首页 > 文献资料
-
涎腺粘液表皮样癌中hMLH1、hMSH2与p53基因的表达及意义
目的:探索hMLH1、hMSH2基因在涎腺粘液表皮样癌中的表达及其与p53表达的关系.方法:采用免疫组织化学S-P法对涎腺粘液表皮样癌及正常涎腺组织石蜡切片进行hMLH1、hMSH2及p53表达的检测.结果:(1)hMLH1、hMSH2及p53在癌组织中表达阳性率均显著高于正常组织(P＜0.01).(2)hMLH1、hMSH2的表达与癌的分化程度、患者年龄、性别、肿块大小、浸润深度以及有无淋巴结转移均无关(P＞0.05).(3)hMLH1、hMSH2基因均与p53表达呈正相关.结论:检测hMLH1、hMSH2、p53将有助于判断涎腺粘液表皮样癌的恶性程度和相关的生物学行为.
-
hMLH1-93G/A基因多态性与结直肠癌的相关性研究
hMLH1是DNA错配修复(MMR)系统的重要成员,在DNA复制过程中识别和修复错配碱基,其基因多态性对散发性结直肠癌(CRC)的诊断有重要价值.目的:探讨hMLH1启动子区-93G/A基因多态性与CRC的关系.方法:连续收集2008年1月-2010年10月的CRC患者312例,纳入同期正常对照300例.抽提所有入选者外周血白细胞DNA,以TaqMan MGB探针荧光定量PCR检测hMLH1启动子区-93G/A基因多态性.结果:CRC组患者hMLH1-93G/A各基因型频率与正常对照组相比.差异无统计学意义(P=0.219).对CRC组行分层分析示Dukes C/D期患者的A等位基因和AA基因型频率明显高于MB期患者(60.5%对48.1%,/a=0.004;39.8%对23.3%,P=0.015),淋巴结转移者的A等位基因和AA基因型频率亦明显高于无淋巴结转移者(60.5%对49.1%,P=0.010;39.5%对25.0%,P=0.031).结论:hMLH1启动子-93G/A基因多态性与CRC的发生无关.但A等位基因和AA基因型可能与CRC的进展有关.
-
hMLH1基因高甲基化在胃癌发生、发展中的作用
背景：基因启动子区CpG岛甲基化使许多基因失活,从而导致恶性肿瘤的发生和发展.目的:检测hMLH1基因启动子区CpG岛甲基化水平,探讨其胃癌发生、发展中的作用.方法:以甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测41例胃癌、40例癌前病变和38例对照组织中hMLH1基因启动子区CpG岛甲基化状态,并分析其与胃癌患者临床病理特征的关系.结果:胃癌组织中hMLH1基因启动子区CpG岛甲基化阳性率为34.1％.显著高于癌前病变组的5.0％和对照组的0％(P<0.05).hMLH1基因甲基化阳性率与胃癌患者的年龄和肿瘤浸润深度有关(阳性率分别为46.4％对7.7％和55.0％对14.3％,P<0.05),与性别、肿瘤分化程度和淋巴结转移无关(阳性率分别为34.8％对33.3％、28.0％对43.8％和38.1％对30.0％).结论:胃癌组织中存在hMLHl基因启动子区CpG岛高甲基化.可能与胃癌的发生、发展有关,且可能在老年胃癌患者的肿瘤发生过程中起重要作用.
-
X线照射对鼻咽癌细胞hMSH2和hMLH1表达的影响
目的:研究X线照射对鼻咽癌细胞中错配修复基因hMSH2和hMLHI表达的影响,探讨放射损伤后肿瘤细胞的DNA错配修复机制.方法:将鼻咽癌CNE-1细胞分为实验组和对照组,对2组细胞进行X线分次外照射.实验组每次照射剂量为2 Gy,总剂量为10 Gy.对照组每次照射剂量为0 Gy.应用RT-PCR、免疫细胞化学及Western blot方法,检测照射终止后不同时间点细胞hMSH2和hMLH1的表达.结果:实验组细胞在照射后hMSH2 mRNA和蛋白的表达均显著强于对照组(P＜0.01);hMLH1 mRNA及蛋白表达与对照组比较无显著差异(P＞0.05).结论:放射可以诱导鼻咽癌细胞hMSH2表达;hMSH2对放射造成的DNA损伤可能有修复作用,这可能是临床上鼻咽癌放疗敏感性降低的原因之一.
