首页 > 文献资料
-
靶向轮廓分析核磁定量法测定4种秦艽中龙胆苦苷与马钱苷酸
目的:建立靶向轮廓分析核磁定量法(TP-qHNM R)同时测定秦艽、麻花艽、粗茎秦艽、小秦艽4种秦艽中龙胆苦苷、马钱苷酸的含量.方法:采集龙胆苦苷、马钱苷酸标准核磁共振氢谱,采用Chenomx NMR suit自建龙胆苦苷与马钱苷酸核磁共振氢谱数据库;秦艽药材采用甲醇超声法提取,提取液吹干以氘代甲醇复溶,同等条件下于记录核磁共振氢谱;基于Chenomx对谱图进行预处理与靶向轮廓分析定量;并采用HPLC-UV法验证TP-qHNMR法测定结果.结果:基于Chenomx的TP-qHNMR法测定秦艽中龙胆苦苷与马钱苷酸含量测定结果准确可靠,与HPLC-UV法无显著差异.所考察的4种秦艽中龙胆苦苷与马钱苷酸含量高低依次为:粗茎秦艽＞秦艽＞麻花艽＞小秦艽.结论:所建立的TP-qHNMR法准确、可靠,可用于秦艽的质量控制,促进了核磁定量技术在中药质量控制中的应用.
关键词： 秦艽 龙胆苦苷 马钱苷酸 靶向轮廓分析核磁定量法 高效液相色谱-紫外检测 -
六盘山人工栽培秦艽化学成分含量累积动态分析
目的:通过对不同生长年限秦艽有效成分含量的动态累积变化规律研究,确定人工栽培秦艽的佳采收期.方法:采用HPLC法,分别对2、3、4年生人工栽培秦艽植株3-11月根部龙胆苦苷和马钱苷酸含量进行测定.结果:在不同生长期龙胆苦苷与马钱苷酸含量累积呈现不同的变化规律,且以第4年9月时,根的干重大且有效成分含量趋于稳定,此时较适于采收.结论:本研究确定了人工栽培秦艽的佳采收期,为保证药材质量和提高产量提供科学依据.
-
滋肾育胎丸指纹图谱及其5种指标成分含量测定的研究
采用高效液相色谱法分别建立了滋肾育胎丸指纹图谱及马钱苷酸、绿原酸、马钱苷、当药苷和川续断皂苷Ⅵ5个成分同时测定的方法,以期对其质量控制提供科学依据.采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012)对11批滋肾育胎丸样品进行分析,建立滋肾育胎丸指纹图谱,在254 nm下标定了15个共有峰,指纹图谱相似度均＞0.90.所建立的5个指标成分同步测定的方法,各成分在各自质量浓度范围内与峰面积呈良好线性关系(r≥0.999 2),平均回收率在97.62％～101.9％,RSD均＜3.0％.该研究所建立的指纹图谱和定量分析的方法简便、准确度高,能更全面反映滋肾育胎丸的质量,可用于滋肾育胎丸的质量控制.
-
化学计量学及双标线性校正法应用于马钱子指纹图谱的研究
目的 建立马钱子药材指纹图谱,并采用化学计量学方法和双标线性校正法进行研究.方法 采用HPLC建立马钱子指纹图谱,使用相似度分析、二维聚类分析和主成分分析进行质量评价,并使用双标线性校正法进行色谱峰定性.结果 10批次马钱子药材选定14个色谱峰作为指纹图谱的共有峰,进一步选择马钱苷酸、绿原酸、士的宁和马钱子碱4个色谱峰作为指纹图谱的特征峰.经化学计量学评价,可对其产地进行初步分类.双标线性校正法预测保留时间的精度优于相对保留时间法.结论 本实验建立的指纹图谱有较强的针对性,可用于马钱子的质量评价.与相对保留时间法相比,双标线性校正法预测保留时间结果的准确度更高,色谱柱的适用范围更广.
