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缺氧条件下前列腺上皮细胞体外培养雌雄激素受体的表达
目的 观察在缺氧条件下前列腺上皮细胞体外培养细胞核膜表面雌雄激素受体表达的变化.方法 前列腺上皮细胞株RWPE-1体外培养,在缺氧或有氧培养环境中分别于接种后4、8、12、24、48 h检测其核膜雌雄激素受体基因和蛋白表达.基因表达采用RT-PCR法检测,蛋白表达采用免疫组化法检测.结果 缺氧条件下接种4h前列腺上皮细胞雄激素受体mRNA表达为(0.32±0.01),后随时间逐渐上升至48 h为(1.13±0.08),显著高于同期有氧条件下的(0.26±0.02,P=0.01)和(0.31±0.01,P=0.003);免疫组化显示,缺氧条件下雄激素受体蛋白表达自12h开始较有氧条件下显著增加,分别为(42.08±1.58)/200个细胞和(26.37±6.76)/200个细胞(P=0.017).有氧条件下前列腺上皮细胞不论在基因还是蛋白水平雌激素受体几乎不表达;而缺氧条件下12 h可检测出雌激素mRNA表达为(0.15±0.01),至48 h升至(0.41±0.04),4h时雌激素阳性表达上皮细胞为(4.98±0.49 )/200个细胞,后逐渐升至48 h的(45.94±0.90 )/200个细胞.结论 缺氧可刺激前列腺上皮细胞核膜表面雌雄激素受体表达的上调.
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微粒子酶免疫分析法检测前列腺疾病患者血清中前列腺特异性抗原
前列腺特异性抗原(PSA)是一种分子量为34 000的糖蛋白,1979年由Wang分离,是一种由激肽释放的丝氨酸蛋白酶,由前列腺上皮细胞产生.我们用MEIA法检测了104例前列腺疾病患者与30名健康体检者以及40例其他各种癌症患者血清中的PSA.
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睾丸切除对前列腺血流的影响
哺乳动物的前列腺在胚胎发育、出生后的成长及成年后正常状态的维持,均有赖于雄激素.前列腺是严格的雄激素依赖性组织,所以临床上利用其雄激素依赖性特点,采用雄激素去除或抗雄激素以治疗良性前列腺增生(BPH)及晚期前列腺癌.雄激素可刺激前列腺上皮细胞生长、分化,同时也是前列腺上皮细胞的存活因子,如果将双侧睾丸切除,则上皮细胞将发生凋亡,前列腺缩小、萎缩.
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缺氧条件下前列腺上皮细胞体外培养生长类激素受体的表达
目的 观察在缺氧条件下前列腺上皮细胞体外培养生长类激素受体表达的变化.方法 人前列腺上皮细胞株RWPE-1体外培养.在缺氧或有氧培养环境中分别于接种后4、8、12、24、48 h检测前列腺上皮细胞膜表面生长类激素受体:表皮生长因子受体(EGFR)、成纤维细胞生长因子受体(FGFR)、转化生长因子B1受体(TGF-β1R)、胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)、血管内皮生长因子受体(VEGFR)基因和蛋白表达.基因表达采用RT-PCR法检测,蛋白表达采用免疫组织化学法检测.结果 缺氧和有氧培养时EGFR、FGFR、IGF-1R、TGF-β1R、VEGFR mRNA和蛋白的表达均呈上升趋势,差异有统计学意义(P<0.01).从各时间点看,两种培养条件除4hEGFR mRNA和12 h EGFR蛋白表达,4 h IGF-1R mRNA和4、8 h IGF-1R蛋白表达,4、8 h TGF-β1R mRNA和TGF-β1R蛋白表达,4 hVEGFR mRNA表达比较差异无统计学意义(P>0.05)外,其余各时间点均以缺氧培养时EGFR、FGFR、IGF-1R、TGF-β1R、VEGFR mRNA和蛋白表达高于有氧培养时(P<0.01).结论 缺氧可刺激前列腺上皮细胞膜表面生长类激素受体表达的上调.