-
地西他滨上调唾液腺腺样囊性癌细胞系细胞hMLH1的表达
目的:通过检测地西他滨(decitabine)对体外培养人唾液腺腺样囊性癌(salivary adenoid cystic carcinoma,SACC)细胞系细胞hMLH1的影响,探讨DNA甲基化转移酶抑制剂应用于SACC治疗的可行性及可能机制.方法:采用不同浓度的decitabine处理SACC细胞系SACC-83和SACC-LM细胞,观察细胞形态变化.选取5 μmol/L的decitabine处理细胞后,分别使用甲基化特异性PCR、蛋白免疫印迹法、流式细胞技术检测用药前、后hMLH1基因启动子甲基化状况、hMLH1蛋白表达和细胞周期、凋亡的变化.应用SPSS13.0软件包对数据进行独立样本t检验.结果:经decitabine处理后,SACC-83和SACC-LM细胞中hMLH1基因启动子甲基化水平降低,hMLH1蛋白表达水平分别升高1.582倍和1.977倍(P＜0.05).用药后G0/G1期细胞比例显著减少,S期细胞比例显著增加(P＜0.05),2种细胞系细胞晚期凋亡比例显著增加,差别有统计学意义(P＜0.05).结论:Decitabine可通过改变hMLH1基因启动子甲基化水平,上调蛋白表达;使SACC细胞阻滞于S期,Decitabine有可能作为SACC化疗药物或与顺铂联合使用,增强顺铂的效果.
-
氯乙烯致DNA损伤与DNA修复基因甲基化
目的 探讨氯乙烯职业接触的早期效应DNA损伤与O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶基因MG-MT、错配修复基因hMLH1启动子甲基化的关系.方法 氯乙烯接触工人按淋巴细胞双核微核数分为DNA损伤组(72例)和非损伤组(43例),采用甲基化特异的PCR法检测修复基因的甲基化.结果 hMLH1基因在DNA损伤组和非损伤组均未检测到甲基化,MGMT基因在DNA非损伤组未检测到甲基化,在DNA损伤组MGMT发生甲基化频率为6.9%(5/72).结论 在氯乙烯致DNA损伤阶段,可检出MGMT基因甲基化异常.
-
hMLH1基因在结直肠癌中的甲基化水平及其预后意义
目的:检测错配修复基因hMLH1在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中的甲基化水平并分析其预后意义.方法:调取有完整随访资料的68例CRC患者术后组织蜡块,所有患者均接受5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-Fu)及其衍生物为基础的辅助化疗4-6个周期,显微切割结合甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测hMLH1基因启动子区域甲基化.结果:68例CRC组织中,16例(23.5％)检出hMLH1基因启动子甲基化,显著高于相应正常组织(3/68,4.4％,P=0.001).尽管hMLH1基因异常甲基化与患者临床病理参数无关,生存分析表明hMLH1甲基化与无进展生存(progression-free survival,PFS)和总生存(overall survival,OS)获益有关(P值分别为0.039、0.045).结论:hMLH1基因甲基化可望成为5-Fu辅助化疗CRC患者预后判断的新型分子标记.
-
胃癌组织错配修复基因hMLH1的表达
肿瘤的发生是一个多步骤、多阶段的过程,它涉及到多种癌基因和抑癌基因的突变和积累,错配修复基因功能的失活,导致癌基因激活和抑癌基因失活,终引起细胞恶变和肿瘤形成[1].国外对胃癌的研究证实了错配修复基因功能的失活与胃癌的发生有着一定的关系.本研究通过检测胃癌中的错配修复基因hMLH1的表达,以探讨hMLH1与胃癌临床特征的相关性,力求寻找一种更为有效的遗传标记,为胃癌的早期诊断、治疗提供参考.