-
HPLC测定续断中马钱苷酸、马钱苷和当药苷的量
目的 建立HPLC法测定续断中马钱苷酸、马钱苷和当药苷的分析方法,通过对多个产地续断的分析,完善续断药材的质量评价方法.方法 Venusil MP C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),0.1％ H3PO4 (A)-乙腈(B)梯度洗脱:0～10 min,8％～9％ B;10～30min,9％～11％B;30～36min,11％～100％B;体积流量1 mL/min,柱温25℃.结果 马钱苷酸、马钱苷和当药苷得到很好分离,并分别在18.4～368.2、2.02～40.4、17.5～349.6 μg/mL内线性关系良好;提取方法的回收率分别为99.34％、99.19％、101.61％.结论 马钱苷酸、当药苷和马钱苷为续断中的主要环烯醚萜苷类成分,同时测定续断中3种环烯醚萜苷类成分的方法简便、快捷.各主产地续断中马钱苷酸、当药苷和马钱苷的范围分别为20.4～186.8、26.4～177.7和1.9～13.2 mg/g,3个成分之和在不同样品之间变化不大,建议作为续断药材质量控制标准.
-
基于UPLC-Q/TOF-MS的中药水蜜丸制剂二至丸多成分稳定性研究
目的 在遵循人用药品注册技术要求国际协调会(International Conference on Harmonization of Technical Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use,ICH)制剂稳定性指导原则的指导下,在采用超高效液相色谱-飞行时间质谱(UPLC-Q/TOF-MS)联用技术对中药传统水蜜丸制剂二至丸进行多成分定性定量研究的基础上,进行二至丸长期稳定性和加速稳定性研究,并考察了制剂影响因素对制剂稳定性的影响.方法 采用Acquity UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1mm,1.7 μm),流动相为0.1％甲酸水溶液-乙腈,梯度洗脱,体积流量0.2 mL/min,采用电喷雾电离源(ESI),正、负离子模式扫描.在遵循ICH制剂稳定性指导原则的指导下,进行了18个月的长期稳定性试验[温度(25±2)℃,相对湿度(RH)(60±5)％],加速稳定性试验[温度(40±2)℃,RH (75±5)％]和制剂影响因素试验(包装材料类型和密封条件).结果 采用以上方法共鉴定出二至丸中20个化学成分(红景天苷、蟛蜞菊内酯、10-羟基木犀榄苷二甲酯、木犀榄苷-11甲酯、马钱苷酸、松果菊苷、女贞苦苷、橄榄苦苷酸、毛蕊花苷/异毛蕊花苷、女贞苷、特女贞苷、ligustroflavone、特女贞苷异构体、阿富汗丁香苷F、异女贞苷、女贞酸、橄榄苦苷、女贞苷-G13、青藤碱、3-O-顺式-对-香豆酰委陵菜酸),并对其进行定量及归一化半定量研究.在长期稳定性研究中,20个成分均保持稳定;然而在加速稳定性试验条件下,11种成分(10-羟基木犀榄苷二甲酯、松果菊苷、女贞苦苷、橄榄苦苷酸、毛蕊花苷、女贞苷、特女贞苷、ligustroflavone、女贞酸、女贞苷-G13、青藤碱)的量明显下降.制剂影响因素试验结果显示采用钠钙玻璃包装材料替代现有市售聚酯包装,在密封或敞口条件下,制剂中各成分稳定性均显著提高.在采用相同包材时密封条件对制剂稳定性也存在显著性影响.结论 通过较为系统的中药传统口服制剂类型水蜜丸的制剂稳定性研究,为中药制剂质量控制水平和临床用药安全提供技术支持.