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老年SD大鼠前列腺上皮细胞膜钾离子通道变化及意义
目的 探讨雄性SD大鼠前列腺上皮细胞膜钾离子通道电流的变化和对钾通道阻断剂的反应.方法 分别取3个月龄成年和12个月龄的老年SD大鼠的背外侧叶前列腺组织,剪成1~2 mm3大小,经消化、培养、免疫组鉴别,将形态正常、贴壁良好的腺上皮细胞用全细胞膜片钳模式记录钾通道电流.结果 成年和老年SD大鼠的前列腺上皮细胞膜+80 mV钾电流密度分别为(10.84±1.54)pA/pF vs(18.48±1.7)pA/pF(n=20,P<0.01);钙激活型钾通道抑制剂(KCa通道)四乙胺(TEA)对老年大鼠峰电流阻断从19.1±2.9到7.2±3.2,KCa电流被抑制约63%;成年大鼠为9.5±1.8到5.4±3.1,KCa通道电流被抑制约44%.电压依赖型钾通道抑制剂4-AP(四氨基吡啶)对大鼠前列腺上皮细胞膜钾电流有显著阻断效应.结论 老年大鼠的前列腺上皮细胞膜钾通道电流比成年大鼠显著增强,同时老年大鼠KCa通道电流对TEA更敏感.由此结果可推论老年大鼠的前列腺上皮细胞分泌功能是降低的.
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338柳叶菜属植物提取物对人前列腺细胞增殖的抑制作用
作者研究了柳叶菜属5种植物(柳叶菜Epilobium hirsutum、沼生柳叶菜E.palustre、E.rosmarinifolium、柳兰E.spicatum和E.tetragonum)提取物对前列腺上皮细胞PZ-HPV-7增殖的抑制作用及机理.
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前列腺特异性抗原检测的临床应用
前列腺特异性抗原(PSA)是由前列腺上皮细胞产生和分泌的一种分子量为3300~3400kD的丝氨酸蛋白酶,具有良好的组织特异性,目前被认为是检测前列腺病变及鉴别前列腺癌(PCa)与前列腺增生(BPH)的重要指标.我们采用磁性微粒分离的免疫酶联测定法(IEMA)检测血清PSA水平,报告如下.1材料1.1标本取自门诊及住院患者,BPH组10例,PCa组10例,BPH及PCa患者均经影像学及病理学证实.正常对照组10例,均为门诊健康体检者.
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钾通道与SD大鼠前列腺上皮细胞增殖和凋亡关系的实验研究
目的 观察钾通道在SD大鼠前列腺上皮细胞增殖和凋亡中的作用.方法 采用胶原酶消化SD大鼠前列腺组织建立原代SD大鼠前列腺上皮细胞株,角化蛋白免疫组织化学染色鉴定培养细胞,将SD大鼠前列腺上皮细胞分为对照组、钾通道阻断剂(四乙胺,TEA)组、开放剂(尼可地尔,Nicorandil)组,TEA的浓度为1、5、15mmol/L,Nicorandil的浓度为10、25、100 μmol/L,各作用于细胞24、48、72 h绘制细胞生长曲线,运用MTT方法、Hoechst33258细胞核染色法和流式细胞仪(FCM)观察传代后细胞增殖和凋亡状况.结果 培养的细胞具有典型的上皮细胞形态特征,Pan-Keratin染色阳性,与对照组相比,MTT法和Hoechst33258染色法均显示,15mmol/L的钾离子通道阻滞剂TEA显著增加前列腺上皮细胞数(P<0.01);25μmol/L~100μmol/L/Nicorandil显著减少前列腺上皮细胞数(P<0.01),且FCM显示前列腺上皮细胞有明显的凋亡峰.Hoechst33258染色法显示细胞核固缩、裂解,呈现明显的凋亡形态特征.结论 钾离子通道对体外培养的SD大鼠前列腺上皮细胞增殖与凋亡状态起重要的调节作用.
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前列腺上皮研究现状
前列腺是男性重要的副性腺,前列腺上皮在前列腺功能中扮演重要角色.近年来,随着对前列腺疾病的研究深入,前列腺上皮的功能日益受到人们的关注,本文就前列腺上皮的研究现状作一综述如下.
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无精子症患者精液细胞学检测与延时细胞凋亡的变化
笔者对1例无精子症患者进行精液细胞学观察,在检出生精细胞的同时并行延时细胞凋亡变化观察,现报告如下.