-
hMSH2、hMLH1和p53在乳腺癌的表达及临床意义
目的 研究错配修复基因hMSH2、 hMLH1和抑癌基因p53在乳腺癌组织中的表达及临床意义.方法 采用免疫组化法检测60例乳腺癌组织及其相应的癌旁正常组织中hMSH2、hMLH1、p53、雌激素受体、孕激素受体和人表皮生长因子受体2的表达,分析其与临床病理学指标的关系.结果 乳腺癌组织中hMSH2和hMLH1阳性表达率低于癌旁正常组织(68.33％vs.86.67％和71.67％vs.90.00％)(P＜0.05),而p53阳性表达率高于癌旁正常组织(48.33％ vs.16.67％)(P＜0.05).乳腺癌组织中hMSH2和p53表达与肿瘤大小、腋窝淋巴结转移有关(P＜0.05),p53表达与hMSH2表达存在中度一致性(Kappa=0.407,P＜0.01).结论 hMLH1与乳腺癌发生相关;而hMSH2和p53参与乳腺癌的发生、发展过程,对乳腺癌诊断及预后判断可能具有重要价值.
-
错配修复基因hMSH2和hMLH1在结直肠癌组织中的表达及意义
[目的]评价错配修复基因hMLH1和hMSH2在结直肠癌中的表达及意义.[方法]经病理学确诊的结直肠癌手术切除标本85例,术前均未接受过放疗或化疗,免疫组化检测hMLH1和hMSH2蛋白表达情况.[结果]85例结直肠癌组中,hMSH2缺失率为69.4％(59/85),hMLH1蛋白缺失率为78.8％(67/85).hMSH2蛋白缺失率在T1、T2、T3和T4期结直肠肿瘤中的缺失率分别为50.0％、43.8％、71.1％和82.8％,随T分期增加而增加(x2=11.037,P=0.012).有淋巴结转移者的hMSH2蛋白缺失率达88.57％ (31/35),而无淋巴结转移患者的hMSH2蛋白缺失率为56.0％(28/50) (x2=10.287,P=0.001).hMLH1蛋白缺失率与肿瘤分化程度和T分期相关,但与性别、年龄、肿瘤部位、N分期和M分期均无关.[结论]在结直肠癌组织中存在hMSH2和hMLH1蛋白缺失,且hMSH2和hMLH1蛋白缺失与肿瘤T分期和分化程度相关.检测hMLH1和hMSH2蛋白表达对预后判断有一定的参考价值.
-
散发性结直肠癌组织中hMSH2和hMLH1的表达研究
[目的]分析散发性结直肠癌中的hMLH1和hMSH2蛋白表达情况.[方法]选取经病理学确诊并在术前未接受过放疗或化疗的结直肠癌手术切除标本127例,以及内镜活检无肿瘤患者肠黏膜上皮20例.用免疫组化方法检测hMLH1和hMSH2蛋白表达情况.[结果]结直肠癌组织中hMSH2蛋白表达缺失率为65.4％(83/127),高于对照肠组织(20.0％,4/20)(x2=14.714,P＜0.001).结直肠癌组织中hMSH2蛋白缺失率随T分期增加而增加(x2=8.233,P=0.041);与N分期有关(x2=20.235,P＜0.001),有淋巴结转移者患者中hMSH2蛋白表达缺失率达87.1％(27/31),高于无淋巴结转移患者(54.2％)(x2=9.250,P=0.002).hMLH1蛋白表达缺失率为74.0％,与T分期(x2=29.115,P＜0.001)、N分期(x2=9.807,P=0.006)、M分期(x2=7.363,P=-0.007)有关.[结论]结直肠癌组织中存在hMLH1和hMLH2蛋白表达缺失,通过免疫组化方法检测,可以简便、准确地发现错配修复基因的突变,可为后期的治疗和预后判断提供参考.