-
秦七风湿方HPLC指纹图谱研究
目的 建立秦七风湿方的HPLC指纹图谱,为其质量评价及药效物质基础研究提供依据.方法 采用Inert Sustain C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5 μm);以0.1％磷酸水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱;检测波长为203 nm;柱温为30℃;体积流量为1 mL/mim;测定10批秦七风湿方样品,利用中药色谱相似度评价系统(2004A版)建立秦七风湿方HPLC指纹图谱,并通过对照品对共有峰进行指认.结果 建立了秦七风湿方HPLC指纹图谱,10批样品的相似度均在0.99以上,共标定19个共有峰,8个峰来源于珠子参,8个峰来源于秦艽,5个峰来源于山茱萸(其中1号峰为珠子参、秦艽和山茱萸共有),并通过与对照品比较指认了其中8个色谱峰,分别为马钱苷酸(2号峰)、莫诺苷(3号峰)、龙胆苦苷(5号峰)、马钱苷(6号峰)、人参皂苷Ro (12号峰)、人参皂苷F1(13号峰)、竹节参皂苷Wa (14号峰)、人参皂苷F2 (17号峰).结论 所建立的方法稳定、准确、重复性好,可为秦七风湿方的质量控制及药效物质基础研究提供依据.
-
基于UPLC-ESI-HRMSn评价不同干燥方式对粗茎秦艽中环烯醚萜类及黄酮类成分的影响
目的 通过化学成分测定,评价远红外干燥、真空干燥、冷冻干燥、阴干、烘干、“发汗”干燥对粗茎秦艽品质的影响.方法 采用UPLC-ESI-HRMSn测定秦艽中4个环烯醚萜类成分(獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、马钱苷酸、獐牙菜苷)和4个黄酮类成分(木犀草素、异牡荆素、芹菜素、山柰酚)质量分数.并结合单因素方差分析、聚类分析、逼近理想值排序法(TOPSIS)分析综合评价不同干燥方式所得样品的品质,确定佳干燥方式.结果 不同干燥方法样品的獐牙菜苦苷差异不显著,龙胆苦苷、马钱苷酸、獐牙菜苷、木犀草素、异牡荆素、芹菜素和山柰酚差异明显.其中,4个环烯醚萜类成分在冷冻干燥中保留佳;4个黄酮类成分在“发汗”干燥中保留佳.各成分在阴干样品中质量分数低.聚类分析及TOPSIS分析表明“发汗”干燥具有与冷冻干燥相似的品质,且品质好,其次是烘干干燥和远红外干燥,阴千干燥的样品品质差.结论 不同干燥方式对秦艽药材品质的影响值得关注.研究表明《中国药典》2015年版收载秦艽“发汗”的干燥方法具有科学性.但传统“发汗”过程时间较长,为了提高干燥效率,进一步研究方向应关注“发汗”干燥结合现代干燥技术如热风干燥、冷冻干燥、真空干燥以保证秦艽药材稳定品质的基础上缩短干燥时间.
-
基于HPLC-ESI-MS法续断发汗前后的成分分析
目的 建立高效液相色谱-电喷雾-质谱(HPLC-ESI-MS)分析续断发汗前后成分变化的方法.方法 HPLC采用Agilent Eclipse XDB-C18 (250 mm×4.6 mm,5.0 μm)色谱柱;流动相为0.1％甲酸水溶液-乙腈,梯度洗脱:0～45 min,6％～～20％乙腈;45～90 min,20％～35％乙腈;90～110 min,35％～70％乙腈;110～120 min,70％乙腈;柱温为30℃,体积流量为0.8 mL/min;质谱采用电喷雾离子源,正负离子模式下全扫描检测,并通过[M-H]-、[M+HCOO]-、[M+H]+、[M+Na]+等离子信息推断化合物.结果 建立了续断发汗前后的HPLC-ESI-MS图谱,均得到42个色谱峰,通过与对照品和文献对照,推断出了31个化合物;续断经产地加工发汗后,有些成分的量下降,如马钱苷酸、隐绿原酸、绿原酸、咖啡酸、马钱苷、异绿原酸B、续断苷A、续断苷B等;有些成分的量升高,如茶茱萸苷、川续断皂苷X、川续断皂苷Ⅵ、川续断皂苷Ⅶ、川续断皂苷乙、川续断皂苷XⅢ、川续断皂苷A等;其他成分的量几乎不变.结论 所建立的HPLC-ESI-MS图谱,便于全面控制续断发汗与未发汗药材的质量.
