳鼠心肌细胞/复氧损伤中的保护作用及其机制
目的:探讨在缺氧/复氧损伤中Na+/H+交换体阻滞剂在不同时相用药的心肌细胞保护作用及其机制.方法:应用乳鼠心肌细胞建立心肌缺血-再灌注(I/R)损伤模型,实验分为对照组、缺氧/复氧全程给药组(EIPA-I组)、复氧前给药 1组(EIPA-R1组)和复氧前给药 2组(EIPA-R2组)进行缺氧/复氧处理,动态检测单个心肌细胞在缺氧/复氧时细胞胞质Ca2+浓度(即 [Ca2+]i )的变化及细胞挛缩程度,并观察细胞的存活率.结果:EIPA-I组和EIPA-R2组显著抑制了[Ca2+]i 上升及细胞的挛缩,并提高了细胞存活率.结论:在复氧前给予增大剂量的EIPA与缺氧时常规剂量用药同样有效地抑制复氧期Na+/H+的交换,减轻细胞内钙超载,抑制细胞的挛缩,提高心肌细胞的存活率.
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基于心肌细胞缺氧/复氧损伤的麦冬多糖提取工艺研究
目的:优化麦冬多糖提取工艺,并验证其对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用.方法:采用L9 (34)正交试验,以麦冬多糖含量为考察指标,以溶媒量、提取时间、提取次数为考察因素,筛选麦冬多糖佳提取工艺;单因素实验,考察其佳醇沉浓度;在此基础上,采用体外细胞实验建立乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤模型,以细胞损伤抑制率为指标,验证麦冬多糖对心肌细胞的保护作用.结果:麦冬多糖的佳提取工艺为14倍量的水回流提取3次,每次1h,醇沉浓度以80％为宜;按此工艺提取的麦冬多糖对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤具有较好的保护作用,但表现出一定的剂量、时间与药效的非线性关系.结论:本实验优化了麦冬多糖的提取工艺,同时验证了麦冬多糖对缺氧/复氧损伤型冠心病的治疗作用,为揭示其药效物质基础与大规模工业化生产提供参考.
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二甲双胍对人脐静脉内皮细胞缺氧/复氧损伤的保护作用
目的 探讨二甲双胍对人脐静脉内皮细胞缺氧/复氧损伤的影响及其可能机制.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞,建立缺氧/复氧模型,随机分为5组:正常对照组、缺氧/复氧组、缺氧/复氧+不同浓度(0.1、0.5、1.0 mmol/L)二甲双胍干预组.流式细胞术检测各组细胞的凋亡率,实时定量聚合酶链反应检测各组核因子κB/P65 mRNA的表达,酶联免疫吸附法检测各组上清液中细胞间黏附分子1和肿瘤坏死因子α的浓度.结果 与对照组相比,缺氧/复氧组细胞凋亡增加(P＜0.05),核因子κB/P65 mRNA增加,同时细胞间黏附分子1和肿瘤坏死因子α的浓度均升高(P＜0.05);与缺氧/复氧组比较,二甲双胍预处理能减少缺氧/复氧所致人脐静脉细胞凋亡(P＜0.05),减少核因子κB/P65的mRNA的表达,同时细胞间黏附分子1和肿瘤坏死因子α的浓度均降低(P＜0.05),其中0.5 mmol/L浓度组保护作用佳.结论 二甲双胍对缺氧/复氧损伤引起的人脐静脉内皮细胞损伤有保护作用,其机制可能与下调核因子κB/P65表达及抑制了细胞间黏附分子1和肿瘤坏死因子α的释放有关.