-
hMLH1甲基化在散发性大肠癌中的临床意义
目的:了解散发性大肠癌中hMLH1基因启动子区域5'端CpG岛的过度甲基化现象,探讨其与微卫星不稳定性(MSI)在散发性大肠癌发生中的相关性.方法:取散发性大肠癌患者肿瘤组织及其正常对照组织(阴性切缘组织,距肿瘤10 cm以上)标本41对,提取DNA后,以甲基化特异性PCR方法检测标本中hMLH1启动子的甲基化情况,并与相应的临床病理学资料进行统计学分析;将BAT25、BAT26作为检测位点,以自动荧光DNA序列分析法检测MSI,并与甲基化情况进行相关分析.结果:41例散发性大肠癌标本中,75.6%(31/41)存在hMLH1启动子过度甲基化,非甲基化患者年龄(49.2岁)与甲基化患者年龄(63.6岁)相比差异有显著性(P<0.05);43.9%(18/41)的标本表现为MSI阳性;在MSI阳性标本中,94.4%(17/18)有甲基化现象存在,明显高于MSI阴性标本(60.9%,14/23),两者相比差异有显著性(P<0.05).结论:散发性大肠癌中普遍存在年龄相关的hMLH1基因启动子过度甲基化现象,由此引起的MSI可能是老年人大肠癌发病的相关因素之一.
-
HMLH1启动子甲基化和hMLH1表达及微卫星不稳定性
目的:DNA甲基化是基因调节的重要环节.CpG岛是甲基化调节的重要区域.DNA甲基化引起错配修复基因表达失活是引起散发性肿瘤微卫星不稳定性的重要机制.文中就甲基化的一般状况,hMLH1启动子的甲基化情况及其与hMLH1基因的表达,以及与微卫星不稳定性之间的关系作了简要的综述,从而说明hMLH1启动子的甲基化可引起hMLH1表达失活,并因此而导致散发性肿瘤中微卫星不稳定性的发生.
-
非小细胞肺癌中hMLH1基因完全失活机制
目的 研究hMLH1基因完全失活机制及蛋白表达与非小细胞肺癌的关系.方法 应用PCR-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳-银染方法 检测hMLH1基因杂合性缺失(LOH),利用甲基化敏感性限制性核酸内切酶HpaⅡ/MspⅠ酶切-PCR方法 检测异常甲基化;通过免疫组化染色方法 分析hMLH1基因蛋白表达情况.结果 40例NSCLC中,hMLH1基因LOH发生率为65%,甲基化发生率为67.5%,72.5% hMLH1蛋白表达阴性,均与对照组之间存在显著性差异.29例hMLH1蛋白表达缺失中有21例(72.4%)同时发生LOH和异常甲基化.结论 hMLH1基因异常在NSCLC发生中起着重要作用,其完全失活机制可能主要为:LOH+异常甲基化.
-
甲状腺乳头状癌中hMLH1、hMSH2和PCNA的表达及临床意义
目的 观察hMLH1、hMSH2和PCNA在甲状腺乳头状癌中的表达及三者与肿瘤发生、发展的关系.方法 应用免疫组化PV-6000两步法对甲状腺乳头状癌及癌旁正常甲状腺组织中hMLH1、hMSH2和PCNA的表达进行检测,并进行统计学分析.结果 三种蛋白在甲状腺乳头状癌与癌旁正常组织中的阳性率差异有显著性(P<0.05),PCNA和hMLH1蛋白与肿瘤包膜侵犯和淋巴结转移相关(P<0.05),hMSH2与淋巴结转移密切相关,但三者均与患者年龄、性别、肿瘤大小无相关性(P>0.05).PCNA与hMSH2表达呈正相关(P<0.05).结论 hMLH1、hMSH2和PCNA的异常表达与甲状腺乳头状癌的发生、发展密切相关.
-
子宫颈癌中c-myc和hMLH1表达与HPV16感染的关系
目的 探讨子宫颈病变中c-myc与hMLH1和HPV16表达的关系.方法 应用免疫组化SP法检测c-myc与hMLH1在慢性子宫颈炎、子宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)和子宫颈癌患者中的表达水平;PCR技术检测相应标本中HPV16感染的情况.结果 c-myc在慢性子宫颈炎、CIN、子宫颈癌中的阳性率分别为26.7%(8/30))、50%(30/60)、69.2%(36/52),差异有统计学意义(P＜0.05),hMLH1阳性率依次为66.7%(20/30)、56.7%(34/60)、30.7%(16/52),差异有统计学意义(P＜0.05).在子宫颈癌组织中,c-myc蛋白与肿瘤分化程度、临床分期以及有无淋巴结转移相关;hMLH1蛋白表达下调与子宫颈癌分化程度及是否有淋巴结转移密切相关,表达差异均有统计学意义(P＜0.05);HPV16与c-myc蛋白表达呈正相关;与hMLH1蛋白表达呈负相关.结论 HPV16可能是通过影响c-myc与hMLH1蛋白表达而在子宫颈癌的发生、发展中发挥作用.