-
HPLC法测定秦归活络口服液中马钱苷酸口龙胆苦苷的含量
目的:建立秦归活络口服液中马钱苷酸和龙胆苦苷的含量测定方法.方法:采用HPLC法,紫外检测器,梯度洗脱同时测定制剂中马钱甘酸和龙胆苦苷的含量.结果:制剂中其他药材对马钱苷酸、龙胆苦苷无干扰；马钱苷酸在0.034 49～0.689 80μg之间有良好线性关系(r=0.999 9),平均回收率为96.4％(n=6,RSD=1.8％)；龙胆苦苷在0.045 48～1.137μg之间有良好线性关系(r=0.999 8),平均回收率为95.6％(n=6,RSD=1.2％).结论:本方法简便,快速,灵敏,专属性强,重现性好,可作为秦归活络口服液中马钱苷酸、龙胆苦苷的含量测定方法.
-
双波长HPLC法同时测定茱苓草中马钱苷酸和龙胆苦苷
目的 建立HPLC同时测定茱苓草中马钱苷酸和龙胆苦苷的方法.方法 采用双波长HPLC法,以Hypersil C18柱(250mm×4.6mm,5μm)为色谱柱,以甲醇-0.1％磷酸溶液(20:80)为流动相,检测波长为233nm(测定马钱苷酸)和272nm(测定龙胆苦苷),体积流量为1mL/min.结果 马钱苷酸在0.498～3.32μg的范围内线性关系良好,相关系数为0.9991,平均回收率为98.33％,RSD为1.14％；龙胆苦苷在0.657～4.38μg线性关系良好,相关系数为0.9999,平均回收率为97.74％,RSD为1.25％.结论 本方法快速,简便,准确,可靠,可用于茱苓草的质量控制.
关键词： 茱苓草 双波长高效液相色谱法 马钱苷酸 龙胆苦苷 -
超高效液相色谱法测定四川松潘3种秦艽中马钱苷酸和龙胆苦苷的含量
目的 采用超高效液相色谱(ultra performance liquid chromatography,UPLC)法对四川省松潘地产3种秦艽中马钱苷酸和龙胆苦苷含量进行测定,并考察海拔高度对其含量的影响.方法 采用BEH C18 (2.1 mm×50 mm,1.7 μm)色谱柱,乙腈-0.1%醋酸溶液为流动相;流速为0.35 ml/min,检测波长为254 nm,同时测定马钱苷酸和龙胆苦苷的含量.结果 马钱苷酸和龙胆苦苷浓度分别在9.9～157.8 μg/ml和15.8～252.5 μg/ml范围内,与峰面积成良好的线性关系(r＞0.999 8);平均加样回收率分别为101.23%、99.78%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)分别为1.69、1.94.结论 四川省松潘地区所产3种秦艽中马钱苷酸和龙胆苦苷的含量符合<中华人民共和国药典>质量标准,且含量远远高于药典要求,其中(大叶)秦艽和粗茎秦艽指标性成分含量与海拔高度呈高度的相关性;所建立的质量控制方法快捷、准确、灵敏度高、重复性好,可用于秦艽药材的质量控制.