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钾离子通道阻滞剂对SD大鼠前列腺上皮细胞的增殖作用
目的:观察钾离子通道阻滞剂四乙胺(TEA)、四氨基吡啶(4-AP)、格列本脲(Glib)对体外培养SD大鼠前列腺上皮细胞增殖的调节作用.方法:胶原酶消化组织建立原代SD大鼠前列腺上皮细胞株,角化蛋白免疫组织化学染色(Pan-keratin)鉴定培养细胞,分别加入TEA(1、5、10 mmol/L)、4-AP (1、5、10 mmol/L)、Glib(10、50、100 mol/L),培养24、48、72 h后计数并绘制细胞生长柱形图,运用MTT方法和Hoechst33258细胞核染色法观察传代后细胞生长状况.对照组不加钾离子通道阻制剂.结果:培养细胞具有典型的上皮细胞形态特征,Pan-Keratin 染色阳性,MTT法和Hoechst33258染色法均显示随着TEA、4-AP及Glib浓度的递增,作用于细胞24、48、72 h后,与对照组相比,前列腺上皮细胞有不同程度的增殖(P<0.05或P<0.01).结论:钾离子通道阻滞剂对体外培养的SD大鼠前列腺上皮细胞有增殖作用.
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大鼠前列腺上皮细胞体外培养及其屏障功能的初步研究
目的:体外培养大鼠前列腺上皮细胞,并观察其屏障功能. 方法:体外培养大鼠前列腺上皮细胞,采用免疫组化观察腺上皮细胞之间紧密连接蛋白claudin-1的表达,光镜以及电镜观察大鼠前列腺上皮细胞的结构组成.采用跨膜电阻测量仪检测前列腺上皮细胞的跨膜电阻,采用酚红渗漏实验检测前列腺上皮细胞的通透性.结果:大鼠前列腺上皮细胞在体外培养可以形成紧密的单层细胞结构,紧密连接蛋白在相邻的腺上皮细胞之间表达,透射电镜结果显示相邻的单层腺上皮细胞之间存在紧密连接.体外培养的大鼠前列腺上皮细胞跨膜电阻在培养第8天可以达到(201.3±3.5)Ω/cm2,酚红渗漏实验显示随着细胞单层跨膜电阻的增加,基底侧的酚红浓度减低. 结论:大鼠前列腺上皮细胞具有与脑毛细血管内皮细胞、肠上皮细胞等具有屏障功能的细胞相似的结构和功能,体外培养的大鼠前列腺上皮细胞具有屏障特性,可以作为血前列腺屏障研究的体外模型.
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缺氧条件下前列腺上皮细胞体外培养生长类激素的表达
目的:观察在缺氧条件下前列腺上皮细胞体外培养生长类激素表达的变化. 方法:前列腺上皮细胞株RWPE-1体外培养.在缺氧或有氧培养环境中分别予接种后4、8、12、24、48 h检测其生长类激素[表皮生长因子(EGF),碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),转化生长因子β(TGF-β),胰岛素样生长因子-1(IGF-1),血管内皮生长因子(VEGF)]基因和蛋白表达.基因表达采用RT-PCR法检测,蛋白表达采用ELISA法检测. 结果:RT-PCR结果显示,随时间延长各类生长因子基因表达均上调,缺氧条件较有氧条件上调尤为明显.以bFGF mRNA表达为例,接种后8h缺氧条件和有氧条件下bFGF mRNA分别为0.14±0.01和0.12±0.01,差异有统计学意义(P=0.01),至48 h时分别为0.29 ±0.01和0.14±0.01 (P <0.001).ELISA结果显示,上皮细胞TGF-β表达在缺氧条件下亦显著增加,接种后4h'缺氧和有氧条件下分别为0.32±0.01和0.26 ±0.01,差异有统计学意义(P=0.017),至48 h时分别为1.56 ±0.13和0.87±0.06(P <0.001).其他4种生长因子的蛋白表达在有氧和无氧条件下没有显著性差异. 结论:缺氧可刺激前列腺上皮细胞上述各类生长因子基因表达的上调,但仅TGF-β分泌增加.
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不育男性精液中出现大量前列腺上皮细胞2例报告
前列腺上皮细胞在正常生育男性精液中偶尔可见,在不育男性精液中大量出现者也比较少见,我们遇到2例,现报告如下.