-
胃癌中hMLH1、hMSH2、PTEN和PCNA表达的相关性及意义
近年来,研究发现除了一些癌基因基因以外,错配修复(mismatch repair,MMR)基因也与胃癌的发生与演进密切相关.研究证实,MMR基因能够纠正DNA复制过程中的碱基错配,避免癌相关基因的突变,保护基因的完整性与稳定性,从而抑制癌的发生.在已经发现的MMR基因中,hMLH1和hMSH2与胃癌的发生关系为密切[1]. PTEN是近年来发现的第一个具有磷酸酶活性的抑癌基因,在维持细胞的增生、分化中起重要作用.本研究采用免疫组化SP法,检测胃癌、癌旁和胃炎黏膜中hMLH1、hMSH2、PTEN和增殖细胞核抗原(PCNA)表达情况,分析各表达产物之间的相互关系,进一步明确MMR基因在胃癌发生发展中的作用.
-
胃癌中hMLH1、hMSH2蛋白表达与HP感染关系的研究
目的:探讨hMLH1和hMSH2蛋白表达在胃癌中的作用及其与HP感染的关系.方法: 用免疫组织化学SP法检测83例胃癌中hMLH1和hMSH2蛋白表达情况;用Warthin-Starry银染法观察83例胃癌中HP感染的情况. 结果:胃癌中hMLH1、hMSH2蛋白表达缺失率分别为34.94%、21.69%,两者差异无显著性(P>0.05);HP感染阳性胃癌组hMLH1和hMSH2蛋白表达缺失率均显著高于HP感染阴性组(P<0.05);HP感染阳性胃癌MMR蛋白表达在大于50岁、男性、胃窦部、乳头及管状腺癌及高分化组中明显降低(P<0.05).结论: hMLH1和hMSH2蛋白表达缺失可能在胃癌的发生中发挥同等重要的作用;HP感染可能引起hMLH1和hMSH2蛋白表达的缺失,这可能是HP感染致胃癌的另一分子机制,HP感染阳性胃癌MMR蛋白表达缺失组有特殊的临床病理特征.
-
hMLH1基因对脑胶质瘤替莫唑胺耐药的影响及机制研究
目的:观察hMLH1基因对脑胶质瘤替莫唑胺耐药的影响并探讨其机制.方法:检测脑胶质瘤患者组织、耐药细胞株(U251/TMZ)和亲本敏感细胞株(U251)的hMLH1表达水平;使用5氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)予耐药细胞株去甲基化干预后,采用MBP法检测其hMLH1基因启动子甲基化水平;检测干预前后耐药细胞株的hMLH1表达水平以及替莫唑胺IC50的变化.结果:脑胶质瘤复发患者组织hMLH1表达水平低于初治患者;耐药细胞株hMLH1表达水平低于敏感细胞株,去甲基化干预后耐药细胞株hMLH1表达水平及对替萸唑胺敏感性增加.结论:hMLH1沉默促进脑胶质瘤替莫唑胺耐药,其机制可能与该基因启动子甲基化增强有关.
-
hMLH1基因蛋白在乳腺癌组织中的表达及意义
探讨人乳腺癌中hMLH1的表达及意义.采用免疫组化法分别检测60例乳腺癌及癌旁乳腺组织中hMLH1的表达情况.hMLH1在乳腺癌表达下调,在癌旁乳腺组织表达较强;hMLH1的表达情况与患者年龄、乳腺癌的临床分期以及腋窝淋巴结的转移情况均无关(P＜0.05).hMLH1基因在乳腺癌组织中表达下调,可能在乳腺癌的发生机制中起了一定的作用.