-
HPLC法同时测定益骨颗粒中3种成分的含量
目的 建立同时测定益骨颗粒中淫羊藿苷、龙胆苦苷、马钱苷酸3种成分含量的方法.方法 采用高效液相色谱法(HPLC),色谱柱为Agilent Eclipse Plus C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1％磷酸溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL· min-1,检测波长为254 nm,柱温为25℃,进样量为10 μL.结果 淫羊藿苷、龙胆苦苷、马钱苷酸3种成分的检测质量浓度线性范围分别为4.072～ 101.8,20.252～ 506.3,4.044～101.1μg·mL-1(r=0.999 9),平均回收率分别为99.51％、98.74％、98.77％,RSD分别为1.16％、1.02％、1.79％(n=6).结论 该测定方法操作简便、结果准确、重复性及专属性好,可用于益骨颗粒的质量控制.
-
正交试验优化益骨颗粒的提取工艺
目的:优化益骨颗粒的提取工艺.方法:采用L9(34)正交试验,以淫羊藿苷、龙胆苦苷、马钱苷酸转移率和出膏率的综合评分为评价指标,以乙醇体积分数、溶剂用量、提取次数、提取时间为考察因素,优化益骨颗粒的提取工艺并进行工艺验证.结果:优化的提取工艺为药材加10倍量60%乙醇回流提取2次,每次1 h.验证试验结果表明,淫羊藿苷、龙胆苦苷、马钱苷酸的平均转移率分别为81.28%、48.71%、59.82%(RSD分别为1.54%、2.37%、2.52%,n=3),平均出膏率为31.48%(RSD=1.97%,n=3).结论:优化的益骨颗粒提取工艺稳定可行、重复性好,可为后续的生产工艺研究提供依据.
-
HPLC法同时测定三味龙胆花片中马钱苷酸和异金雀花素的含量
目的:建立同时测定三味龙胆花片中马钱苷酸、异金雀花素含量的方法.方法:采用高效液相色谱法.色谱柱为Inertsil ODS-3,流动相为甲醇-0.2%磷酸溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为240 nm,柱温为30℃,进样量为10 μL.结果:马钱苷酸和异金雀花素进样量线性范围分别为0.040 08～4.008 0 μg(r＝0.999 9)、0.021 96～2.196 0 μg(r＝0.999 9);定量限分别为0.160 32、0.087 8 ng/mL,检测限分别为0.080 16、0.043 92 ng/mL;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于2%;加样回收率分别为103.07%～104.26%(RSD＝0.52%,n＝6)、95.57%～99.61%(RSD＝1.55%,n＝6).结论:该方法简便、精确,可用于同时测定三味龙胆花片中马钱苷酸和异金雀花素的含量.
-
HPLC同时测定养血软坚片中的马钱苷酸、龙胆苦苷和芍药苷
目的 采用HPLC法测定养血软坚片中马钱苷酸、龙胆苦苷和芍药苷的含量.方法 采用Chrom-Matrix C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1％甲酸为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长235 nm,柱温30℃.结果 马钱苷酸、龙胆苦苷和芍药苷的线性范围分别为0.714 ～71.4(r =0.9999)、2.999 ～299.9(r =0.9999)、3.423 ～342.3 mg·L-1(r =0.9996),平均回收率分别为100.2％、96.6％、96.1％,RSD分别为1.5％、1.2％、0.9％.结论 所用方法简便、准确、重复性好、专属性强,可用于养血软坚片中三成分的含量测定.
-
HPLC测定麻花艽地上和地下部分的4种有效成分
采用HPLC法测定麻花艽地上和地下部位中马钱苷酸、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷和獐牙菜苷的含量.方法采用Eclipse XOB - C18色谱柱(150 mmm×4.6 mm,5μμn)；流动相为甲醇-水(21:79)；流速1mL·min-1；检测波长254 nm;柱温25℃.结果马钱苷酸、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷和獐牙菜苷的线性范围分别为0.08 ～6.31 μg(r =0.9997)、0.069 ～4.12 μg(r=0.9999)、0.06～6.23 μg(r=0.9998)、1.32 ～7.76(r =0.9999)；平均回收率分别为99.7％(RSD =2.5％)、101.2％(RSD= 1.9％)、102.4％(RSD= 1.6％)、100.5％(RSD= 2.2％).结论所建方法测定快速、结果准确；麻花艽地上部位可作为主要的药源.