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血清PAS系列在前列腺疾病诊断灰区中的应用探讨
前列腺特异抗原(Prostate specific antigen PSA)是分子量为34000的糖蛋白,具有丝氨酸蛋白酶活性,可由正常的前列腺上皮细胞和前列腺癌细胞产生,存在于精液、前列腺液及尿中,PSA有一定的器官特异性,但无肿瘤特异性,在前列腺良性疾病时,如前列腺增生、肥大、缺血、炎症等,以及其他癌;如泌尿生殖系统癌、胃肠癌、乳腺癌、肺癌等均可引起该指标轻度升高,特别是T-PSA值在4.0~10.0ug/L范围(通常称诊断灰区)时,很难与前列腺癌区别.
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血清PAS系列在前列腺疾病诊断灰区中的应用探讨
前列腺特异抗原(Prostate specific antigen PSA)是分子量为34000的糖蛋白,具有丝氨酸蛋白酶活性,可由正常的前列腺上皮细胞和前列腺癌细胞产生,存在于精液、前列腺液及尿中,PSA有一定的器官特异性,但无肿瘤特异性,在前列腺良性疾病时,如前列腺增生、肥大、缺血、炎症等,以及其他癌:如泌尿生殖系统癌、胃肠癌、乳腺癌、肺癌等均可引起该指标轻度升高,特别是T-PSA值在4.0~10.0ug/L范围(通常称诊断灰区)时,很难与前列腺癌区别.
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超声引导下经会阴部细针穿刺注射川参通液治疗前列腺增生的应用价值
前列腺增生,是老年男性常见病,由于腺体增大,常压迫尿道或凸入膀胱阻塞尿道口而致排尿困难或发生滴尿、尿频、尿急、血尿等临床症状.对前列腺增生的治疗方法较多,但疗效欠佳.我们采用在超声引导下经会阴部细针穿刺注射川参通液至前列腺组织内,形成局部组织大的药物浓度,使其有效活性成分得以充分吸收和利用,通过改善微循环,促进前列腺上皮细胞新陈代谢,修复病变组织,改善和消除临床症状.治疗后经超声复查,疗效确切、稳定、无复发,取得了良好效果,现报告如下.
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前列腺上皮细胞对成纤维细胞TGF-β1、α-SMA表达的影响
目的 观察人前列腺上皮细胞(BPH-1细胞)对人成纤维细胞(HFF 1细胞)TGF-β1、α-SMA表达的影响.方法 将BPH-1细胞与HFF-1细胞非接触性共培养(共培养组),另单独培养HFF-1细胞(对照组),Western blot方法检测两组HFF-1细胞的TGF-β1、α-SMA蛋白表达.结果 与对照组相比,共培养组HFF-1细胞TGF-β1、α-SMA表达低于对照组(P<0.05).结论 前列腺上皮细胞可能对成纤维细胞TGF-β1、α-SMA的表达起到抑制作用.
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肽类生长因子及其受体与良性前列腺增生研究进展
肽类生长因子是一组强有力的细胞生长调节物质,是多细胞生物进行细胞间信息交流的基础,它们组成复杂的生物信息网络,通过自分泌、旁分泌或内在分泌形式刺激细胞生长,抑制细胞增殖或促进细胞分化与恶变等[1,2].虽然良性前列腺增生(BpH)的形成与睾丸是否存在和年龄增长有关,但性激素平衡的失调假说并不能完全解释BpH的所有现象,例如:在体外无血清培养时,前列腺上皮细胞的生长并不需要雄激素的参与,而受其它激素或生长因子的刺激[1],而且组织重组研究表明雄激素的作用部位在间质,进而间接地导致邻近上皮细胞增殖与分化.这种上皮与间质相互作用的物质基础就是肽类生长因子及其受体[2],胚胎学研究见肽类生长因子介导的上皮与间质相互作用是的列腺分化、生长和发育的重要因素[3].近在人类DpH组织中发现有许多肽类生长因子及其受体的表达,并受雄激素的调节,它们可能参与了DpH的形成[1,3].本文就目前研究较多的如:表皮生长因子(EGF),成纤维细胞生长因子(FGF),血小板生长因子(PDGF),转化生长因子(TGF)等在BpH中的作用综述如下.