-
艽龙胶囊制备中4种主化学成分的转移率研究
目的 建立同时测定秦艽药材与艽龙胶囊中的马钱苷酸、6’-OβD葡萄糖基龙胆苦苷、獐芽菜苦苷和龙胆苦苷含量的HPLC法,并探讨其在秦艽药材至艽龙胶囊成药间的转移率.方法 采用HPLC法,选取10批秦艽药材,每批对应1批胶囊.结果 建立同时检测药材与胶囊中4种成分的HPLC法;10批药材及其对应10批胶囊的马钱苷酸、6'-O-β-D-葡萄糖基龙胆苦苷、獐芽菜苦苷和龙胆苦苷转移率分别为48.90％～86.47％,87.23％～97.88％,21.34％～44.67％和81.47％～96.15％.结论 该含量测定方法简便、准确、重复性好,可作为秦艽药材与艽龙胶囊中4种主成分的检测方法;龙胆苦苷为该胶囊主要成分且转移率高,表明该胶囊制备工艺良好,为胶囊的质量控制提供了保障.
-
西藏不同产区长梗秦艽中龙胆苦苷和马钱苷酸含量研究
目的 比较西藏不同产区长梗秦艽中龙胆苦苷和马钱苷酸含量的差异.方法 收集西藏3个地区共8份长梗秦艽样品,采用高效液相色谱(HPLC)法对其中龙胆苦苷和马钱苷酸的含量进行测定.色谱柱为Kromasil C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.1％磷酸水溶液,梯度洗脱,流速为1 mL/min,检测波长245 nm,柱温35℃,进样量10 μL.结果 龙胆苦苷回归方程为Y=1 050X+34.6,r=0.999 7,结果表明龙胆苦苷在61.063 ～ 977.000 μg/mL范围内线性关系良好;马钱苷酸回归方程为y=898.7X+47.9,r =0.999 9,结果表明马钱苷酸在11.563 ～ 185.000 μg/mL范围内线性关系良好.龙胆苦苷含量均值依次为拉萨＞林芝＞昌都,马钱苷酸含量均值依次为拉萨＞昌都＞林芝;且西藏8个产地中只有昌都地区一个样地的长梗秦艽中龙胆苦苷与马钱苷酸的含量总和未达到2015版《中华人民共和国药典》标准(2.5％).结论 该方法快捷、有效,可用于长梗秦艽中龙胆苦苷与马钱苷酸的含量测定.
-
RP-HPLC同时测定活络效灵丹中糖苷及生物碱成分的含量
目的:建立反相高效液相色谱法同时测定活络效灵丹中3个糖苷(马钱苷酸、龙胆苦苷、芍药苷)和2个生物碱(延胡索乙素、延胡索甲素)成分的含量.方法:采用xBridgeTM C18色谱柱(150 mm× 4.6 mm,3.5 μm),流动相A为乙腈,流动相B为体积分数0.02％的磷酸水溶液,梯度洗脱,流速为1.2 mL· min-1,检测波长为230 nm,柱温为30℃.结果:马钱苷酸、龙胆苦苷、芍药苷、延胡索乙素、延胡索甲素的质量浓度分别在9.375～300.0、45.99～1 502.4、31.20～998.3、1.693～54.20、1.125～36.00 mg·L-1范围内与峰面积呈良好的线性关系(r≥0.999 6,n=6),加样回收率均值分别为99.1％、99.9％、98.4％、102.2％、99.8％,RSD均不大于2.8％.3个糖苷和2个生物碱含量的质量分数测定结果分别为3.94～4.59、22.8～26.5、13.6～14.7、1.04～1.17、0.408～0.459 mg· g-1.结论:该方法可作为活络效灵丹中糖苷和生物碱类化学成分的含量测定方法,为其质量控制提供参考依据.
